| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
RAD51 ( IC50 = 5-30 μM )
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：RI-1 通过直接、特异性破坏 HsRAD51 并抑制 RAD51 在 ssDNA 上形成细丝的能力，使细胞对 DNA 损伤敏感。此外，RI-1 单独对所有三种癌细胞系（HeLa、MCF-7 和 U2OS）产生单药毒性，LD50 值在 20–40 µM 范围内。 RI-1 减少 G2 期细胞中 γ-H2AX 病灶的重新连接，并导致照射后 6 小时内未修复的 DSB 水平更高。激酶测定：所有反应均在黑色非结合聚苯乙烯 384 孔板中进行，反应体积为 30–100 μL。纯化的DNA链交换蛋白和化合物在室温下预孵育5分钟；然后将它们与 100 nM ssDNA 底物在 37°C 下进一步孵育 30 分钟，该底物由 5' 末端带有 Alexa 488 标记的 45 聚体聚 dT（由 Integrated DNA Technologies 合成和纯化）组成。反应在 20 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、0.25 μM BSA、2% 甘油、30 mM NaCl、4% DMSO 和 2 mM ATP 中进行。一些条件包括所示的 DTT 或 TCEP（三（2-羧乙基）膦）。使用 Safire2 酶标仪测量 DNA 结合作为荧光偏振 (FP) 的函数，使用以下设置：激发 470±5nm，发射 530±5nm，10 个读数/孔，从对照孔自动校准 Z 高度和 G 因子。显示的误差线代表标准偏差。对于涉及蛋白质浓度滴定的实验，数据适合一个方程，该方程解释了重组酶蛋白结合 DNA 的合作性质。对于涉及 RI-1 滴定的实验，选择蛋白质浓度以在不存在 RI-1 的情况下提供约 80% 的 FP 信号饱和度。细胞测定：细胞毒性是通过集落形成能力的丧失来确定的。实验一式三份进行。使用 CCD 相机对结晶紫染色的菌落进行成像，并使用 NIH Image 软件进行计数。误差线表示标准误差。
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| 体内研究 (In Vivo) |
由于 RI-1 在组织培养基和水性缓冲液中的半衰期较短，因此其在临床前体内模型中的开发受到限制。 RI-2 是 RI-1 的同系物，它的诞生可以减轻这些影响 (119)。 RI-2 显示可结合 Rad51 并抑制 Rad51 在 DNA 损伤位点的核灶。 RI-2 目前是进一步体外和体内研究的主题，并被用于鉴定抑制 Rad51 功能的第三代类似物。
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| 酶活实验 |
反应体积范围为 30 至 100 μL，所有反应均在 384 孔黑色非结合聚苯乙烯板中进行。纯化的化合物和 DNA 链交换蛋白首先在室温下孵育五分钟。然后将它们在 37°C 下与 100 nM ssDNA 底物一起孵育 30 分钟，该底物是在 5' 末端标有 Alexa 488 的 45 聚体聚 dT（由 Integrated DNA Technologies 纯化和合成）。反应使用 20 mM HEPES pH 7.5、10 mM MgCl2、0.25 μM BSA、2% 甘油、30 mM NaCl、4% DMSO 和 2 mM ATP。 DTT 或 TCEP（三（2-羧乙基）膦）属于所提及的条件。 Safire2 酶标仪用于测量 DNA 结合作为荧光偏振 (FP) 的函数。使用以下设置：激发 470±5 nm、发射 530±5 nm、10 个读数/孔、Z 高度和从对照孔自动校准的 G 因子。显示的误差线代表标准偏差。将数据拟合到一个方程中，该方程考虑了在涉及蛋白质浓度滴定的实验中重组酶蛋白 DNA 结合的协同性质。选择用于 RI-1 滴定实验的蛋白质浓度，以便当 RI-1 不存在时 FP 信号达到约 80% 饱和度。
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| 细胞实验 |
形成集落的能力是细胞毒性的关键指标。每个实验进行三份重复。 NIH Image 软件用于对用结晶紫染色并使用 CCD 相机成像的菌落进行计数。正常误差由误差线指示。
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| 动物实验 |
Female BALB/c nude mice (6 weeks) bearing TNBC tumor
50 mg/kg I.p. every 3 days for 30 days |
| 参考文献 |
| 分子式 |
C14H11CL3N2O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
361.61
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| 精确质量 |
359.983
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| 元素分析 |
C, 46.50; H, 3.07; Cl, 29.41; N, 7.75; O, 13.27
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| CAS号 |
415713-60-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
1074953
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| 外观&性状 |
Yellow to orange solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
483.0±45.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
245.9±28.7 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.669
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| LogP |
3.04
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| tPSA |
49.85
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
520
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1C(N(C2C([H])=C([H])C(=C(C=2[H])Cl)Cl)C(C=1N1C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C1([H])[H])=O)=O
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| InChi Key |
MWSUIZKGNWELRF-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H11Cl3N2O3/c15-9-2-1-8(7-10(9)16)19-13(20)11(17)12(14(19)21)18-3-5-22-6-4-18/h1-2,7H,3-6H2
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| 化学名 |
3-chloro-1-(3,4-dichlorophenyl)-4-morpholin-4-ylpyrrole-2,5-dione
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.91 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7654 mL | 13.8271 mL | 27.6541 mL | |
| 5 mM | 0.5531 mL | 2.7654 mL | 5.5308 mL | |
| 10 mM | 0.2765 mL | 1.3827 mL | 2.7654 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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RAD51-IN-3
Homologous recombination-IN-1
RI-2
RAD51-IN-1
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