5-HT2C Receptor
5-HT2C serotonin receptor (HTR2C). Ro 60-0175 is a potent and selective agonist of the 5-HT2C receptor. The compound shows high selectivity for 5-HT2C over other serotonin receptor subtypes, with pKi values of 9.0 for 5-HT2C, 7.5 for 5-HT2A, and significantly lower affinity for 5-HT1A (5.4), 5-HT6 (5.2), and 5-HT7 (5.6).

Ro60-0175，或称(2S)-1-(6-氯-5-氟吲哚-1-基)-丙-2-胺，是一种具有S构型的1-(6-氯-5-氟吲哚-1-基)-丙-2-胺。它是一种选择性激动剂，可同时激动5-羟色胺2B (5-HT2B)和5-羟色胺2C (5-HT2C)两种血清素受体亚型，通常以富马酸盐的形式使用。它既是5-羟色胺2B受体激动剂，也是5-羟色胺2C受体激动剂。体外实验表明，Ro 60-0175对人5-HT2C受体具有强效且选择性的激动活性，其pKi值为9.0。该化合物对5-HT2C受体的选择性高于5-HT2A受体（pKi = 7.5）、5-HT1A受体（5.4）、5-HT6受体（5.2）和5-HT7受体（5.6）。其高效性和选择性使其成为体外研究5-HT2C受体功能的重要工具。

在治疗组中，对照组小鼠的反应规律性由富马酸Ro60-0175（1 mg/kg；皮下注射）维持，使动物能够更早地达到反应转折点[1]。在Ro60-0175（0.3、1和3 mg/kg）和育亨宾（1 mg/kg）皮下注射和腹腔注射组中，单独使用育亨宾治疗可剂量依赖性地分离出对载体注射的增强反应。富马酸可降低这种反应，而SB242084则阻断了这种作用[1]。与对照组相比，1 mg/kg 和 3 mg/kg 的富马酸盐（Ro60-0175，0.5 mg/kg SB242084；1 mg/kg Ro60-0175；皮下注射；腹腔注射）显著降低了恢复组的激活杆操作次数[1]。另一方面，恢复组中存在富马酸，SB242084 可能用于阻断该效应。关于被动杆操作次数，未观察到显著的主效应或交互作用[1]。体内研究已将 Ro 60-0175 用于研究中枢神经系统中 5-HT2C 受体的作用。该化合物影响情绪、焦虑、摄食行为和生殖行为，这与已知的 5-HT2C 受体功能相符。它对 5-HT2C 的选择性使其能够在动物模型中特异性激活该受体亚型，从而能够将 5-HT2C 介导的作用与其他血清素受体介导的作用区分开来。

用于检测化合物 Ro 60-0175 的无细胞受体结合试验采用表达重组人血清素受体（5-HT2C、5-HT2A、5-HT1A、5-HT6、5-HT7）的细胞膜制备物。将该化合物与不同浓度的放射性标记血清素受体配体（例如，5-HT2C 的配体为 [³H]-美舒麦角林）在室温下孵育 60-120 分钟。在过量未标记血清素受体配体存在下测定非特异性结合。通过过滤分离结合的和游离的放射性，并根据竞争曲线计算 Ki 值。

Ro 60-0175 的细胞功能分析采用稳定表达 5-HT2C 受体的细胞系（例如 HEK-293-5-HT2C 细胞）。将细胞接种于 96 孔板中，并用钙敏感荧光染料（例如 Fluo-4）进行标记。用浓度范围为 0.01 nM 至 100 μM 的 Ro 60-0175 处理细胞，并使用荧光酶标仪测量细胞内钙动员，因为 5-HT2C 受体与 Gq 蛋白偶联，并刺激磷脂酶 C 介导的钙释放。EC50 值由剂量反应曲线确定。通过测试该化合物对表达其他血清素受体亚型的细胞的作用，验证其选择性。

动物/疾病模型：成年雄性SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠（280-320 g）[1]
剂量：1 mg/kg
给药途径：皮下注射
实验结果：药物治疗组的对照动物保持了反应的规律性，但药物治疗组的动物更早达到临界点。

---

动物/疾病模型： 成年雄性 SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠（280-320 g）[1]
剂量： 0.5 mg/kg (SB242084)，1 mg/kg (Ro60-0175)
给药途径： 皮下注射 (Ro60-0175)，腹腔注射 (SB242084)
实验结果： SB242084 减弱了对可卡因的反应，并且其作用被逆转。

