| 规格 | 价格 | |
|---|---|---|
| 50mg | ||
| 100mg | ||
| 250mg | ||
| Other Sizes |
| 靶点 |
5-HT1B Receptor
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Cho1p 不会被 SB-224289 抑制，但它确实具有特殊的毒素膨胀能力。 SB-224289 的盐酸盐 (100 μM–25 μM) 始终显示出对 Pap-A 产生耐药性的有效性。此外，在此体外实验中，SB-224289 盐酸盐抑制巴布酰胺的活性，但不抑制其他膜破坏化合物的活性。虽然 SB-224289 盐酸盐可以提供针对 TPap 的保护，但它无法保留野生型细胞支架 KF 连接。与几乎相当的 5-HT1B 受体相比，人类克隆的 5-HT1B 受体对 SB-224289 盐酸盐的 pKi 更高，为 8。 - HT1D 接收器和许多其他接收器显示超过 80x 轴。 Hydrochloride SB-224289 是一种强拮抗剂，pEC50 为 7.9±0.1。 SB-224289 的盐酸盐使 5-HT 浓度曲线向右平行移动，pA2 为 8.4±0.2。在豚鼠大脑皮层切片中，SB-224289 盐酸盐（100 nM 和 1 μM）也显着增强 [3H]-5HT 释放 [3]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
SB-224289 (SB 224289) 单独使用或与可卡因结合使用时，可能会加剧焦虑样行为。使用可卡因时，SB 224289 会显着降低运动活动。 SB 224289 与用载体处理的动物相比，用紫色处理的动物停留的时间要长得多。 [2]。 SB 224289 是一种强拮抗剂，当豚鼠暴露于 SK&F-99101 时会导致体温过低；其骨ED50为3.6mg/kg。此外，SB 224289（4 mg/kg，骨）逆转了舒马曲坦介导的 5-HT 释放抑制，表明它是一种强的体内间质 5-HT 自身受体拮抗剂。在豚鼠中，SB 224289（2-16 mg/kg，海湾）不会提高前额叶电位的 5-HT。尽管如此，当豚鼠的齿状回暴露于 SB 224289（4 毫克/千克，壁）时，5-HT 水平显着增加。 [3]
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| 酶活实验 |
磷脂酰丝氨酸合酶测定[1]
该程序按照中所述进行，但略有更改。培养物生长过夜，然后在1 L YPD中稀释至约0.1 OD600/ml，并在30°C下摇动6至10小时。通过在6000 x g下离心20分钟来收获细胞。然后将颗粒转移到50ml锥形管中，用水洗涤并重新造粒。去除上清液，并测定样品的湿重。细胞颗粒在-80°C下储存过夜。第二天，将0.1 M Tris-Cl pH 7.5、5 mMβ-巯基乙醇（BME）、10%甘油和蛋白酶抑制剂1.7μg/ml PMSF、1μg/ml亮肽和1μg/ml pepstatin的冷混合物加入冷冻颗粒（1 ml/g[湿重]）中，并在冰上解冻。使用法国压榨机裂解细胞（以约13000磅/平方英寸的速度进行三次）。将匀浆在4°C下以3000 rpm离心5分钟，以清除未破碎的细胞和重质物质。然后在4°C下以27000 x g的速度再次旋转上清液10分钟。对于一些实验，然后将所得上清液以100000 x g的速度旋转，以收集较低密度的膜。将颗粒重新悬浮在500μl至1ml的0.1 M Tris-Cl pH 7.5、5 mM BME、10%甘油和蛋白酶抑制剂中。将这种混合物等分到微量离心管中，并均质化以分解团块，尽可能保持在冰上。使用Bradford测定法测定总粗蛋白浓度。最佳测定混合物包含50 mM Tris-HCl pH 7.5、0.1%Triton X-100、0.5 mM MnCl2、0.1 mM CDP-DAG（以悬浮液形式添加在1%-20%Triton X-1100中）和0.4-0.5 mg蛋白质，总体积为0.1 ml。以不同浓度将SB-224289和mg-624加入反应混合物中，以监测其抑制[3H]-PS产生的能力。PS合酶测定是通过在37°C下监测0.5 mM l-丝氨酸掺入5%[3H]-l-丝氨酸（或0.02μM）到氯仿可溶性产物中的预定时间来进行的。通过加入1ml氯仿：甲醇（2:1）终止反应。低速旋转后，将800-1000μl上清液移至新鲜试管中，用200μl 0.9%NaCl洗涤。在第二次低速旋转后，将400-500μl有机相移至新管中，用500μl氯仿：甲醇：0.9%氯化钠（3:48:47）洗涤。