| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MEK1 (IC50 = 5.2 nM); MEK2 (IC50 = 5.2 nM)
MEK1/2 (IC₅₀ = 5.2 nmol/L for inhibition of MEK1/2 in vitro) [1] - MEK1/2 (IC₅₀ = 0.0065 μM for anti-proliferative inhibition in NCI-H2122 cells) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
RO4987655 有效抑制丝裂原激活蛋白激酶信号通路激活和肿瘤细胞生长，抑制 MEK1/2 的体外 IC50 为 5.2 nM[1]。 RO4987655 以剂量依赖性方式抑制 NCI-H2122 细胞的增殖，IC50 值为 0.0065 μM。在 0.1 至 1.0 μM 的剂量范围内，RO4987655 最早在治疗后 2 小时即可抑制 pERK1/2[2]。
1. RO4987655（也称为CH4987655）是一种口服有效的高选择性小分子MEK抑制剂，在体外能强效抑制丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的激活和肿瘤细胞的生长，对MEK1/2的抑制IC₅₀为5.2 nmol/L [1] 2. 在NCI-H2122（K-ras突变型）人肺癌细胞中，给予不同浓度（0、0.01、0.03、0.1、0.3、1 μM）的RO4987655处理2小时后，细胞裂解液的免疫印迹分析显示，RO4987655以浓度依赖的方式抑制ERK1/2的磷酸化（pERK1/2）；MEK1/2的磷酸化（pMEK1/2）和AKT的磷酸化（pAKT）水平也随药物浓度升高发生变化。在时间依赖性实验中，0.1 μM RO4987655处理NCI-H2122细胞0小时、6小时、第1天（D1）、第2天（D2）、第3天（D3）后，ERK、MEK、AKT和EGFR的磷酸化水平呈现动态变化：早期时间点pERK下调，而第3天pMEK1/2、pMEK2、pC-RAF和pAKT上调。RO4987655在NCI-H2122细胞中具有剂量依赖性的抗增殖作用，抗增殖抑制的IC₅₀为0.0065 μM [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在异种移植模型中，RO4987655 (CH4987655) 作为单一药物口服给药可完全根除肿瘤。 RO4987655 的 tmax 不到一小时，会被迅速吸收。 0.5 至 4 mg 的暴露量与剂量成正比。终末 t1/2 小于 25 小时，该处置是双相的。观察到较低的受试者间变异性； Cmax 和曲线下面积 (AUC) 的范围分别为 9%–23% 和 14%–25%。在较高剂量下，pERK 抑制率超过 80%，并且具有暴露依赖性。抑制性 Emax 模型（Emax ~100%；IC50 40.6 ng/mL）用于非线性混合效应模型来描述药代动力学-药效关系[1]。随机分配的研究组由雌性无胸腺裸鼠组成。使用数字卡尺，在第 0、1 和 3 天，使用剂量为 1.0、2.5 和 5.0 mg/kg RO4987655 来估计肿瘤大小。在此期间，载体治疗不会阻止 NCI-H2122 肿瘤异种移植物的生长。另一方面，RO4987655 治疗第 3 天，1.0 mg/kg 时的肿瘤生长抑制 (TGI) 为 119%，2.5 mg/kg 时为 145%，5.0 mg/kg 时为 150%。PET 成像表明[18F ] RO4987655 给药后 24 小时（第 1 天），异种移植物中的 FDG 摄取减少[2]。
1. 在荷NCI-H2122（K-ras突变型）人肺癌异种移植瘤的Balb nu/nu裸鼠中，给予RO4987655 1.0、2.5、5.0 mg/kg剂量处理，通过[(¹⁸)F] FDG-PET成像检测治疗后第0天（基线）至第9天的肿瘤葡萄糖代谢：给药后2小时即可观察到肿瘤[(¹⁸)F] FDG摄取量轻度下降；第1天[(¹⁸)F] FDG摄取量下降最为显著，第3天则出现[(¹⁸)F] FDG摄取量反弹，且与肿瘤体积的减小同步。肿瘤组织的反向相位蛋白阵列（RPPA）分析显示，RO4987655处理后第1天，pERK1/2、pMKK4和pmTOR的表达水平下调；第3天，pMEK1/2、pMEK2、pC-RAF和pAKT的表达水平显著上调，提示MAPK通路重新激活且补偿性PI3K通路被激活。肿瘤组织的半定量荧光免疫组化（fIHC）分析发现，GLUT1和己糖激酶1的表达水平与[(¹⁸)F] FDG摄取量的变化无统计学显著相关性 [2] |
| 酶活实验 |