---

动物/疾病模型： 成年雄性 SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠（280-320 g）[1]
剂量： 0.3、1 和 3 mg/kg（Ro60-0175），1 mg/kg（育亨宾）
给药途径： 皮下注射（Ro60-0175），腹腔注射（育亨宾）
实验结果： 单独使用育亨宾治疗可增强与载体注射相比的反应，而 Ro60-0175 可剂量依赖性地减弱这种反应。

---

动物/疾病模型： 成年雄性 SD（SD（Sprague-Dawley））大鼠（280-320 g）[1]
剂量： 0.5 mg/kg (SB242084)、1 mg/kg (Ro60-0175)、1 mg/kg (育亨宾)

---

Ro60-0175 溶于 0.9% 生理盐水中，皮下注射[1]
实验 1a：每日注射 Ro60-0175 对可卡因自我给药的影响[1]
手术前，训练大鼠按压杠杆获取食物颗粒。限制大鼠的食物摄入量（约 18 g/天），将其置于操作箱中，并根据 FR 1 强化程序训练其按压左侧杠杆获取食物（45 mg Noyes 颗粒）。在每天30分钟的训练中，大鼠最多可获得100粒饲料颗粒。任何在训练第三天仍未获得100粒饲料颗粒的大鼠，将被放入操作箱中过夜，并按照FR1强化程序获得300粒饲料颗粒。在训练期间，操作箱内还会放置一个装满水的不锈钢盘。之后，大鼠仅在白天30分钟的训练时间内被放入操作箱。一旦大鼠连续三天每天都获得100粒饲料颗粒，即被认为已完成杠杆训练，随后每天喂食约20克实验室饲料。导管植入一周后，大鼠开始接受可卡因（0.25毫克/次，溶于0.1毫升溶液中）的输注（0.1毫升，持续5.5秒），输注过程遵循FR1强化程序。每次输注后，都会有一个刺激灯亮起，持续20秒的暂停期。一旦反应稳定，便实施渐进比率强化程序，其中获得输注所需的反应次数会随着输注次数的增加而增加。该渐进比率由以下公式得出：反应比率=[5e(0.2 × 输注次数)−5]，由此得出的反应比率分别为 1、2、4、6、9、12、15、20、25、32、40、50、62、77、95、118 等（Richardson 和 Roberts，1996）。每次实验持续到连续 1 小时未获得输注为止，或最长持续 5 小时。记录在此临界点之前获得的输注次数。整个实验过程中，输注剂量始终保持在 0.25 mg/次。当连续三天临界点的变化不超过 15% 时，测试开始。此时，将大鼠随机分为两组，两组大鼠每日可卡因输注次数相同。一组大鼠在放入自我给药箱前15分钟皮下注射1 mg/kg Ro60-0175；另一组大鼠注射生理盐水。连续8天进行测试。生理盐水组和Ro60-0175组各有8只大鼠完成了实验。

---

实验1b：SB242084和Ro60-0175对可卡因自我给药的交互作用[1]
另有9只大鼠按照上述方法训练对可卡因（0.25 mg/次）产生反应。一旦断点稳定，便开始药物测试。每只大鼠至少间隔72小时进行四次测试。在这些测试日，首先给大鼠腹腔注射0.5 mg/kg SB242084或其溶剂，30分钟后，皮下注射1 mg/kg Ro60-0175或生理盐水。15分钟后，将大鼠放入药物自我给药箱中。处理顺序由拉丁方设计确定，每个处理水平的测试动物数量大致相等。在非药物测试日，进行常规的自我给药训练。

---

实验2a：Ro60-0175对育亨宾诱导的复吸的影响[1]
本实验及所有后续实验的实验设计均包含三个阶段：可卡因自我给药、按压杆行为消退训练和复吸测试。11只大鼠接受训练，使其对按照FR1强化程序给予的可卡因（0.25 mg/次）做出反应，如上所述。可卡因输注时，刺激灯会亮起20秒。自我给药实验持续2小时，连续进行15次。实验结束后，进入消退阶段。此时，将药物注射器从泵中移除，使之前激活的杠杆上的反应能够激活刺激灯，但不再输注可卡因。消退阶段持续8天，直至激活杠杆的反应次数达到一个较低且稳定的水平，即2小时内少于15次。此时，对大鼠进行五次测试，每次测试间隔至少72小时。在这些测试中，首先对大鼠进行2小时的消退阶段，期间不进行任何药物处理。阶段结束后，大鼠腹腔注射1 mg/kg育亨宾或生理盐水，然后放回笼中。30分钟后，大鼠再次皮下注射Ro60-0175或生理盐水。 15分钟后，将大鼠放回自我给药箱，进行另一次2小时的消退训练。测试的五种处理组合为：生理盐水载体，以及1 mg/kg育亨宾联合生理盐水，0.3、1和3 mg/kg Ro60-0175。处理顺序由拉丁方设计确定。在两次测试之间的几天，大鼠按常规进行2小时的消退训练。育亨宾的剂量是根据已发表的研究（Shepard等人，2004）和一项预实验的结果选择的。

