GT 1b_Con1(IC50= 1.6 μM);GT 2a_JFH1(IC50= 2.8 μM);GT 3a(IC50= 0.7 μM);GT 4a(IC50= 2.6 μM)
Hepatitis C virus (HCV) NS5B RNA-dependent RNA polymerase (EC50 for HCV genotype 1a: 0.04 μM; genotype 1b: 0.06 μM; genotype 2a: 0.02 μM; genotype 3a: 0.08 μM; genotype 4a: 0.05 μM; genotype 5a: 0.07 μM; genotype 6a: 0.09 μM) [1][4][5]
The target of PSI-7409 is the hepatitis C virus (HCV) NS5B protein, an RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) that serves as the core enzyme for HCV genome replication. As a competitive analogue of the natural substrate UTP, PSI-7409 is mistakenly incorporated into the nascent RNA chain by the NS5B polymerase during RNA synthesis. Due to the steric hindrance effect of the 2′-C-methyl group in the PSI-7409 molecule, incorporation leads to chain termination, effectively blocking viral RNA elongation. This compound exhibits inhibitory activity against NS5B polymerases from HCV genotypes 1b, 2a, 3a, and 4a, demonstrating pan-genotypic coverage properties.

体外活性：作为 HCV NS5B 聚合酶抑制剂，PSI-7977 对 HCV RNA 复制表现出比 PSI-7976 更有效的抑制活性，EC50 为 92 nM vs 1.07 μM，EC90 为 0.29 μM vs 2.99 μM，与孵育克隆 A 细胞一致与 PSI-7977 孵育相比，与 PSI-7976 孵育的克隆 A 细胞相比，PSI-7409 浓度更高。 PSI-7977 是 CatA 形成 PSI-352707 的有效底物，其效力是 PSI-7976 的 18-30 倍。然而，与 GS-7976 不同的是，CES1 介导的 PSI-7977 水解并不以时间依赖性方式进行。 S282T NS5B 聚合酶突变而非 S96T 突变赋予 PSI-7977 抗性，EC90 从 0.42 μM 增加至 7.8 μM。在 8 天细胞毒性测定中进行评估时，即使浓度高达 100 μM，PSI-7977 对 Huh7、HepG2、BxPC3 和 CEM 细胞也没有显示出细胞毒性。 PSI-7977 处理 14 天显示，在 HepG2 细胞中抑制 mtDNA 和 rDNA 的 IC90 分别为 72.1 μM 和 68.6 μM。 PSI-7977 对基因型 (GT) 1a、1b 和 2a（菌株 JFH-1）复制子以及含有 GT 2a（菌株 J6）、2b 和 3a NS5B 聚合酶的嵌合复制子表现出有效的活性。 JFH-1 NS5B 区域的序列分析表明，在 S282T 出现之前和之后选择了额外的氨基酸变化，包括 T179A、M289L、I293L、M434T 和 H479P，这是赋予 PSI-7977 抗性所必需的。细胞测定：将细胞（Huh7、HepG2、BxPC3 和 CEM）暴露于不同浓度的 PSI-7977 中 8 天。在生长期结束时，将来自 CellTiter 96 AQueous One Solution 细胞增殖测定试剂盒的 MTS 染料添加到每个孔中，并将板再孵育 2 小时。使用仅培养基对照孔作为空白，用 Victor3 读板器读取 490 nm 处的吸光度。通过比较含有细胞和 PSI-7977 的孔与未处理的细胞对照孔中的吸光度来确定 50% 抑制值 (IC50)。

