| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p38α (IC50 = 5 nM)
Skepinone-L (CBS3830) is a highly selective inhibitor of the α isoform of p38 mitogen-activated protein kinase (p38α MAPK), with an IC50 value of 10 nM for recombinant human p38α. It shows no significant inhibition (IC50 > 10 μM) against other MAPK family members including p38β, p38γ, p38δ, JNK1, JNK2, ERK1, and ERK2 [1] Skepinone-L (CBS3830) specifically inhibits p38α MAPK activity in cells, with no detectable effect on the activity of p38β MAPK even at concentrations up to 1 μM [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Skepinone-L 降低由 p38 MAPK 控制的 TNF-α、IL-1β 和 IL-10 浓度，IC50 范围为 30 至 50 nM，并通过 p38 MAPK 对 HSP27 (Ser82) 磷酸化表现出浓度依赖性抑制途径。[1] Skepinone-L (1 μM) 通过抑制血小板 p38 MAPK 底物 Hsp27 的磷酸化来减少血小板分泌和聚集，而 Hsp27 可通过 CRP、凝血酶或血栓素 A2 类似物 U-46619 刺激而激活。 [2]
1. 在经茴香霉素（p38激活剂）处理的HeLa细胞中，Skepinone-L（10 nM、100 nM）呈剂量依赖性抑制p38α MAPK及其下游底物热休克蛋白27（HSP27）的磷酸化。100 nM浓度下，p-p38α和p-HSP27的磷酸化水平较茴香霉素刺激对照组分别降低约90%和85%[1] 2. 在经脂多糖（LPS）刺激的RAW264.7小鼠巨噬细胞中，Skepinone-L（0.1 μM、1 μM、10 μM）呈剂量依赖性显著抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的释放。1 μM浓度下，TNF-α分泌量较LPS处理对照组降低约70%；10 μM浓度下，抑制率达约95%[2] 3. HeLa细胞免疫荧光分析显示，Skepinone-L（100 nM）可阻断茴香霉素诱导的p38α MAPK核转位。p38α核定位阳性细胞比例从茴香霉素组的约80%降至药物处理组的约15%[1] 4. 在经白细胞介素-1β（IL-1β）刺激的原代人皮肤成纤维细胞中，Skepinone-L（10 nM、100 nM）可抑制p38α的关键下游效应分子MAPK激活蛋白激酶2（MAPKAPK2）的磷酸化。100 nM浓度下，p-MAPKAPK2水平降低约80%[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在活生物体中，Skepinone-L 可抑制 TNF 诱导的 Gal/LPS 释放 77%。 [1]
1. 在LPS诱导的C57BL/6小鼠全身性炎症模型中，于LPS给药前30分钟腹腔注射Skepinone-L（1 mg/kg、5 mg/kg），可剂量依赖性降低血清TNF-α水平。1 mg/kg剂量下，血清TNF-α较LPS对照组降低约45%；5 mg/kg剂量下，降低幅度达约75%（LPS注射后90分钟检测）[2] 2. 在同一小鼠模型中，Skepinone-L（5 mg/kg，腹腔注射）还可抑制肝脏和脾脏组织中p38α的磷酸化。蛋白质印迹分析显示，肝脏组织中p-p38α水平较LPS处理组降低约60%[2] |
| 酶活实验 |
Skepinone-L (CBS3830)，第一个 ATP 竞争性 p38 MAPK 抑制剂，具有出色的体内功效和选择性。因此，Skepinone-L (CBS3830) 是一种有价值的化学探针。生物。研究，它可能会促进一类独特激酶抑制剂的开发。
1. 重组人p38α MAPK激酶活性测定：实验在含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl2、1 mM二硫苏糖醇（DTT）和25 μM ATP的反应缓冲液中进行。以ATF2衍生的合成肽（序列：H2N-LKRQILSEQETRAR-COOH）为底物（终浓度10 μM）。将不同浓度的Skepinone-L（0.1 nM~10 μM）与重组p38α（10 nM）在30°C下预孵育10分钟，加入底物-ATP混合物启动反应，继续在30°C孵育30分钟。采用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）法检测磷酸化底物的量，通过非线性回归分析拟合抑制曲线，计算IC50值[1] 2. p38β MAPK选择性测定：实验方案与p38α测定一致，仅将重组人p38α（10 nM）替换为重组人p38β（10 nM）。测试浓度高达10 μM的Skepinone-L，未检测到对p38β活性的显著抑制[1] |
| 细胞实验 |
1. HeLa细胞p-p38α/p-HSP27蛋白质印迹测定：将HeLa细胞以2×10⁵个/孔的密度接种于6孔板，用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基培养过夜。随后用无FBS的DMEM培养基饥饿细胞16小时，向孔中加入不同浓度的Skepinone-L（10 nM、100 nM），在37°C孵育1小时。加入茴香霉素（200 ng/mL）激活p38α，继续孵育30分钟。收集细胞，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解，采用BCA法测定蛋白质浓度。将等量蛋白质（40 μg）通过10% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜。膜用5%脱脂牛奶室温封闭1小时，随后与抗p-p38α（Thr180/Tyr182）、总p38α、p-HSP27（Ser82）和总HSP27的一抗在4°C孵育过夜。用TBST洗涤后，加入HRP偶联的二抗室温孵育1小时，采用ECL检测系统显影蛋白条带，用ImageQuant软件定量条带强度[1]
2. RAW264.7细胞TNF-α ELISA测定：将RAW264.7小鼠巨噬细胞以5×10⁴个/孔的密度接种于24孔板，用含10% FBS的RPMI 1640培养基培养过夜。加入Skepinone-L（0.1 μM、1 μM、10 μM）孵育1小时，再加入LPS（100 ng/mL）刺激TNF-α分泌，继续在37°C孵育6小时。收集细胞培养上清，在4°C下以1000×g离心5分钟去除细胞碎片。采用小鼠TNF-α夹心ELISA试剂盒按说明书步骤检测上清中TNF-α浓度，用酶标仪在450 nm处读取吸光度，根据标准曲线计算TNF-α水平[2] 3. HeLa细胞p38α免疫荧光测定：将HeLa细胞以5×10⁴个/孔的密度接种于含盖玻片的24孔板，培养过夜。细胞饥饿16小时后，用Skepinone-L（100 nM）处理1小时，再加入茴香霉素（200 ng/mL）处理30分钟。用4%多聚甲醛室温固定细胞15分钟，0.1% Triton X-100透化10分钟，3% BSA封闭1小时。加入抗p38α一抗在4°C孵育过夜，洗涤后加入Alexa Fluor 488偶联的二抗室温孵育1小时，DAPI染色细胞核5分钟。将盖玻片封片于载玻片上，用共聚焦激光扫描显微镜观察p38α的定位，在5个随机视野（每个视野≥100个细胞）中计数p38α核定位阳性细胞的百分比[1] |
