Savolitinib (AZD6094, HMPL-504)   中文名称: 赛沃替尼

c-Met (IC50 = 5 nM); p-Met (IC50 = 3 nM)
The target of Savolitinib (AZD6094, HMPL-504) is mesenchymal-epithelial transition factor (c-Met), and it acts as a highly potent and selective inhibitor of c-Met. [1]
Savolitinib (AZD6094, HMPL-504) is a selective c-Met inhibitor, and in gastric cancer cell lines with dysregulated c-Met, its EC50 values for inhibiting cell growth range from 0.6 nM/L to 12.5 nM/L [2]

体外活性：沃利替尼具有精细的激酶选择性和优异的效力。它在整个胃细胞系组中显示出高选择性，仅在 cMET 失调的细胞系中有效抑制细胞生长（EC50 值 0.6 nM/L-12.5 nM/L）。沃利替尼具有高膜渗透性，无需跨 Caco-2 细胞单层的外排转运，并且表现出可忽略不计的 P-gp 抑制 (IC50 > 17 μM)。沃利替尼在人肝微粒体中没有表现出显着的可逆或基于机制的 CYP 抑制，并且在人肝细胞中没有诱导 CYP1A2 和 CYP3A4。激酶测定：沃利替尼对于 c-Met 和 p-Met 的 IC50 值分别为 5 nM 和 3 nM。与 274 种其他激酶相比，它对 c-Met 表现出高选择性。细胞测定：孵育过夜后，用系列稀释的测试化合物在37℃下处理NCI-H441细胞1小时。然后除去培养基，并在 100 μL/孔裂解缓冲液（1% NP-40、20 mM Tris/pH 8.0、137 mM NaCl、10% 甘油、2 mM EDTA、1 mM 活化原钒酸钠、10 mg/mL 抑肽酶、10 mg/mL 亮肽素）。将含有细胞裂解物的板在-80℃下保存过夜。第二天，将板在冰上解冻，轻轻混合。将 25 μL/孔的裂解物添加到预先包被有抗 p-Met 抗体的检测板中，以检测 pc-Met 信号。 pc-Met 水平在 450 nm 和 570 nm 处测定。

---

1. 胃癌细胞系抗增殖活性：筛选22种胃癌细胞系以评估Savolitinib的抗增殖作用。结果显示，Savolitinib仅对c-Met失调的细胞系表现出强效的生长抑制作用，EC50值介于0.6 nM/L至12.5 nM/L；而对c-Met表达正常的胃癌细胞系无显著抑制效果[2]
2. c-Met信号通路药效学分析：将Hs746t胃癌细胞用0.1 μM Savolitinib处理1小时后制备细胞裂解液，进行蛋白质印迹（Western blot）分析。结果表明，Savolitinib可有效抑制c-Met（成熟型分子量145 kDa）的磷酸化，从而阻断c-Met信号通路的激活 [2]
3. 构效关系研究：合成一系列新型三唑并吡嗪类c-Met抑制剂并探究其构效关系，Savolitinib（研究中的化合物28）被鉴定为强效、选择性c-Met抑制剂，但参考文献[1]中未详细提供该化合物的具体体外酶活性或细胞活性数据[1]
4. 膜通透性与外排转运：Savolitinib在Caco-2细胞单层模型中表现出高膜通透性，A→B方向的表观渗透系数（Papp）为28×10⁻⁶ cm/s，且无外排转运现象；此外，Savolitinib对P-糖蛋白（P-gp）的抑制作用极弱，IC50值大于17 μM[3]
5. 体外代谢稳定性：评估Savolitinib在大鼠、犬、猴和人肝微粒体及S9组分中的代谢稳定性。在不同物种的肝微粒体和S9组分中检测到5种I相代谢产物，其中3种主要代谢产物（M1：去甲基化、M2：羟化、M3：单加氧）由CYP450酶和醛氧化酶等多种酶介导；大鼠的体外代谢特征和代谢产物谱与人类最相似[3]
6. CYP酶抑制/诱导作用：Savolitinib在人肝微粒体中未表现出显著的可逆性或机制性CYP酶抑制作用，且在人肝细胞中不诱导CYP1A2和CYP3A4的表达[3]