RO4987655（也称为 CH-4987655）是一种新型、口服生物可利用的、特异性的 MEK 激酶小分子抑制剂，对 MEK1/MEK2 的 IC50 为 5.2 nM。丝裂原激活蛋白激酶激酶 1 (MAP2K1/MEK1) 可能具有抗肿瘤活性，是该药物的靶标。 MEK1/2抑制的体外IC50为5.2 nmol/L，可有效阻止丝裂原激活蛋白激酶信号通路的激活和肿瘤细胞的生长。
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| 细胞实验 |
将热灭活的胎牛血清和 L-谷氨酰胺在人肺腺癌细胞系 NCI-H2122 的指定培养基中维持在指定浓度。在 37 摄氏度和 5% 二氧化碳的条件下，细胞会发育。将细胞在 96 孔板中暴露于不同浓度（0.00001、0.001、0.1 和 10 μM）的 RO4987655 72 小时后，使用 Cell Counting Kit-8 对活细胞进行计数 [2]。
1. 外周血单个核细胞（PBMCs）药效学评价实验（参考文献[1]）：从接受单次口服剂量RO4987655（0.5、1、2、3、4 mg）的健康志愿者体内分离PBMCs，体外经PMA刺激后，检测磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）水平的变化，以评价RO4987655的药效学效应。结果显示，pERK的抑制作用具有暴露依赖性，高剂量下抑制率超过80%；采用非线性混合效应模型分析药代动力学-药效学关系，符合抑制性Eₘₐₓ模型（Eₘₐₓ≈100%；IC₅₀=40.6 ng/mL）[1] 2. NCI-H2122细胞增殖及信号通路实验（参考文献[2]）：将NCI-H2122细胞接种于培养板，培养至对数生长期。在浓度依赖性实验中，给予0、0.01、0.03、0.1、0.3、1 μM浓度的RO4987655处理2小时；在时间依赖性实验中，给予0.1 μM RO4987655处理0小时、6小时、第1天、第2天、第3天。处理后制备细胞裂解液，使用针对磷酸化和总蛋白的ERK1/2、MEK1/2、AKT、EGFR、MKK4、Cyclin D1抗体以及Actin内参抗体进行免疫印迹分析，检测相关蛋白的磷酸化水平。在抗增殖活性实验中，给予NCI-H2122细胞系列浓度的RO4987655处理，培养一定时间后采用合适方法（如CCK-8、MTT）检测细胞增殖能力，计算得出抗增殖抑制的IC₅₀为0.0065 μM [2] |
| 动物实验 |
小鼠：雌性无胸腺裸鼠，使用 5 至 6 周龄（18 至 22 克）的 balb nu/nu 小鼠。 Balb-nu/nu 小鼠接受皮下注射 NCI-H2122 细胞（4×10⁶/只）。待肿瘤建立后（100 至 200 mm³），将小鼠随机分组，各组小鼠的平均肿瘤体积相近。在第 0、1 和 3 天，分别给予小鼠 1.0、2.5 和 5.0 mg/kg 的 RO4987655 剂量，并使用 PET 扫描评估肿瘤大小。在第 0 天（基线）、第 1、2、3 和 9 天进行 [¹⁸F] FDG-PET 成像，以测量肿瘤体积和体重。计算肿瘤生长抑制率[2]。
NCI-H2122 肿瘤异种移植模型在 Balb nu/nu 小鼠中的应用（参考文献 [2]）：将 NCI-H2122 人肺癌细胞皮下接种到 Balb nu/nu 小鼠体内以建立肿瘤模型。异种移植模型。当肿瘤达到适当体积后，以1.0、2.5和5.0 mg/kg的剂量向小鼠注射RO4987655（具体给药途径和频率在文献中未明确描述）。在首次给药后第0天（基线）、2小时、第1天、第3天和第9天进行[(¹⁸)F]FDG-PET成像（microPET Focus 120），以检测肿瘤中[(¹⁸)F]FDG的摄取（以%ID/gr表示，即每克组织注射剂量）。在治疗期间动态测量肿瘤体积。实验结束后，处死小鼠，收集肿瘤组织进行半定量荧光免疫组化（fIHC）以检测GLUT1和己糖激酶1的表达水平，以及反相蛋白芯片（RPPA）以分析磷酸化水平。 MAPK/PI3K通路组分[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
目的：CH4987655 (RO4987655) 是一种口服活性高选择性的小分子 MEK 抑制剂。它能有效抑制丝裂原活化蛋白激酶信号通路激活和肿瘤细胞生长，体外抑制 MEK1/2 的 IC50 为 5.2 nmol/L。单药口服 CH4987655 可使异种移植瘤模型中的肿瘤完全消退。[1]
