| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
5-HT1B Receptor
Cho1p is not inhibited by SB-224289 hydrochloride, however it does have a particular toxin swelling ability. The hydrochloride of SB-224289 (100 μM–25 μM) consistently showed effectiveness in giving resistance against Pap-A. Additionally, SB-224289 hydrochloride inhibited the activity of babuamide in this in vitro experiment, but not that of other film-disrupting compounds. While SB-224289 hydrochloride can offer protection against TPap, it is unable to preserve wild-type cell scaffold KF connections. Compared to the nearly comparable 5-HT1B receptor, the human cloned 5-HT1B receptor shows a higher pKi of 8 for SB-224289 hydrochloride. -Over 80x axis is displayed by the HT1D receiver and a number of other receivers. Hydrochloride SB-224289 is a strong antagonist with a pEC50 of 7.9±0.1. The hydrochloride of SB-224289 shifts the 5-HT concentration curve parallel to the right, with a pA2 of 8.4±0.2. In guinea pig cerebral cortex slices, SB-224289 hydrochloride (100 nM and 1 μM) also markedly enhanced [3H]-5HT release [3]. |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Cho1p 不会被 SB-224289 盐酸盐抑制，但它确实具有特殊的毒素膨胀能力。 SB-224289 的盐酸盐 (100 μM–25 μM) 始终显示出对 Pap-A 产生耐药性的有效性。此外，在此体外实验中，SB-224289 盐酸盐抑制巴布酰胺的活性，但不抑制其他膜破坏化合物的活性。虽然 SB-224289 盐酸盐可以提供针对 TPap 的保护，但它无法保留野生型细胞支架 KF 连接。与几乎相当的 5-HT1B 受体相比，人类克隆的 5-HT1B 受体对 SB-224289 盐酸盐的 pKi 更高，为 8。 - HT1D 接收器和许多其他接收器显示超过 80x 轴。 Hydrochloride SB-224289 是一种强拮抗剂，pEC50 为 7.9±0.1。 SB-224289 的盐酸盐使 5-HT 浓度曲线向右平行移动，pA2 为 8.4±0.2。在豚鼠大脑皮层切片中，SB-224289 盐酸盐（100 nM 和 1 μM）也显着增强 [3H]-5HT 释放 [3]。
SB-224289（浓度范围 25 μM 至 100 μM）能赋予野生型白念珠菌对环酯肽毒素 Papuamide A (Pap-A) 致死效应的抵抗力。这种保护作用具有高度特异性，因为 SB-224289 不能保护细胞免受其他细胞毒性酯肽（如缬氨霉素或卡哈拉肽 F）的伤害，但能保护细胞免受结构相似的毒素 Theopapuamide A (TPap-A) 的伤害。[1] SB-224289 的结构类似物或截短片段（包括 GR-127935、GMC 2-29、SB-216641 以及合成的化合物 2945、2946、3047、3048）均不能赋予 Pap-A 抗性，这表明 SB-224289 的完整分子结构是其活性所必需的。[1] 用 SB-224289 处理野生型白念珠菌不会诱导乙醇胺营养缺陷型，这是与磷脂酰丝氨酸合成缺失相关的表型。[1] 用 SB-224289 处理野生型白念珠菌不会引起细胞壁中 β (1-3)-葡聚糖的暴露，这是另一种与 PS 缺陷相关的表型。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SB-224289 盐酸盐 (SB 224289) 单独使用或与可卡因结合使用时，可能会加剧焦虑样行为。使用可卡因时，SB 224289 会显着降低运动活动。 SB 224289 与用载体处理的动物相比，用紫色处理的动物停留的时间要长得多。 [2]。 SB 224289 是一种强拮抗剂，当豚鼠暴露于 SK&F-99101 时会导致体温过低；其骨ED50为3.6mg/kg。此外，SB 224289（4 mg/kg，骨）逆转了舒马曲坦介导的 5-HT 释放抑制，表明它是一种强的体内间质 5-HT 自身受体拮抗剂。在豚鼠中，SB 224289（2-16 mg/kg，海湾）不会提高前额叶电位的 5-HT。尽管如此，当豚鼠的齿状回暴露于 SB 224289（4 毫克/千克，壁）时，5-HT 水平显着增加。 [3]。