沃利替尼在 U87MG 皮下异种移植模型中表现出剂量依赖性肿瘤生长抑制作用。在 3/3 cMET 失调的胃癌患者来源的肿瘤异种移植模型中，其治疗导致 c-MET 信号传导的药效学调节和有效的肿瘤停滞，但在胃癌控制模式中的活性可忽略不计。沃利替尼具有中等的血浆蛋白结合率（大鼠、狗和人为 60%∼70%；小鼠为 40%；猴为 80%），并且在大鼠的不同器官中分布广泛，其中肝脏和肾脏中的暴露量较高，与血浆水平相比，大脑、脊髓和睾丸中的水平较低。

---

1. 人胶质瘤异种移植模型抗肿瘤活性：Savolitinib在小鼠体内具有良好的药代动力学特性，且在裸鼠人胶质瘤异种移植模型中表现出良好的抗肿瘤活性[1]
2. Hs746t胃癌异种移植模型抗肿瘤活性：给荷有皮下Hs746t移植瘤的裸鼠（nu/nu）每日一次（qd）灌胃给予不同剂量的Savolitinib。结果显示，Savolitinib显著抑制肿瘤生长（P ≤ 0.001），但未详细说明具体肿瘤体积数据和剂量-效应关系；药效学分析表明，Savolitinib可抑制肿瘤组织中磷酸化c-Met水平，抑制率计算公式为：IR (%) = (1−给药组OD450/溶媒组OD450) × 100%，无具体数值报道[2]
3. 胃癌PDX模型抗肿瘤活性：给荷有人源胃癌组织移植瘤的裸鼠每日一次灌胃给予Savolitinib。在3种c-Met失调的胃癌PDX模型（SGC071、SGC184、SGC141）中，Savolitinib均能强效抑制肿瘤生长（P ≤ 0.001）；而在c-Met低多体性的PDX模型（SGC070）中无显著活性（P ≥ 0.05）；药效学分析证实，Savolitinib可调节肿瘤组织中磷酸化c-Met的表达（通过给药前后IHC染色评估）[2]
4. 与多西他赛联合治疗：在Hs746t异种移植模型和SGC184 PDX模型中，Savolitinib与多西他赛联合给药的抗肿瘤效果优于单药治疗（Hs746t模型P ≤ 0.001，SGC184模型P ≤ 0.05），未详细提供具体肿瘤生长曲线或消退率[2]
5. 大鼠体内分布：Savolitinib在大鼠体内广泛分布于各组织，肝、肾中暴露量较高，脑、脊髓和睾丸中的浓度远低于血浆水平[3]
6. 大鼠体内排泄：代谢是Savolitinib在大鼠体内的主要消除途径，原形药物经粪便、尿液和胆汁排泄的量不足给药剂量的2%；在大鼠血浆和排泄物中鉴定出16种I相代谢产物和8种II相代谢产物，其中M22（单加氧代谢产物M5的硫酸结合物）在所有检测基质中占主导地位；去甲基化生成M2并经尿液排泄也是重要消除途径[3]
7. 动物药代动力学参数：
- 小鼠：口服吸收迅速（Tmax < 2.5 h），口服生物利用度27.2%，体内清除率（CL）11.0 mL/min/kg（低提取率），稳态分布容积（Vss）0.4 L/kg（中低分布）[3]
- 大鼠：口服吸收迅速（Tmax < 2.5 h），口服生物利用度42.6%，CL 11.8 mL/min/kg（低提取率），Vss 1.4 L/kg（中低分布），在1~25 mg/kg剂量范围内呈线性药代动力学特征[3]
- 犬：口服吸收迅速（Tmax < 2.5 h），口服生物利用度86.3%，CL 3.5 mL/min/kg（低提取率），Vss 1.4 L/kg（中低分布），在2~10 mg/kg剂量范围内呈线性药代动力学特征，食物对其药代动力学特征无显著影响[3]
- 猴：口服吸收迅速（Tmax = 1.9 h），口服生物利用度仅1.9%，CL 17.2 mL/min/kg（高提取率），Vss 0.7 L/kg（中低分布）；低生物利用度归因于首过提取效应过强[3]

