sGC
Riociguat (BAY 63-2521) targets soluble guanylate cyclase (sGC) (EC50=0.01 μM for human recombinant sGC; activates both NO-sensitive and NO-insensitive oxidized sGC) [2]

Riocigua 通过不依赖 NO 但依赖血红素的机制，以 0.1 至 100 μM 浓度依赖性地刺激重组 sGC，效果达到 2 倍至 73 倍[1]。利奥西呱会抑制洗涤血小板中的血小板功能，但不会抑制全血中的血小板功能，并且对心肌细胞的收缩和舒张没有直接影响[2]。

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在人肺动脉平滑肌细胞（hPASMCs）中，Riociguat (BAY 63-2521)（0.01–1 μM）以剂量依赖方式升高细胞内cGMP水平，1 μM时升高8倍；抑制血清诱导的hPASMCs增殖（IC50=0.15 μM）和迁移（1 μM时抑制50%）[1]
在暴露于高氧（85% O2）的大鼠肺动脉平滑肌细胞（rPASMCs）中，Riociguat (BAY 63-2521)（0.1 μM）降低增殖标志物PCNA的表达（降低40%），并抑制胶原沉积 [3]
Riociguat (BAY 63-2521)（0.001–0.1 μM）在体外可激活氧化态sGC（经H2O2处理），0.1 μM时使cGMP生成增加5.2倍，且不依赖内源性NO [2]

在长期治疗缺氧小鼠和注射 MCT 的大鼠中，利奥西呱（10 mg/kg/d，口服）可部分逆转肺动脉高压、右心肥厚和肺血管结构重塑[1]。

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在高氧诱导肺动脉高压的新生大鼠（85% O2暴露21天）中，口服 Riociguat (BAY 63-2521)（0.3 mg/kg/天）使右心室收缩压（RVSP）从45 mmHg降至32 mmHg，减少肺小动脉肌化程度（从65%降至30%），降低肺组织炎症细胞因子水平（TNF-α降低55%，IL-6降低48%），且不影响胫骨长度和体重增长 [3]
在肺动脉高压（PAH）患者中，口服 Riociguat (BAY 63-2521)（0.5–2.5 mg，每日3次）治疗12周后，6分钟步行距离平均增加36米，肺血管阻力（PVR）降低25%，心输出量增加18% [2]

纯化人重组sGC（α1/β1亚基），悬浮于含MgCl2和GTP的反应缓冲液中。将酶与系列浓度的 Riociguat (BAY 63-2521)（0.001–0.1 μM）在37°C孵育15分钟，加入终止液终止反应。通过ELISA检测生成的cGMP浓度，计算sGC激活的EC50值 [2]
用H2O2处理重组sGC 30分钟制备氧化态sGC，在相同反应条件下将氧化态酶与 Riociguat (BAY 63-2521)（0.01–0.1 μM）孵育，检测cGMP水平以评估药物对NO不敏感型氧化态sGC的激活效果 [2]

将hPASMCs培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，接种到96孔板（5×103个细胞/孔），血清饥饿24小时后，加入 Riociguat (BAY 63-2521)（0.01–1 μM）和10%血清，孵育72小时。MTT法检测细胞活力，计算增殖抑制率 [1]
迁移实验：将hPASMCs接种到Transwell小室上室，上室加入含 Riociguat (BAY 63-2521)（0.1–1 μM）的培养基，下室加入含10%胎牛血清的培养基，孵育24小时后，固定并染色下室表面的迁移细胞，显微镜下计数 [1]
cGMP检测：用 Riociguat (BAY 63-2521)（0.01–1 μM）处理hPASMCs 30分钟，裂解细胞，通过ELISA定量细胞内cGMP水平 [1]

Mice: Four groups of mice are used for the chronic intervention studies: ten control mice exposed to normoxic gas for 35 days; ten hypoxic gas exposed for 21 days; ten mice exposed for 35 days and given the vehicle (2% methylcellulose solution) from day 21 to day 35; and ten mice exposed for 35 days and given BAY 63-2521 (10 mg/kg) once daily by oral application from day 21 to day 35. In order to perform continuous radiotelemetry measurements of cardiac frequency and Prvs, a different group of mice is given oral application of BAY 63-2521 (10 mg/kg) once daily from day 21 to day 35 after being exposed to hypoxic gas for 35 days. Further two groups of animals are studied: control mice (n = 12) and animals exposed to hypoxia for 21 days (n = 12) in order to examine vascular reactivity in isolated mouse lungs. Rats: One week following MCT injection, rats are randomly assigned to receive chronic BAY 63-2521 treatment. A vehicle (2% methylcellulose solution) or BAY 63-2521 (10 mg/kg) are administered orally to rats in the experimental groups once daily. On day 35, rats undergo histological evaluation and are monitored every day for the duration of their lives.