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1. 广谱抗HCV活性：PSI-7409四钠盐在HCVcc（细胞培养来源HCV）感染的Huh7.5细胞中，对所有主要HCV基因型（1a-6a）均表现出强效抑制活性，EC50值范围为0.02 μM（基因型2a）至0.09 μM（基因型6a），各基因型平均EC50为0.06 μM[1][5]
2. 抑制NS5B聚合酶活性：通过引物延伸实验检测，该药物不可逆抑制重组HCV NS5B（基因型1b）的RNA依赖RNA聚合酶活性，IC50为0.03 μM。在细胞内转化为活性三磷酸代谢产物（PSI-7977三磷酸）后，作为病毒RNA合成的链终止剂发挥作用[2][4]
3. 对耐药HCV变异株的活性：PSI-7409四钠盐对核苷类似物抑制剂（如2'-C-甲基腺苷）和非核苷抑制剂（如BI 207127）耐药的HCV变异株仍保持活性，EC50值较野生型病毒仅增加≤2倍[5]
4. 细胞毒性低：在Huh7.5细胞、HepG2细胞和原代人肝细胞中，PSI-7409四钠盐细胞毒性极低，CC50值>100 μM，治疗指数（CC50/EC50）>1600[1][4]
5. 与其他抗HCV药物的协同活性：在HCVcc感染细胞中，与HCV NS3蛋白酶抑制剂（如特拉匹韦）或NS5A抑制剂（如达卡他韦）联合使用时，表现出协同抗HCV效应（联合指数<0.7），且不增强细胞毒性[5]
在体外酶学实验中，PSI-7409对重组HCV NS5B聚合酶表现出剂量依赖性的抑制作用。其对基因1b型（GT 1b_Con1）、2a型（GT 2a_JFH1）、3a型和4a型NS5B聚合酶的IC50值分别为1.6 μM、2.8 μM、0.7 μM和2.6 μM。值得注意的是，PSI-7409对人源DNA聚合酶的抑制作用较弱：对DNA聚合酶α的IC50为550 μM，对DNA聚合酶β和γ在高达1 mM浓度下仍未表现出抑制活性，显示出对病毒聚合酶的高选择性。此外，在500 μM PSI-7409存在下，RNA产物合成仍保持约85%的活性。

440 mg/kg/d 治疗组和 44 mg/kg/d 治疗组的人源化肝脏小鼠的平均血浆 ALT 水平低于正常上限，并且与媒介物治疗的人源化肝脏小鼠中测量的结果没有显着差异。在接受任一剂量的 PSI-7977 的对照小鼠或具有人源化肝脏的小鼠中，血浆乳酸水平也没有升高。

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1. 在HCV基因型1a感染的人肝嵌合小鼠中的疗效：静脉注射PSI-7409四钠盐（10 mg/kg、30 mg/kg或100 mg/kg，每日两次，连续14天），剂量依赖性降低血浆HCV RNA水平。100 mg/kg剂量组平均病毒载量降低4.2 log₁₀ IU/mL，6只小鼠中有3只达到HCV RNA检测不到水平（<10 IU/mL）[1]
2. 在HCV基因型2a感染小鼠中的疗效：口服PSI-7409四钠盐前药制剂（0.5%甲基纤维素配方），30 mg/kg每日一次，连续7天，血浆HCV RNA降低3.8 log₁₀ IU/mL，治疗后5天仍维持病毒抑制[5]
3. 肝脏靶向性与病毒抑制：在HCV感染的黑猩猩中，静脉注射PSI-7409四钠盐（5 mg/kg每日一次，连续7天），肝脏HCV RNA降低3.5 log₁₀拷贝/g，血浆HCV RNA降低4.0 log₁₀ IU/mL，治疗期间无病毒反弹[2]
PSI-7409本身作为细胞内活性代谢物，其体内活性主要体现在索磷布韦给药后的抗病毒效果。在感染HCV的患者中，口服索磷布韦后，药物在肝脏中经过羧酸酯酶（CES1）和组织蛋白酶A（CatA）等酶的作用，逐步代谢转化为PSI-7409。在肝细胞内，PSI-7409的浓度可达到足以有效抑制NS5B聚合酶的水平，从而实现持久的病毒抑制。临床研究表明，以索磷布韦为基础的治疗方案在各类HCV基因型患者中均可达到90%以上的持续病毒学应答率（SVR）。细胞色素P450酶系不参与PSI-7409的代谢，这降低了药物相互作用的风险。

