| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
hGSK-3α (IC50 = 77.5 nM); hGSK-3β (IC50 = 77.5 nM)
Glycogen Synthase Kinase 3 (GSK3), including GSK3β and GSK3α. For GSK3β, the IC₅₀ value was 10 nM; for GSK3α, the IC₅₀ value was 100 nM. No inhibitory activity against other kinases (e.g., cdk2, erk1, p38) was detected at concentrations up to 1 μM [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
SB 415286 (SB-415286) 抑制人 GSK-3α，IC50 为 77.5 nM，Ki 为 30.75 nM。 SB-415286 刺激 Chang 人肝细胞系中的糖原合成，EC50 为 2.9 μM。 SB-415286 刺激 Chang 人肝细胞中的糖原合酶活性。在 HEK293 细胞中，SB-415286 激活由 β-catenin-LEF/TCF 通路控制的报告基因的转录[1]。 SB 415286 (SB-415286, 5-44 μM) 可减弱 1 mM H2O2 介导的 B65 细胞损失。 SB-415286 (5-44 μM) 会导致 DCF 荧光强度出现显着的剂量依赖性下降，并减弱 1 mM H2O2 介导的 B65 ROS 产生。 SB-415286 (5-44 μM) 还可减弱 1 mM H2O2 介导的 CGN 中 ROS 的产生 [2]。 SB-415286 (50 µM) 可使免疫沉淀 GSK3 活性显着抑制 97%[3]。
1. 在稳定表达人胰岛素受体的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞中，用SB415286（1 μM，处理24小时）处理后，通过[¹⁴C]-葡萄糖掺入法检测发现，糖原合成增加约2.2倍，且糖原合成酶（GS）被激活——GS在Ser⁶⁴¹位点（抑制性位点）的磷酸化水平降低约60%（Western blot检测）。该药物还能增强胰岛素诱导的糖原合成：在1 nM胰岛素存在时，1 μM SB415286可使糖原积累量较单独使用胰岛素时再增加约1.5倍 [1] 2. 在B65大鼠神经母细胞瘤细胞中，用SB415286（0.1 μM、1 μM、10 μM，过氧化氢处理前1小时预处理）呈剂量依赖性保护细胞免受过氧化氢（H₂O₂，200 μM）诱导的死亡。在1 μM浓度下，细胞存活率（MTT法）从H₂O₂单独处理组的35%提升至78%（保护率约123%）。该药物可减少H₂O₂诱导的凋亡：1 μM浓度下，TUNEL阳性细胞减少约55%，caspase-3活性（荧光法）被抑制约60%。同时，它还能降低细胞内活性氧（ROS）水平：DCFH-DA染色显示，1 μM浓度下ROS减少约45% [2] 3. 在培养10天的原代大鼠皮层神经元中，SB415286（1 μM、10 μM，H₂O₂处理前1小时预处理）同样能减轻H₂O₂（100 μM）诱导的神经毒性。在10 μM浓度下，神经元存活率（NeuN免疫染色）从40%提升至82%，ROS生成减少约50% [2] 4. 在分化的L6大鼠骨骼肌肌管细胞中，SB415286（1 μM，处理4小时）通过[³H]-2-脱氧葡萄糖摄取实验检测显示，葡萄糖转运增加约1.8倍。它还能增强胰岛素刺激的葡萄糖转运：与10 nM胰岛素联合使用时，葡萄糖摄取量较单独使用胰岛素时高约2.3倍。Western blot分析表明，1 μM SB415286可使GSK3β在Ser⁹位点的磷酸化水平（GSK3β抑制的标志物）降低约70% [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SB 415286（10 mg/kg，每日两次）给药可降低由三硝基苯磺酸 (TNBS) 引起的大鼠结肠炎症的强度和严重程度，以及体重减轻，这与 NF-B 活性下调有关，参与促炎介质的产生。 1 mg/kg SB 415286 处理显着减慢裸鼠体内 Neuro-2A 细胞的生长。
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| 酶活实验 |
在存在或不存在 SB-216763 或 SB-415286 的情况下，在含有以下终浓度的反应混合物中测量 GSK-3 激酶活性： 1 nM 人 GSK-3α 或兔 GSK3α； 50 mM MOPS pH 7.0； 0.2 毫米乙二胺四乙酸； 10 mM 乙酸镁； 7.5 mM β-巯基乙醇； 5%（w/v）甘油； 0.01%（重量/体积）Tween-20； 10%（v/v）DMSO； 28 μM GS-2 肽底物。 GS-2 肽序列对应的糖原合酶区域是 GSK-3 磷酸化的区域。添加 0.34 μCi [33P]γ-ATP（IC50 测定）或 2.7 μCi [33P]γ-ATP（Ki 测定）。开始测定。总 ATP 浓度为 10 μM（基于 IC50 计算）或 0 至 45 μM（基于 Ki 计算）。室温孵育 30 分钟后，通过添加测定体积的三分之一的含有 21 mM ATP 的 2.5% (v/v) H3PO4 来终止测定。点样到 P30 磷酸纤维素垫上后，样品在分析前用 0.5% (v/v) H3PO4 清洗六次。在装有 Wallac betaplate 闪烁液的样品袋中，过滤垫是密封的。通过在 Wallac microbeta 闪烁计数器中对垫进行计数，可以确定掺入底物肽中的 33P 量[1]。
