| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
G6PD; Nrf2-ARE
Nrf2 (nuclear factor erythroid 2‑related factor 2) – RRx-001 activates Nrf2, leading to its nuclear translocation and subsequent ARE‑driven gene expression. No IC50/Ki values are reported. [2] Not applicable (no direct enzyme target reported). |
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| 体外研究 (In Vitro) |
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G6PD) 是磷酸戊糖途径中的关键酶，负责确保体内维持主要细胞还原剂 NADPH 的充足水平。RRx-001 的抗增殖作用至少部分是通过此机制实现的。在三种不同的癌细胞系 Hep G2、CACO-2 和 HT-29 中，RRx-001 均能改变葡萄糖和 G6PD 酶的活性。RRx-001 的浓度依赖性效应导致 G6PD 抑制和葡萄糖消耗增加。RRx-001 通过产生活性氧/活性氮 (ROS/RNS) 来激活 p53 和 PARP-1。它发挥抗癌活性至少部分是通过干扰快速增殖细胞的三个关键代谢需求来实现的：生物能量学、大分子生物合成以及活细胞胞质氧化还原稳态的调控[1]。 RRx-001可激活肿瘤细胞中的HO-1和NQO1（Nrf2的两种下游酶），并使其转位至细胞核。除表观遗传改变外，RRx-001还通过多种机制发挥作用，包括氧化还原信号传导以及氧化还原诱导的多种信号通路失调，例如Nrf2、p53、PARP裂解、HIF1α和G6PD活性。RRx-001不仅能扰乱癌细胞的能量代谢，还能响应双链DNA断裂激活p53和p21。药物 RRx-001 通过产生 ROS 和 RNS，有效激活 Nrf2-ARE 信号通路[3]。
在 SCC VII 细胞中激活 Nrf2：用 RRx-001（2 或 5 μM，处理 24 小时）处理后，细胞核内 Nrf2 蛋白水平较基线水平增加 6 倍，而细胞质内 Nrf2 水平保持不变。Western blot 分析显示，HO-1（8 小时时增加约 2 倍，24 小时时恢复至基线水平）和 NQO1（8 小时时增加 2 至 4 倍，24 小时时增加 >6 倍）的表达均呈剂量和时间依赖性增加。 [2]在稳定共表达ARE-萤火虫荧光素酶（ARE-FLUC）和CMV-海肾荧光素酶-mRFP的SCC VII细胞中，RRx-001可剂量和时间依赖性地激活ARE-FLUC，在2.3 μM RRx-001处理6小时后达到最大激活。更高剂量（4.7-18.7 μM）由于细胞死亡而降低信号。已知的Nrf2激活剂TBHQ（20 μM）作为阳性对照，2.3 μM RRx-001可达到TBHQ信号的约80%。[2]使用Nrf2特异性siRNA敲低内源性Nrf2可提高SCC VII细胞对RRx-001的敏感性； IC50 值：亲代细胞 1.09 μM，对照 siRNA 1.04 μM，Nrf2 siRNA 克隆 C2 和 C3 分别为 0.74 μM 和 0.75 μM，通过 WST-8 细胞增殖试验测定。[2] 在小鼠 SCC VII 肿瘤中，单次静脉注射 10 mg/kg 的 RRx-001 后，与对照组相比，24 小时和 48 小时细胞质 Nrf2 分别增加 2.0 倍和 2.4 倍，核 Nrf2 分别增加约 1.6 倍和 2.3 倍。注射后8小时和24小时，肿瘤中HO-1和NQO1的水平分别升高了13%和20%，NQO1的水平分别升高了12%和27%（与对照组相比，p < 0.05，每个时间点n=6）。[2] 在SCC VII和U87肿瘤中，单次静脉注射15 mg/kg的RRx-001可引起血流重新分布。在SCC VII肿瘤中，灌注血管（DiOC7(3)阳性）的百分比从21%（对照组）增加到给药后12小时的28%（p < 0.05），但未观察到组织氧合或缺氧（匹莫尼达唑结合）的显著变化。HIF1-α阳性组织在90分钟和12小时时减少（12小时时p < 0.05）。在U87肿瘤中，90分钟时中心血管灌注显著下降，出现大片无灌注区域（与对照组相比p < 0.05），但这些区域并未坏死，并在12小时后恢复；灌注血管的百分比从<20%（对照组）增加到12小时时的约28%（无统计学意义）。90分钟和12小时时均未观察到肿瘤缺氧的显著变化。这些数据表明存在血管正常化效应。[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
RRx-001 在具有富含周细胞和 α-SMA 血管的肿瘤中显示出短期血流重新分布的潜力[2]。RRx-001 单药治疗耐受性良好，且无限制其剂量的毒性。它不仅能促进 Nrf2 进入细胞核，还能增加小鼠 SCC VII 肿瘤中内源性 Nrf2 的表达[3]。
未在提供的文献中描述。 |
| 酶活实验 |
细胞活力检测 (WST-8)：将 SCC VII 细胞接种，用不同浓度的 RRx-001 处理特定时间，然后根据制造商的方案使用 WST-8 试剂检测细胞活力。IC50 值由剂量反应曲线计算得出。[2] Nrf2、HO-1、NQO1 的蛋白质印迹分析：将细胞或肿瘤组织在 RIPA 缓冲液或 NE-PER 核/胞质提取缓冲液中裂解。定量蛋白质浓度后，取等量 (20 μg) 样品进行 10% SDS-PAGE 电泳分离，然后转移至 PVDF 膜，用 5% 脱脂奶粉封闭，依次用一抗（抗 Nrf2、抗 HO-1、抗 NQO1、抗 β-肌动蛋白、抗核纤层蛋白 B）和 HRP 标记的二抗进行孵育，最后用 ECL 化学发光法检测。使用 ImageJ 软件对条带进行定量分析。 [2]