在第三次低速旋转后，将200-300μl转移到闪烁瓶中。在化学罩下干燥试管，向每根试管中加入2.5ml Cytoscint ES液体闪烁尾管，并在Packard TriCarb 2900TR液体闪烁分析仪中计数。 SB-224289在人类克隆的5-HT1B受体上的pKi为8.1，与密切相关的5-HT1D受体和一系列其他受体相比，显示出≥80倍的选择性。在表达人克隆5-HT1B受体的CHO细胞中的[35S]GTPγS放射性配体结合研究中，SB-224289表现为一种强效的反向激动剂，其pEC50=7.9±0.1（5-HT，pEC50=7.8±0.1，-GR127935，pEC50=8.1±0.1）。在该系统的拮抗剂研究中，SB-224289引起5-羟色胺浓度反应曲线平行右移，pA2为8.4±0.2。在100 nM和1 mM的浓度下，SB-224289显著增加了电刺激豚鼠大脑皮层切片中[3H]5-HT的释放，表明它是体外末端5-HT自身受体拮抗剂[3]。 |
| 细胞实验 |
巴氏酰胺A耐药性测定[1]
菌株在30°C的液体YPD振荡中生长过夜至饱和，培养物在YPD中稀释至2 x 104个细胞/ml。通过在96孔板中连续稀释或单独制备并直接加入孔中，将感兴趣的化合物稀释至工作浓度的两倍，体积为37.5μl YPD。然后加入37.5μl YPD中2 x 104个细胞/ml的细胞。根据实验情况，将板在37°C下孵育6小时或3小时，然后向每个孔中加入75μl含YPD的缩酚肽（Pap-A为8μg/ml，VA为6μg/ml，KF为30μg/ml，或TPap-A为12μg/ml），将这些浓度稀释一半。添加后，在37°C下孵育过夜。 第二天通过荧光强度或光密度测量细胞存活率。对于荧光强度，将Alamar Blue以1:10的稀释度加入孔中。让平板在37°C下再次孵育30分钟至2小时，直至颜色明显变化。然后在550nm激发和590nm发射下读取荧光。对于光密度，将板从过夜培养中取出，在波长为600nm的板读数器中读取吸光度。所有测量均使用Gen 5软件在Cytation3 BioTek平板读数器上进行。 |
| 动物实验 |
在豚鼠体内5-HT1B受体功能模型（SK&F-99101诱导的体温过低模型）中，SB-224289是一种强效拮抗剂，其ED50为3.6 mg/kg（口服）。在自由活动豚鼠额叶皮层的微透析研究中，SB-224289（4 mg/kg，口服）逆转了舒马曲坦诱导的5-HT释放抑制，表明其在体内也是一种强效的末端5-HT自身受体拮抗剂。在豚鼠额叶皮层中，单独使用SB-224289（2–16 mg/kg，口服）并未增加5-HT水平。相反，在豚鼠齿状回中，口服 4 mg/kg SB-224289 可显著提高 5-HT 水平。这些结果可能反映了终末 5-HT 自身受体张力的区域差异[3]。
SB-224289 和可卡因实验[2] 第 1 天：每只动物在放入起始箱前立即腹腔注射无菌生理盐水（1 ml/kg）[2] 第 2 天：每只动物在测试前 90 分钟腹腔注射 5 mg/kg SB 224289（溶于 10% Trappsol 无菌水中）或仅注射溶剂（总体积 1 ml/kg）。该剂量的药物在之前的研究中已被证明具有药理作用。将大鼠放回笼中，直到测试前才取出。在测试前，每只大鼠均腹腔注射可卡因（15 mg/kg），可卡因溶于无菌生理盐水（15 mg/ml）中，或注射生理盐水作为对照。 验证实验 为了验证该方法作为焦虑测量指标的有效性，我们使用地西泮进行了验证实验。每个实验组使用七只动物。这些动物均为本研究的独立动物。 第1天：每只动物在放入起始箱前立即腹腔注射无菌生理盐水（1 ml/kg）。 第2天：每只动物在测试前15分钟腹腔注射0.5 mg/kg地西泮或生理盐水（总量1 ml/kg）。该剂量已被证明具有抗焦虑作用，且不会严重损害运动功能。动物被放回笼中，直至测试前才再次进行测试。 分析：验证实验采用双尾t检验进行分析。所有SB 224289/可卡因数据均采用2×2方差分析（SB 224289×可卡因）进行分析。必要时采用Scheffe事后检验。所有分析均使用Statistica™软件完成。退出潜伏期的分析采用Fisher精确检验。分析排除了时间或测试顺序对任何一天结果的影响。 |
| 参考文献 |
[1]. Cassilly CD, et al. SB-224289 Antagonizes the Antifungal Mechanism of the Marine Depsipeptide Papuamide A. PLoS One. 2016 May 16;11(5):e0154932.