1. GSK3β激酶活性检测：将5 ng重组人GSK3β与50 μM合成肽底物（序列：YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQpSEDEEE）在含20 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM氯化镁（MgCl₂）、1 mM二硫苏糖醇（DTT）和10 μM [γ-³²P]-ATP的反应缓冲液中孵育。加入SB415286（0.1 nM-1 μM）后，混合物在30°C孵育30分钟。取20 μL反应液点样于磷酸纤维素纸上终止反应，用1%磷酸洗涤3次以去除未掺入的[γ-³²P]-ATP。通过液体闪烁计数测定放射性，根据剂量-反应曲线计算GSK3β的IC₅₀ [1] 2. GSK3α激酶活性检测：实验流程与GSK3β检测一致，仅替换为5 ng重组人GSK3α。使用相同浓度范围的SB415286和数据分析方法确定GSK3α的IC₅₀ [1] 3. 激酶选择性检测：对于其他激酶（cdk2、erk1、p38），将5-10 ng重组酶与其各自的肽底物、[γ-³²P]-ATP和SB415286（0.1 nM-1 μM）在激酶特异性反应缓冲液中孵育。按上述方法测定放射性，未检测到该药物对这些激酶的抑制活性 [1] |
| 细胞实验 |
B65细胞在体外培养24小时后使用。 CGN 在体外创建后 7-8 天使用。在添加 H2O2 前一小时，将锂和 SB-415286 分别溶解在培养基和 DMSO 中后，以准确的浓度（50 M 至 1 mM）添加到神经元制备物中。 MTT [3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑]方法用于测量细胞活力的损失。将MTT以终浓度250M添加到细胞中，孵育1小时后，由于MTT的还原而产生深蓝色的甲臜产物。除去培养基后，将细胞溶解在二甲亚砜中。利用酶标仪，通过 595 nm 处吸光度的变化确定产生的甲臜量。结果以活力百分比表示。从未处理的细胞测量的吸光度被视为 100%[2]。
1. CHO细胞糖原合成实验：将稳定表达人胰岛素受体的CHO细胞接种于24孔板，在含10%胎牛血清（FBS）的DMEM中培养至80%汇合。细胞饥饿血清16小时后，用SB415286（0.1 μM-1 μM）±胰岛素（1 nM）处理24小时。在处理的最后4小时加入[¹⁴C]-葡萄糖（0.5 μCi/mL）。用冷PBS洗涤细胞，用10%三氯乙酸（TCA）裂解细胞，糖原在4°C沉淀过夜。沉淀的糖原用乙醇洗涤，溶解于水中，通过液体闪烁计数测定放射性，以量化糖原合成 [1] 2. B65细胞H₂O₂毒性实验：将B65大鼠神经母细胞瘤细胞以5×10³个/孔的密度接种于96孔板，在含10% FBS的DMEM中培养24小时。更换为无血清DMEM后，在H₂O₂（200 μM）处理前1小时加入SB415286（0.1 μM-10 μM）。24小时后，加入MTT试剂（0.5 mg/mL），37°C孵育4小时，用二甲基亚砜（DMSO）溶解甲臜结晶，在570 nm处测定吸光度以计算存活率。凋亡检测时，用4%多聚甲醛固定细胞，0.1% Triton X-100透化，加入TUNEL试剂染色，在荧光显微镜下计数TUNEL阳性细胞 [2] 3. 原代皮层神经元H₂O₂保护实验：从E18大鼠胚胎中分离皮层组织并解离，以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔板（多聚-L-赖氨酸包被）。细胞在含B27添加剂的Neurobasal培养基中培养10天。第10天，在H₂O₂（100 μM）处理前1小时加入SB415286（1 μM-10 μM）。24小时后，固定细胞并加入NeuN抗体（神经元特异性标志物）染色，通过免疫荧光计数存活神经元 [2] 4. L6肌管细胞葡萄糖转运实验：将L6细胞接种于24孔板，在含2%马血清的DMEM中培养7天分化为肌管细胞。肌管细胞饥饿血清4小时后，用SB415286（1 μM）±胰岛素（10 nM）处理4小时。加入[³H]-2-脱氧葡萄糖（0.1 μCi/mL）孵育10分钟，用含200 μM根皮素的冷PBS洗涤细胞。用0.1% SDS裂解细胞，测定放射性以确定葡萄糖摄取量 [3] |
| 动物实验 |
Male Wistar rats with acute colitis provoked by trinitrobenzene sulphonic acid (TNBS)
~1 mg/kg Administered subcutaneously twice daily |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In vitro, SB415286 (up to 10 μM) showed no cytotoxicity in CHO cells, B65 cells, primary cortical neurons, or L6 myotubes (viability >90% vs. control, MTT assay) [1], [2], [3]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
SB 415286 is a member of the class of maleimides carrying 3-chloro-4-hydroxyphenylamino and 2-nitrophenyl substituents at positions 3 and 4 respectively. It has a role as an EC 2.7.11.26 (tau-protein kinase) inhibitor, an antioxidant, a neuroprotective agent and an apoptosis inducer. It is a member of maleimides, a member of phenols, a member of monochlorobenzenes, a substituted aniline, a secondary amino compound and a C-nitro compound.
