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SELETALISIB

别名: Seletalisib; UCB-5857; UCB 5857; UCB5857 塞来利司; 塞来利西布；司来利塞UCB5857;UCB-5857;UCB 5857;Seletalisib
目录号: V3970 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
Seletalisib（原名 UCB-5857）是一种新型、有效、ATP 竞争性、选择性的 PI3Kδ 小分子抑制剂，IC50 值为 12 nM。
SELETALISIB CAS号: 1362850-20-1
产品类别: PI3K
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
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产品说明书
产品描述
Seletalisib（以前称为 UCB-5857）是一种新型、有效、ATP 竞争性、选择性小分子 PI3Kδ 抑制剂，IC50 值为 12 nM。与其他 I 类 PI3K 同工型相比，它表现出显着（24 至 303 倍）优先结合 PI3K。并且使用生化测试、先天性和适应性免疫的细胞测试以及体内大鼠模型检查了其有效性。炎。当 B 细胞系中的 B 细胞受体被激活时，seletalisib 能够防止蛋白激酶 B (AKT) 磷酸化。 Seletalisib 还可以阻止人中性粒细胞在受到 N-甲酰肽刺激时释放超氧化物，但在受到佛波醇肉豆蔻酸酯乙酸酯刺激时则不会，这表明它具有 PI3Kδ 特异性活性。暴露于塞达利西的外周血单核细胞 (PBMC) 和其他细胞类型没有显示出细胞毒性的迹象。适应性免疫的细胞测定结果表明，seletalisib 抑制人类 T 细胞从活化的 T 细胞中产生多种细胞因子。此外，seletalisib 还减少了 B 细胞增殖和细胞因子的产生。在 B 细胞激活和抗 IgE 介导的嗜碱性粒细胞脱颗粒后，Seletalisib 降低了人全血测定中 CD69 的表达。在抗 CD3 抗体诱导白细胞介素 2 释放的体内大鼠模型中，seletalisib 显示出剂量依赖性抑制。总的来说，这些数据将 seletalisib 定义为一种选择性 PI3K 抑制剂和潜在的治疗候选药物，用于治疗由促炎细胞因子分泌失调引起的自身免疫性疾病和 B 细胞恶性肿瘤。
生物活性&实验参考方法
靶点
PI3Kδ (IC50 = 12 nM); GSK-3α (IC50 = 1.5 nM)
A potent, ATP-competitive, and highly selective PI3K inhibitor called seletalisib can prevent AKT phosphorylation after the BCR is activated in a B-cell line. Seletalisib inhibits superoxide release from human neutrophils when N-formyl peptides (fMLP) are stimulated, but not when phorbol myristate acetate (PMA), suggesting that it has a PI3Kδ-specific activity. Neither PBMCs nor other cell types treated with seletalisib show any signs of cytotoxicity. Seletalisib prevents human T cells from producing a number of cytokines after they become activated. The differentiation of T cells into Th1, Th2, and Th17 subtypes is inhibited by seletalisib. Seletalisib also prevents B-cell growth and cytokine production. Seletalisib blocks basophil degranulation induced by anti-IgE and B-cell activation in human whole blood assays[1].
体外研究 (In Vitro)
一种名为 seletalisib 的有效、ATP 竞争性、高选择性 PI3K 抑制剂可以在 B 细胞系中 BCR 激活后阻止 AKT 磷酸化。当 N-甲酰肽 (fMLP) 受到刺激时，Seletalisib 会抑制人中性粒细胞释放超氧化物，但当佛波醇肉豆蔻酸酯乙酸酯 (PMA) 受到刺激时，Seletalisib 则不会，这表明它具有 PI3Kδ 特异性活性。用 seletalisib 处理的 PBMC 和其他细胞类型均未显示任何细胞毒性迹象。 Seletalisib 可防止人类 T 细胞在激活后产生多种细胞因子。 seletalisib 抑制 T 细胞分化为 Th1、Th2 和 Th17 亚型。 Seletalisib 还可以阻止 B 细胞生长和细胞因子产生。在人全血检测中，Seletalisib 可阻断抗 IgE 诱导的嗜碱性粒细胞脱粒和 B 细胞激活[1]。
在Ramos人B细胞系中，seletalisib有效抑制了抗IgM诱导的AKT磷酸化，IC50为15 nM（几何平均数；95% CI：9.3–23.5）。[1]
Seletalisib抑制fMLP刺激的人中性粒细胞超氧化物释放，IC50为16 nM（几何平均数；95% CI：11–24），但不抑制PMA刺激的超氧化物释放，表明其具有PI3Kδ特异性活性。[1]
在抗CD3刺激的人PBMCs中，seletalisib抑制IFNγ（IC50 = 54 nM）、IL-17（IC50 = 21 nM）和TNFα（IC50 = 31 nM）的分泌。在大鼠PBMCs中，它抑制抗CD3诱导的TNFα释放，IC50为22 nM。[1]
Seletalisib抑制屋尘螨（HDM）诱导的过敏供者PBMCs分泌IL-5和IL-13，平均IC50值分别为15 nM和2 nM。[1]
Seletalisib抑制抗IgM诱导的人B细胞增殖，IC50为16 nM（范围：10–19 nM）。[1]