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Neonatal Sprague-Dawley rats (within 24 hours of birth) were randomly divided into three groups (n=8/group): normoxia control (room air + vehicle), hyperoxia model (85% O2 + vehicle), and Riociguat (BAY 63-2521) treatment (85% O2 + drug). Riociguat (BAY 63-2521) was dissolved in 0.5% carboxymethylcellulose to prepare a 0.03 mg/mL suspension, administered via oral gavage at 0.3 mg/kg/day once daily for 21 days. RVSP was measured using a pressure catheter, lung tissues were collected for histopathological analysis of arteriole muscularization, and tibia length and body weight were recorded [3]

吸收、分布和排泄
利奥西泮的药代动力学与剂量成正比，剂量范围为0.5 mg至2.5 mg。绝对生物利用度约为94%。口服给药后，血浆峰浓度在1.5小时内达到。食物不影响利奥西呱的生物利用度。
利奥西呱主要以代谢物的形式经尿液（40%）和粪便（53%）排出。
稳态分布容积 = 30 L

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代谢/代谢物
利奥西呱的活性代谢物 (M1) 的效力约为利奥西呱的 1/3 至 1/10。

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生物半衰期
患者约为 12 小时，健康受试者约为 7 小时。

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在健康志愿者中，口服利奥西呱 (BAY 63-2521) (1 mg) 的口服生物利用度为 94%，给药后 1.5 小时达到血浆峰浓度 (Cmax) 为 3.5 ng/mL，末端半衰期 (t1/2) 为 12 小时。 [2]
利奥西呱 (BAY 63-2521) 在成人体内的分布容积 (Vd) 为 100 升，组织分布广泛。[2]
主要在肝脏通过 CYP1A1、CYP1A2 和 CYP3A4 代谢；不生成主要活性代谢物。[2]
约 70% 的 利奥西呱 (BAY 63-2521) 经粪便排泄，30% 经尿液排泄，不足 5% 以原药形式排泄。[2]

肝毒性
在注册前研究中，利奥西呱与血清酶升高或临床上明显的肝损伤事件无关。自利奥西呱获批以来，尚未有已发表的肝毒性报告，且产品标签中也未将肝损伤列为不良事件。
可能性评分：E（不太可能引起临床上明显的肝损伤）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
目前尚无关于利奥西呱在哺乳期临床应用的信息。生产商建议在服用利奥西呱期间避免哺乳。末次给药后3天，药物应从母乳中检测不到。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白质结合
95%，主要结合成分为血清白蛋白和α-1酸性糖蛋白。

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在用利奥西呱（BAY 63-2521）（0.3 mg/kg/天，持续21天）治疗的新生大鼠中，未观察到肝功能（ALT、AST）或肾功能（肌酐、BUN）异常，也未观察到行为毒性[3]。
在临床试验中，利奥西呱（BAY 63-2521）的常见不良事件利奥西呱（BAY 63-2521）的常见不良反应包括头痛（32%）、头晕（28%）和消化不良（15%），大多为轻度至中度[2]。
利奥西呱（BAY 63-2521）的血浆蛋白结合率为94%[2]。
禁止与硝酸盐类药物合用，因为可能导致严重低血压[2]。

[1]. Expression and function of soluble guanylate cyclase in pulmonary arterial hypertension. Eur Respir J. 2008 Oct;32(4):881-91.

[2]. Riociguat for the treatment of pulmonary hypertension. Expert Opin Investig Drugs. 2011 Apr;20(4):567-76.

[3]. Riociguat prevents hyperoxia-induced lung injury and pulmonary hypertension in neonatal rats without effects on long bone growth. PLoS One. 2018 Jul 10;13(7):e0199927.

利奥西呱是一种氨基甲酸酯，是{4,6-二氨基-2-[1-(2-氟苄基)-1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-3-基]嘧啶-5-基}甲基氨基甲酸的甲酯。它用于治疗慢性血栓栓塞性肺动脉高压和肺动脉高压。它是一种可溶性鸟苷酸环化酶激活剂和抗高血压药。它是一种吡唑并吡啶类化合物、氨基嘧啶类化合物、有机氟化合物和氨基甲酸酯类化合物。
利奥西呱是一种可溶性鸟苷酸环化酶 (sGC) 激动剂，已在美国、欧洲和其他几个地区获批用于治疗 WHO 功能分级 II 或 III 级的 I 组肺动脉高压 (PAH) 患者；利奥西呱用于治疗无法手术的慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）患者，或WHO功能分级II级或III级肺动脉内膜剥脱术后持续性/复发性肺动脉高压（PH）患者。利奥西呱由拜耳医药保健公司以Adempas®品牌销售。利奥西呱治疗30天的费用为7,500美元。
利奥西呱是一种可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂。利奥西呱的作用机制是作为鸟苷酸环化酶刺激剂。
利奥西呱是一种鸟苷酸环化酶刺激剂，可引起血管平滑肌松弛，用于治疗重度肺动脉高压。利奥西呱在治疗期间未见与显著的血清酶升高或临床上明显的急性肝损伤病例相关。