在旷场/新物体探索实验中，全身给予 SB 224289（5 mg/kg，腹腔注射）可降低可卡因诱导的大鼠运动活性。 SB 224289 会增加焦虑样行为，无论是单独给药还是与可卡因联用，表现为在旷场角落停留时间增加和离开起始箱的潜伏期延长。[2] |
| 酶活实验 |
磷脂酰丝氨酸合酶测定[1]
该程序按照中所述进行，但略有更改。培养物生长过夜，然后在1 L YPD中稀释至约0.1 OD600/ml，并在30°C下摇动6至10小时。通过在6000 x g下离心20分钟来收获细胞。然后将颗粒转移到50ml锥形管中，用水洗涤并重新造粒。去除上清液，并测定样品的湿重。细胞颗粒在-80°C下储存过夜。第二天，将0.1 M Tris-Cl pH 7.5、5 mMβ-巯基乙醇（BME）、10%甘油和蛋白酶抑制剂1.7μg/ml PMSF、1μg/ml亮肽和1μg/ml pepstatin的冷混合物加入冷冻颗粒（1 ml/g[湿重]）中，并在冰上解冻。使用法国压榨机裂解细胞（以约13000磅/平方英寸的速度进行三次）。将匀浆在4°C下以3000 rpm离心5分钟，以清除未破碎的细胞和重质物质。然后在4°C下以27000 x g的速度再次旋转上清液10分钟。对于一些实验，然后将所得上清液以100000 x g的速度旋转，以收集较低密度的膜。将颗粒重新悬浮在500μl至1ml的0.1 M Tris-Cl pH 7.5、5 mM BME、10%甘油和蛋白酶抑制剂中。将这种混合物等分到微量离心管中，并均质化以分解团块，尽可能保持在冰上。使用Bradford测定法测定总粗蛋白浓度。最佳测定混合物包含50 mM Tris-HCl pH 7.5、0.1%Triton X-100、0.5 mM MnCl2、0.1 mM CDP-DAG（以悬浮液形式添加在1%-20%Triton X-1100中）和0.4-0.5 mg蛋白质，总体积为0.1 ml。以不同浓度将SB-224289和mg-624加入反应混合物中，以监测其抑制[3H]-PS产生的能力。PS合酶测定是通过在37°C下监测0.5 mM l-丝氨酸掺入5%[3H]-l-丝氨酸（或0.02μM）到氯仿可溶性产物中的预定时间来进行的。通过加入1ml氯仿：甲醇（2:1）终止反应。低速旋转后，将800-1000μl上清液移至新鲜试管中，用200μl 0.9%NaCl洗涤。在第二次低速旋转后，将400-500μl有机相移至新管中，用500μl氯仿：甲醇：0.9%氯化钠（3:48:47）洗涤。在第三次低速旋转后，将200-300μl转移到闪烁瓶中。在化学罩下干燥试管，向每根试管中加入2.5ml Cytoscint ES液体闪烁尾管，并在Packard TriCarb 2900TR液体闪烁分析仪中计数。 SB-224289在人类克隆的5-HT1B受体上的pKi为8.1，与密切相关的5-HT1D受体和一系列其他受体相比，显示出≥80倍的选择性。在表达人克隆5-HT1B受体的CHO细胞中的[35S]GTPγS放射性配体结合研究中，SB-224289表现为一种强效的反向激动剂，其pEC50=7.9±0.1（5-HT，pEC50=7.8±0.1，-GR127935，pEC50=8.1±0.1）。在该系统的拮抗剂研究中，SB-224289引起5-羟色胺浓度反应曲线平行右移，pA2为8.4±0.2。在100 nM和1 mM的浓度下，SB-224289显著增加了电刺激豚鼠大脑皮层切片中[3H]5-HT的释放，表明它是体外末端5-HT自身受体拮抗剂[3]。 使用白念珠菌的无细胞提取物进行了磷脂酰丝氨酸合成酶（Cho1p）活性测定。测定混合物包含 Tris-HCl 缓冲液（pH 7.5）、Triton X-100、MnCl2、CDP-二酰基甘油和 L-丝氨酸（包括痕量氚标记的 L-丝氨酸）。反应在 37°C 下孵育，并通过加入氯仿:甲醇终止。通过液体闪烁计数测量放射性标记的丝氨酸掺入氯仿可溶性 PS 的量。在该测定中加入不同浓度的 SB-224289 并未抑制 Cho1p 的酶活性，表明 SB-224289 不是 PS 合成酶的直接抑制剂。[1] |
| 细胞实验 |
巴氏酰胺A耐药性测定[1]