Seletalisib抑制CpG ODN 2006诱导的纯化人B细胞释放IL-6和IL-10，IC50值分别为57 nM和18.1 nM。[1]
在人全血中，seletalisib抑制抗IgM诱导的B细胞CD69表达，IC50为57 nM（几何平均数；95% CI：22–143）。[1]
在人全血中，seletalisib抑制抗IgE诱导的嗜碱性粒细胞脱颗粒（通过CD63表达测量），IC50为35 nM（几何平均数；95% CI：27–45）。[1]
BioMAP分析显示，seletalisib选择性抑制免疫细胞反应（例如，BT共培养系统中的B细胞增殖、细胞因子和IgG产生），在PBMC测定中未显示细胞毒性，在非白细胞系统中也无活性，这与泛PI3K抑制剂形成对比。[1]
体内研究 (In Vivo)
Seletalisib 显着减少 TCR 刺激后大鼠释放的 IL-2 量。在所有测试剂量下均观察到塞拉利西布的抑制作用，在剂量水平≥1 mg/kg 时几乎达到完全抑制。 seletalisib 的体内作用很强，估计 IC50 值<10 nM[1]。
在Lewis大鼠抗CD3抗体诱导的IL-2释放模型中，在抗CD3攻击前30分钟口服给予seletalisib（0.1–10 mg/kg）可显著且剂量依赖性地抑制IL-2释放。在剂量≥1 mg/kg时几乎达到完全抑制。基于血药浓度-反应关系，估计的体内IL-2抑制IC50 < 10 nM。[1]
酶活实验
将 Seletalisib 溶解在 DMSO 中，并在浓度响应 (seletalisib) 中进行测试，以探索 PI3Kδ 特异性抑制与 I 类 PI3K 信号传导完全抑制相比的效果。此外，还在 BioMap BT 细胞系统中检查了 1000、100、10 和 1 nM 的 seletalisib 的作用。根据化合物如何影响细胞因子、生长因子、粘附分子和增殖终点等细胞读数水平，创建活性概况[1]。
使用竞争性时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）测定法评估seletalisib对PI3K亚型的抑制活性。在该测定中，PI3K酶活性将磷脂酰肌醇二磷酸（PIP2）转化为磷脂酰肌醇三磷酸（PIP3）。生成的PIP3与生物素化的PIP3示踪剂竞争结合GST标记的pleckstrin同源结构域蛋白。该复合物使用链霉亲和素-别藻蓝蛋白和铕标记的抗GST抗体进行检测，接近时产生TR-FRET信号。抑制PI3K会减少PIP3的产生，从而增加TR-FRET信号。实验步骤包括将化合物与PIP2和ATP预孵育，然后加入PI3K酶。孵育后，终止反应，加入检测试剂，测量TR-FRET信号。通过在不同ATP浓度（2、40、200和1000 µM）下进行测定，证实了seletalisib的ATP竞争性。[1]
使用Z’-LYTE FRET和Adapta通用激酶测定法，在10 µM的筛选浓度下进行了激酶选择性分析。[1]
细胞实验
将在无血清 RPMI 1640 中连续稀释的塞莱达西布和山羊抗人 F(ab)2 IgM 添加到铺在无血清 RPMI 1640 中的 Ramos 细胞中。将板孵育 10 分钟，置于冰上，然后将细胞离心将它们颗粒化。 MSD 测定用于鉴定细胞磷酸化的 AKT。
Ramos pAKT测定： 将Ramos细胞接种在无血清培养基中，用系列稀释的seletalisib处理，然后用抗IgM抗体刺激。短暂孵育后，裂解细胞，使用微尺度发现（MSD）免疫测定法定量磷酸化AKT（pAKT）水平。[1]
人中粒细胞超氧化物释放测定： 从人血中富集的中性粒细胞在含有超氧化物检测混合物（二氢细胞松弛素B、辣根过氧化物酶、叠氮化钠、Amplex Red）的PBS中与seletalisib一起孵育，并用fMLP或PMA刺激。孵育后，测量荧光强度以定量超氧化物释放。[1]
T细胞激活测定（人/大鼠）： 从人或大鼠血液中分离PBMCs。对于人测定，用抗CD3抗体包被板。将PBMCs和seletalisib加入板中，孵育48小时。然后收集培养上清液，使用MSD或ELISA试剂盒进行细胞因子分析（人：IFNγ、IL-17、TNFα；大鼠：TNFα）。[1]
屋尘螨（HDM）测定： 将HDM过敏供者的PBMCs与seletalisib和HDM提取物一起孵育6天。收集上清液，通过ELISA测量IL-5和IL-13水平。[1]
B细胞增殖测定： 通过CD19阳性选择从PBMCs中分离B细胞，用CFSE染色，并与丝裂霉素C处理的抗原呈递细胞共培养。用seletalisib处理细胞，并用抗IgM、IL-2和IL-10刺激。6天后，通过流式细胞术分析CD19+细胞中CFSE的稀释度以测量增殖。[1]
CpG诱导的B细胞因子测定： 纯化的CD19+ B细胞用seletalisib处理，并用CpG ODN 2006刺激48小时。收集上清液，通过ELISA测量IL-6和IL-10水平。[1]
全血CD69 B细胞激活测定： 将人全血等分试样与抗IgM和seletalisib一起孵育20小时。然后用抗CD19和抗CD69抗体染色细胞，裂解，并通过流式细胞术分析CD19+ B细胞上CD69的平均荧光强度。[1]
全血嗜碱性粒细胞脱颗粒测定： 将人全血与seletalisib一起孵育，然后用抗IgE刺激。孵育后，用抗体混合物（CD123、HLA-DR、CD63）染色细胞，裂解，并通过流式细胞术分析。将嗜碱性粒细胞圈定为SSC^lo、CD123+、HLA-DR-细胞，并测量CD63表面表达作为脱颗粒的标志。[1]
动物实验
大鼠：大鼠经口灌胃给予 seletalisib（0.1-10 mg/kg，500 μL）或溶剂，30 分钟后静脉注射 200 μL 抗 CD3 抗体。口服和静脉注射的溶剂分别为甲基纤维素和生理盐水。测定 IL-2 和 seletalisib 的水平[1]。
抗 CD3 诱导的 Lewis 大鼠 IL-2 释放：成年雄性 Lewis 大鼠（6-8 周龄）经口灌胃给予 seletalisib（0.1、1、3 或 10 mg/kg）或溶剂（0.5% 甲基纤维素），体积为 500 μL。30 分钟后，大鼠接受静脉注射抗 CD3 抗体（100 μg/kg，200 μL 生理盐水）。阴性对照组同时接受口服和静脉注射溶剂。阳性对照组接受口服赋形剂和静脉注射抗CD3抗体。注射抗CD3抗体90分钟后，对大鼠进行麻醉，通过心脏末端穿刺采集血液至EDTA或肝素抗凝管中，并制备血浆用于ELISA法测定IL-2。同时，血液样本也用于LC-MS/MS法分析seletalisib浓度。[1]
参考文献

