| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GPX4/glutathione peroxidase 4
RSL3 targets glutathione peroxidase 4 (GPX4), a selenoprotein that plays a critical role in cellular redox homeostasis by reducing lipid hydroperoxides to their corresponding alcohols, thereby preventing iron-dependent lipid peroxidation and ferroptosis. RSL3 binds covalently to the active site of GPX4, inhibiting its enzymatic activity and rendering cells unable to detoxify lipid peroxides. This leads to the accumulation of lipid ROS and triggers ferroptotic cell death. RSL3 also inhibits system xc- (IC50 = 100 nM), which blocks GSH synthesis, although its primary mechanism is direct GPX4 inhibition. The compound exhibits selectivity for tumor cells bearing oncogenic RAS mutations. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
RSL3（0-8 μM，72 小时）在 HN3-rslR 细胞中的 IC50 为 5.8 μM，在 HN3 细胞中的 IC50 为 0.48 μM，可显著降低 HN3 细胞的活力 [1]。在HN3-rslR细胞中，RSL3（0-8 μM，24小时）可使Keap1失活，提高p62和Nrf2的表达，并降低GPX4蛋白的表达[1]。
RSL3或ML-162可诱导HNC细胞发生不同程度的铁死亡[1]。 在RSL3处理的HNC细胞中，p62和Nrf2的表达与铁死亡抵抗相关[1]。 体外实验表明，抑制Nrf2可使化疗耐药的HNC细胞对RSL3治疗敏感[1]。 体外实验表明，RSL3在多种癌细胞系中均表现出强大的铁死亡诱导活性。在人结直肠癌细胞系（HCT116、HT29、LoVo）中，RSL3 处理以时间和剂量依赖的方式显著降低细胞活力，同时伴有细胞内活性氧（ROS）和脂质过氧化水平升高以及 GPX4 蛋白功能受损。RSL3 通过降低 GPX4 表达诱导头颈癌细胞发生铁死亡。该化合物在纳摩尔浓度下具有活性，对系统 xc- 抑制的 IC50 为 100 nM。RSL3 诱导的细胞死亡可被铁死亡抑制剂 ferrostatin-1 或铁螯合剂阻断，证实了该细胞死亡途径的铁依赖性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
将葫芦巴碱与RSL3（100 mg/kg，瘤内注射，每周两次，持续20天）联合使用可显著抑制HN3R因子细胞的肿瘤生长[1]。在小鼠异种移植模型中，所有小鼠在细胞植入期间及之后，无论接受载体、RSL3、葫芦巴碱还是RSL3联合葫芦巴碱治疗，均存活良好。治疗20天后处死小鼠。与载体对照组相比，单独使用RSL3或葫芦巴碱均未显著抑制体内肿瘤生长（P > 0.1）（图6A和B）。然而，RSL3联合葫芦巴碱可显著抑制肿瘤生长（P < 0.01）。对照组和治疗组的体重和每日食物摄入量均无显著变化（P < 0.05）（图6C）。体内肿瘤中测得的亚铁离子、脂质活性氧（ROS）和RPA水平在RSL3联合葫芦巴碱组中显著高于对照组或其他治疗组（P < 0.01）。重要器官的组织学检查未发现各组之间存在显著差异[1]。
在临床前模型中，RSL3已显示出抗肿瘤疗效。研究发现，西妥昔单抗可通过激活p38 MAPK和抑制Nrf2/HO-1轴增强RSL3诱导的铁死亡，从而进一步抑制肿瘤生长。该化合物选择性杀伤RAS突变癌细胞的能力使其成为研究癌症治疗中铁死亡的宝贵工具。然而，现有文献中关于动物模型体内疗效的详细数据有限。RSL3主要用作体外研究的工具，其体内药代动力学和药效学特性仍需进一步研究。 |
| 酶活实验 |
活性氧（ROS）生成测定[1]
将处理24小时的HNC细胞裂解液上清液加入10 µM 2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯（用于胞质ROS测定）或2 µM C11-BODIPY C11（用于脂质过氧化测定），于37 °C孵育30分钟，测定细胞内ROS的生成。使用配备CellQuest Pro的FACSCalibur流式细胞仪分析ROS水平。 活性铁池（LIP）和铁测定[1] 将每个样品接种于培养板中，并用指定药物处理。4小时后，移除上清液，并用Hank's平衡盐溶液（HBSS）洗涤培养板两次。加入8 μg/mL Calcein AM（溶于HBSS）标记细胞，并在37 °C孵育30分钟。 30分钟后，去除标记溶液，用PBS洗涤细胞两次，然后用胰蛋白酶-EDTA消化细胞。之后加入4% FBS的HBSS溶液中和细胞，并在1500 rpm下离心3分钟。收集细胞，涡旋振荡后用HBSS洗涤一次，并在1500 rpm下离心3分钟。然后将细胞重悬于250 μL HBSS中并涡旋振荡，送至流式细胞仪（FACS）进行分析。使用配备CellQuest Pro的FACSCalibur流式细胞仪分析活性铁水平，并使用铁测定试剂盒测定细胞或组织提取物中的亚铁离子水平。 