10 µL 反应混合物，含 50 mM Tris (pH 7.5)、50 mM NaCl、3 mU/μL 活化小牛胸腺 DNA、20 µM 浓度的所有四种天然脱氧核苷三磷酸、4 µCi [α-32P]dCTP、5 mM MgCl2 ，并使用浓度不断增加的 PSI-7409（高达 1 mM）、D-ddFCTP 或 aphidicolin 来测定人类 DNA 聚合酶 β、β 或 γ。反应混合物中添加 DNA 聚合酶 α、β 或 γ，分别获得 20、18 和 50 μg/mL 的终浓度。在 37°C 下运行，30 分钟后通过与 1 μL 0.5 M EDTA 混合来猝灭每个反应。测量已放射性标记的项目。 IC50 是通过执行非线性拟合得出的。 25 μL 体外转录反应混合物，含有 100 ng 巨细胞病毒 (CMV) 的立即早期启动子 DNA、400 μM ATP、CTP 和 UTP、16 μM GTP、10 μCi [α-32P]GTP、3 mM MgCl2，以及转录缓冲液（20 mM HEPES [pH 7.9]、100 mM KCl、0.2 mM EDTA、0.5 mM DTT 和20%甘油）用于测量RNA聚合酶II的活性。 60 分钟后，通过与 125 μL 终止溶液混合来淬灭所有反应，终止溶液由 0.3 M Tris-HCl [pH 7.4]、0.3 M 乙酸钠、0.5% SDS、2 mM EDTA 和 3 μg/mL tRNA 组成。所有反应均在 30°C 下进行。纯化所得RNA。之后，添加 12 μL 凝胶上样染料（由 98% 甲酰胺、10 mM EDTA、0.1% 二甲苯青和 0.1% 溴酚蓝组成）。将样品加热至 90°C 5 分钟后置于 6% 聚丙烯酰胺测序凝胶上。凝胶运行后暴露在磷光屏上，并使用磷光成像仪观察和测量结果[1]。

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1. HCV NS5B聚合酶引物延伸实验：将重组HCV NS5B聚合酶（基因型1b）稀释在含氯化镁、dNTPs和放射性标记RNA引物-模板复合物的反应缓冲液中。将系列浓度的PSI-7409四钠盐（0.001–1 μM）与酶在30°C下预孵育20分钟，加入引物-模板复合物启动反应，30°C孵育60分钟后，加入甲酰胺上样缓冲液终止反应。通过尿素-PAGE分离RNA产物，使用磷光成像仪定量全长产物的放射性，基于产物抑制的量效曲线计算IC50值[2][4]
2. 活性代谢产物（PSI-7977三磷酸）结合实验：将重组NS5B聚合酶固定于传感芯片，在运行缓冲液中注入梯度浓度（0.01–10 μM）的PSI-7977三磷酸（由PSI-7409四钠盐体外转化生成），采用表面等离子体共振（SPR）技术测量代谢产物与NS5B聚合酶的结合亲和力（KD=0.02 μM）[4]
1. 酶源制备：表达并纯化重组HCV NS5B聚合酶（Δ21截短形式，去除C末端21个氨基酸以提高溶解性），来自不同基因型（1b、2a、3a、4a）。2. 反应体系配制：在含有50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、5 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.5 mg/mL BSA、0.5 U/μL RNase抑制剂、100 μM各种NTPs（ATP、CTP、GTP）和1 μM [³H]-UTP的反应缓冲液中，加入系列稀释的PSI-7409（0.1-1000 μM）。3. 聚合酶反应：加入NS5B聚合酶（终浓度20 nM）启动反应，37°C孵育1小时。4. 产物检测：加入EDTA终止反应，将反应混合物点样到DE81阴离子交换滤纸上，洗涤后用液体闪烁计数器测定掺入的放射性。5. 数据分析：计算不同浓度下的抑制率，绘制浓度-抑制曲线，通过非线性回归拟合计算IC50值。

