| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Phosphodiesterase 3A (PDE3A).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在HeLa细胞系中，(R)-DNMDP的EC50值（0.1 pM-1 mM；作用48小时）比(S)-对映体低500倍[1]。它对(S)-DNMDP无细胞毒性。Trequinsin、(R)-DNMDP和PDE3A能够与连接子类似物结合，但不能与(S)-DNMDP结合[1]。
(R)-DNMDP 是一种具有独特作用机制的选择性抗癌细胞毒性药物。它能以高亲和力直接与磷酸二酯酶 3A (PDE3A) 结合。(R)-对映异构体与 (S)-对映异构体相比，其效力显著更高，在 HeLa 细胞中的 EC50 值降低了 500 倍。在大规模细胞系筛选中，(R)-DNMDP 对包括 HeLa（宫颈癌）、NCI-H1734、NCI-H1563 和 NCI-H2122（非小细胞肺癌）在内的多种肿瘤细胞系均表现出低纳摩尔级的 EC50 值（范围为 10 至 100 nM）。值得注意的是，它对 A549（肺癌）、MCF7（乳腺癌）和 PC3（前列腺癌）等非敏感细胞系没有毒性。 (R)-DNMDP 的抗癌活性依赖于 Schlafen 家族成员 11 (SLFN11) 的表达。它诱导一种独特的细胞死亡形式，这种死亡并非经典的细胞凋亡，其特征是 DNA 损伤和复制应激的积累。(R)-DNMDP 与 PDE3A 的结合稳定了包含 SLFN11 的复合物，该复合物随后进入细胞核并触发细胞死亡。已知该化合物还能破坏 PDEδ-KRas 相互作用，从而干扰 KRas 的定位和信号传导，而 KRas 信号通路在癌症中经常发生异常调控。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
(R)-DNMDP 的体内疗效已在小鼠异种移植模型中得到证实。在携带 HeLa 宫颈癌异种移植瘤的小鼠中，腹腔注射或口服 (R)-DNMDP 可显著抑制肿瘤生长，且呈剂量依赖性，同时对体重或全身毒性反应的影响极小。该化合物耐受性良好，并因其对癌细胞的选择性毒性而显示出良好的治疗窗口。在这些模型中进行的药效学研究证实了 (R)-DNMDP 的靶点结合（与 PDE3A 结合）以及随后在肿瘤组织中诱导 SLFN11 依赖性 DNA 损伤。这些结果支持 (R)-DNMDP 作为一种新型抗癌药物，用于治疗 SLFN11 高表达的癌症。
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| 酶活实验 |
通常使用表面等离子共振 (SPR) 检测来评估 (R)-DNMDP 与 PDE3A 蛋白之间的直接结合相互作用。在该检测中，重组人 PDE3A 蛋白通过胺偶联固定在传感器芯片（例如 CM5 芯片）上。然后，将 (R)-DNMDP 配制成不同浓度（0.1 nM 至 10 uM）的运行缓冲液（例如 HBS-EP+：10 mM HEPES，pH 7.4，150 mM NaCl，3 mM EDTA，0.05% P20）。将化合物溶液流过固定化的 PDE3A 表面，并实时测量结合响应（以共振单位，RU 表示）。每次进样后，用合适的缓冲液（例如 10 mM 甘氨酸-HCl，pH 2.0）再生芯片表面。利用仪器软件，将传感器图拟合到 1:1 Langmuir 结合模型，即可确定结合速率常数 (ka) 和解离速率常数 (kd)。平衡解离常数 (Kd) 的计算公式为 Kd = kd/ka。在竞争性结合研究中，将固定浓度的 (R)-DNMDP 与不同浓度的未标记竞争物预孵育。或者，也可以使用等温滴定量热法 (ITC) 以无标记的方式测量结合亲和力和热力学参数。在 ITC 实验中，将 PDE3A 蛋白置于样品池中，并通过注射器滴加 (R)-DNMDP。测量每次注射引起的热量变化，并分析结合等温线以确定 Kd、化学计量比 (n) 和热力学参数（ΔH、ΔS）。
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| 细胞实验 |
采用细胞活力检测法（例如 CellTiter-Glo 发光法）评估 (R)-DNMDP 的细胞毒活性。将癌细胞系（例如 HeLa、NCI-H1734、A549、MCF7、PC3）培养于各自的培养基（例如 DMEM 或 RPMI-1640）中，并添加 10% 胎牛血清和 1% 青霉素-链霉素，置于 37℃、5% CO₂ 的加湿培养箱中培养。进行检测时，收集细胞并以每孔 5,000 至 10,000 个细胞的密度接种于 96 孔不透明壁板中，每孔加入 100 μL 生长培养基，过夜培养以促进细胞贴壁。次日，将培养基更换为100 μL含有不同浓度(R)-DNMDP（通常浓度范围为0.01 nM至100 μM，以3倍系列稀释8至10个浓度点）的新鲜培养基。对照孔加入等体积的溶剂（例如DMSO，终浓度≤0.1%）。细胞在37℃下孵育72小时。孵育结束后，将培养板在室温下平衡30分钟。然后，向每个孔中加入100 μL CellTiter-Glo试剂，并振荡2分钟以诱导细胞裂解。之后，将培养板在室温下再孵育10分钟以稳定发光信号。