菌株在30°C的液体YPD振荡中生长过夜至饱和，培养物在YPD中稀释至2 x 104个细胞/ml。通过在96孔板中连续稀释或单独制备并直接加入孔中，将感兴趣的化合物稀释至工作浓度的两倍，体积为37.5μl YPD。然后加入37.5μl YPD中2 x 104个细胞/ml的细胞。根据实验情况，将板在37°C下孵育6小时或3小时，然后向每个孔中加入75μl含YPD的缩酚肽（Pap-A为8μg/ml，VA为6μg/ml，KF为30μg/ml，或TPap-A为12μg/ml），将这些浓度稀释一半。添加后，在37°C下孵育过夜。 第二天通过荧光强度或光密度测量细胞存活率。对于荧光强度，将Alamar Blue以1:10的稀释度加入孔中。让平板在37°C下再次孵育30分钟至2小时，直至颜色明显变化。然后在550nm激发和590nm发射下读取荧光。对于光密度，将板从过夜培养中取出，在波长为600nm的板读数器中读取吸光度。所有测量均使用Gen 5软件在Cytation3 BioTek平板读数器上进行。 建立了高通量 Pap-A 抗性筛选方法。将野生型白念珠菌细胞稀释后分配至含有测试化合物（终浓度 50-75 μM）的 384 孔板中。在 37°C 预孵育 6 小时后，加入 Pap-A 至终浓度 4 μg/ml。板子在 37°C 下孵育过夜。第二天通过加入基于刃天青的活力染料（Alamar Blue）并测量荧光（激发 550 nm/发射 590 nm）来定量细胞存活率。[1] 对于剂量反应和特异性测定，用 SB-224289（或其他化合物）的系列稀释液处理细胞 3 或 6 小时（37°C），然后加入致死剂量的 Pap-A、Theopapuamide A (TPap-A)、缬氨霉素 (VA) 或卡哈拉肽 F (KF)。过夜孵育后，通过测量 600 nm 处的光密度或 Alamar Blue 荧光法来测定细胞存活率。[1] 为评估 β (1-3)-葡聚糖的暴露情况，用 SB-224289 处理野生型白念珠菌细胞 3 小时，然后用 β (1-3)-葡聚糖抗体染色，并通过落射荧光显微镜观察。[1] |
| 动物实验 |
在豚鼠体内5-HT1B受体功能模型（SK&F-99101诱导的体温过低模型）中，SB-224289是一种强效拮抗剂，其ED50为3.6 mg/kg（口服）。在自由活动豚鼠额叶皮层的微透析研究中，SB-224289（4 mg/kg，口服）逆转了舒马曲坦诱导的5-HT释放抑制，表明其在体内也是一种强效的末端5-HT自身受体拮抗剂。在豚鼠额叶皮层中，单独使用SB-224289（2–16 mg/kg，口服）并未增加5-HT水平。相反，在豚鼠齿状回中，口服 4 mg/kg SB-224289 可显著提高 5-HT 水平。这些结果可能反映了终末 5-HT 自身受体张力的区域差异[3]。
SB-224289 和可卡因实验[2] 第 1 天：每只动物在放入起始箱前立即腹腔注射无菌生理盐水（1 ml/kg）[2] 第 2 天：每只动物在测试前 90 分钟腹腔注射 5 mg/kg SB 224289（溶于 10% Trappsol 无菌水中）或仅注射溶剂（总体积 1 ml/kg）。该剂量的药物在之前的研究中已被证明具有药理作用。将大鼠放回笼中，直到测试前才取出。在测试前，每只大鼠均腹腔注射可卡因（15 mg/kg），可卡因溶于无菌生理盐水（15 mg/ml）中，或注射生理盐水作为对照。 验证实验 为了验证该方法作为焦虑测量指标的有效性，我们使用地西泮进行了验证实验。每个实验组使用七只动物。这些动物均为本研究的独立动物。 第1天：每只动物在放入起始箱前立即腹腔注射无菌生理盐水（1 ml/kg）。 第2天：每只动物在测试前15分钟腹腔注射0.5 mg/kg地西泮或生理盐水（总量1 ml/kg）。该剂量已被证明具有抗焦虑作用，且不会严重损害运动功能。动物被放回笼中，直至测试前才再次进行测试。 分析：验证实验采用双尾t检验进行分析。所有SB 224289/可卡因数据均采用2×2方差分析（SB 224289×可卡因）进行分析。必要时采用Scheffe事后检验。所有分析均使用Statistica™软件完成。退出潜伏期的分析采用Fisher精确检验。分析排除了时间或测试顺序对任何一天结果的影响。 使用雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）。将SB 224289溶解于10% Trappool的无菌水溶液中，并在行为测试前90分钟以5 mg/kg（1 mL/kg）的剂量腹腔注射。 可卡因溶解于无菌生理盐水（15 mg/mL）中，并在测试前以15 mg/kg的剂量腹腔注射。 开放场/新物体任务持续两天。第一天，所有动物均接受生理盐水注射。第二天，动物先接受SB 224289或溶剂注射，随后接受可卡因或生理盐水注射。记录的行为参数包括离开起始箱的潜伏期、运动距离、在角落/中心停留的时间以及对新物体的探索。[2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