Nrf2 转录活性测定[1] 根据制造商的说明，使用 Cignal 抗氧化反应报告试剂盒测定 Nrf2 的转录活性。 RSL3 的体外酶/受体结合测定通常涉及测量其对 GPX4 的抑制活性。GPX4 酶活性可在无细胞系统中进行评估，其中将纯化的 GPX4 与脂质氢过氧化物底物（例如，磷脂酰胆碱氢过氧化物）和谷胱甘肽 (GSH) 在不同浓度的 RSL3 存在下孵育。测量 GPX4 介导的脂质氢过氧化物还原的抑制情况，并根据剂量反应曲线确定 GPX4 抑制的 IC50 值。亲和纯化和质谱研究已证实 RSL3 与 GPX4 的活性位点共价结合。 |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： HN3 细胞，HN3-rslR 细胞 测试浓度： 0-8 μM 孵育时间： 72 小时 实验结果： HN3 和 HN3-rslR 细胞的 IC50 值分别为 0.48 µM 和 5.8 µM[1] 。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： HN3-rslR 细胞 测试浓度： 0-8 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 抑制 GPX4 表达，增加 p62 和 Nrf2 水平，降低 Keap1 水平。 使用多种癌细胞系（包括 HT-1080 纤维肉瘤细胞、结直肠癌细胞和头颈癌细胞）进行 RSL3 的体外细胞实验。用不同浓度的 RSL3 处理细胞，并通过 MTT 或刃天青还原法检测细胞活力来评估铁死亡。脂质过氧化作用采用荧光探针（如C11-BODIPY581/591）进行测定，细胞内活性氧（ROS）水平采用DCFH-DA进行检测。GPX4蛋白的表达和活性通过Western blotting进行评估。铁死亡的特异性通过与铁抑制剂-1或铁螯合剂共同处理来验证。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 携带 HN3R 细胞的 10 周龄无胸腺 BALB/c 雄性裸鼠 (nu/nu) [1]
剂量： 100 mg/kg 联合葫芦巴碱 (50 mg/kg)：瘤内注射， 实验结果： 每周两次、连续 20 天用葫芦巴碱治疗的小鼠肿瘤体积显著缩小。 肿瘤异种移植[1] 使用 10 周龄无胸腺 BALB/c 雄性裸鼠 (nu/nu)，并将 HN3R 细胞皮下注射到每只小鼠的侧腹部。一旦检测到肿瘤植入物形成肉眼可见的结节，小鼠将接受以下四种治疗之一：载体；RSL3（100 mg/kg，每周两次瘤内注射）；葫芦巴碱（50 mg/kg，每日口服）；或RSL3联合葫芦巴碱。每组包含10只小鼠。每周测量两次肿瘤大小和体重，肿瘤体积计算公式为（长×宽²）/2。划痕后，分离肿瘤并测量细胞内脂质活性氧（ROS）和亚铁离子水平。 RSL3的体内动物实验已在异种移植小鼠癌症模型中进行。将人肿瘤细胞（例如，结直肠癌或头颈癌细胞）植入免疫缺陷小鼠体内，并通过腹腔或静脉注射RSL3进行治疗。监测肿瘤生长抑制情况，终点指标包括肿瘤体积、肿瘤重量和生存期。通过免疫组织化学或生化分析评估肿瘤组织中的药效学标志物，例如脂质过氧化和GPX4表达。然而，现有文献中并未详细记录具体的实验方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
RSL3的分子量为440.88 g/mol，分子式为C23H21ClN2O5。它在DMSO中的溶解度为40 mg/mL，不溶于水或乙醇。该化合物应以粉末形式在-20°C下保存，最长可达3年。目前尚未有大量关于其药代动力学参数（如半衰期、Cmax和生物利用度）的报道。作为一种研究化合物，RSL3主要用于体外研究，其体内药代动力学尚需进一步研究。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
公开文献中尚未对RSL3的毒理学特征进行全面描述。作为一种GPX4抑制剂和铁死亡诱导剂，RSL3可能对正常细胞具有潜在毒性，尤其是那些代谢活性高且含铁量高的细胞。该化合物被归类为危险物质，应采取适当的安全预防措施进行处理。在体外研究中使用的浓度下，现有研究文献中尚未报道明显的毒性。若要将其用于治疗用途，则需要进行全面的毒理学研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4) 是铁死亡（一种铁依赖性的非凋亡性细胞死亡过程）的调节因子；抑制GPX4可使耐药癌细胞对铁死亡敏感。然而，一些癌细胞会发展出对抗铁死亡的保护机制；了解这些机制有助于克服化疗耐药性。本研究探讨了GPX4抑制诱导头颈癌(HNC)细胞产生铁死亡耐药性的分子机制。我们测试了两种GPX4抑制剂(1S, 3R)-RSL3和ML-162以及葫芦巴碱在HNC细胞系中的作用，这些细胞系包括顺铂耐药细胞系(HN3R)和获得性RSL3耐药细胞系(HN3-rslR)。本研究通过细胞活力、细胞死亡、脂质活性氧（ROS）生成和蛋白质表达，以及在小鼠肿瘤异种移植模型中，评估了抑制剂和葫芦巴碱的作用，以及p62、Keap1或Nrf2基因抑制的作用。RSL3或ML-162处理可诱导头颈癌（HNC）细胞发生不同程度的铁死亡。RSL3或ML-162处理可增加化疗耐药的HN3R和HN3-rslR细胞中p62和Nrf2的表达，使Keap1失活，并增加磷酸化PERK-ATF4-SESN2通路的表达。Nrf2的转录激活与铁死亡抵抗相关。通过抑制Keap1或Nrf2基因过表达Nrf2，可诱导化疗耐药的HN3细胞对RSL3产生耐药性。然而，Nrf2抑制或p62沉默可使HN3R细胞对RSL3敏感。在移植了HN3R细胞的小鼠模型中，葫芦巴碱可使化疗头颈癌细胞对RSL3治疗敏感。因此，Nrf2-ARE通路激活会导致头颈癌细胞对GPX4抑制剂产生耐药性，而抑制该通路则可逆转头颈癌细胞对铁死亡的耐药性。[1]