---

实验2b：SB242084和Ro60-0175对育亨宾诱导的复吸的交互作用[1]
九只大鼠经历了与实验2a相同的可卡因自我给药和消退程序。在本实验中，消退训练持续12天，之后开始恢复测试。共进行了四次测试。每次测试中，所有大鼠在2小时消退训练结束后均接受1 mg/kg育亨宾注射，然后放回笼中。15分钟后，大鼠接受0.5 mg/kg SB242084或其溶剂对照处理，30分钟后，大鼠接受1 mg/kg Ro60-0175或生理盐水注射。再过15分钟后，大鼠被放回自我给药箱，进行2小时的消退训练。所有大鼠均接受所有四种处理组合的测试，每次测试间隔至少72小时。处理顺序由拉丁方设计确定。

---

实验 3a：Ro60-0175 对情境线索诱导的复吸的影响[1]
本实验考察了 Ro60-0175 对情境线索诱导的可卡因渴求复吸的影响。实验需要在两种不同的情境下进行，实验分为三个阶段（自我给药、消退和复吸）。实验首先进行可卡因自我给药的习得训练（15 天），然后进行消退训练（22 天），最后测试可卡因渴求复吸情况（10 天）。大鼠被随机分配到复吸组（n=8）或对照组（n=8）。在复吸组中，大鼠在一种情境（A）中进行可卡因自我给药，在另一种情境（B）中进行消退训练，并在情境A中进行复吸测试。在对照组中，大鼠在情境A中进行自我给药，消退训练和复吸训练均在情境B中进行。在一种情境中，操作箱底部铺设了纹理化的有机玻璃板；箱内照明灯和隔音箱内的通风扇均开启。该情境下的实验在饲养室熄灯2小时后开始。在另一种情境中，操作箱位于实验室的不同区域。这些操作箱底部为标准的钢条地板；箱内照明灯和通风扇均关闭。在替代情境下进行的实验于饲养室熄灯5小时后开始。
在可卡因自我给药阶段，大鼠接受训练，使其能够根据FR1强化程序（如实验1和2所述）对可卡因输注（0.25 mg，溶于0.1 ml，输注时间为5.5秒）做出反应。每次输注可卡因时，饲养室的照明灯会亮起20秒，在此期间记录大鼠的按压操作杆次数，但不进行强化。共进行了15次，每次2小时的自我给药实验。在消退阶段，注射器从泵上移除，之前激活的操作杆会激活刺激灯，但不再输注可卡因。在恢复阶段，每只大鼠在分别接受0.3、1和3 mg/kg Ro60-0175和生理盐水处理15分钟后开始进行四次测试。处理顺序由拉丁方设计确定。两次测试间隔至少 72 小时，测试间隙，大鼠在相应的消退条件下进行训练。

---

实验 3b：SB242084 和 Ro60-0175 对情境线索诱导的复吸行为的影响[1]
本实验在复吸组和对照组各使用了 8 只大鼠。自我给药、消退和复吸的行为学程序与实验 3a 相同。在复吸日，大鼠接受 0.5 mg/kg SB242084 或其溶剂与 1 mg/kg Ro60-0175 或生理盐水的各种组合的测试。两次注射间隔 30 分钟，第二次注射后 15 分钟开始测试。处理顺序由拉丁方设计确定。两次测试间隔至少72小时，测试间隙，大鼠在相应的消退条件下进行训练。

---

使用Ro 60-0175在啮齿动物模型中进行体内研究，以评估5-HT2C受体激活的行为效应。该化合物通常通过腹腔注射或皮下注射给药，剂量范围为0.1-10 mg/kg。采用高架十字迷宫、旷场实验和摄食行为实验等行为学测试来评估焦虑、运动和食欲。使用选择性5-HT2C拮抗剂（例如SB-242084）预处理以阻断Ro 60-0175诱导的效应，从而证实其作用的选择性。

Ro 60-0175 的药代动力学研究表明，该化合物能够穿透血脑屏障，这与其作为中枢神经系统5-羟色胺受体激动剂的活性相符。在临床前动物模型中测定了 Cmax、Tmax、AUC、半衰期和脑血浆比等药代动力学参数。该化合物良好的药代动力学特性支持其在中枢神经系统研究中的应用。