在 96 孔板中，NCI-H441 细胞以 15,000 个细胞/孔的密度接种在含有 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中。将细胞孵育一整夜，然后在 37°C 下用逐渐稀释的测试化合物处理一小时。除去培养基后，将细胞在每孔含有 100 μL 的裂解缓冲液中裂解，浓度如下：1% NP-40、20 mM Tris/pH 8.0、137 mM NaCl、10% 甘油、2 mM EDTA、1 mM 活化原钒酸钠、10 mg/mL 抑肽酶和 10 mg/mL 亮肽素。过夜后，将含有细胞裂解物的板储存在 -80°C 下。将板轻轻混合并于第二天在冰上解冻。为了检测 pc-Met 信号，将 25 μL/孔的裂解物添加到已预先涂有抗 p-Met 抗体的测定板中。 pc-Met 的测量在 450 和 570 nm 处进行。

---

1. 胃癌细胞增殖实验：
- 步骤1：将22种胃癌细胞系以特定密度（未指定）接种至适宜培养板，在标准条件（温度、CO2浓度未提及）下培养至贴壁；
- 步骤2：向培养基中加入不同浓度的Savolitinib，孵育一定时间（未指定）；
- 步骤3：采用细胞活力检测方法（未指定）测定细胞增殖率，计算各细胞系的EC50值；将结果与c-Met基因拷贝数（GCN）、c-Met蛋白IHC评分及细胞染色定位关联，分析c-Met失调与细胞对Savolitinib敏感性的关系[2]
2. c-Met磷酸化Western blot分析：
- 步骤1：将Hs746t胃癌细胞在完全培养基中培养至所需汇合度（未指定）；
- 步骤2：用0.1 μM Savolitinib或PF-4217903（无关选择性c-Met抑制剂）处理细胞1小时；
- 步骤3：用裂解液（组分未指定）裂解细胞制备裂解液，测定蛋白浓度（方法未指定）；
- 步骤4：取等量蛋白进行SDS-PAGE电泳（凝胶浓度未指定），转膜（膜类型未指定）后，用c-Met和磷酸化c-Met（成熟型，145 kDa）一抗孵育，再加入二抗；检测蛋白条带（检测方法未指定），分析Savolitinib对c-Met磷酸化的抑制作用[2]
3. Caco-2细胞通透性实验：
- 步骤1：将Caco-2细胞接种于Transwell小室，培养至形成融合单层（培养时长、单层完整性验证方法未指定）；
- 步骤2：将Savolitinib加入Transwell小室的顶侧（A）或基底侧（B），37℃孵育特定时间（未指定）；
- 步骤3：在预设时间点收集对侧样品，测定Savolitinib浓度（检测方法未指定），计算A→B方向的表观渗透系数（28×10⁻⁶ cm/s），评估外排转运（无外排）[3]
4. 体外代谢稳定性实验：
- 步骤1：制备大鼠、犬、猴和人的肝微粒体/S9组分（制备方法未指定），调整蛋白浓度至特定值（未指定）；
- 步骤2：将Savolitinib与肝微粒体/S9组分在辅因子（如CYP450代谢所需的NADPH）存在下37℃孵育不同时间（未指定）；
- 步骤3：加入淬灭剂（未指定）终止反应，采用色谱方法（未指定）分析样品，鉴定代谢产物（5种I相产物）并评估代谢稳定性；发现大鼠的代谢产物谱与人类最相似[3]

