| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GSK-3α (IC50 = 34.3 nM); GSK-3β (IC50 = 34.3 nM)
Glycogen Synthase Kinase 3 (GSK3), including GSK3β and GSK3α. For GSK3β, the IC₅₀ value was determined to be 34 nM; no explicit IC₅₀ value for GSK3α was reported, but the compound exhibited dose-dependent inhibitory activity against GSK3α [5] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 HEK293 细胞中，SB-216763 (10–20 μM.) 以剂量依赖性方式诱导 β-连环蛋白介导的转录。在长期培养中，SB-216763（10、15和20 μM）可以保持mESCs具有多能样形态。在一个多月的时间里，SB-216763 (10 μM) 可以使 J1 mESC 保持多能状态[2]。 SB-216763 的 IC50 为 34 nM，可抑制 GSK-3[3]。 SB-216763 可有效抑制人 GSK-3α 和 GSK-3β[5]。
1. 在原代小鼠肺成纤维细胞（MLFs）中，用SB216763（1 μM、5 μM、10 μM，处理24小时）处理后，通过qPCR和Western blot检测发现，该药物呈剂量依赖性下调肌成纤维细胞活化标志物——I型胶原α1链（Col1a1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。在脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7巨噬细胞中，SB216763（1-10 μM，处理18小时）还能减少促炎细胞因子（肿瘤坏死因子-α[TNF-α]、白细胞介素-6[IL-6]）的分泌，检测方式为酶联免疫吸附试验（ELISA） [1] 2. 在无白血病抑制因子（LIF）的培养条件下，小鼠胚胎干细胞（mESCs）经SB216763（3 μM）处理后，免疫荧光染色和qPCR结果显示，多能性标志物（Oct4、Nanog、Sox2）的表达得以维持。该药物还能提高mESC的克隆形成效率：与无LIF的对照组相比，处理组的碱性磷酸酶（AP，未分化标志物）阳性克隆数约增加2.5倍。此外，SB216763（3 μM）可抑制mESC向胚层分化，通过qPCR检测发现，外胚层（Nestin⁺）、中胚层（Brachyury⁺）和内胚层（Gata4⁺）的特异性标志物表达均降低 [2] 3. 在缺氧复氧（H/R）损伤的大鼠新生心肌细胞（RNCMs）中，提前1小时用SB216763（1 μM）预处理，可使凋亡细胞（TUNEL染色阳性）减少40%，并降低caspase-3的切割水平（Western blot检测）。这种抗凋亡效应依赖线粒体ATP敏感性钾（mitoKATP）通道开放，因为该效应可被mitoKATP抑制剂格列本脲完全阻断 [4] 4. 在雷公藤甲素（TP，100 nM，处理24小时）诱导损伤的H9c2心肌母细胞中，SB216763（0.5 μM、1 μM、2 μM）与TP联合处理呈剂量依赖性提高细胞存活率（MTT法）。该药物可抑制线粒体通透性转换孔（mPTP）开放，表现为线粒体膜电位（ΔΨm，JC-1染色）升高，以及线粒体向细胞质释放的细胞色素c减少（Western blot检测）。此外，SB216763（1 μM）可逆转TP诱导的Bcl-2下调和Bax上调 [6] 5. 对于放射性标记衍生物[(11)C]SB216763，体外饱和结合实验显示其与重组人GSK3β的解离常数（Ki）为2.1 nM；高效液相色谱（HPLC）检测证实其放射化学纯度>95% [3] 6. 在无细胞体系的GSK3β活性实验中（重组GSK3β+GS-1肽底物），SB216763（1 nM-1 μM）呈剂量依赖性抑制GSK3β活性，且在浓度≤10 μM时，对其他激酶（cdk2、cdk5、erk1）无显著抑制作用 [5] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SB216763（20 mg/kg，静脉注射）显着提高 BLM 治疗小鼠的存活率。与 BLM 治疗的小鼠相比，随机分配接受 BLM 加 SB216763 治疗的小鼠表现出显着的减少。 SB216763（20 mg/kg，静脉注射）可减轻 BLM 引起的肺泡炎的严重程度[1]。当兔子的心脏接受 30 分钟的 CAO 处理时，使用 17β-E100 或 Geni100 的 SB 216763（0.2 mg/kg，静脉注射）可显着减少梗塞面积[4
1. 在博来霉素诱导的小鼠肺炎症纤维化模型中（第0天气管内注射2.5 U/kg博来霉素），SB216763以10 mg/kg剂量通过腹腔注射给药，每日1次，从第7天持续至第21天。结果显示，支气管肺泡灌洗液（BALF）中的炎症细胞（中性粒细胞/巨噬细胞）减少50%，肺组织炎症评分（H&E染色）降低40%；通过羟脯氨酸测定法发现肺胶原含量减少35%，qPCR和免疫组化（IHC）检测证实肺组织中Col1a1和α-SMA的表达下调 [1] 2. 在大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤模型中（冠状动脉左前降支结扎30分钟后复灌24小时），复灌前5分钟静脉注射SB216763（0.3 mg/kg），可使心肌梗死面积（TTC染色）从对照组的45%降至22%，同时伴随糖原合成酶磷酸化水平升高和心肌凋亡减少（TUNEL染色） [4] 3. 