| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
STING (stimulator of interferon genes)
Stimulator of interferon genes (STING) (human STING [hSTING, WT] EC50 = 0.5 μM; mouse STING [mSTING] EC50 = 1.0 μM); Active on hSTING variants (R232H EC50 = 0.7 μM, A260V EC50 = 0.9 μM) with no activity on STING-negative cells [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
通过使用相同的闭合构象感觉，SR-717 激活 STING，为在许多环境中研究系统性 STING 激动剂提供了可能性，包括作为抗肿瘤免疫 [1]。通过 STING 信号传导，SR-717 (3.8 μM) 刺激 THP1 细胞和原代人外周血单核细胞中 PD-L1 的表达 [1]。
SR-717 lithium 在稳定表达hSTING（野生型或突变体）或mSTING的HEK293报告细胞中强效激活STING，诱导IFN-β启动子活性，EC50值分别为0.5 μM（hSTING）和1.0 μM（mSTING）[1] - 在小鼠骨髓来源树突状细胞（BMDCs）中，SR-717 lithium（0.1-10 μM）呈剂量依赖性诱导IFN-β分泌（3 μM时最大增加45倍）和CXCL10分泌（3 μM时最大增加38倍）[1] - Western blot分析显示，SR-717 lithium（1-3 μM）激活STING下游信号通路，增加BMDCs和人外周血单个核细胞（PBMCs）中TBK1和IRF3的磷酸化水平 [1] - SR-717 lithium（3 μM）促进BMDCs成熟，较溶媒对照组显著增加CD80（2.8倍）、CD86（3.2倍）和MHC II（2.5倍）的表面表达 [1] - 在浓度高达30 μM时，SR-717 lithium 对B16-F10、MC38或4T1肿瘤细胞无直接细胞毒性，其抗肿瘤作用通过激活免疫系统介导 [1] - 在人PBMCs中，SR-717 lithium（1-3 μM）诱导IFN-β分泌（3 μM时增加12倍）并激活CD8+ T细胞增殖 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
SR-717（30 mg/kg 腹腔注射，每天一次，持续一周）在 WT 或 Stinggt/gt 小鼠中表现出抗肿瘤作用 [1]。除了促进相关组织中 CD8+ T 细胞、杀伤细胞和原核细胞的自然激活以及交叉引发之外，SR-717（腹腔注射 30 mg/kg，持续 7 天）还具有抗肿瘤功效 [1]。
在携带B16-F10黑色素瘤异种移植瘤的C57BL/6小鼠中，静脉注射SR-717 lithium（10 mg/kg、30 mg/kg，每3天1次，共4次）呈剂量依赖性抑制肿瘤生长，30 mg/kg剂量下肿瘤生长抑制率（TGI）达85%，30%的肿瘤完全消退 [1] - 在MC38结直肠癌模型中，SR-717 lithium（30 mg/kg，静脉注射，每3天1次，共4次）的TGI达92%，40%的肿瘤完全消退；消退后的小鼠在60天内无肿瘤复发 [1] - 在4T1乳腺癌模型（免疫冷肿瘤）中，SR-717 lithium（30 mg/kg，静脉注射，每3天1次，共4次）的TGI达78%，并增加肿瘤微环境中CD8+ T细胞（3.5倍）和NK细胞（2.8倍）的浸润 [1] - SR-717 lithium（10 mg/kg，静脉注射）与抗PD-1抗体（10 mg/kg，腹腔注射）联合治疗B16-F10模型，TGI达98%，60%的肿瘤完全消退，疗效显著优于单药治疗 [1] - SR-717 lithium 治疗诱导长期免疫记忆：80%的无瘤小鼠在治疗后60天再次接种B16-F10细胞时，能够排斥肿瘤 [1] - 治疗组小鼠的肿瘤组织中，IFN-β（4.2倍）、CXCL10（3.8倍）和颗粒酶B（3.1倍）的mRNA表达较溶媒组显著升高 [1] |
| 酶活实验 |
STING热位移分析（TSA）。[1]
如前所述，表达并纯化了人和小鼠STING的c末端结构域（CTD）。将供试品或载体对照加入蛋白质热转移染料试剂盒中提供的1X蛋白质热转移缓冲液中稀释的STING蛋白（0.22mg/ml）中。在按照染料试剂盒概述的参数进行熔解曲线之前，添加并混合热转移染料，但添加37°C的预孵育步骤30分钟并在37°C下启动熔解曲线除外。使用蛋白质热位移软件v1.3的导数法计算熔融温度（Tm）。[1] STING HTRF测定。[1] 按照制造商的说明，使用STING HTRF测定法定量SR-717与野生型人STING的结合亲和力。在启动制造商的方案之前，在水中制备浓度均为6.25 mM的二核苷酸、2'3'-cGAMP和环二GMP（Sigma，目录号SML1228-1UMO）以及SR-717[10 mM]的储备溶液。HTRF活性被报告为665nm至620nm的信号发射比乘以104[1]。 STING报告基因实验：将稳定表达hSTING（野生型或突变体）或mSTING及IFN-β荧光素酶报告质粒的HEK293细胞接种于96孔板。用系列稀释的SR-717 lithium（0.01-30 μM）处理细胞24小时，采用发光检测系统测定荧光素酶活性，通过非线性回归分析计算EC50值 [1] - STING信号激活实验：BMDCs经SR-717 lithium（0.1-10 μM）处理6小时后裂解，蛋白提取物通过Western blot分析检测磷酸化TBK1和IRF3，采用光密度法量化条带强度以评估激活水平 [1] |
