p38 MAPK; TNF-α; IL-1 (IC50 = 1 μM)
p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK): SKF-86002 (chemical name: 6-(4-fluorophenyl)-2,3-dihydro-5-(4-pyridinyl)imidazo(2,1-b)thiazole) is a specific inhibitor of p38 MAPK; no specific Ki/IC₅₀ values were provided in the literature[1, 4]
- Cyclooxygenase (COX, including prostaglandin H2 synthase): SKF-86002 inhibits COX activity, with IC₅₀ values of 120 μmol/L (for purified prostaglandin H2 synthase), 70 μmol/L (for prostanoid production in rat basophilic leukemia [RBL-1] cells), 100 μmol/L (for prostanoid production in RBL-1 cell sonicate), and 1 μmol/L (for prostanoid production in human monocytes)[2]
- Lipoxygenase (LOX, including 5-lipoxygenase): SKF-86002 inhibits LOX activity, with IC₅₀ values of 10 μmol/L (for dihydroxyeicosatetraenoic acid [diHETE] and 5-hydroxyeicosatetraenoic acid [5-HETE] generation in RBL-1 cell high-speed supernatant), 20 μmol/L (for leukotriene B4 [LTB4] generation in human neutrophils), 20 μmol/L (for leukotriene C4 [LTC4] generation in human monocytes), and 40 μmol/L (for 5-HETE production in RBL-1 cells)[2]

非甾体类抗炎药 SK&F 86002 [5-(4-吡啶基)-6 (4-氟苯基)-2,3-二氢咪唑(2,1-b)噻唑]对类二十烷酸体外产生的影响并描述了体内炎症反应。

---

抑制p38 MAPK介导的中性粒细胞凋亡：应激刺激（紫外线、高渗、鞘氨醇）可诱导人中性粒细胞凋亡并激活p38 MAPK。用SKF-86002（具体浓度未详述）处理可抑制p38 MAPK激活，进而阻断应激诱导的中性粒细胞凋亡；但SKF-86002对Fas抗体诱导的凋亡或自发性凋亡（不依赖p38 MAPK）无影响。用半胱天冬酶（caspase）抑制剂（Val-Ala-Asp-氟甲基酮或Asp-Glu-Val-Asp-氟甲基酮）预处理可抑制所有刺激诱导的凋亡，表明p38 MAPK依赖和非依赖途径均需caspase激活[1]
- 调节IL-4刺激单核细胞中CD23的表达：SKF-86002可浓度依赖性降低IL-4刺激的人单核细胞和U937细胞（人单核细胞系）中可溶性CD23水平。与金属蛋白酶抑制剂batimastat（直接阻断CD23水解并升高表面完整CD23 [iCD23]）不同，SKF-86002可降低表面iCD23表达（流式细胞术检测）和总细胞相关CD23蛋白水平（Western blot检测），但不影响CD23 mRNA水平（Northern blot检测）。IL-4可诱导p38 MAPK及其底物MAPKAPK-2的晚期（>4小时）激活，该过程可被SKF-86002阻断，与CD23表达抑制效应一致[4]
- 双重抑制花生四烯酸代谢：SKF-86002可同时抑制COX和LOX介导的类花生酸生成。COX活性抑制方面：可抑制前列腺素H2合酶活性及RBL-1细胞、RBL-1细胞匀浆、人单核细胞中前列腺素类生成（IC₅₀值见作用靶点部分）；LOX活性抑制方面：可减少RBL-1细胞组分、人中性粒细胞、人单核细胞中5-LOX产物（diHETE、5-HETE、LTB4、LTC4）生成（IC₅₀值见作用靶点部分）[2]