使用兼容的微孔板读数仪（例如BioTek Synergy H1）测量发光值。发光强度与活细胞数量成正比。通过使用非线性回归分析，将浓度-反应数据拟合到四参数逻辑方程，计算降低活力的半数最大有效浓度 (EC50)。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在啮齿动物中进行的(R)-DNMDP药代动力学(PK)研究表明，该化合物具有良好的口服生物利用度，并能达到足够的全身暴露量以发挥其抗肿瘤作用。口服给药后，该化合物被吸收，并在数小时内达到血浆峰浓度(Cmax)。其半衰期(t1/2)适中，因此可以进行合理的给药间隔。该化合物主要通过代谢清除，可能涉及CYP450酶。其分布容积表明其具有良好的组织穿透性，包括向肿瘤组织的分布。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(R)-DNMDP 已在临床前毒理学研究中进行了评估，以评价其安全性。在标准体外试验中，其遗传毒性较低。在大鼠和犬的重复给药毒性研究中，主要结果与其靶向药理活性一致，包括对细胞周转率高的组织（例如骨髓和胃肠道）的影响。这些研究已确定了未观察到不良反应剂量 (NOAEL)。然而，(R)-DNMDP 尚未进入临床试验，因此尚无全面的人体安全性数据。其选择性细胞毒活性（可保护许多正常细胞）表明，与许多传统化疗药物相比，它可能具有更有利的治疗窗口。
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| 分子式 |
C15H20N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
304.344303131104
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| 精确质量 |
304.153
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| CAS号 |
1630760-60-9
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| 相关CAS号 |
DNMDP;328104-79-6
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| PubChem CID |
7122097
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| LogP |
2.2
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| tPSA |
90.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
456
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=C1C[C@@H](C)C(C2C=CC(=C(C=2)[N+](=O)[O-])N(CC)CC)=NN1
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| InChi Key |
YOSSKNZHADPXJX-SNVBAGLBSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H20N4O3/c1-4-18(5-2)12-7-6-11(9-13(12)19(21)22)15-10(3)8-14(20)16-17-15/h6-7,9-10H,4-5,8H2,1-3H3,(H,16,20)/t10-/m1/s1
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| 化学名 |
(4R)-3-[4-(diethylamino)-3-nitrophenyl]-4-methyl-4,5-dihydro-1H-pyridazin-6-one
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| 别名 |
(R)DNMDP; (R) DNMDP
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~328.58 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.21 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.21 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2858 mL | 16.4290 mL | 32.8580 mL | |
| 5 mM | 0.6572 mL | 3.2858 mL | 6.5716 mL | |
| 10 mM | 0.3286 mL | 1.6429 mL | 3.2858 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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