实验设计：所有 40 名受试者均接受单次口服给药，随后进行 72 小时的药代动力学、药效学和安全性/耐受性评估。药效学评估通过检测 PMA 刺激的外周血单核细胞（一种替代组织）中磷酸化细胞外信号调节激酶 (pERK) 水平的变化来进行。 [1] 结果：0.5、1、2、3 和 4 mg 的剂量均安全且耐受性良好。未观察到具有临床意义的安全事件。共报告了 26 例不良事件（n = 15）：21 例轻度，5 例中度，无重度。1 例受试者在 1 mg 剂量组出现中度不良事件（自主神经系统失衡），3 例受试者在 4 mg 剂量组出现中度不良事件（腹泻、腹痛、自主神经系统紊乱和痤疮）。CH4987655 吸收迅速，达峰时间约为 1 小时。0.5 至 4 mg 剂量范围内，药物暴露量与剂量成正比。药物分布呈双相性，末端半衰期约为 25 小时。受试者间变异性较低，Cmax 为 9% 至 23%，曲线下面积 (AUC) 为 14% 至 25%。 pERK抑制作用与药物暴露量相关，且在高剂量下抑制率超过80%。采用非线性混合效应模型，以抑制性E(max)模型（E(max)约为100%；IC(50)为40.6 ng/mL）表征了其药代动力学-药效学关系。[1] 结论：单次给药即可达到显著的pERK抑制效果，且在健康志愿者中安全性良好，耐受性良好。 在健康志愿者中，单次口服0.5、1、2、3、4 mg的RO4987655（CH4987655）：药物吸收迅速，达峰时间（tₘₐₓ）约为1小时；暴露量（Cₘₐₓ和AUC）在0.5至4 mg范围内呈剂量比例关系；该药物的分布呈双相性，末端半衰期（t₁/₂）约为25小时；个体间变异性较低，Cₘₐₓ为9%至23%，曲线下面积（AUC）为14%至25%[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在健康志愿者中，单次口服0.5、1、2、3、4 mg的RO4987655（CH4987655）后，所有剂量均安全且耐受性良好，未观察到具有临床意义的安全事件。15名受试者共报告了26例不良事件，其中21例为轻度不良事件，5例为中度不良事件，未发生重度不良事件。中度不良事件包括1例服用1 mg剂量的受试者出现自主神经系统失衡，以及3例服用4 mg剂量的受试者出现腹泻、腹痛、自主神经系统紊乱和痤疮[1]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
RO4987655 已用于肿瘤治疗研究的临床试验。
MEK 抑制剂 RO4987655 是一种口服活性小分子，靶向丝裂原活化蛋白激酶激酶 1 (MAP2K1 或 MEK1)，具有潜在的抗肿瘤活性。MEK 抑制剂 RO4987655 与 MEK 结合并抑制其活性，这可能导致 MEK 依赖性细胞信号传导的抑制和肿瘤细胞增殖的抑制。MEK 是一种双特异性苏氨酸/酪氨酸激酶，是 RAS/RAF/MEK/ERK 信号通路的关键组成部分，该通路调节细胞生长；该通路组成型激活与多种癌症相关。丝裂原活化蛋白激酶（MEK，也称为MAPK2、MAPKK）是Ras/MAPK（丝裂原活化蛋白激酶）通路的关键分子，其抑制剂在临床试验中对B-raf突变和某些RAS（大鼠肉瘤）激活的肿瘤显示出良好的疗效。本研究旨在利用[(18)F]FDG-PET成像和蛋白质组学技术，检测一种新型变构MEK抑制剂RO4987655在K-ras突变的人类肿瘤异种移植模型中的疗效。方法：使用microPET Focus 120（CTI Concorde Microsystems，Knoxville，TN，USA）研究RO4987655治疗0天至9天期间人肺癌异种移植瘤的[(18)F]FDG摄取情况。采用半定量荧光免疫组化（fIHC）检测GLUT1和己糖激酶1的表达水平。通过反相蛋白芯片（RPPA）评估RO4987655对MAPK/PI3K通路组分的体内影响。结果：我们观察到，RO4987655抑制MEK后，肿瘤对[(18)F]FDG的摄取量在治疗后2小时即出现轻微下降。[(18)F]FDG摄取量下降最显著的是第1天，随后在第3天出现反弹，与肿瘤体积的缩小同步。fIHC对肿瘤的分子分析未发现GLUT1和己糖激酶1的表达与[(18)F]FDG变化之间存在统计学意义上的相关性。 RPPA信号通路反应分析显示，RO4987655治疗后第1天pERK1/2、pMKK4和pmTOR表达下调，而第3天pMEK1/2、pMEK2、pC-RAF和pAKT表达显著上调。这些标志物的上调被解释为MAPK通路重新激活和代偿性PI3K通路激活的标志，这也可以解释在K-ras突变的人类肿瘤异种移植模型中，使用RO4987655抑制MEK后[(18)F]FDG摄取的反弹。结论：我们首次采用[(18)F]FDG-PET成像和分子蛋白质组学相结合的方法，对一种新型MEK抑制剂RO4987655进行了临床前评估。这些结果支持使用临床前 [(18)F] FDG-PET 成像对 MEK 以及其他 Ras/MAPK 信号通路抑制剂的作用进行早期、无创监测，这应有助于更广泛地实施临床 [(18)F] FDG-PET，以优化其临床应用。[2] 1. RO4987655 (CH4987655) 是一种口服活性高选择性的小分子变构 MEK 抑制剂；单药口服RO4987655可使异种移植模型中的肿瘤完全消退[1] 2. 在K-ras突变的人类肿瘤异种移植模型中，RO4987655治疗后[(¹⁸)F]FDG摄取的反弹被解释为MAPK通路重新激活和代偿性PI3K通路激活所致[2] 3. [(¹⁸)F]FDG-PET成像与分子蛋白质组学相结合可用于RO4987655疗效的临床前评估，该方法支持将[(¹⁸)F]FDG-PET应用于临床，以无创监测MEK抑制剂的作用并优化其临床应用[2] |
