Rifalazil

别名: Rifalazil ABI 1648 ABI1648 ABI -648 Krm-1648 Krm 1648 Krm1648 利福拉齐; 3'-羟基-5'-(4-异丁基-1-哌嗪)苯噁嗪利福霉素; 利福拉齐标准品; 3'-羟基-5'-(4-异丁基-1-哌嗪)苯嗪利福霉素
目录号: V5388 纯度: ≥98%
lRifalazil(以前称为 KRM-1648 和 AMI-1648)是利福霉素类似物和抗生素。
Rifalazil CAS号: 129791-92-0
产品类别: New15
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纯度: ≥98%

产品描述
lRifalazil(以前称为 KRM-1648 和 AMI-1648)是利福霉素类似物和抗生素。利福拉齐通过阻断 RNA 聚合酶中的 β 亚基来杀死细菌细胞。利福拉齐用于治疗许多不同的疾病。最常见的是衣原体感染、艰难梭菌相关性腹泻 (CDAD) 和结核病 (TB)。
生物活性&实验参考方法
靶点
Bacterial DNA-dependent RNA polymerase (specifically of Chlamydia trachomatis and Chlamydia pneumoniae)[1]
体外研究 (In Vitro)
利福拉齐抑制艰难梭菌、产气荚膜梭菌和脆弱拟杆菌,MIC50 值分别为 0.0015、0.0039 和 0.0313 µg/ml。它对革兰氏阳性肠道细菌具有抗菌作用[3]。 MIC50 值分别为 16 和 16 µg/ml,表明利福拉齐可抑制大肠杆菌和肺炎克雷伯菌这两种革兰氏阴性肠道细菌 [3]。利福拉齐的抗菌活性针对肠道中未发现的革兰氏阳性菌。具体来说,它抑制甲氧西林敏感、甲氧西林耐药、甲氧西林和喹诺酮耐药金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的生长。这些细菌的 MIC50 值分别为 0.0078、0.0078、0.0078、0.0078、0.0002 和 0.0001 µg/ml [3]。利福拉齐的 MIC50 值分别为 0.004、0.000125 和 0.00025 µg/ml,对幽门螺杆菌、肺炎衣原体和沙眼衣原体表现出抗菌活性 [3]。
Rifalazil 在细胞培养中对沙眼衣原体和肺炎衣原体表现出强效的抗菌活性。根据菌株和方法的不同,其最小抑菌浓度范围为0.00025至0.0025 µg/ml。[1]
Rifalazil 展现出独特的"保护效应",即用该药物预处理哺乳动物细胞单层后,可保护这些细胞免受后续衣原体感染。此效应比阿奇霉素、利福平、多西环素和氧氟沙星更强且更持久。例如,用0.002 µg/ml的rifalazil预处理McCoy细胞24小时,可在2天后保护其免受沙眼衣原体血清型D的攻击。根据细胞系的不同,该保护效应可持续6至12天。[1]
该保护效应在五种不同的哺乳动物细胞系(McCoy、HeLa、Hep-2、BGMK、HL)以及针对多种沙眼衣原体和肺炎衣原体分离株中均被观察到。[1]
该保护效应是由特异性抑制衣原体RNA聚合酶介导的,这通过使用具有改变的RNA聚合酶的沙眼衣原体突变体(突变体L2/UW-60、L2/UW-73、L2/UW-153)得到证实。这些突变体的保护剂量与其升高的MIC成比例增加,从而证实了靶点特异性机制。[1]
体内研究 (In Vivo)
当利福拉齐(口服灌胃;20、25和150 mg/kg;6-8周)与异烟肼(INH)联合治疗时,检测到结核分枝杆菌的各组小鼠的脾脏数量显着减少。至少6周。这与早期和晚期控制的减少形成对比。此外,添加吡嗪酰胺 (PZA) 在任何时间点都没有显着改善 RLZ-INH 治疗 [2]。
在小鼠结核病模型中,口服rifalazil联合异烟肼(INH)表现出强大的灭菌活性。与未治疗的对照组相比,使用rifalazil(20 mg/kg)加INH(25 mg/kg)治疗6周或更长时间,显著减少了感染小鼠脾脏和肺脏中的活结核分枝杆菌数量,并使部分动物达到"不可培养"状态(器官匀浆中检测不到菌落)。[2]