双荧光素酶报告基因检测：将稳定表达ARE-FLUC和CMV-RLUC-mRFP的细胞用被动裂解缓冲液裂解，离心去除细胞碎片，取20 μL上清液分别与LARII溶液混合用于FLUC检测，或与腔肠素（1 μg溶于100 μL PBS）混合用于RLUC检测，使用发光仪进行检测。以总蛋白量进行标准化。[2] 肿瘤切片免疫组织化学：将冰冻切片固定于丙酮-甲醇（1:1）混合液中，分别用抗CD31抗体（用于血管染色）、抗匹莫尼达唑抗体（用于缺氧染色）、抗BrdUrd抗体（用于增殖染色）或抗HIF1-α抗体进行染色，随后使用相应的荧光二抗。细胞DNA用Hoechst 33342进行复染。使用带有拼接功能的机器人荧光显微镜采集整个肿瘤切片的图像。分析包括手动去除坏死/伪影、对阳性区域进行固定阈值处理，以及计算平均强度和与血管的距离。[3] |
| 细胞实验 |
使用 MTT 增殖检测试剂盒评估细胞生长和增殖。简而言之，将 5×10³ 个细胞接种于 96 孔板中，每个孔中接种 5×10³ 个细胞，分别进行处理或不处理。细胞培养时间最长可达 72 小时。每个孔加入 10 μL MTT 试剂，静置 3 小时。孵育结束后，吸出培养基，每个孔加入 100 μL 结晶溶解液，并在 570 nm 波长处测定溶液的吸光度。所有样品均在相同条件下进行三次 MTT 检测。简而言之，步骤如下：加入 MTT 溶液 (0.5 mg/mL)，将细胞在 37 摄氏度下孵育 4 小时，然后用酶标仪在 540 nm 处测量吸光度。
SCC VII 小鼠鳞状细胞癌细胞在含 10% 胎牛血清、青霉素/链霉素的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO2 条件下培养。为了敲低 Nrf2，使用转染试剂将 120 pmol 的 Nrf2 特异性 siRNA 或对照 siRNA 瞬时转染至细胞中，转染 24 小时，然后更换为正常培养基再培养 24 小时，之后进行检测。[2] 稳定细胞系构建：使用脂质体转染试剂将 pcPUR-ARE-FLUC 和 pcDNA-CMV-RLUC-mRFP 质粒共转染至 SCC VII 细胞中。用嘌呤霉素和G418进行双重筛选，然后通过FACS分选RFP，得到一个单克隆，经双荧光素酶报告基因检测验证。[2] 体外Nrf2激活实验：将SCC VII细胞用0、2或5 μM的RRx-001处理8或24小时，然后裂解细胞进行Western blot分析。[2] ARE-FLUC报告基因检测：将稳定细胞用不同剂量的RRx-001（0至18.7 μM）或20 μM的TBHQ处理，加入D-荧光素后，在不同时间点（例如6小时）用发光仪测量FLUC信号。[2] |
| 动物实验 |
mg/kg 或 10 mg/kg；静脉注射 CB-17 SCID 小鼠
用于体内 Nrf2 激活研究（文献 [2]）：将 5×10^5 个 SCC VII 细胞（亲代细胞或表达 ARE-FLUC/RLUC-mRFP 的细胞）皮下接种到雌性裸鼠（7-8 周龄，20-25 g）两侧。当肿瘤体积达到约 150 mm³（第 10 天）时，小鼠接受单次静脉注射 RRx-001，剂量为 10 mg/kg（配制方法为：将 10 mg RRx-001 溶于 0.5 mL DMA-PEG400 1:2 混合液中，然后用双蒸水稀释至 2 mg/mL）。为了评估肿瘤反应，将小鼠随机分为载体对照组和 RRx-001 组（每组 8 个肿瘤）。每周三次使用游标卡尺测量肿瘤体积；计算肿瘤体积四倍增长时间 (TVQT) 和肿瘤生长延迟 (TGD)。进行蛋白质印迹分析时，分别在给药后 8、24 或 48 小时处死小鼠，用 PBS 灌注，并收集肿瘤。[2] 血管正常化研究（文献 [3]）：将 0.5×10^6 个 SCCVII 细胞或 5×10^6 个 U87 细胞皮下植入雌性 C3H/Hen 小鼠（用于 SCCVII）和雌性 NOD.CB17-Prkdcscid 小鼠（用于 U87）的骶骨区域。当肿瘤体积达到约 150 mm³ 时，小鼠接受单次静脉注射 15 mg/kg 的 RRx-001。给药后 90 分钟和 12 小时，小鼠腹腔注射 BrdUrd（1000 mg/kg）和匹莫尼达唑（60 mg/kg），并在安乐死前 1 小时注射；安乐死前 5 分钟，注射 DiOC7(3)（0.6 mg/mL，溶于 25% DMSO，50 μL）。切除肿瘤，冷冻，切片进行免疫组织化学分析。[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
所提供的文献中未提及。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
所提供的文献中未描述（无LD50、器官毒性或蛋白结合数据）。然而，在I期临床试验（参考文献[2]）中，RRx-001单药治疗耐受性良好，未出现剂量限制性毒性。[2]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