[1]. Seletalisib: Characterization of a Novel, Potent, and Selective Inhibitor of PI3Kδ. J Pharmacol Exp Ther. 2017 Apr 25. pii: jpet.116.237347.
其他信息
Seletalisib 已用于研究原发性干燥综合征的治疗和基础科学的临床试验。
Seletalisib（UCB-...）是一种新型、高效、选择性且与 ATP 竞争的小分子 PI3Kδ 亚型抑制剂。[1]
它选择性抑制 PI3Kδ，而 PI3Kδ 主要表达于白细胞，并位于 B 细胞受体 (BCR)、T 细胞受体 (TCR) 和 Fcε 受体 I (FcεRI) 等免疫受体的下游，这表明其具有治疗 B 细胞恶性肿瘤和自身免疫/炎症性疾病（例如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、银屑病）的潜力。[1]
它已进入临床试验阶段。截至本文发表时，该药物正在健康志愿者和银屑病患者（NCT02303509）以及原发性干燥综合征患者（NCT02610543）中进行评估。[1]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C23H14CLF3N6O
分子量
482.85
精确质量
482.086
元素分析
C, 57.21; H, 2.92; Cl, 7.34; F, 11.80; N, 17.41; O, 3.31
CAS号
1362850-20-1
相关CAS号
1362850-20-1
PubChem CID
56928390
外观&性状
White to off-white solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
710.8±60.0 °C at 760 mmHg
闪点
383.7±32.9 °C
蒸汽压
0.0±2.3 mmHg at 25°C
折射率
1.692
LogP
2.21
tPSA
89
氢键供体(HBD)数目
1
氢键受体(HBA)数目
9
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
34
分子复杂度/Complexity
690
定义原子立体中心数目
1
SMILES
ClC1=CC=CC2=C1N=C(C1=CC=C[N+](=C1)[O-])C(=C2)[C@H](C(F)(F)F)NC1C2C(=CC=CN=2)N=CN=1
InChi Key
LNLJHGXOFYUARS-OAQYLSRUSA-N
InChi Code
InChI=1S/C23H14ClF3N6O/c24-16-6-1-4-13-10-15(18(31-19(13)16)14-5-3-9-33(34)11-14)21(23(25,26)27)32-22-20-17(29-12-30-22)7-2-8-28-20/h1-12,21H,(H,29,30,32)/t21-/m1/s1
化学名
(R)-3-(8-chloro-3-(2,2,2-trifluoro-1-(pyrido[3,2-d]pyrimidin-4-ylamino)ethyl)quinolin-2-yl)pyridine 1-oxide
别名
Seletalisib; UCB-5857; UCB 5857; UCB5857
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: ~100 mg/mL
Water: <1 mg/mL
Ethanol: >100 mg/mL
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.18 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0710 mL 10.3552 mL 20.7104 mL
5 mM 0.4142 mL 2.0710 mL 4.1421 mL
10 mM 0.2071 mL 1.0355 mL 2.0710 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