确定了达到并维持这种不可培养状态(即在治疗停止后防止细菌再生长)所需的最短治疗时间。使用rifalazil加INH治疗6或8周,在治疗结束后立即达到不可培养状态,但在治疗后的观察期内(第一个实验为4个月),相当数量的小鼠出现了细菌再生长。Rifalazil-INH治疗至少需要10周,才能在观察期内达到并维持不可培养状态。[2]
评估了在rifalazil-INH方案中添加吡嗪酰胺(PZA)的效果。与单用rifalazil-INH相比,PZA(150 mg/kg)联合rifalazil-INH进行短期治疗(3周)在3周时间点上导致脾脏和肺脏中的细菌计数显著更大幅度地减少。然而,对于更长的治疗时间(6、8或10周),添加PZA并未显著缩短达到不可培养状态所需的时间,也未显著改善防止治疗后细菌再生长的效果,尽管观察到了减少再生长趋势(但无统计学显著性)。[2]
细胞实验
抗菌药物敏感性试验(MIC测定): 将衣原体菌株接种于96孔微量滴定板中的McCoy细胞单层上。接种量为每孔10,000至50,000个包涵体形成单位。加入衣原体后30分钟内,将单层细胞在37°C下以1,200 × g离心1小时。弃去上清液,加入含有1 µg/ml放线菌酮和适当浓度rifalazil(或其他药物)的生长培养基。细胞在37°C、4% CO₂条件下培养48小时,然后用甲醇固定。使用属特异性单克隆抗体通过荧光检测衣原体包涵体。[1]
药物保护作用测定(保护效应实验): 将各种哺乳动物细胞(McCoy、HeLa、Hep-2、BGMK、HL)的单层培养于48孔板中。将细胞暴露于rifalazil(或其他药物)的系列稀释液中,时间从5分钟到72小时不等(标准时间为24小时)。然后离心细胞,用磷酸盐缓冲盐水洗涤三次,并置于新鲜的、不含抗菌药物但含有1 µg/ml放线菌酮的生长培养基中。细胞单层在不含药物的情况下(每48小时更换一次培养基)培养长达12天,然后用感染复数(MOI)为0.5的沙眼衣原体或肺炎衣原体进行攻击。感染后,细胞培养48小时,固定,并通过免疫荧光检测包涵体。最小保护浓度定义为能防止形成形态正常包涵体的最低药物浓度。[1]
动物实验
动物/疾病模型:感染5.2×107活分枝杆菌的雌性CD-1小鼠[2]
剂量:20、25和150 mg/kg; 6-8 周
给药途径: 口服(灌胃)
实验结果: 与异烟肼 (INH) 联合用药显示出短期治疗结核分枝杆菌感染的潜力。
感染模型:将 5 至 6 周龄的雌性 CD-1 近交系小鼠经尾静脉注射感染约 10⁷ 个活的结核分枝杆菌(Erdman 株),该菌悬浮于 0.2 ml 改良的 7H10 肉汤中。[2]
治疗方案:治疗于感染后 1 周开始,每周 5 天通过灌胃给药,持续指定时间(例如,3、4、5、6、8、10 或 12 周)。利法拉嗪溶于二甲基亚砜 (DMSO),然后用蒸馏水稀释,给药时 DMSO 的最终浓度为 0.5%。利法拉嗪的剂量为 20 mg/kg 体重。异烟肼 (INH,25 mg/kg) 和吡嗪酰胺 (PZA,150 mg/kg) 溶于蒸馏水。给药体积为 0.2 ml。[2]
疗效评估:在治疗结束时或治疗后观察期(停止治疗 3 或 4 个月)后,对小鼠实施安乐死。无菌取出脾脏和右肺,匀浆后接种于7H10琼脂平板上(对于菌落计数较低的治疗组,取0.1 ml全器官匀浆;对于其他治疗组,则进行滴定),以测定可培养分枝杆菌的数量(CFU)。平板在37℃空气中培养4周后进行计数。[2]
药代性质 (ADME/PK)
代谢/代谢物
利法拉嗪在人体内的主要代谢物是25-脱乙酰基苯并恶嗪去甲利法霉素和32-羟基苯并恶嗪去甲利法霉素。负责苯并恶嗪去甲利法霉素-25-脱乙酰化的酶是β-酯酶,而负责苯并恶嗪去甲利法霉素-32-羟基化的酶是CYP3A4。
利法拉嗪在动物和人体内均具有较长的半衰期,但未提供具体的半衰期数值。[1]
利法拉嗪可以进入哺乳动物细胞并在细胞内浓缩,这一特性有助于其在细胞培养中发挥持久的保护作用。[1]
参考文献