3-(3-chloro-4-hydroxyphenylamino)-4-(4-nitrophenyl)-1H-pyrrole-2,5-dione has been reported in Penicillium with data available. 1. SB415286 is a selective, ATP-competitive inhibitor of GSK3, with higher potency against GSK3β (IC₅₀=10 nM) than GSK3α (IC₅₀=100 nM). Its selectivity for GSK3 over other kinases reduces the risk of off-target effects [1] 2. The neuroprotective effects of SB415286 against H₂O₂-induced damage are mediated by inhibiting GSK3-dependent apoptosis (reducing caspase-3 activation) and lowering intracellular ROS production, suggesting potential applications in neurodegenerative diseases associated with oxidative stress [2] 3. In metabolic tissues (skeletal muscle, CHO cells), SB415286 improves glucose metabolism by promoting glucose transport and glycogen synthesis, and it potentiates insulin signaling — these effects support its potential as a therapeutic agent for type 2 diabetes [1], [3] 4. Unlike lithium (a non-selective GSK3 inhibitor), SB415286 does not affect other enzymes targeted by lithium (e.g., inositol monophosphatase), making it a more specific tool for studying GSK3 function [3] |
| 分子式 |
C16H10CLN3O5
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|---|---|
| 分子量 |
359.7207
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| 精确质量 |
359.03
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| 元素分析 |
C, 53.42; H, 2.80; Cl, 9.85; N, 11.68; O, 22.24
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| CAS号 |
264218-23-7
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| 相关CAS号 |
264218-23-7
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| PubChem CID |
4210951
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
595.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
314.1±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.746
|
| LogP |
2.06
|
| tPSA |
124.25
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
617
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ClC1=C(C([H])=C([H])C(=C1[H])N([H])C1C(N([H])C(C=1C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[N+](=O)[O-])=O)=O)O[H]
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| InChi Key |
PQCXVIPXISBFPN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H10ClN3O5/c17-10-7-8(5-6-12(10)21)18-14-13(15(22)19-16(14)23)9-3-1-2-4-11(9)20(24)25/h1-7,21H,(H2,18,19,22,23)
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| 化学名 |
3-(3-chloro-4-hydroxyanilino)-4-(2-nitrophenyl)pyrrole-2,5-dione
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| 别名 |
SB-415286; SB415286; SB 415286
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 72~100 mg/mL (200.2~278 mM)
Ethanol: ~72 mg/mL (~200.2 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.95 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7799 mL | 13.8997 mL | 27.7994 mL | |
| 5 mM | 0.5560 mL | 2.7799 mL | 5.5599 mL | |
| 10 mM | 0.2780 mL | 1.3900 mL | 2.7799 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
CDKL5/GSK3-IN-1
GSK-3β inhibitor 23
GSK3β-IN-1
GSK-3β inhibitor 25
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COA
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463611831