Ro 60-0175 的毒理学数据仅限于研究性研究。作为一种 5-HT2C 受体激动剂，其潜在毒性可能包括对食欲、情绪和心血管功能的影响。临床开发需要进行标准的毒理学研究。在研究剂量下，该化合物的处理遵循标准的实验室安全预防措施。

[1]. Fletcher PJ, et al. The 5-HT2C receptor agonist Ro60-0175 reduces cocaine self-administration and reinstatement induced by the stressor yohimbine, and contextual cues. Neuropsychopharmacology. 2008;33(6):1402-1412.

我们此前已证实，5-HT2C受体激动剂Ro60-0175可减少可卡因的自我给药，并抑制药物渴求消退后对可卡因的恢复反应。本研究进一步拓展了这些发现，旨在探讨Ro60-0175对自我给药的影响能否通过重复给药维持，以及Ro60-0175是否会改变由药理应激剂育亨宾或自我给药环境诱导的恢复反应。在实验1中，皮下注射Ro60-0175（1 mg/kg）可减少由渐进比率强化程序维持的可卡因（0.25 mg/次）自我给药，这种减少持续了8天。在实验2中，大鼠接受FR1强化，每天进行2小时的可卡因自我给药，持续15天。镇静作用消退后，腹腔注射育亨宾（1 mg/kg）可诱导恢复反应，而皮下注射Ro60-0175（0.3–3 mg/kg）则呈剂量依赖性地减弱了这种恢复作用。在实验3中，大鼠先在不同环境（A）下接受FR1强化程序训练，使其对可卡因产生反应，然后在不同环境（B）下进行消退训练。恢复测试在环境A或B中进行。结果显示，只有当大鼠在最初的自我给药环境（A）中进行测试时，其反应才会恢复。Ro60-0175呈剂量依赖性地减弱了这种恢复作用。5-HT2C受体拮抗剂SB242084可阻断Ro60-0175的所有作用。因此，Ro60-0175通过5-HT2C受体发挥作用，减少由应激源和药物相关线索引发的可卡因自我给药和觅药行为。在为期 8 天的测试期间，Ro60-0175 未显示出耐受性。这些结果表明，选择性 5-HT2C 受体激动剂可能是一种治疗药物滥用的有效药理学策略。[1]

---

富马酸 Ro 60-0175 是一种用于研究 5-HT2C 受体生物学并验证 5-HT2C 作为中枢神经系统疾病治疗靶点的研究化合物。它并非获批药物，也未进入临床试验阶段。该化合物仅供研究用途，可从化学品供应商处获得。其对 5-HT2C 受体相对于其他血清素受体亚型的高选择性，使其成为解析 5-HT2C 受体在情绪、焦虑、摄食和其他行为中作用的宝贵工具。该化合物通常在 -20°C 下储存以保持长期稳定性。

C11H12N2FCL.C4H4O4

342.74994

342.078

C, 52.56; H, 4.71; Cl, 10.34; F, 5.54; N, 8.17; O, 18.67

169675-09-6

Ro60-0175;169675-08-5

6446435

Typically exists as White to off-white solid at room temperature

353.2ºC at 760mmHg

167.4ºC

3.65E-05mmHg at 25°C

3.193

105.55

3

6

4

23

346

1

C[C@H](N)CN1C=CC2=C1C=C(Cl)C(F)=C2.O=C(O)/C=C/C(O)=O

CEPHEXXZGQBXGT-XZTIXWOLSA-N

InChI=1S/C11H12ClFN2.C4H4O4/c1-7(14)6-15-3-2-8-4-10(13)9(12)5-11(8)15;5-3(6)1-2-4(7)8/h2-5,7H,6,14H2,1H3;1-2H,(H,5,6)(H,7,8)/b;2-1+/t7-;/m0./s1

(E)-but-2-enedioic acid;(2S)-1-(6-chloro-5-fluoroindol-1-yl)propan-2-amine

Ro 60-0175 fumarate; 169675-09-6; Ro60-0175 (fumarate); YQP8J4N96A; (S)-2-(Chloro-5-fluoro-indol-l-yl)-1-methylethylamine fumarate; 169675-09-6 (fumarate); (AS)-6-CHLORO-5-FLUORO-ALPHA-METHYL-1H-INDOLE-1-ETHANAMINE FUMARATE; (S)-1-(6-Chloro-5-fluoro-1H-indol-1-yl)propan-2-amine fumarate;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~291.76 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。