[1]. Rifalazil pretreatment of mammalian cell cultures prevents subsequent Chlamydia infection.Antimicrob Agents Chemother. 2006 Feb;50(2):439-44.

[2]. Evaluation of rifalazil in long-term treatment regimens for tuberculosis in mice.Antimicrob Agents Chemother. 2000 Jun;44(6):1458-62.

[3]. Development potential of rifalazil.Expert Opin Investig Drugs. 2003 Feb;12(2):255-71.

其他信息
利法拉嗪是一种吩恶嗪类药物。
利法拉嗪是抗生素利福霉素的衍生物。ActivBiotics公司正在研究其用于治疗多种细菌感染的疗效。
药物适应症
已研究用于治疗动脉粥样硬化、细菌感染和外周血管疾病。
作用机制
利法拉嗪强大的抗分枝杆菌活性源于其对细菌RNA聚合酶的抑制作用。
药效学
利法拉嗪代表了新一代安沙霉素类药物,具有独特的四环结构。最初,利法拉嗪被开发为一种治疗药物,用于替代利福平,作为结核病多药联合治疗方案的一部分。由于其卓越的抗菌活性和高细胞内浓度,利法拉嗪有望用于治疗由胞内病原体沙眼衣原体引起的疾病,该病原体可导致非淋球菌性尿道炎和宫颈炎,并常发展为盆腔炎。利法拉嗪也有望用于治疗相关微生物肺炎衣原体,该病原体可能参与慢性炎症过程,而慢性炎症被认为与动脉粥样硬化部分相关。由于其良好的抗菌谱和其他积极特性,利法拉嗪也可能对治疗由幽门螺杆菌引起的胃溃疡以及抗生素相关性结肠炎(由艰难梭菌在结肠内生长产生毒素所致)具有价值。利福拉嗪治疗这些适应症的潜在价值将在人体临床试验中进行评估。
利福拉嗪是一种新型利福霉素衍生物(3'-羟基-5'-(4-异丁基-1-哌嗪基)苯并恶嗪基利福霉素),可抑制细菌DNA依赖性RNA聚合酶。[1]
它对分枝杆菌、革兰氏阳性菌、幽门螺杆菌、肺炎衣原体和沙眼衣原体均具有高效力。[1]
利福拉嗪独特的“保护作用”(PE)表明,它可能在治疗后提供针对再次感染的持久保护,这可能具有公共卫生价值,尤其是在性传播感染和眼部衣原体感染等再次感染常见的疾病中。[1]
这种保护作用被认为是由于利福拉嗪能够在体内浓缩并持续存在。该药物能长时间作用于哺乳动物细胞,从而抑制衣原体RNA聚合酶的活性,即使药物移除后数天,衣原体仍能感染这些细胞。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C51H64N4O13
分子量
941.088
精确质量
940.447
CAS号
129791-92-0
相关CAS号
129791-92-0;
PubChem CID
135431094
外观&性状
Blue to dark blue solid powder
密度
1.36g/cm3
沸点
1048.6ºC at 760mmHg
熔点
195-200° (dec)
闪点
588ºC
蒸汽压
0mmHg at 25°C
折射率
1.634
LogP
6.573
tPSA
230.66
氢键供体(HBD)数目
5
氢键受体(HBA)数目
16
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
68
分子复杂度/Complexity
2510
定义原子立体中心数目
9
SMILES
C[C@H]1/C=C/C=C(\C(=O)NC2=C3C(=C4C(=C(C(=C5C4=C([C@](O5)(O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@H]([C@@H]([C@@H]([C@@H]([C@H]1O)C)O)C)OC(=O)C)C)OC)C)O)C)O)C2=O)N=C6C(=CC(=CC6=O)N7CCN(CC7)CC(C)C)O3)/C
InChi Key
UEFHFKKWYKVLDC-HTQYORAHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C51H64N4O13/c1-24(2)23-54-16-18-55(19-17-54)32-21-33(57)39-35(22-32)67-48-40(52-39)36-37-44(60)30(8)47-38(36)49(62)51(10,68-47)65-20-15-34(64-11)27(5)46(66-31(9)56)29(7)43(59)28(6)42(58)25(3)13-12-14-26(4)50(63)53-41(48)45(37)61/h12-15,20-22,24-25,27-29,34,42-43,46,57-60H,16-19,23H2,1-11H3,(H,53,63)/b13-12+,20-15+,26-14-/t25-,27+,28+,29+,34-,42-,43+,46+,51-/m0/s1 SMILES
化学名
(7S,9E,11S,12R,13S,14R,15R,16R,17S,18S,19E,21Z)-2,15,17,32-Tetrahydroxy-30-(4-isobutyl-1-piperazinyl)-11-methoxy-3,7,12,14,16,18,22-heptamethyl-6,23,37-trioxo-8,27,38-trioxa-24,34-diazahexacyclo[23.11.1.14,7.05,36.026,35.028,33]octatriaconta-1(36),2,4,9,19,21,25,28,30,32,34-undecaen-13-yl acetate
别名
Rifalazil ABI 1648 ABI1648 ABI -648 Krm-1648 Krm 1648 Krm1648
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~8.33 mg/mL (~8.85 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.2 mg/mL (2.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 22.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.2 mg/mL (2.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 22.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20%SBE-β-CD生理盐水中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.0626 mL 5.3130 mL 10.6260 mL
5 mM 0.2125 mL 1.0626 mL 2.1252 mL
10 mM 0.1063 mL 0.5313 mL 1.0626 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
NCT Number Recruitment interventions Conditions Sponsor/Collaborators Start Date Phases
NCT00385385 UNKNOWN STATUS Drug: Rifalazil Cerebrovascular Disease
Coronary Artery Disease
Peripheral Vascular Disease
ActivBiotics 2006-10 Phase 2
NCT00251849 UNKNOWN STATUS Drug: Rifalazil Intermittent Claudication
Peripheral Vascular Diseases
ActivBiotics 2005-11 Phase 3
NCT01631201 COMPLETED Drug: Rifalazil 25 milligram
Drug: Azithromycin 1 gram
Chlamydia Trachomatis Infection ActivBiotics Pharma, LLC 2012-07 Phase 2
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