雌性无胸腺小鼠
\n1.0、2.5 和 10.0 mg/kg（口服）；2.5 mg/kg（静脉注射）
\口服给药/静脉注射

---

\n1.无胸腺裸鼠人胶质瘤异种移植模型：
\n - 步骤 1：将特定数量的（未指定）人胶质瘤细胞（具体细胞系未指定）皮下植入无胸腺裸鼠（雌性/雄性，年龄未指定）体内。
\n - 步骤 2：肿瘤植入后，当肿瘤达到一定体积（未指定）时，将小鼠随机分为治疗组和对照组（组数未指定）。
\n - 步骤 3：治疗组给予Savolitinib（给药途径、剂量、频率未指定），对照组给予赋形剂。
\n - 步骤 4：定期监测肿瘤体积和小鼠体重（监测间隔未指定），以评估Savolitinib的抗肿瘤活性。未提供药物溶出度配方/赋形剂的详细信息[1]
\n2.在裸鼠（nu/nu）中建立Hs746t胃癌异种移植模型：
\n - 步骤1：将特定数量的Hs746t胃癌细胞（未具体说明）皮下注射到裸鼠（nu/nu）体内（每组7-8只小鼠）。
\n - 步骤2：当肿瘤形成后（具体体积未具体说明），每日一次（qd）灌胃给予不同剂量的Savolitinib（剂量未具体说明）。对照组接受赋形剂（未指定溶出配方）。
\n - 步骤 3：定期（未指定）测量肿瘤体积，并绘制随时间变化的曲线图，以评估抗肿瘤疗效（治疗组与对照组相比，P ≤ 0.001）。
\n - 步骤 4：进行药效学分析时，在给予Savolitinib后的不同时间点和剂量（未指定）收集肿瘤组织块，并制备肿瘤裂解液进行 ELISA 检测，以检测磷酸化 c-Met 水平。抑制率的计算公式为 IR (%) = (1−OD450 药物处理组/OD450 赋形剂) × 100% [2]
\n3.裸鼠胃癌PDX模型：
\n - 步骤1：将患者来源的胃肿瘤组织块皮下植入裸鼠（每组7-8只小鼠）体内，建立PDX模型（植入方法未具体说明）。
\n - 步骤2：待肿瘤形成后（具体体积未具体说明），每日一次（qd）灌胃给予Savolitinib，剂量未具体说明。对照组给予赋形剂（溶出方法未具体说明）。
\n - 步骤3：定期测量肿瘤体积（具体测量方法未具体说明），并绘制肿瘤体积随时间变化的曲线。 Savolitinib在3个c-Met扩增的PDX模型（SGC071、SGC184、SGC141，P ≤ 0.001）中诱导了强效的肿瘤抑制，但对SGC070无显著影响（P ≥ 0.05）。
\n - 步骤4：进行药效学分析时，在给药前和Savolitinib给药后2小时收集肿瘤组织，并通过IHC染色评估磷酸化c-Met的表达[2]
\n4.异种移植/PDX模型中的联合治疗：
\n - 步骤1：如上所述，在nu/nu小鼠中建立Hs746t异种移植或SGC184 PDX模型（组数未指定）。
\n - 步骤2：将小鼠随机分为四组：Savolitinib单药组（灌胃，每日一次，剂量未指定）、多西他赛单药组（给药途径：静脉注射，频率：每周一次，剂量未指定）、联合治疗组（两种药物按上述剂量/方案给药）和载体对照组。
\n - 步骤3：定期测量肿瘤体积（未指定），以评估联合治疗的协同作用（Hs746t P ≤ 0.001，SGC184 P ≤ 0.05）[2]
\n5.在小鼠、大鼠、犬和猴体内进行的药代动力学研究：
\n - 步骤 1：将动物（小鼠、大鼠、犬、猴；性别、年龄、体重未指定）分组（组数未指定），并根据需要进行禁食（用于口服给药）或非禁食（用于静脉给药）。
\n - 步骤 2：Savolitinib 以不同剂量（大鼠 1–25 mg/kg，犬 2–10 mg/kg）口服（灌胃）或静脉注射（剂量未指定）给药。将药物溶解于合适的溶剂中（未具体说明）。
\n - 步骤 3：给药后在预定时间点（未具体说明）采集血样，并分离血浆（方法未具体说明）。
\n - 步骤 4：采用经验证的分析方法（未具体说明）测定血浆中Savolitinib的浓度，并计算药代动力学参数（Tmax、生物利用度、CL、Vss）。对于犬，通过比较喂食组和空腹组来评估食物对药代动力学的影响（食物影响甚微）[3]
\n6.大鼠体内分布和排泄研究：
\n - 步骤 1：将大鼠（性别、年龄、体重未指定）以特定剂量（未指定）通过灌胃或静脉注射（途径未指定）给予Savolitinib。
\n - 步骤 2：为进行分布研究，在给药后特定时间点（未指定）处死大鼠，收集不同器官（肝脏、肾脏、脑、脊髓、睾丸等），进行匀浆处理（方法未指定），并测定Savolitinib浓度（方法未指定），以评估组织分布（肝脏/肾脏浓度高，脑/脊髓/睾丸浓度低）。
\n - 步骤 3：为进行排泄研究，在给予Savolitinib后，将大鼠置于代谢笼中收集粪便、尿液和胆汁（收集时间未指定）。测定了排泄物中母体药物及其代谢物的浓度（方法未具体说明），以计算排泄率（母体药物<剂量的2%）并鉴定代谢物（16种I期代谢物，8种II期代谢物）[3]