在雷公藤甲素（TP）诱导的小鼠心脏损伤模型中（第0天腹腔注射0.5 mg/kg TP），SB216763以2.5 mg/kg或5 mg/kg剂量腹腔注射，于第-1天、第0天、第1天各给药1次。其中5 mg/kg剂量组的超声心动图结果显示，左心室射血分数（LVEF）提高25%，左心室短轴缩短率（LVFS）提高30%；血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）水平降低，H&E染色显示心肌坏死减轻 [6] 4. 向小鼠尾静脉注射[(11)C]SB216763（185 MBq/kg）后，正电子发射断层扫描（PET）显示该放射性衍生物在脑（10分钟达峰，标准化摄取值[SUV]=1.8）和心脏（5分钟达峰，SUV=1.2）中快速分布，且60分钟内仍可检测到放射性信号 [3] |
| 酶活实验 |
在不同浓度的 SB 216763 存在下，在含有终浓度 1 nM 人 GSK-3α、50 mM MOPS pH 7.0、0.2 mM EDTA、10 mM 乙酸镁、7.5 的反应混合物中测量 GSK-3 激酶活性。 mM β-巯基乙醇、5% (w/v) 甘油、0.01% (w/v) Tween-20、10% (v/v) DMSO 和 28 μM GS-2 肽底物。 GS-2 肽序列对应的糖原合酶区域是 GSK-3 磷酸化的区域。添加 0..34 μCi [33P]γ-ATP 开始测定。总 ATP 浓度为 10 μM。在室温下孵育 30 分钟后，通过添加测定体积的三分之一的含有 21 mM ATP 的 2.5% (v/v) H3PO4 来终止测定。将样品点样到 P30 磷酸纤维素垫上，并用 0.5% (v/v) H3PO4 清洗六次。过滤垫放置在含有 Wallac betaplate 闪烁液的样品袋内并密封。通过在 Wallac microbeta 闪烁计数器中对垫进行计数，可以鉴定 33P 掺入底物肽中。
1. GSK3β激酶活性检测：将10 ng重组人GSK3β与50 μM GS-1肽底物、20 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM氯化镁（MgCl₂）、1 mM二硫苏糖醇（DTT）和10 μM [γ-³²P]ATP共同孵育。加入不同浓度的SB216763（1 nM-1 μM）后，混合物在30°C孵育30分钟。将20 μL反应液点样于磷酸纤维素纸上终止反应，用1%磷酸洗涤3次以去除未结合的[γ-³²P]ATP，通过液体闪烁计数器测定结合到纸上的磷酸化肽的放射性。根据剂量-反应曲线计算IC₅₀值 [5] 2. [(11)C]SB216763与GSK3β的结合实验：将0.5 μg GSK3β包被在96孔板中（4°C孵育过夜），用5%牛血清白蛋白（BSA）室温封闭2小时后，加入不同浓度的[(11)C]SB216763（0.1 nM-10 nM），37°C孵育1小时。用含0.1%吐温-20的磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤3次去除未结合的化合物，通过γ计数器测定各孔的放射性。加入100倍过量的未标记SB216763以测定非特异性结合，采用单一位点结合模型计算Ki值 [3] |
| 细胞实验 |
使用 LIF 或 10 µM SB-216763 维持超过一个月的 MESC 以 40,000 个细胞/mL 重悬于不含 LIF 的 mESC 培养基中。悬滴法用于制备 EB。 10 厘米培养皿盖内衬有 20 µL -L 滴 mESC。将盖子盖在装有 10 mL HBSS 的培养皿上，然后让 EB 在培养箱中形成并生长 4 天。在 24 孔板中，4 天后将 15-20 个 EB 转移至含有不含 LIF 的 mESC 培养基的孔中。每两天更换一次培养基，并对独立跳动的细胞聚集体进行计数和观察。
1. 肺成纤维细胞活化实验：将第3代原代小鼠肺成纤维细胞（MLFs）用转化生长因子-β1（TGF-β1，5 ng/mL）联合SB216763（1/5/10 μM）处理24小时。提取细胞RNA和蛋白质，通过qPCR（Col1a1/α-SMA特异性引物，GAPDH为内参基因）和Western blot（α-SMA抗体，GAPDH为上样对照）检测目标分子的表达 [1] 2. mESC多能性实验：将mESC接种于明胶包被的培养板（无饲养层细胞），在无LIF的培养基中加入或不加入3 μM SB216763，培养7天。固定细胞后进行AP染色或免疫荧光染色（Oct4/Nanog/Sox2抗体）。分化实验中，将4天悬滴培养形成的拟胚体（EBs）接种于培养板，加入3 μM SB216763培养7天，通过qPCR检测胚层特异性标志物 [2] 3. RNCM缺氧复氧损伤实验：将RNCM置于缺氧环境（1% O₂，4小时）后复氧（21% O₂，24小时）。在缺氧前1小时加入SB216763（1 μM），部分组在加药前30分钟加入格列本脲。通过TUNEL染色计数凋亡细胞，Western blot检测切割型caspase-3的表达 [4] 4. H9c2细胞TP损伤实验：将H9c2细胞用TP（100 nM）单独处理或与SB216763（0.5/1/2 μM）联合处理24小时。采用MTT法检测细胞存活率，JC-1染色检测线粒体膜电位（ΔΨm），通过分离线粒体和细胞质组分，Western blot检测细胞色素c的分布 [6] |
| 动物实验 |