啮齿动物模型中的抗炎活性：SKF-86002口服给药（具体剂量范围未详述）在多种体内模型中表现出抗炎效应：
1. 抑制大鼠爪部角叉菜胶诱导水肿、小鼠耳部和大鼠爪部花生四烯酸诱导水肿[2, 5]
2. 减少小鼠腹腔角叉菜胶诱导细胞浸润和大鼠气囊花生四烯酸诱导细胞浸润[2]
3. 预防大鼠佐剂诱导关节炎（AA，含免疫和非免疫介导炎症）发生，并减轻AA和II型胶原诱导关节炎的已建立炎症[5]
4. 抑制角叉菜胶诱导水肿的已建立炎症和血小板活化因子（PAF）诱导水肿（此类模型对萘普生、吲哚美辛等选择性COX抑制剂不敏感）[5]
5. 抑制致敏动物经纯化蛋白衍生物激发的免疫介导炎症反应（吲哚美辛无此效应）[5]
- 小鼠中的镇痛活性：SKF-86002可剂量依赖性产生小鼠镇痛效应（具体镇痛实验类型和剂量未详述），且该效应不能被阿片受体拮抗剂纳曲酮逆转，表明其不通过阿片受体介导[5]

前列腺素 H2 (PGH2) 合酶活性、大鼠嗜碱性白血病 (RBL-1) 细胞 (IC50 70 µM) 产生的前列腺素、这些细胞的超声处理 (IC50 100 µM) 和人单核细胞 (IC50 1 µM) 均被 SK&F 抑制86002（IC50 120 微摩尔）。 RBL-1 细胞的高速上清液部分产生二羟基二十碳四烯酸 (diHETE) 和 5-羟基二十碳四烯酸 (5-HETE)，两者均被 SK&F 86002 抑制 (IC50 10 microM)。

---

COX（前列腺素H2合酶）活性实验：将纯化的前列腺素H2合酶或细胞/组织组分（RBL-1细胞匀浆、人单核细胞裂解物）与花生四烯酸底物及不同浓度的SKF-86002共同孵育。在37°C孵育特定时间（如15-30分钟）后，采用放射免疫分析（RIA）或酶联免疫吸附实验（ELISA）检测前列腺素H2（或其稳定代谢产物如前列腺素E2）的生成量，通过抑制率-药物浓度曲线计算IC₅₀值[2]
- LOX（5-脂氧合酶）活性实验：将RBL-1细胞高速上清（富含5-LOX）或完整细胞（人中性粒细胞、人单核细胞、RBL-1细胞）与花生四烯酸及不同浓度的SKF-86002共同孵育。在37°C孵育20-60分钟后，采用高效液相色谱（HPLC）紫外检测或RIA定量LOX产物（5-HETE、diHETE、LTB4、LTC4），根据产物抑制的量效曲线确定IC₅₀值[2]
- p38 MAPK活性实验：人中性粒细胞或HL-60细胞（向中性粒细胞表型分化）在存在或不存在SKF-86002的条件下，用应激刺激（紫外线、高渗、鞘氨醇）处理。裂解细胞后，用特异性抗体免疫沉淀p38 MAPK，将免疫沉淀的p38 MAPK与合成底物（如髓鞘碱性蛋白[MBP]）和[γ-³²P]ATP共同孵育。反应后将混合物点样到磷酸纤维素纸上，通过闪烁计数器检测放射性强度以评估激酶活性，对比溶媒处理组计算SKF-86002对p38 MAPK活性的抑制率[1]

使用人中性粒细胞产生的白三烯 B4 (LTB4) (IC50 20 µM)、人单核细胞产生的白三烯 C4 (LTC4) (IC50 20 µM) 和 RBL-1 细胞产生的 5-HETE (IC50 40 µM) 来确定SK&F 86002 在减少细胞产生 5-脂氧合酶产品方面的有效性。通过作用于对选择性环氧合酶抑制剂具有抗性的炎症模型，SK&F 86002 的体内抗炎活性支持花生四烯酸代谢的双重抑制。 SK&F 86002 和菲尼酮可抑制花生四烯酸诱导的小鼠耳部和大鼠爪子水肿的影响，以及小鼠腹膜中角叉菜胶和大鼠气囊中花生四烯酸引起的细胞浸润，但选择性环加氧酶抑制剂则不起作用萘普生和吲哚美辛。