| 分子式 |
C20H19F3IN3O5
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|---|---|---|
| 分子量 |
565.28
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| 精确质量 |
565.032
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| 元素分析 |
C, 42.49; H, 3.39; F, 10.08; I, 22.45; N, 7.43; O, 14.15
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| CAS号 |
874101-00-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11548630
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.638
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| LogP |
5.49
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| tPSA |
103.62
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
652
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1C(NC2C(F)=CC(I)=CC=2)=C(F)C(F)=C(CN2C(=O)CCCO2)C=1)NOCCO
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| InChi Key |
FIMYFEGKMOCQKT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H19F3IN3O5/c21-14-9-12(24)3-4-15(14)25-19-13(20(30)26-31-7-5-28)8-11(17(22)18(19)23)10-27-16(29)2-1-6-32-27/h3-4,8-9,25,28H,1-2,5-7,10H2,(H,26,30)
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| 化学名 |
3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodoanilino)-N-(2-hydroxyethoxy)-5-[(3-oxooxazinan-2-yl)methyl]benzamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.42 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 10% DMSO+ 40% PEG300+ 5% Tween-80+ 45% saline: ≥ 2.5 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7690 mL | 8.8452 mL | 17.6903 mL | |
| 5 mM | 0.3538 mL | 1.7690 mL | 3.5381 mL | |
| 10 mM | 0.1769 mL | 0.8845 mL | 1.7690 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT00817518 | Completed | Drug: RO4987655 | Neoplasms | Hoffmann-La Roche | January 2009 | Phase 1 |
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MEK1 P124L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 F53L Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK5 Recombinant Human Active Protein Kinase
MEK1 SESE Recombinant Human Active Protein Kinase
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