| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PLK1 (IC50 = 200 pM); PLK3 (IC50 = 875 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：SBE 13 降低各种癌细胞系的细胞增殖，并导致 G2/M 停滞，随后发生细胞凋亡。在原代细胞中，SBE 13 不会损害细胞周期，从而损害原代细胞的增殖。 SBE13 与 Enzastaurin 组合可协同减少 HCT116(p53-/-) 细胞的细胞增殖并增强细胞凋亡诱导。激酶测定：为了测定 Plk1 和 Aurora A 激酶活性，在双胸苷阻断后在 SBE13 存在下释放 13 小时后裂解细胞，并使用如上所述的抗体从裂解物中免疫沉淀激酶。简而言之，每次免疫沉淀将 800 µg 总蛋白分别与 1.5 µg Plk1 抗体混合物、3 µg Plk2 抗体、3 µg Plk3 抗体或 5 µg Aurora A 抗体在旋转器上于 4°C 下孵育 2 小时。使用 Protein G 琼脂糖珠收集免疫沉淀蛋白。将 Plk1、Plk2 和 Plk3 免疫沉淀物与 1 µg 酪蛋白和 1 µCi [γ32-P]ATP 在激酶缓冲液中于 37°C 孵育 30 分钟。 Aurora A 免疫沉淀物与 0.5 µl 组蛋白和 1 µCi 的 [γ32-P]ATP 在激酶缓冲液中室温孵育 60 分钟。激酶测定的产物在 10% Bis-Tris-聚丙烯酰胺凝胶上分级，暴露 12 至 36 小时后通过放射自显影术观察磷酸化底物。对等量的免疫沉淀物进行蛋白质印迹分析，以确认激酶反应中 Plk1、Plk2、Plk3 或 Aurora A 蛋白的负载量相等。使用 λ 蛋白磷酸酶去磷酸化后，在 SBE13 存在下释放 13 小时后，对免疫沉淀的 Plk1 进行测定，并与内源免疫沉淀的 Plk1 的激酶活性进行比较。比较有去磷酸化和没有去磷酸化的 Plk1 激酶活性，并计算去磷酸化和“正常”内源免疫沉淀 Plk1 激酶活性之间的比率。细胞检测：细胞（HeLa、A431、HCT-15、HT-29、MCF-7、U2OS、LN-229、SKW 6.4、PC-3、Det-562、SK-BR-3、SK-OV-3 和A549nb 细胞）在传代培养一天后用 SBE13 处理。对照细胞与正常培养基一起孵育。 SBE13 的浓度范围为 1 nM–100 µM。通过处理后 24、48 和 72 小时的细胞计数确定每 6 孔 1 x 105 个细胞的生长率。每个时间点的细胞培养研究一式三份进行。
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| 酶活实验 |
在 SBE13 存在的情况下释放 13 小时后，裂解细胞，应用双胸苷封闭，并使用抗体从裂解物中免疫沉淀激酶，以测量 Plk1 激酶活性。总之，对 800 μg 总蛋白进行免疫沉淀，然后在旋转器上于 4°C 下与 1.5 μg Plk1 抗体混合物一起孵育 2 小时。 Protein A/G 琼脂糖珠用于免疫沉淀蛋白质收集过程。 Plk1 免疫沉淀物在含有酪蛋白 (1 μg) 和 [γ-32P]ATP (1 μCi) 的激酶缓冲液中于 37°C 孵育 30 分钟。激酶测定产物在 10% 双-三-聚丙烯酰胺凝胶上分级，暴露 12 至 36 小时后，通过放射自显影观察磷酸化底物。对等体积的免疫沉淀物进行蛋白质印迹分析，以验证 Plk1 蛋白在激酶反应中的负载量相等[1]。
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| 细胞实验 |
传代培养后一天，将 SBE13 应用于细胞。使用正常培养基来培养对照细胞。 SBE13 浓度范围为 1 nM 至 100 µM。通过在处理后24小时、48小时和72小时计数细胞，可以计算出每6孔1 x 105个细胞的生长率。使用细胞培养物一式三份地研究每个时间点。
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 分子式 |
C24H28CL2N2O4
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| 分子量 |
479.4
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| 精确质量 |
478.1426128
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| 元素分析 |
C, 60.13; H, 5.89; Cl, 14.79; N, 5.84; O, 13.35
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| CAS号 |
1052532-15-6
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| 相关CAS号 |
SBE13;775294-82-1
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| SMILES |
COC1=C(C=C(C=C1)CCNCC2=CC(=C(C=C2)OCC3=CN=C(C=C3)Cl)OC)OC.Cl
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| InChi Key |
QBGSVDJLQQXEGG-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H27ClN2O4.ClH/c1-28-20-7-4-17(12-22(20)29-2)10-11-26-14-18-5-8-21(23(13-18)30-3)31-16-19-6-9-24(25)27-15-19;/h4-9,12-13,15,26H,10-11,14,16H2,1-3H3;1H
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| 化学名 |
N-[[4-[(6-chloropyridin-3-yl)methoxy]-3-methoxyphenyl]methyl]-2-(3,4-dimethoxyphenyl)ethanamine;hydrochloride
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month Note: Please store this product in a sealed and protected environment, avoid exposure to moisture. |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
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| 溶解度 (体内) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0859 mL | 10.4297 mL | 20.8594 mL | |
| 5 mM | 0.4172 mL | 2.0859 mL | 4.1719 mL | |
| 10 mM | 0.2086 mL | 1.0430 mL | 2.0859 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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