临床试验信息
UCB Proof of Concept Study in Patients With Primary Sjögren's Syndrome
CTID: NCT02610543
Phase: Phase 2
Status: Terminated
Date: 2020-12-01
Study to Assess the Safety, Tolerability, Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Profiles of UCB5857 in Healthy Subjects
CTID: NCT02207595
Phase: Phase 1
Status: Completed
Date: 2015-03-05
AN OPEN-LABEL, EXPLORATORY, MULTICENTER, EXTENSION STUDY TO EVALUATE THE LONG-TERM SAFETY, TOLERABILITY, PHARMACOKINETICS AND EFFICACY OF UCB5857 IN SUBJECTS WITH ACTIVATED PHOSPHOINOSITIDE 3 KINASE (PI3K) DELTA SYNDROME (APDS)
EudraCT: 2015-005541-30
Phase: Phase 3
Status: Completed, Prematurely Ended
Date: 2016-08-23
AN OPEN-LABEL EXPLORATORY STUDY OF UCB5857 IN SUBJECTS WITH ACTIVATED PHOSPHOINOSITIDE 3 KINASE (PI3K) DELTA SYNDROME (APDS)
EudraCT: 2015-002900-10
Phase: Phase 1
Status: Completed
Date: 2016-01-29
A RANDOMIZED, DOUBLE-BLIND, PLACEBO-CONTROLLED, PROOF-OF-CONCEPT STUDY TO EVALUATE THE EFFICACY AND SAFETY OF UCB5857 OVER 12 WEEKS IN SUBJECTS WITH PRIMARY SJOGREN’S SYNDROME
EudraCT: 2014-004523-51
Phase: Phase 2
Status: Completed, Prematurely Ended
Date: 2015-05-18
生物数据图片

  • SELETALISIB

    Seletalisib is a selective, ATP-competitive PI3Kδinhibitor.

    SELETALISIB

    Seletalisib is a potent inhibitor of IL-2 release in a rat model of inflammation (primary pharmacology model).2017 Jun;361(3):429-440

  • SELETALISIB

    Seletalisib shows potent and selective cellular inhibition of PI3Kδsignaling.

    SELETALISIB

    Seletalisib shows potent activity in human whole blood assays.2017 Jun;361(3):429-440

  • SELETALISIB

    Seletalisib shows anti-inflammatory activity in cellular assays of adaptive immunity.2017 Jun;361(3):429-440

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