| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Eukaryotic initiation factor 4A-3 (eIF4A3). eIF4A3 is a member of the DEAD-box RNA helicase family and is a core component of the exon junction complex (EJC), which is deposited on mRNAs after splicing. eIF4A3 plays critical roles in mRNA splicing, export, translation, and nonsense-mediated decay (NMD). The active enantiomer (eIF4A3-IN-2) binds noncompetitively and selectively to eIF4A3, inhibiting its ATPase and helicase activities. (R)-eIF4A3-IN-2 is the inactive enantiomer used as a negative control.
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Asp-Glu-Ala-Asp (DEAD) 盒家族腺苷三磷酸 (ATP) 依赖性 RNA 解旋酶被称为真核起始因子 4A-3 (eIF4A3) [1]。
在无细胞生化分析中，eIF4A3-IN-2 以 110 nM 的 IC50 值抑制 eIF4A3 的 ATPase 和解旋酶活性。该抑制作用对 ATP 为非竞争性抑制，意味着该抑制剂结合于一个不同于 ATP 结合位点的位点。eIF4A3-IN-2 具有很高的特异性，对其他 DEAD-box 解旋酶的活性极低。(R)-对映异构体的抑制活性显著降低；(R)-对映异构体的精确 IC50 值尚未公开。该化合物影响 eIF4A3 对 RNA 的结合和解旋。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
由于(R)-eIF4A3-IN-2是活性较低的对映体，常被用作对照，因此针对该化合物的细胞活性检测报道较少。活性对映体eIF4A3-IN-2可抑制细胞内eIF4A3的功能，进而影响mRNA剪接和无义介导的mRNA降解(NMD)过程。抑制eIF4A3可降低NMD敏感转录本的表达，并改变可变剪接模式。(R)-对映体的细胞活性预计极低，因此可作为区分靶点特异性结合和脱靶效应的合适阴性对照。在活性对映体所用的浓度（例如0.1-10 uM）下，(R)-对映体未显示出显著作用。
|
| 酶活实验 |
eIF4A3 的 ATPase 活性采用偶联发光法在无细胞体系中进行测定。将重组 eIF4A3 蛋白（通常为 10-100 nM）与不同浓度的 (R)-eIF4A3-IN-2 或活性对映体（0.001-100 uM）在含有 ATP（0.1-1 mM）、RNA（poly(U) 或其他 RNA 底物）、Mg2+ 和 KCl 的测定缓冲液中孵育。使用 Kinase-Glo® 或 ATPase-Glo™ 试剂定量 ATP 水解，该试剂可测量剩余的 ATP 或 ADP 生成量。在酶标仪上测量发光值，并根据剂量反应曲线计算 IC50 值。或者，也可以使用孔雀绿法测定释放的磷酸盐。对于解旋酶活性，使用基于 FRET 或凝胶的解旋测定法，并结合荧光标记的双链 RNA 进行测定。
|
| 细胞实验 |
对于用作对照的(R)-对映体，基于细胞的eIF4A3抑制检测并非标准方法。对于活性对映体，将细胞（例如HeLa、HEK293）用eIF4A3-IN-2（0.1-10 uM）处理24-72小时。通过检测mRNA和蛋白质水平，利用报告基因构建体（例如含有提前终止密码子的β-珠蛋白或TCR-β报告基因）评估NMD效率。通过RT-PCR分析eIF4A3靶基因的可变剪接。添加(R)-对映体的浓度与对照相同，并记录任何轻微影响，以解释脱靶或非特异性活性。除非长期NMD抑制破坏细胞稳态，否则eIF4A3抑制剂通常不会影响细胞活力。
|
| 动物实验 |
由于(R)-eIF4A3-IN-2是活性较低的对照化合物，因此尚未有关于其体内动物研究的报道。活性对映体eIF4A3-IN-2已用于癌症研究。在eIF4A3依赖性癌症（例如某些白血病、胶质瘤或实体瘤）的小鼠异种移植模型中，使用活性对映体（例如，腹腔注射或口服10-50 mg/kg）治疗可抑制肿瘤生长并改变NMD依赖性基因表达。(R)-对映体可用作阴性对照，以确认体内效应是由特异性eIF4A3抑制而非非靶向活性引起的。典型的研究设计包括每日给药2-4周、测量肿瘤体积以及对NMD敏感转录本进行终点分析。
|
| 药代性质 (ADME/PK) |