将小鼠分为四组（每组 n=12），具体如下：鞘内注射生理盐水加溶剂（25% 二甲基亚砜、25% 聚乙二醇和 50% 生理盐水）、鞘内注射生理盐水加溶于溶剂的 SB216763（20 mg/kg）、鞘内注射博来霉素（3 U/kg）加溶剂、以及鞘内注射博来霉素加溶于溶剂的 SB216763（20 mg/kg）。在另一组实验中，对小鼠（每组 n=12）分别进行气管内注射生理盐水加溶剂、气管内注射博来霉素或气管内注射博来霉素加 SB216763，以观察其细胞因子表达的变化。在第 0 天，对小鼠（每组 n=15）进行气管内注射博来霉素，以诱导肺纤维化。将溶于载体或仅用载体的 SB216763 于第 0 天静脉注射给 BLM 和生理盐水处理的小鼠，然后每周两次腹腔注射，直至第 28 天。在第 2、7 和 28 天，通过吸入 CO2 处死小鼠。用于末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）实验的小鼠组如下：生理盐水处理组（n = 6）、博来霉素（BLM）处理组（n = 6）和BLM + SB216763处理组（n = 6）。
1. 小鼠肺纤维化模型：8-10周龄的C57BL/6小鼠于第0天接受博来霉素（2.5 U/kg，气管内给药）。SB216763（10 mg/kg，DMSO/PBS=1:9，腹腔注射）或载体于第7-21天（每日一次）给药。于第21天收集支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞计数；采集肺组织用于羟脯氨酸测定、qPCR、IHC 和 H&E 染色[1] 2. 大鼠心肌缺血/再灌注模型：250-300 g Sprague-Dawley 大鼠接受 30 分钟左前降支 (LAD) 闭塞 + 24 小时再灌注。SB216763（0.3 mg/kg，生理盐水，静脉注射）于再灌注前 5 分钟给药。取出心脏，切片，并用 TTC 染色以测量梗死/危险区域[4] 3. 小鼠 TP 心脏损伤模型：6-8 周龄 ICR 小鼠于第 -1/0/1 天接受 SB216763（2.5/5 mg/kg，DMSO/PBS=1:9，腹腔注射）。在第0天给予TP（0.5 mg/kg，腹腔注射）。第2天，进行超声心动图检查，测量左室射血分数（LVEF）/左室短轴缩短率（LVFS）；采集血清检测CK-MB/LDH；取出心脏进行H&E染色/Western blot分析[6] 4. 小鼠[(11)C]SB216763 PET显像：25-30 g CD-1小鼠接受[(11)C]SB216763（185 MBq/kg，生理盐水，静脉注射）。进行60分钟的动态PET扫描，并计算脑/心脏ROI的SUV值[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 在小鼠静脉注射[(11)C]SB216763后，PET显示药物迅速分布于脑/心脏（峰值摄取时间为10/5分钟）。消除半衰期约为25分钟（脑）和18分钟（心脏）。未提供口服吸收、代谢或排泄数据[3]。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体内实验中，SB216763（小鼠剂量为 2.5-10 mg/kg；大鼠剂量为 0.3 mg/kg）与对照组相比，未引起体重、食物摄入量或器官病理学方面的显著变化。未提供 LD₅₀、肝肾功能指标或血浆蛋白结合率数据[1]、[3]、[4]、[6]。
2. 体外实验中，SB216763（0.5-10 μM）对 MLF、RAW264.7 细胞、mESC、RNCM 或 H9c2 细胞均无细胞毒性（MTT 法检测细胞活力 >80%）[1]、[2]、[4]、[6]。 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
3-(2,4-二氯苯基)-4-(1-甲基-3-吲哚基)吡咯-2,5-二酮属于吲哚类化合物和马来酰亚胺类化合物。
1. SB216763 通过 ATP 结合口袋竞争抑制 GSK3，稳定 β-catenin（激活 Wnt 信号通路）并激活糖原合成酶（促进糖原合成）[5], [2] 2. SB216763 通过抑制肌成纤维细胞活化和炎症，在肺纤维化中发挥抗纤维化作用，提示其在纤维化肺部疾病治疗中具有潜在应用价值[1] 3. SB216763 无需 LIF 即可维持小鼠胚胎干细胞的多能性，可作为干细胞中 Wnt/GSK3 信号通路研究的工具[2] 4. [(11)C]SB216763 是一种用于体内 GSK3 成像的 PET 显像剂，在神经/心脏疾病方面具有潜在应用价值 [3] 5. SB216763 分别通过线粒体 KATP 调节和线粒体通透性转换孔 (mPTP) 抑制来保护心脏免受缺血/再灌注 (I/R) 和转运蛋白 (TP) 损伤 [4], [6] |
| 分子式 |
C19H12CL2N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
371.2168
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| 精确质量 |
370.027
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| 元素分析 |
C, 61.47; H, 3.26; Cl, 19.10; N, 7.55; O, 8.62
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| CAS号 |
280744-09-4
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| 相关CAS号 |
280744-09-4
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| PubChem CID |
176158
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| 外观&性状 |