---

人中性粒细胞凋亡实验：从外周血中分离人中性粒细胞并体外培养。应激诱导凋亡实验：用紫外线（特定剂量：如20 J/m²）、高渗培养基（如500 mmol/L山梨醇）或鞘氨醇（特定浓度：如20 μmol/L）处理细胞，同时加入或不加入SKF-86002（特定浓度：如1-10 μmol/L）；Fas抗体诱导凋亡实验：用Fas抗体（特定浓度）处理细胞，同时加入或不加入SKF-86002。培养4-24小时后，通过形态学观察（Hoechst染色观察核固缩）、流式细胞术（Annexin V/PI染色）或DNA片段化实验（琼脂糖凝胶电泳）评估凋亡。用caspase抑制剂（Val-Ala-Asp-氟甲基酮或Asp-Glu-Val-Asp-氟甲基酮，10-50 μmol/L）预处理验证caspase的作用[1]
- IL-4刺激单核细胞/U937细胞CD23表达实验：从外周血分离人单核细胞，U937细胞（人单核细胞系）用RPMI 1640培养基培养。用重组人IL-4（特定浓度：如10 ng/mL）刺激细胞，同时加入不同浓度的SKF-86002（如0.1-20 μmol/L）。培养24-48小时后：
1. 用ELISA检测培养上清中可溶性CD23[4]
2. 用荧光标记抗CD23抗体通过流式细胞术检测表面iCD23[4]
3. 通过Western blot分析总细胞相关CD23蛋白（细胞裂解物经SDS-PAGE分离、转膜、抗CD23抗体孵育后化学发光显影）[4]
4. 通过Northern blot定量CD23 mRNA（提取总RNA，琼脂糖凝胶电泳分离、转尼龙膜，与放射性标记CD23 cDNA探针杂交后放射自显影）[4]
- HL-60细胞分化及激酶活性实验：用二甲基亚砜（DMSO，特定浓度：如1.25%）处理HL-60细胞5-7天，诱导其向中性粒细胞表型分化。分化后的HL-60细胞在存在或不存在SKF-86002的条件下，用甲酰甲硫氨酰亮氨酰苯丙氨酸（fMLP，特定浓度：如100 nmol/L）或应激刺激（紫外线、高渗）处理。制备细胞裂解物，通过免疫沉淀激酶实验（p38 MAPK以MBP为底物，JNK以c-Jun为底物）检测p38 MAPK/c-Jun氨基末端激酶（JNK）活性，评估分化对激酶激活及SKF-86002抑制效应的影响[1]

Lewis rats, with adjuvant-induced arthritis (AA)[5]
10 mg/kg, 30 mg/kg, 90 mg/kg
Oral administration, daily, for 22 days

---

Rodent anti-inflammatory models:
1. Carrageenan-induced edema (rat paw/mouse peritoneum): Male rats (e.g., Sprague-Dawley) or mice (e.g., CD-1) were used. SKF-86002 was dissolved in an appropriate solvent (e.g., 0.5% carboxymethyl cellulose sodium [CMC-Na] or DMSO diluted with saline) and administered orally (gavage) at doses of 1-100 mg/kg 30-60 minutes before carrageenan injection. For paw edema: 1% carrageenan (0.1 mL) was injected into the hind paw, and paw volume was measured using a plethysmometer at 1-4 hours post-injection. For peritoneal cell infiltration: 1% carrageenan (1 mL) was injected intraperitoneally, and 4 hours later, peritoneal exudate was collected to count total leukocytes[2, 5]
2. Arachidonic acid-induced edema (mouse ear/rat paw): SKF-86002 was administered orally (1-50 mg/kg) 30 minutes before topical application of arachidonic acid (e.g., 1 mg/20 μL in acetone) to mouse ears or subcutaneous injection of arachidonic acid (e.g., 100 μg/paw) to rat paws. Ear thickness (mouse) or paw volume (rat) was measured 1-2 hours post-stimulation[2, 5]
3. Adjuvant-induced arthritis (AA) in rats: Male Lewis rats were injected with Freund's complete adjuvant (0.1 mL) into the hind paw to induce AA. SKF-86002 was administered orally (1-30 mg/kg) once daily starting from the day of adjuvant injection (for prevention) or from day 10 post-adjuvant (for established inflammation). Paw volume and arthritis score (based on redness, swelling, and joint involvement) were measured every 2-3 days for 21 days[5]
4. Collagen type II-induced arthritis in rats: Male rats were immunized with bovine collagen type II (emulsified in Freund's incomplete adjuvant) to induce arthritis. SKF-86002 was administered orally (1-30 mg/kg) once daily, and arthritis severity was evaluated by paw volume and clinical score[5]
- Mouse analgesic assay: Male mice (e.g., Swiss-Webster) were used. SKF-86002 was administered orally (1-50 mg/kg) 30 minutes before the analgesic test (e.g., acetic acid writhing test: 0.6% acetic acid injected intraperitoneally, number of writhes counted for 10-20 minutes; or hot plate test: latency to paw licking/jumping measured at 55°C). For naltexone reversal: naltexone (1 mg/kg) was injected subcutaneously 15 minutes before SKF-86002 administration[5]