RSL3是一种研究化合物，广泛用作研究铁死亡的药理学工具。铁死亡是一种非凋亡性细胞死亡，其特征是铁依赖性脂质过氧化。它也被称为(1S,3R)-RSL3和RAS选择性致死化合物3。RSL3并非获批药物，仅供研究使用。 RSL3在阐明GPX4在铁死亡中的作用方面发挥了重要作用，并对癌症研究、神经退行性疾病以及其他氧化应激是关键因素的疾病具有重要意义。RSL3由多家科研化学品供应商提供，用于生化和细胞分析。 |
| 分子式 |
C23H21CLN2O5
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|---|---|
| 分子量 |
440.8762
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| 精确质量 |
440.113
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| 元素分析 |
C, 62.66; H, 4.80; Cl, 8.04; N, 6.35; O, 18.14
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| CAS号 |
1219810-16-8
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| PubChem CID |
1750826
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
641.3±55.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
341.6±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.636
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| LogP |
3.07
|
| tPSA |
88.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
696
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
COC(=O)[C@H]1CC2=C([C@@H](N1C(=O)CCl)C3=CC=C(C=C3)C(=O)OC)NC4=CC=CC=C24
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| InChi Key |
TXJZRSRTYPUYRW-NQIIRXRSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H21ClN2O5/c1-30-22(28)14-9-7-13(8-10-14)21-20-16(15-5-3-4-6-17(15)25-20)11-18(23(29)31-2)26(21)19(27)12-24/h3-10,18,21,25H,11-12H2,1-2H3/t18-,21+/m1/s1
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| 化学名 |
methyl (1S,3R)-2-(2-chloroacetyl)-1-(4-methoxycarbonylphenyl)-1,3,4,9-tetrahydropyrido[3,4-b]indole-3-carboxylate
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| 别名 |
(1S,3R)-RSL3; 1S,3R-RSL3; RSL3 (1S,3R-); CHEMBL4747331; (1S,3R)-Methyl 2-(2-chloroacetyl)-1-(4-(methoxycarbonyl)phenyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indole-3-carboxylate; RSL3 1S,3R-;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~226.82 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 5 mg/mL (11.34 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 50.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.67 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.72 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.56 mg/mL (1.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMF 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: 20 mg/mL (45.36 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2682 mL | 11.3410 mL | 22.6819 mL | |
| 5 mM | 0.4536 mL | 2.2682 mL | 4.5364 mL | |
| 10 mM | 0.2268 mL | 1.1341 mL | 2.2682 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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