RRx-001 已在临床试验中用于治疗多种肿瘤，包括淋巴瘤、脑转移瘤、胆管癌、结直肠癌和恶性实体瘤。尼布洛芬是一种二硝基氮杂环丁烷衍生物，具有潜在的放射增敏活性。给药后，尼布洛芬可扩张血管，从而增加肿瘤血流并改善肿瘤部位的氧合作用。通过提高氧合作用水平，这些肿瘤细胞可能对放射治疗更加敏感。肿瘤乏氧与肿瘤的侵袭性、转移和放射治疗耐药性密切相关。RRx-001 是一种环状硝基化合物（1-溴乙酰基-3,3-二硝基氮杂环丁烷），分子式为 C5H6BrN3O5，分子量为 268.02。它是一种氧化还原活性剂，可产生活性氧和活性氮，从而导致表观遗传改变，包括 DNA 甲基化和组蛋白乙酰化。它与血红蛋白结合，影响红细胞流变学，使其选择性归巢至缺氧肿瘤内皮细胞，并重新分配血流（血管正常化）。这种正常化作用可改善化疗药物和氧气的输送，从而增强放射增敏作用。RRx-001 已在包括晚期结直肠癌在内的多种癌症的 I 期和 II 期临床试验中进行了评估。它也被称为 ABDNAZ。其合成和表征已在其他文献中报道。[2][3]
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| 分子式 |
C5H6BRN3O5
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|---|---|---|
| 分子量 |
268.02
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| 精确质量 |
266.949
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| 元素分析 |
C, 22.41; H, 2.26; Br, 29.81; N, 15.68; O, 29.85
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| CAS号 |
925206-65-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
15950826
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| LogP |
0.457
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| tPSA |
111.95
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
14
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| 分子复杂度/Complexity |
273
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
BrC([H])([H])C(N1C([H])([H])C(C1([H])[H])([N+](=O)[O-])[N+](=O)[O-])=O
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| InChi Key |
JODKFOVZURLVTG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C5H6BrN3O5/c6-1-4(10)7-2-5(3-7,8(11)12)9(13)14/h1-3H2
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| 化学名 |
2-bromo-1-(3,3-dinitroazetidin-1-yl)ethanone
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (9.33 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7311 mL | 18.6553 mL | 37.3106 mL | |
| 5 mM | 0.7462 mL | 3.7311 mL | 7.4621 mL | |
| 10 mM | 0.3731 mL | 1.8655 mL | 3.7311 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT05566041 | Active Recruiting |
Drug: RRx-001 + eLOOP Device |
Carcinoma, Small Cell Lung | EpicentRx, Inc. | August 1, 2022 | Phase 3 |
| NCT02518958 | Completed | Drug: RRx-001 Drug: Nivolumab |
Lymphoma Malignant Solid Tumor |
EpicentRx, Inc. | July 21, 2015 | Phase 1 |
| NCT02096354 | Completed | Drug: RRx-001 Drug: Regorafenib Drug: Irinotecan |
Colorectal Neoplasms | EpicentRx, Inc. | May 2014 | Phase 2 |
| NCT03515538 | Completed | Drug: Cisplatin for injection | Oral Mucositis | EpicentRx, Inc. | July 12, 2018 | Phase 2 |
| NCT01359982 | Completed | Drug: RRx-001 | Lymphomas Malignant Solid Tumor |
EpicentRx, Inc. | September 2011 | Phase 1 |
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