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药物适应症
利奥西呱适用于治疗术后持续性/复发性慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）（WHO 第 4 组）或无法手术的 CTEPH 成人患者，以改善其运动能力和 WHO 功能分级。利奥西呱也适用于治疗肺动脉高压（PAH）（WHO 第 1 组）成人患者，以改善其运动能力、WHO 功能分级并延缓临床恶化。利奥西呱单药治疗或与内皮素受体拮抗剂或前列腺素类药物联合治疗均显示出疗效。证实疗效的研究主要纳入了 WHO 功能分级 II-III 级的患者，其病因包括特发性或遗传性肺动脉高压 (PAH) (61%) 以及与结缔组织疾病相关的 PAH (25%)。
FDA 标签
慢性血栓栓塞性肺动脉高压 (CTEPH)：Adempas 适用于治疗 WHO 功能分级 (FC) II 至 III 级的成人 CTEPH 患者，包括可手术治疗的 CTEPH、手术治疗后持续性或复发性 CTEPH，以改善运动能力。肺动脉高压 (PAH) 成人：Adempas 可作为单药治疗或与内皮素受体拮抗剂联合治疗，适用于治疗 WHO 功能分级 (FC) II 至 III 级的成人肺动脉高压 (PAH) 患者，以改善运动能力。已证实其对包括特发性或遗传性 PAH 以及与结缔组织疾病相关的 PAH 在内的 PAH 患者群体有效。儿科：Adempas适用于治疗18岁以下、体重≥50 kg、WHO功能分级（FC）II至III级的儿童肺动脉高压（PAH），需与内皮素受体拮抗剂联合使用。
治疗肺动脉高压

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作用机制
利奥西呱是一种可溶性鸟苷酸环化酶（sGC）的刺激剂，sGC是心肺系统中的一种酶，也是一氧化氮（NO）的受体。当NO与sGC结合时，该酶会催化信号分子环磷酸鸟苷（cGMP）的合成。细胞内cGMP在调节影响血管张力、增殖、纤维化和炎症的过程中发挥着重要作用。肺动脉高压与内皮功能障碍、一氧化氮合成受损以及NO-sGC-cGMP通路刺激不足有关。利奥西呱具有双重作用机制。它通过稳定NO-sGC结合，增强sGC对内源性NO的敏感性。此外，利奥西呱还能通过另一个结合位点直接刺激sGC，该作用独立于NO。利奥西呱可刺激NO-sGC-cGMP通路，导致cGMP生成增加，进而引起血管舒张。

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利奥西呱（BAY 63-2521）是首个口服可溶性鸟苷酸环化酶激活剂，它通过直接结合sGC的变构位点并稳定NO-sGC复合物发挥药理作用，从而促进GTP转化为cGMP[1]。
其作用机制包括血管舒张、抑制平滑肌细胞增殖和抗纤维化作用，这些作用不依赖于内源性NO水平，因此在NO缺乏或sGC氧化的病理状态下也有效[1]。
临床上，利奥西呱适用于治疗肺动脉高压（PAH）和慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH）[2]。
利奥西呱（BAY 63-2521） 63-2521) 需要根据患者的耐受性进行剂量调整，每日最大剂量为 7.5 毫克（每日三次，每次 2.5 毫克）[2]

C20H19FN8O2

422.42

422.161

C, 56.87; H, 4.53; F, 4.50; N, 26.53; O, 7.58

625115-55-1

Riociguat-13C,d6

11304743

Light yellow solid powder

1.5±0.1 g/cm3

567.2±50.0 °C at 760 mmHg

296.8±30.1 °C

0.0±1.6 mmHg at 25°C

1.720

-0.31

138.8

2

9

5

31

618

0

FC1=CC=CC=C1CN2C3=NC=CC=C3C(C4=NC(N)=C(C(N)=N4)N(C)C(OC)=O)=N2

WXXSNCNJFUAIDG-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C20H19FN8O2/c1-28(20(30)31-2)15-16(22)25-18(26-17(15)23)14-12-7-5-9-24-19(12)29(27-14)10-11-6-3-4-8-13(11)21/h3-9H,10H2,1-2H3,(H4,22,23,25,26)

methyl N-[4,6-diamino-2-[1-[(2-fluorophenyl)methyl]pyrazolo[3,4-b]pyridin-3-yl]pyrimidin-5-yl]-N-methylcarbamate

Riociguat; BAY 63-2521; BAY63-2521; BAY632521; Trade name: Adempas

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。