[1]. p38 mitogen-activated protein kinase-dependent and -independent intracellular signal transduction pathways leading to apoptosis in human neutrophils. J Biol Chem. 1998 Apr 3;273(14):8389-97.

[2]. SK&F 86002: a structurally novel anti-inflammatory agent that inhibits lipoxygenase- and cyclooxygenase-mediated metabolism of arachidonic acid. Biochem Pharmacol. 1987 Oct 15;36(20):3463-70.

[3]. A protein kinase involved in the regulation of inflammatory cytokine biosynthesis. Nature. 1994;372(6508):739-746.

[4]. Inhibitors of the p38 mitogen-activated kinase modulate IL-4 induction of low affinity IgE receptor (CD23) in human monocytes. J Immunol. 1998 Dec 1;161(11):6005-13.

[5]. Pharmacologic characterization of the antiinflammatory properties of a new dual inhibitor of lipoxygenase and cyclooxygenase. Agents Actions. 1987 Feb;20(1-2):113-23.

6-(4-氟苯基)-5-吡啶-4-基-2,3-二氢咪唑并[2,1-b]噻唑属于咪唑类化合物。

---

SKF-86002 是一种结构新颖的咪唑并噻唑衍生物，化学名称为 6-(4-氟苯基)-2,3-二氢-5-(4-吡啶基)咪唑并[2,5]噻唑。
- SKF-86002 的抗炎机制归因于其对 COX 和 LOX 介导的花生四烯酸代谢的双重抑制作用，这使其区别于在 LOX 依赖性炎症模型中缺乏活性的选择性 COX 抑制剂（例如萘普生、吲哚美辛）[2,5]。
- SKF-86002 可调节 IL-4 刺激的 CD23 表达。单核细胞通过 p38 MAPK 抑制发挥作用。由于抗 CD23 抗体可缓解小鼠胶原诱导性关节炎，因此该效应提示 SKF-86002 除了抑制类花生酸外，还具有其他抗炎机制[4]。- 在人中性粒细胞中，SKF-86002 特异性阻断 p38 MAPK 依赖性应激诱导的细胞凋亡，但不阻断 p38 MAPK 非依赖性抗 Fas/自发性细胞凋亡，表明 p38 MAPK 对细胞凋亡的调控具有细胞类型特异性和刺激特异性[1]。- SKF-86002 口服有效，在啮齿动物中表现出抗炎和镇痛特性，且其镇痛作用不依赖于阿片受体[5]。

C16H12FN3S

297.35

297.073

C, 64.63; H, 4.07; F, 6.39; N, 14.13; S, 10.78

72873-74-6

SKF-86002 dihydrochloride;116339-68-5

5228

Coffee solid powder

1.4±0.1 g/cm3

476.1±55.0 °C at 760 mmHg

189-190ºC(lit.)

241.7±31.5 °C

0.0±1.2 mmHg at 25°C

1.713

1.9

56.01

0

4

2

21

355

0

S1C([H])([H])C([H])([H])N2C1=NC(C1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1[H])F)=C2C1C([H])=C([H])N=C([H])C=1[H]

YOELZIQOLWZLQC-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C16H12FN3S/c17-13-3-1-11(2-4-13)14-15(12-5-7-18-8-6-12)20-9-10-21-16(20)19-14/h1-8H,9-10H2

6-(4-fluorophenyl)-5-pyridin-4-yl-2,3-dihydroimidazo[2,1-b][1,3]thiazole

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。