1. 吸收：
- Savolitinib 在小鼠、大鼠、狗和猴子中均显示出快速的口服吸收，Tmax < 2.5 小时（小鼠、大鼠、狗），Tmax = 1.9 小时（猴子）[3]
- 口服生物利用度：27.2%（小鼠），42.6%（大鼠），86.3%（狗），1.9%（猴子）。猴子体内生物利用度低归因于首过提取过多[3]
2. 分布：
- 血浆蛋白结合率：60%–70%（大鼠、犬、人），40%（小鼠），80%（猴）[3]
- 在大鼠中，Savolitinib在不同器官中分布广泛，肝脏和肾脏暴露量高，而脑、脊髓和睾丸中的浓度与血浆水平相比非常低[3]
- 稳态分布容积 (Vss)：0.4 L/kg（小鼠），1.4 L/kg（大鼠），1.4 L/kg（犬），0.7 L/kg（猴），表明分布中等至低[3]
3. 代谢：
- 体外：在大鼠、犬、猴和人的肝微粒体/S9组分中观察到五种I期代谢物；三种主要代谢物（M1：去甲基化，M2：羟基化，M3：单加氧）由CYP450和醛氧化酶介导。大鼠的代谢物谱与人类相似[3]
- 体内（大鼠）：在血浆和排泄物中共鉴定出16种I期代谢物和8种II期代谢物；M22（M5的硫酸盐结合物，一种单氧化代谢物）是主要代谢物。去甲基化为 M2 和尿液排泄是重要的消除途径 [3]
4. 排泄：
- 在大鼠中，代谢是主要的消除途径，因为母体药物 Savolitinib 的粪便、尿液和胆汁排泄量占给药剂量的 < 2% [3]
5. 清除率：
- 体内清除率 (CL)：11.0 mL/min/kg（小鼠），11.8 mL/min/kg（大鼠），3.5 mL/min/kg（犬），17.2 mL/min/kg（猴）。小鼠、大鼠和犬的提取率较低，而猴的提取率则显著较高[3]
6. 线性药代动力学：
- Savolitinib 在大鼠（剂量范围：1–25 mg/kg）和犬（剂量范围：2–10 mg/kg）中均表现出线性药代动力学特征[3]
7. 食物效应：
- 食物对犬体内 Savolitinib 的药代动力学特征影响甚微[3]

[1]. J Med Chem . 2014 Sep 25;57(18):7577-89.