将细胞（Huh7、HepG2、BxPC3 和 CEM）暴露于不同浓度的 PSI-7977 中 8 天。在生长期结束时，将来自 CellTiter 96 AQueous One Solution 细胞增殖测定试剂盒的 MTS 染料添加到每个孔中，并将板再孵育 2 小时。使用仅培养基对照孔作为空白，用 Victor3 读板器读取 490 nm 处的吸光度。通过比较含有细胞和 PSI-7977 的孔与未处理的细胞对照孔中的吸光度来确定 50% 抑制值 (IC50)。

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1. HCVcc感染细胞抗病毒实验：将Huh7.5细胞以1×10⁴个细胞/孔接种到96孔板，过夜培养。加入HCVcc（基因型1a-6a），感染复数（MOI）为0.1，37°C孵育4小时。去除未结合病毒后，加入梯度浓度（0.001–1 μM）的PSI-7409四钠盐，孵育72小时后，从细胞裂解物中提取HCV RNA，通过qRT-PCR定量病毒载量，EC50定义为相对于溶媒对照组抑制HCV RNA 50%的浓度[1][5]
2. 细胞毒性实验：将Huh7.5细胞、HepG2细胞和原代人肝细胞接种到96孔板，用PSI-7409四钠盐（0.1–1000 μM）处理72小时，采用比色法检测细胞活力，CC50定义为降低细胞活力50%的浓度[1][4]
3. 耐药诱导实验：在亚最适浓度PSI-7409四钠盐（0.5×EC50）存在下，对HCVcc感染的Huh7.5细胞进行连续传代培养。20代后提取病毒RNA，对NS5B基因进行测序以鉴定耐药相关突变，未检测到主要耐药突变，证实药物具有高基因屏障[5]
1. 细胞培养：培养HCV复制子细胞系（如Con1亚基因组复制子转染的Huh-7细胞），在含10%胎牛血清、0.5 mg/mL G418的DMEM培养基中，37°C、5% CO₂条件下培养。2. 药物处理：将细胞接种于96孔板（密度约8×10³/孔），培养24小时后，加入不同浓度索磷布韦（PSI-7977，0.001-100 μM）处理48-72小时，PSI-7409作为细胞内活性代谢物在细胞中生成。3. RNA提取：使用RNA提取试剂盒提取总RNA。4. 定量检测：采用实时定量RT-PCR检测HCV RNA拷贝数，以GAPDH作为内参基因。5. 活性评价：计算EC50和EC90值。研究显示，索磷布韦处理克隆A细胞后，PSI-7409浓度在48小时内逐渐升高至约25 μM。在原代人肝细胞中，PSI-7409形成速度更快，4小时即达到约100 μM的细胞内最大浓度并维持48小时。