| 动物实验 |
小鼠
~3 mg/kg 口服给药 1. C57BL/6 小鼠 LPS 诱导炎症模型：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄，体重 20-25 g）随机分为三组：溶剂对照组、Skepinone-L（1 mg/kg）组和Skepinone-L（5 mg/kg）组（每组 n=6）。Skepinone-L 溶于由 10% DMSO、40% Cremophor EL 和 50% 生理盐水组成的溶剂中。药物或溶剂通过腹腔注射给药（注射量：10 μL/g 体重）。给药 30 分钟后，所有小鼠均腹腔注射 LPS（10 mg/kg，溶于生理盐水）以诱导全身炎症。 LPS注射90分钟后，用异氟烷麻醉小鼠，并通过心脏穿刺采集血液。血液样本在4℃下以3000×g离心15分钟分离血清，并将血清储存于-80℃直至进行TNF-α测定。采血后，处死小鼠，取出肝脏和脾脏组织，液氮速冻后储存于-80℃，用于后续的Western blot分析[2]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在C57BL/6小鼠炎症模型中，腹腔注射Skepinone-L（1 mg/kg和5 mg/kg）后24小时内，小鼠体重未发生显著变化。与溶剂对照组相比，药物治疗组未观察到任何异常行为（如嗜睡、食欲不振或运动功能障碍）[2]
2. 给药24小时后，Skepinone-L治疗组小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐和尿素氮水平均在正常生理范围内，表明未观察到明显的急性肝肾毒性[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. Skepinone-L (CBS3830) 是一种具有独特化学结构的小分子抑制剂，它与 p38α MAPK 的 ATP 结合口袋结合，诱导 p38α 激活环的构象变化，从而稳定激酶的非活性形式。这种机制使其对 p38α 的选择性高于其他 p38 亚型和 MAPK 家族成员 [1]
2. 与早期的 p38 MAPK 抑制剂（例如 SB203580）相比，Skepinone-L 在体外活性和炎症模型中的体内疗效均有所提高，且未检测到对相关激酶的脱靶效应，使其成为研究 p38α 介导的生物学过程的一种很有前景的工具化合物 [1] 3. Skepinone-L 通过抑制免疫细胞（例如巨噬细胞）中的 p38α 活性并减少促炎细胞因子（例如 TNF-α）的产生，从而抑制小鼠 LPS 诱导的全身性炎症，表明其在炎症性疾病（例如脓毒症、类风湿性关节炎）中具有潜在的治疗应用价值 [2] |
| 分子式 |
C24H21F2NO4
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|---|---|---|
| 分子量 |
425.42
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| 精确质量 |
425.143
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| 元素分析 |
C, 67.76; H, 4.98; F, 8.93; N, 3.29; O, 15.04
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| CAS号 |
1221485-83-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
45279963
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
629.0±55.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
334.2±31.5 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.646
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| LogP |
4.95
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| tPSA |
78.79
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
608
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=C1C2=CC(OC[C@@H](CO)O)=CC=C2CCC3=C1C=CC(NC4=CC=C(C=C4F)F)=C3
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| InChi Key |
HXMGCTFLLWPVFM-GOSISDBHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H21F2NO4/c25-16-4-8-23(22(26)10-16)27-17-5-7-20-15(9-17)2-1-14-3-6-19(11-21(14)24(20)30)31-13-18(29)12-28/h3-11,18,27-29H,1-2,12-13H2/t18-/m1/s1
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| 化学名 |
13-(2,4-difluoroanilino)-5-[(2R)-2,3-dihydroxypropoxy]tricyclo[9.4.0.03,8]pentadeca-1(11),3(8),4,6,12,14-hexaen-2-one
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| 别名 |
CBS3830; CBS-3830; CBS 3830; Skepinone-L
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 0.5% methylcellulose: 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3506 mL | 11.7531 mL | 23.5062 mL | |
| 5 mM | 0.4701 mL | 2.3506 mL | 4.7012 mL | |
| 10 mM | 0.2351 mL | 1.1753 mL | 2.3506 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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BChE/p38-α MAPK-IN-1
p38 Kinase-IN-9
MKK6 SDTD Recombinant Human Active Protein Kinase
BMS-626531
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463611831