[2]. Hoplight BJ, et al. The effects of SB 224289 on anxiety and cocaine-related behaviors in a novel object task. Physiol Behav. 2005 Apr 13;84(5):707-14. [3]. Gaster LM, et al. The selective 5-HT1B receptor inverse agonist SB-224289, potently blocks terminal 5-HT autoreceptor function both in vitro and in vivo. Ann N Y Acad Sci. 1998 Dec 15;861:270-1. |
| 其他信息 |
SB 224289 是一种苯甲酰胺类化合物，由 2'-甲基-4'-(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)联苯-4-羧酸的羧基与 1'-甲基-6,7-二氢-5H-螺[呋喃并[2,3-f]吲哚-3,4'-哌啶]的仲氨基缩合而成。它是一种选择性 5-HT1B 受体拮抗剂（pKi = 8.2）。在放射性配体结合和功能测定中，其对 5-HT1B 受体的选择性比 5-HT1D、5-HT1A、5-HT1E、5-HT1F、5-HT2A 和 5-HT2C 受体高 60 倍以上。口服给药后，该化合物在体内具有中枢活性。它是一种血清素能拮抗剂。它是一种有机杂四环化合物、氮杂螺环化合物、1,2,4-噁二唑类化合物，也是苯甲酰胺类化合物。它是SB 224289(1+)的共轭碱。
SB-224289是一种对人5-HT1B受体具有高亲和力的小分子。 |
| 分子式 |
C32H32N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
520.62148
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| 精确质量 |
556.25
|
| 元素分析 |
C, 73.82; H, 6.20; N, 10.76; O, 9.22
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| CAS号 |
180083-23-2
|
| 相关CAS号 |
SB-224289 hydrochloride;180084-26-8
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| PubChem CID |
3378093
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.34g/ml
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| 熔点 |
280℃
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| LogP |
6.384
|
| tPSA |
71.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
39
|
| 分子复杂度/Complexity |
885
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
CC1=CC(=CC=C1C2=CC=C(C=C2)C(=O)N3CCC4=C3C=C5C(=C4)OCC65CCN(C)CC6)C7=NOC(=N7)C
|
| InChi Key |
ATQMRMGXINTJHV-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C32H32N4O3/c1-20-16-25(30-33-21(2)39-34-30)8-9-26(20)22-4-6-23(7-5-22)31(37)36-13-10-24-17-29-27(18-28(24)36)32(19-38-29)11-14-35(3)15-12-32/h4-9,16-18H,10-15,19H2,1-3H3
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| 化学名 |
(1'-Methyl-6,7-dihydro-5H-spiro(furo(2,3-f)indole-3,4'-piperidin)-5-yl)(2'-methyl-4'-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)biphenyl-4-yl)methanone
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| 别名 |
SB 224289; SB-224289; (2'-Methyl-4'-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)(1'-methyl-6,7-dihydrospiro[furo[2,3-f]indole-3,4'-piperidin]-5(2H)-yl)methanone; SB224289; J854.001B; CHEMBL281350; (1'-Methyl-6,7-dihydro-5H-spiro(furo(2,3-f)indole-3,4'-piperidin)-5-yl)(2'-methyl-4'-(5-methyl-1,2,4-oxadiazol-3-yl)biphenyl-4-yl)methanone;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9208 mL | 9.6039 mL | 19.2079 mL | |
| 5 mM | 0.3842 mL | 1.9208 mL | 3.8416 mL | |
| 10 mM | 0.1921 mL | 0.9604 mL | 1.9208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
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