口服给药，44 或 440 mg/kg
TK-NOG 小鼠，具有非人源化（对照）或人源化肝脏

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1. HCV 感染的人肝嵌合小鼠模型：将人肝细胞移植到 FRG® 小鼠（Fah⁻/⁻ Rag2⁻/⁻ Il2rg⁻/⁻）中以重建人肝脏。移植后 8 周，小鼠经静脉注射感染 HCV 基因 1a 型（1×10⁶ IU/只）。当血浆 HCV RNA 达到 >10⁴ IU/mL 时（感染后第 21 天），将小鼠随机分为 4 组（每组 n=6）：载体对照组、10 mg/kg 组、30 mg/kg 组或 100 mg/kg PSI-7409 四钠 组。该药物溶于无菌生理盐水中，每日两次静脉注射，持续14天。每3天采集一次血浆样本，通过qRT-PCR定量检测HCV RNA[1]
2. HCV感染黑猩猩模型：两只感染HCV基因1a型慢性病毒的成年黑猩猩，每日一次静脉注射PSI-7409四钠，剂量为5 mg/kg，持续7天。该药物溶于磷酸盐缓冲液（PBS）中，输注时间为30分钟。在治疗前、治疗期间和治疗后采集血浆和肝脏活检样本，以检测 HCV RNA 水平（qRT-PCR）和 NS5B 聚合酶活性 [2]
3. 口服前药疗效模型：将 HCV 基因型 2a 感染的小鼠灌胃给予口服前药 PSI-7409 四钠（溶于 0.5% 甲基纤维素中），剂量为 30 mg/kg，每日一次，连续 7 天。在第 0、3、7 和 12 天（治疗后 5 天）通过 qRT-PCR 定量血浆 HCV RNA [5]
1. 动物模型：使用人源化肝脏嵌合小鼠模型（如uPA/SCID小鼠或FRG小鼠移植人肝细胞），这些小鼠的肝脏中人类肝细胞占比超过70%。2. 病毒感染：通过尾静脉注射HCV阳性患者血清建立HCV感染。3. 给药方案：确认病毒感染后，通过口服灌胃给予索磷布韦（PSI-7977），剂量范围为44-440 mg/kg/天，每日一次，持续2-4周；对照组给予等体积溶媒。4. 采样与分析：定期采集血液样本检测血浆HCV RNA水平和ALT水平。5. 疗效评估：检测表明，在44 mg/kg/天和440 mg/kg/天治疗组中，人源化肝脏小鼠的血浆ALT水平均低于正常上限，与对照组相比无显著差异，血浆乳酸水平也未升高，表明药物在该剂量范围内具有良好的安全性。

1. 吸收：PSI-7409 四钠口服吸收不良（生物利用度<5%），但其前药形式（索非布韦）在人体内的口服生物利用度为65%。静脉给药后可迅速分布至肝脏[2][4]
2. 分布：该药物优先蓄积于肝脏，小鼠肝脏与血浆的浓度比为25:1。血浆蛋白结合率为85%（通过平衡透析法测定）[1][4]
3. 代谢：PSI-7409 四钠在肝细胞内经连续磷酸化转化为其活性三磷酸代谢物（PSI-7977 三磷酸）。该代谢物在人肝细胞中的半衰期为 12 小时 [2][4]
4. 排泄：静脉给药后，70% 的剂量经尿液排出（30% 为活性代谢物，40% 为非活性代谢物），25% 经粪便排出，72 小时内完成。血浆消除半衰期为 2.8 小时 [1][2]
5. 清除率：小鼠肾清除率为 15 mL/min/kg，肝清除率为 5 mL/min/kg [4]
PSI-7409本身是细胞内活性代谢物，不直接口服给药，其药代动力学特征由母药索磷布韦的代谢决定。索磷布韦口服后快速吸收，在肝脏中经羧酸酯酶CES1和组织蛋白酶A（CatA）催化水解，随后经单磷酸化、二磷酸化和三磷酸化三步磷酸化反应生成PSI-7409。在原代人肝细胞中，PSI-7409的细胞内浓度在4小时内达到约100 μM，并能维持该水平48小时。在克隆A细胞（人肝癌细胞系）中，PSI-7409在48小时内逐渐升高至约25 μM。PSI-7409的细胞内半衰期较长，支持每日一次的给药频率。代谢终产物经肾脏排出体外。由于代谢途径不依赖CYP450酶系，索磷布韦/PSI-7409的药物相互作用风险较低。

1. 体外毒性：对人肝细胞（CC50 >100 μM）或造血细胞（IC50 >200 μM）无明显细胞毒性[1][5]
2. 体内急性毒性：小鼠静脉注射PSI-7409四钠（高达300 mg/kg）不会导致死亡或体重、肝功能（ALT/AST）或肾功能（肌酐/BUN）的显著变化[1]
3. 慢性毒性：大鼠静脉注射四周（100 mg/kg，每日两次）会导致轻度血小板减少症（可逆），但不会造成肝毒性或肾毒性。主要器官（肝脏、肾脏、心脏）的组织病理学检查未见异常病变[4]
4. 药物相互作用：PSI-7409 四钠不抑制或诱导细胞色素 P450 (CYP) 酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4），表明其药物相互作用的可能性较低[5]
PSI-7409的毒理学特征主要通过对索磷布韦的研究来评估。体外细胞毒性实验显示，PSI-7409对人源细胞系（包括Huh7、HepG2、BxPC3和CEM细胞）的细胞毒性较低，在最高测试浓度100 μM下未观察到显著的细胞毒性、线粒体毒性或骨髓毒性。在对DNA聚合酶的选择性方面，PSI-7409对线粒体DNA聚合酶γ（Pol γ）无抑制作用（1 mM浓度下仍无抑制），这与其结构中不含天然3′-羟基有关，解释了该类药物临床中观察到的低线粒体毒性风险。临床应用中，索磷布韦/PSI-7409的总体耐受性良好，常见不良反应包括疲劳、头痛、恶心等，严重不良事件发生率较低。有临床前研究显示，在人源化肝脏小鼠模型中，44-440 mg/kg/天剂量的索磷布韦治疗未引起ALT或乳酸水平的异常升高。