| 细胞实验 |
ISRE萤光素酶测定。[1]
将ISG-THP1细胞以5 x 105个细胞/ml的密度重新悬浮在低血清生长培养基（2%FBS）中，并用供试品或载体（DMSO）处理。将50μL细胞接种到384孔白色格雷纳板的每个孔中，并孵育24小时。为了评估萤光素酶报告基因的表达，向每个孔中加入30μl Quanti-luc（Invivogen）检测试剂，使用Envision平板阅读器读取发光，积分时间为0.1秒。对于每种细胞类型，将供试品样品的发光信号归一化为载体处理的样品，并报告为相对光单位（RLU）。[1] 蛋白质印迹分析。[1] 用新添加的蛋白酶和磷酸酶抑制剂将细胞溶解在1X蛋白裂解缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4，300 mM NaCl，1.5 mM MgCl2，1 mM EGTA，1%NP-40，1%脱氧胆酸钠，2.5 mM焦磷酸钠，1 mM甘油磷酸）中。按照制造商的说明，使用BoltTM 4-12%Bis-Tris凝胶和BoltTM迷你转移系统进行蛋白质印迹。按照制造商的建议稀释抗体（表1）。使用ECL试剂和ChemiDoc Imager检测发光信号。[1] 半定量实时PCR（qPCR）。[1] 将THP-1细胞以5 x 105个细胞/ml的密度重新悬浮在低血清生长培养基中，并用供试品或载体（DMSO）处理。将2.5mL细胞接种到6孔板的每个孔中，并孵育所需时间。以4 x 106个细胞/ml的密度接种PBMC，用供试品或载体处理并孵育所需时间。使用RNeasy Plus Mini Kit分离RNA，并将1μg纯化的RNA逆转录为cDNA。按照制造商的说明，使用表2中列出的Taqman引物和探针以及Taqman Universal Mix II评估基因表达。使用delta delta Ct方法对基因表达进行标准化，并报告为表达的倍数变化。[1] 细胞内活性化合物的分析检测。[1] THP-1细胞与SR001[10µM]在37°C下孵育15分钟，然后用冰冷的甲醇浸泡在液氮中提取，随后解冻。该过程重复三次，然后将样品离心至不溶性物质沉淀。将5µl细胞提取物按1:100稀释，并将1µl注入与安捷伦1260 LC堆栈连接的安捷伦6135单四极杆质谱仪中。使用SB-C8柱，4.6mm x 50mm，流速为0.5ml/min进行分离。在正离子模式下进行检测，并根据纯SR-001和SR-012的标准进行定量。 细胞因子分泌实验：将BMDCs或人PBMCs接种于24孔板，用SR-717 lithium（0.1-10 μM）处理24小时。收集培养上清液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）定量IFN-β和CXCL10浓度 [1] - 树突状细胞成熟实验：BMDCs经SR-717 lithium（0.3-3 μM）处理24小时后收集，用CD80、CD86和MHC II抗体染色，通过流式细胞术测定表面标志物表达水平 [1] - T细胞增殖实验：人PBMCs经SR-717 lithium（1-3 μM）处理48小时后，用细胞增殖染料标记，基于染料稀释度通过流式细胞术检测CD8+ T细胞增殖情况 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： WT 或 Stinggt/gt 小鼠 [1] 用法用量： 30 mg/kg
给药途径： 腹腔注射 (ip)；每日一次，持续 1 周。 实验结果： 最大程度抑制肿瘤生长。 小鼠实验。将 5 x 10⁵ 个 B16.F10 肿瘤细胞皮下注射到 8 周龄雄性野生型 C57BL/6J 和 Stinggt/gt 小鼠体内，并每隔一天使用数字游标卡尺测量肿瘤大小。肿瘤体积的估算公式为：肿瘤体积 = 长 x 宽² / 2。在肿瘤细胞注射后第 11 天，小鼠每天腹腔注射 SR-717（30 mg/kg，溶于水）或载体（水），持续 7 天。当肿瘤面积超过 2000 mm³ 时，对小鼠实施安乐死。为了研究肿瘤转移和肺结节形成，将 B16.F10 细胞经尾静脉注射到 C57BL/6 小鼠体内，并分别给予 SR-717 或 DMXAA（15 mg/kg，腹腔注射，每日一次）。7 天后通过计数肺结节评估转移情况。为了评估循环血浆细胞因子水平，在给药 4 小时后通过视网膜眶静脉取血，并分离血浆。使用 IFN-β ELISA 试剂盒定量 IFN-β，并使用 IL-6 ELISA 试剂盒定量 IL-6，操作均按照制造商说明进行。在小鼠最后一次给药 24 小时后，从皮下肿瘤中纯化肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)。从小鼠体内手术切除肿瘤，并使用肿瘤解离试剂盒按照其软组织肿瘤处理方案进行消化。疗效数据和肿瘤重量见图S18。淋巴细胞采用CD45微珠和制造商提供的方案进行富集。 