目前尚未发表针对 (R)-eIF4A3-IN-2 的专门药代动力学研究。作为活性较低的对映异构体，其理化性质（分子量 602.71，C25H19Br2ClN4O2）预计与活性对映异构体相似。需要对消旋体或单个对映异构体进行标准药代动力学参数（例如半衰期、口服生物利用度和组织分布）的评估。对于使用活性对映异构体的体内研究，典型的制剂采用以 PEG300 或生理盐水稀释的 DMSO 基载体。由于结构相似，(R)-对映异构体预计具有相似的吸收、分布、代谢和排泄 (ADME) 特性，但不能排除对映选择性代谢的可能性。
|
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
(R)-eIF4A3-IN-2 的临床前毒理学数据尚不可用。作为活性较低的对映体，它并非药物研发的重点，仅用作研究对照工具。活性对映体 eIF4A3-IN-2 在治疗剂量下，预计在动物模型中具有良好的耐受性。RNA 解旋酶抑制剂常见的毒性问题可能包括对细胞 RNA 代谢和剪接的影响，但这些通常与急性毒性无关。应遵循标准的实验室安全预防措施。目前尚无人体临床数据。
|
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
(R)-eIF4A3-IN-2 是一种研究级化合物，用作 eIF4A3-IN-2 的阴性对照。活性对映体（非 (R)-型）是 eIF4A3 的一种高选择性非竞争性抑制剂。eIF4A3 是一种 RNA 解旋酶，参与 mRNA 剪接和无义介导的 mRNA 降解 (NMD)。该化合物可用于研究癌症生物学、新型治疗途径以及基因表达调控。eIF4A3 在多种癌症中过表达，抑制 eIF4A3 是一种潜在的治疗策略。该化合物的分子式为 C25H19Br2ClN4O2，分子量为 602.71。(R)-eIF4A3-IN-2 尚未获准用于临床。活性对映体的选择性源于其与 eIF4A3 特有的非竞争性结合位点结合，从而最大限度地减少了对其他解旋酶的脱靶效应。
|
| 分子式 |
C25H19BR2CLN4O2
|
|---|---|
| 分子量 |
602.7050
|
| 精确质量 |
601.954
|
| CAS号 |
2095484-82-3
|
| 相关CAS号 |
eIF4A3-IN-2;2095677-20-4
|
| PubChem CID |
131953886
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| LogP |
5
|
| tPSA |
57.9
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
34
|
| 分子复杂度/Complexity |
744
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
| SMILES |
BrC1C([H])=C([H])C2=C(C([H])=NN2C=1[H])C(N1C([H])([H])C([H])([H])N(C(C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])Br)=O)[C@]([H])(C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])Cl)C1([H])[H])=O
|
| InChi Key |
WKKAVTNXNVPCCN-QHCPKHFHSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C25H19Br2ClN4O2/c26-18-5-1-17(2-6-18)24(33)31-12-11-30(15-23(31)16-3-8-20(28)9-4-16)25(34)21-13-29-32-14-19(27)7-10-22(21)32/h1-10,13-14,23H,11-12,15H2/t23-/m0/s1
|
| 化学名 |
(4-bromophenyl)-[(2R)-4-(6-bromopyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonyl)-2-(4-chlorophenyl)piperazin-1-yl]methanone
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~82.96 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.15 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6592 mL | 8.2959 mL | 16.5917 mL | |
| 5 mM | 0.3318 mL | 1.6592 mL | 3.3183 mL | |
| 10 mM | 0.1659 mL | 0.8296 mL | 1.6592 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