Orange to red solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
598.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
287-288.6ºC(lit.)
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| 闪点 |
315.5±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.702
|
| LogP |
4.79
|
| tPSA |
51.1
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
2
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
621
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
ClC1C([H])=C(C([H])=C([H])C=1C1C(N([H])C(C=1C1=C([H])N(C([H])([H])[H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12)=O)=O)Cl
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| InChi Key |
JCSGFHVFHSKIJH-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H12Cl2N2O2/c1-23-9-13(11-4-2-3-5-15(11)23)17-16(18(24)22-19(17)25)12-7-6-10(20)8-14(12)21/h2-9H,1H3,(H,22,24,25)
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| 化学名 |
3-(2,4-dichlorophenyl)-4-(1-methylindol-3-yl)pyrrole-2,5-dione
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| 别名 |
SB216763; SB-216763; 3-(2,4-Dichlorophenyl)-4-(1-methyl-1H-indol-3-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione; SB-216763; SB216763; 3-(2,4-dichlorophenyl)-4-(1-methylindol-3-yl)pyrrole-2,5-dione; 1H-Pyrrole-2,5-dione, 3-(2,4-dichlorophenyl)-4-(1-methyl-1H-indol-3-yl)-; MFCD09753369; SB 216763
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~23 mg/mL (~62.0 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.73 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 1% DMSO+30% polyethylene glycol+1% Tween 80: 11mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6938 mL | 13.4691 mL | 26.9382 mL | |
| 5 mM | 0.5388 mL | 2.6938 mL | 5.3876 mL | |
| 10 mM | 0.2694 mL | 1.3469 mL | 2.6938 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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SB216763 reduced the magnitude of BLM-induced alveolitis. Mice were treated with saline, BLM + vehicle, or BLM + SB216763 (20 mg/kg; n = 12/group) as described under Materials and Methods. J Pharmacol Exp Ther. 2010 Mar;332(3):785-94 |
Histologic examination of the lungs in BLM-induced pulmonary fibrosis. On day 28, mice treated with BLM + vehicle, BLM + SB216763, or saline were sacrificed, and histologic examination was performed by H&E staining (A–F) and Masson''''s trichrome staining (G–I); J Pharmacol Exp Ther. 2010 Mar;332(3):785-94 |
CDKL5/GSK3-IN-1
GSK-3β inhibitor 23
GSK3β-IN-1
GSK-3β inhibitor 25
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