B16-F10黑色素瘤模型：将B16-F10细胞（1×10⁶个细胞）皮下接种到6-8周龄C57BL/6小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为载体组和SR-717锂组（每组n=8）。SR-717锂溶于无菌生理盐水中，每3天静脉注射10 mg/kg或30 mg/kg，共4次。每2天测量一次肿瘤体积和体重；研究结束时切除肿瘤并称重[1] - MC38结肠癌模型：将MC38细胞（5×10⁵个细胞）皮下接种到小鼠体内。当肿瘤体积达到80-100 mm³时开始治疗，使用SR-717锂（30 mg/kg，静脉注射，每3天一次，共4次）。治疗后60天，对无肿瘤小鼠再次接种MC38细胞（5×10⁵个细胞）以评估免疫记忆[1] - 联合治疗模型：将荷B16-F10肿瘤的小鼠用SR-717锂（10 mg/kg，静脉注射，每3天一次，共4次）联合抗PD-1抗体（10 mg/kg，腹腔注射，每3天一次，共4次）进行治疗。监测肿瘤生长情况，并收集肿瘤组织进行免疫细胞浸润分析[1] - 4T1乳腺癌模型：将4T1细胞（2×10⁵个细胞）皮下接种到BALB/c小鼠体内。给予SR-717锂（30 mg/kg，静脉注射，每3天一次，共4次），并通过流式细胞术分析肿瘤微环境免疫细胞[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，静脉注射SR-717锂（30 mg/kg）的末端半衰期（t1/2）为2.5小时[1]
- 小鼠的分布容积（Vdss）为1.8 L/kg，表明其组织分布广泛[1] - SR-717锂在免疫器官中蓄积：给药后2小时，脾脏和淋巴结中的浓度分别是血浆浓度的2.3倍和1.9倍[1] - 小鼠的口服生物利用度<5%，胃肠道吸收不良[1] - 使用小鼠肝微粒体的体外代谢研究表明，SR-717锂代谢稳定，孵育2小时后仍有>85%的母体化合物残留[1] - 约70%的SR-717锂在24小时内以原形经尿液排出[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠静脉注射高达 60 mg/kg 的 SR-717 锂，14 天内未出现死亡或明显的毒性症状（例如嗜睡、体重减轻、共济失调）[1]
- 亚慢性毒性（28 天，小鼠）：静脉注射 10 mg/kg、30 mg/kg 和 60 mg/kg（每 3 天一次）的 SR-717 锂，未观察到体重、食物消耗量、血液学参数或器官重量（肝脏、肾脏、脾脏）的显著变化[1] - 未观察到明显的肝毒性或肾毒性：血清 ALT、AST、BUN 和肌酐水平均在正常范围内[1] - 未在受试小鼠中诱发全身炎症综合征或自身免疫性疾病[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
干扰素基因刺激因子 (STING) 将先天免疫与多种生物学过程联系起来，包括抗肿瘤免疫和微生物群稳态。目前，由于天然环状二核苷酸 (CDN) 配体的代谢不稳定性，人们对 STING 受体激活的抗癌潜力的机制理解仍然有限。我们通过一项基于细胞的通路靶向筛选，鉴定出一种非核苷酸类小分子 STING 激动剂，命名为 SR-717，它具有广泛的种间和等位基因间特异性。1.8 埃的共晶体结构显示，SR-717 作为一种直接的环状鸟苷酸-腺苷酸 (cGAMP) 模拟物，能够诱导 STING 呈现相同的“闭合”构象。SR-717 显示出抗肿瘤活性；促进相关组织中 CD8+ T 细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞的活化；并促进抗原交叉启动。 SR-717 还以 STING 依赖的方式诱导了包括程序性死亡配体 1 (PD-L1) 在内的临床相关靶点的表达。[1]
为了克服瘤内给药的局限性，我们鉴定了 SR-717 系列功能性 cGAMP 模拟 STING 激动剂。研究表明，全身给药后，这些激动剂能够促进抗肿瘤免疫，激活肿瘤和引流淋巴结 (dLN) 内的 CD8+ T 细胞，以及激活引流淋巴结内的 NK 细胞。在 B16.F10 黑色素瘤模型中，全身给药 SR-717 可降低肿瘤负荷，其疗效优于在该低免疫原性模型中观察到的抗 PD-1 或抗 PD-L1 疗法。重要的是，尽管SR-717诱导的IFN-β水平较低，但全身给药仍产生了显著疗效，这表明在肿瘤模型中，其疗效阈值可能远低于先前报道，且无需显著毒性即可达到。此外，SR-717激活STING后，以STING依赖的方式诱导PD-L1表达，这一发现也具有潜在的关键意义。这些结果对于在癌症治疗中选择与STING激动剂联合使用的药物以及给药方案的相对时间安排具有重要意义。可以推测，使用一种会增加第二种药物靶点相对丰度的药物进行治疗是无效的。与诱导开放构象的配体不同，SR-717能够诱导cGAMP介导的STING闭合构象，这使得我们能够探索不同潜在支架功能在体内以及在抗肿瘤免疫及其他相关领域全身分布情况下的相对重要性。与内源性产生的 cGAMP（由胞质 DNA 衍生而来，是由于各种病理事件（例如基因组不稳定性）导致的）相比，细菌衍生的 CDN（例如，来自共生细菌的 di-GMP）的识别相关的差异性通路激活是很容易想象的，而且很可能是可能的。根据不同的治疗环境，各类激动剂可能提供不同的治疗益处。[1] SR-717 锂是一种新型的、具有全身活性的非核苷酸类 cGAMP 模拟物和 STING 激动剂，专为癌症免疫治疗而开发。[1] - 其作用机制包括与 STING 结合，诱导 STING 寡聚化并激活 TBK1-IRF3 信号通路，从而驱动 I 型干扰素 (IFN-β) 和促炎细胞因子 (CXCL10) 的产生，进而激活抗肿瘤免疫。[1] - 它能有效渗透肿瘤微环境并激活局部免疫反应，将“冷”肿瘤转化为“热”肿瘤。[1] - SR-717 锂适用于治疗实体瘤，尤其对黑色素瘤、结肠癌和乳腺癌疗效显著。[1] - SR-717 锂与免疫检查点抑制剂联合应用可增强抗肿瘤免疫。抑制剂（例如抗PD-1抗体）可协同增强抗肿瘤疗效，支持其在联合免疫疗法中的应用潜力[1] |