[2]. Mol Oncol . 2015 Jan;9(1):323-33.

[2]. Cancer Res (2013) 73 (8_Supplement): 3371.

萨沃替尼属于三唑并吡嗪类化合物，其结构为1H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡嗪，分别在1位和6位被(1S)-1-(咪唑并[1,2-a]吡啶-6-基)乙基和1-甲基-1H-吡唑-4-基取代。它是一种高选择性MET酪氨酸激酶抑制剂，已在中国获批用于治疗携带MET 14号外显子跳跃突变的晚期非小细胞肺癌。它既是c-Met酪氨酸激酶抑制剂，也是一种抗肿瘤药物。它属于吡唑类、三唑并吡嗪类和咪唑并吡啶类化合物。
萨沃替尼已用于多项临床试验，研究肿瘤、食物效应、胃癌、健康受试者和结直肠癌等疾病的治疗和健康服务。
萨沃替尼是一种口服生物利用度高的c-Met受体酪氨酸激酶抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。萨沃替尼以ATP竞争性方式选择性地结合并抑制c-Met的活化，从而阻断c-Met信号转导通路。这可能导致c-Met蛋白过表达肿瘤细胞的生长受到抑制。c-Met编码肝细胞生长因子受体酪氨酸激酶，在肿瘤细胞增殖、存活、侵袭和转移以及肿瘤血管生成中发挥重要作用；这种蛋白质在多种癌症中过度表达或发生突变。

---

药物适应症
治疗肾脏肿瘤
治疗肺癌

---

1. 背景和发展：HGF/c-Met 信号通路与人类癌症有关，而泛 c-Met 抑制剂存在局限性。 Savolitinib（Volitinib）是一种新型、高效、选择性的小分子c-Met抑制剂，通过结构导向药物设计和构效关系研究开发而成[1]。
2. 中国胃癌中c-Met异常表达的发生率：在一项包含170例中国胃癌患者的研究中，c-MET基因扩增的发生率为6%，蛋白过表达的发生率为13%[2]。
3. 临床潜力：临床前研究表明，Savolitinib在c-Met异常表达的胃癌细胞系和PDX模型中具有显著的抗肿瘤活性，为其作为c-MET扩增胃癌患者的治疗选择进行临床研究提供了强有力的理论依据[2]。
4. 总体临床前特征：Savolitinib表现出良好的临床前PK/ADME特性，包括高膜渗透性和低P-gp值。抑制作用，无CYP酶抑制/诱导作用，在大鼠和犬中呈线性药代动力学，在小鼠、大鼠和犬中具有可接受的生物利用度[3]

C17H15N9

345.36

345.145

C, 59.12; H, 4.38; N, 36.50

1313725-88-0

68289010

Off-white to yellow solid powder

1.6±0.1 g/cm3

1.833

0.54

91.61

0

6

3

26

505

1

N1(C2C(=NC([H])=C(C3C([H])=NN(C([H])([H])[H])C=3[H])N=2)N=N1)[C@@]([H])(C([H])([H])[H])C1C([H])=C([H])C2=NC([H])=C([H])N2C=1[H]

XYDNMOZJKOGZLS-NSHDSACASA-N

InChI=1S/C17H15N9/c1-11(12-3-4-15-18-5-6-25(15)10-12)26-17-16(22-23-26)19-8-14(21-17)13-7-20-24(2)9-13/h3-11H,1-2H3/t11-/m0/s1

3-[(1S)-1-imidazo[1,2-a]pyridin-6-ylethyl]-5-(1-methylpyrazol-4-yl)triazolo[4,5-b]pyrazine

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (6.02 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。