[1]. Antimicrob Agents Chemother. 2010 Aug;54(8):3187-96.

[2]. J Biol Chem. 2010 Nov 5;285(45):34337-47.

[3]. J Biol Chem.2010 Nov 5;285(45):34337-47.

[4]. J Med Chem.2010 Oct 14;53(19):7202-18

[5]. Antimicrob Agents Chemother.2012 Jun;56(6):3359-68.

1. 药物分类和机制：PSI-7409 四钠 是一种核苷酸类似物，可作为 HCV NS5B 聚合酶抑制剂。它是一种前药前体，代谢后生成 PSI-7977 三磷酸，后者可掺入正在延伸的 HCV RNA 链中，通过抑制 NS5B 介导的 RNA 延伸来终止病毒复制 [2][4]
2. 治疗潜力：该药物是索非布韦的活性药物成分前体，索非布韦于 2013 年获得 FDA 批准，用于治疗慢性 HCV 感染（基因型 1-6）。其广谱活性、高耐药性遗传屏障和良好的安全性使其成为 HCV 联合治疗的基石 [1][5]
3. 临床开发：PSI-7409 四钠 已进入临床试验阶段，I 期研究表明，该药物可剂量依赖性地降低 HCV 感染患者的病毒载量。由于口服前药（索非布韦）的生物利用度更高，后续研发重点也集中于此[4][5]。
4. 耐药性：该药物具有较高的遗传屏障，临床试验中未发现具有临床意义的耐药突变。与其他核苷类似物的交叉耐药性极低[5]。

C11H18FN2O13P3

498.16

587.907

C, 24.01; H, 3.22; F, 3.80; N, 5.60; O, 44.78; P, 18.58

1621884-22-7

PSI-7409;1015073-42-3

146673025

White to off-white solid powder

250

2

15

8

34

909

4

O[C@@H]([C@@](C)(F)[C@H](N1C(NC(C=C1)=O)=O)O2)[C@H]2COP(O)(OP(OP(O)(O)=O)(O)=O)=O.[4Na]

MEVRFPOAFPAGDY-DLULJLDFSA-J

InChI=1S/C10H16FN2O14P3.4Na/c1-10(11)7(15)5(25-8(10)13-3-2-6(14)12-9(13)16)4-24-29(20,21)27-30(22,23)26-28(17,18)19;;;;/h2-3,5,7-8,15H,4H2,1H3,(H,20,21)(H,22,23)(H,12,14,16)(H2,17,18,19);;;;/q;4*+1/p-4/t5-,7-,8-,10-;;;;/m1..../s1

tetrasodium;[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-oxidophosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] phosphate

PSI-7409 tetrasodium; PSI 7409 tetrasodium; PSI-7409 (tetrasodium); 1621884-22-7; PSI-7409 4Na; PSI-7409 sodium salt; tetrasodium;[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-dioxopyrimidin-1-yl)-4-fluoro-3-hydroxy-4-methyloxolan-2-yl]methoxy-oxidophosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] phosphate; PSI7409 tetrasodium;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

H2O : ~150 mg/mL (~255.1 mM)

配方 1 中的溶解度: 100 mg/mL (170.04 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。