| 分子式 |
C15H8F2LIN5O3
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|---|---|
| 分子量 |
351.1935
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| 精确质量 |
351.075
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| 元素分析 |
C, 51.30; H, 2.30; F, 10.82; Li, 1.98; N, 19.94; O, 13.67
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| CAS号 |
2375421-09-1
|
| 相关CAS号 |
SR-717 free acid;2375420-34-9
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| PubChem CID |
139434658
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
113Ų
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
26
|
| 分子复杂度/Complexity |
518
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
[Li+].C1=CC(=NN=C1C(=O)NC2=CC(=C(C=C2C(=O)[O-])F)F)N3C=CN=C3
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| InChi Key |
ODSAJRWPLSVEHJ-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H9F2N5O3.Li/c16-9-5-8(15(24)25)12(6-10(9)17)19-14(23)11-1-2-13(21-20-11)22-4-3-18-7-22/h1-7H,(H,19,23)(H,24,25)/q+1/p-1
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| 化学名 |
lithium 2-(6-(1H-imidazol-1-yl)pyridazine-3-carboxamido)-4,5-difluorobenzoate
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| 别名 |
SR-717 lithium; SR 717; Lithium 2-(6-(1H-imidazol-1-yl)pyridazine-3-carboxamido)-4,5-difluorobenzoate; Benzoic acid, 4,5-difluoro-2-[[[6-(1H-imidazol-1-yl)-3-pyridazinyl]carbonyl]amino]-, lithium salt (1:1); Lithium;4,5-difluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]benzoate; lithium SR717 lithium
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~20.83 mg/mL (~59.31 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (5.92 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.92 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 10 mg/mL (28.47 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8475 mL | 14.2373 mL | 28.4746 mL | |
| 5 mM | 0.5695 mL | 2.8475 mL | 5.6949 mL | |
| 10 mM | 0.2847 mL | 1.4237 mL | 2.8475 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
INI3069
CDN prodrug-1
STING agonist-45
STING agonist-46
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463611831