SB 224289 盐酸盐是 SB 224289 的单盐酸盐。它是一种选择性 5-HT1B 受体拮抗剂（pKi = 8.2）。在放射性配体结合和功能测定中，其对 5-HT1D、5-HT1A、5-HT1E、5-HT1F、5-HT2A 和 5-HT2C 受体的选择性比后者高 60 倍以上。口服给药后，它在体内具有中枢活性。它既可用作前药，也可用作血清素能拮抗剂。它包含化合物 SB 224289(1+)。
SB-224289 是从约 5600 种生物活性化合物的表型筛选中鉴定出来的，该筛选旨在寻找真菌磷脂酰丝氨酸合成酶 (Cho1p) 的抑制剂，并以对磷脂酰丝氨酸结合毒素 Pap-A 的抗性作为检测指标。[1] SB-224289 拮抗 Pap-A（和 TPap-A）毒性的机制并非通过抑制磷脂酰丝氨酸的合成。它可能涉及与毒素的直接物理相互作用或间接的细胞保护反应。这种相互作用的特异性表明，该筛选方法可用于发现其他具有医学或环境意义的膜活性毒素的拮抗剂。 [1] SB 224289 用于研究 5-HT1B 受体在可卡因相关行为和焦虑中的作用。 它可能减轻可卡因的一些行为效应（例如，活动过度），但也可能增加焦虑样行为，这可能会限制其在可卡因滥用治疗中的应用潜力。 SB 224289 的作用可能通过中脑边缘回路中的 5-HT1B 受体介导，可能涉及腹侧被盖区 (VTA) 的 GABA 能神经末梢。[2] |
| 分子式 |
C32H32N4O3.HCL
|
|---|---|
| 分子量 |
557.08242
|
| 精确质量 |
556.224
|
| CAS号 |
180084-26-8
|
| 相关CAS号 |
SB-224289;180083-23-2
|
| PubChem CID |
11226716
|
| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
724.8ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
392.2ºC
|
| 蒸汽压 |
7.29E-21mmHg at 25°C
|
| LogP |
6.384
|
| tPSA |
71.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
885
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
GKGKBZYMDILCOF-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H32N4O3.ClH/c1-20-16-25(30-33-21(2)39-34-30)8-9-26(20)22-4-6-23(7-5-22)31(37)36-13-10-24-17-29-27(18-28(24)36)32(19-38-29)11-14-35(3)15-12-32;/h4-9,16-18H,10-15,19H2,1-3H3;1H
|
| 化学名 |
[4-[2-methyl-4-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)phenyl]phenyl]-(1'-methylspiro[6,7-dihydro-2H-furo[2,3-f]indole-3,4'-piperidine]-5-yl)methanone;hydrochloride
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| 别名 |
SB-224289 hydrochloride; SB-224289A; sb224289 hydrochloride; SB 224289A; SB 224289 HCl; RTX59ZSB74;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~8.33 mg/mL (~14.95 mM)
H2O : < 0.1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 8.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 8.3 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7951 mL | 8.9754 mL | 17.9507 mL | |
| 5 mM | 0.3590 mL | 1.7951 mL | 3.5901 mL | |
| 10 mM | 0.1795 mL | 0.8975 mL | 1.7951 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
匹伐加宾
磷酸氢化可的松
BAY-784
Gly-PEG3-endo-BCN
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