| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 靶点 |
STING/stimulator of interferon genes
SR-717 targets the stimulator of interferon genes (STING) receptor. STING is a key adaptor protein in the innate immune response to cytosolic DNA. Upon activation, STING triggers a signaling cascade that leads to the production of type I interferons and other pro-inflammatory cytokines. SR-717 is a non-nucleotide agonist that directly activates STING. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
SR-717 通过诱导 STING 形成闭合构象，激活 STING，为在抗肿瘤免疫等多种背景下研究系统性 STING 激动剂开辟了新的可能性 [1]。在 THP1 细胞和原代人外周血单核细胞中，SR-717 (3.8 μM) 以 STING 依赖的方式刺激 PD-L1 的表达 [1]。体外实验表明，SR-717 在 ISG-THP1 (WT) 和 ISG-THP1 (cGAS KO) 细胞系中的 EC50 值分别为 2.1 μM 和 2.2 μM。作为一种 STING 激动剂，SR-717 可激活 STING 信号通路，进而诱导干扰素刺激基因 (ISG) 的表达。临床前模型已证实 SR-717 具有抗肿瘤活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
SR-717（30 mg/kg，腹腔注射，每日一次，持续1周）在野生型（WT）或Stinggt/gt小鼠中显示出抗癌疗效[1]。SR-717（30 mg/kg，腹腔注射，持续7天）显示出抗肿瘤疗效；增强相关器官中CD8+ T细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞的活化；并促进抗原交叉启动[1]。体内实验表明，SR-717具有抗肿瘤活性。它是开发用于肿瘤免疫治疗的STING激动剂的先导化合物。然而，目前文献中尚未详细报道SR-717的具体体内疗效研究。该化合物被用作研究STING通路和癌症免疫治疗的工具。
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| 酶活实验 |
STING 热迁移分析 (TSA)。[1]
人源和鼠源 STING 的 C 端结构域 (CTD) 的表达和纯化方法已在之前的文献中详细描述。将测试样品或载体对照加入到稀释的 STING 蛋白 (0.22 mg/ml) 中，该蛋白溶于蛋白质热迁移染料试剂盒提供的 1X 蛋白质热迁移缓冲液中。在进行熔解曲线测定之前，加入热迁移染料并混匀，操作参数与染料试剂盒说明书中的参数相同，但增加了 37 °C 预孵育 30 分钟的步骤，并将熔解曲线的起始温度设为 37 °C。熔解温度 (Tm) 使用蛋白质热迁移软件 v1.3 的导数法计算。[1] STING HTRF 分析。[1] 使用 STING HTRF 分析，并按照制造商的说明，定量 SR-717 与野生型人 STING 的结合亲和力。在按照制造商提供的方案进行实验之前，将二核苷酸 2'3'-cGAMP 和环二鸟苷酸（Sigma，货号 SML1228-1UMO）配制成浓度均为 6.25 mM 的储备液，并将 SR-717 [10 mM] 配制成水溶液。HTRF 活性以 665 nm 与 620 nm 处的信号发射比值乘以 10⁴ 表示 [1]。 SR-717 的体外 STING 激活实验采用表达干扰素刺激基因 (ISG) 报告基因的 THP1 细胞进行。细胞用不同浓度的 SR-717 处理。通过定量报告基因活性（例如，荧光素酶）来测量 STING 激活。EC50 值由剂量反应曲线计算得出。使用 STING 敲除细胞验证了该化合物的特异性。 |
| 细胞实验 |
ISRE-荧光素酶检测。[1]
将ISG-THP1细胞以5 x 10⁵个细胞/ml的密度重悬于低血清培养基（2% FBS）中，并用测试样品或溶剂（DMSO）处理。将50 μL细胞悬液接种于384孔白色Greiner板的每个孔中，并孵育24小时。为了评估荧光素酶报告基因的表达，向每个孔中加入30 μL Quanti-luc（Invivogen）检测试剂，并使用Envision酶标仪读取发光值，积分时间为0.1秒。对于每种细胞类型，测试样品的发光信号均以溶剂处理样品的发光信号进行标准化，并以相对光单位（RLU）表示。[1] Western blot分析。 [1] 将细胞溶解于 1X 蛋白裂解缓冲液（25 mM HEPES，pH 7.4，300 mM NaCl，1.5 mM MgCl2，1 mM EGTA，1% NP-40，1% 脱氧胆酸钠，2.5 mM 焦磷酸钠，1 mM 甘油磷酸钠）中，并新鲜添加蛋白酶和磷酸酶抑制剂。按照制造商的说明，使用 Bolt™ 4-12% Bis-Tris 凝胶和 Bolt™ 迷你转印系统进行蛋白质印迹分析。抗体按照制造商的建议进行稀释（表 1）。使用 ECL 试剂和 ChemiDoc 成像仪检测发光信号。[1] 半定量实时 PCR (qPCR)。 [1] 将THP-1细胞以5 x 10⁵个细胞/ml的密度重悬于低血清培养基中，并用测试物或溶剂（DMSO）处理。将2.5 mL细胞悬液接种于6孔板的每个孔中，并孵育所需时间。将PBMC以4 x 10⁶个细胞/ml的密度接种，并用测试物或溶剂处理，孵育所需时间。使用RNeasy Plus Mini试剂盒分离RNA，并将1 μg纯化的RNA反转录为cDNA。使用表2中列出的Taqman引物和探针，并按照制造商的说明，使用Taqman Universal Mix II试剂盒评估基因表达。基因表达采用ΔΔCt法进行标准化，并以表达倍数变化表示。[1] 细胞内活性化合物的分析检测。 [1] 将THP-1细胞与SR001 [10 µM] 在37 °C下孵育15分钟，然后用冰冷的甲醇进行提取，方法是将细胞浸入液氮中，随后解冻。重复此过程三次，然后将样品离心以沉淀不溶性物质。取5 µl细胞提取物稀释1:100，取1 µl注入与Agilent 1260液相色谱系统联用的Agilent 6135单四极杆质谱仪。分离采用SB-C8色谱柱（4.6 mm × 50 mm），流速为0.5 ml/min。检测采用正离子模式，并基于纯SR-001和SR-012标准品进行定量。 SR-717的细胞活性测定在THP1单核细胞或原代树突状细胞等免疫细胞中进行。将细胞用不同浓度的SR-717处理。采用ELISA或qPCR检测I型干扰素和其他细胞因子的产生。采用Western blotting检测下游信号通路（如TBK1和IRF3的磷酸化）的激活情况。使用标准方法检测细胞活力。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 野生型 (WT) 或 Stinggt/gt 小鼠 [1]
剂量： 30 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 (ip)；每日一次，持续 1 周 实验结果： 最大程度抑制肿瘤生长。 小鼠研究。[1] 将 8 周龄雄性野生型 C57BL/6J 和 Stinggt/gt 小鼠皮下注射 5 x 10⁵ 个 B16.F10 肿瘤细胞，并每隔一天使用数字游标卡尺测量肿瘤大小。肿瘤体积使用以下公式估算：肿瘤体积 = 长 x 宽² / 2。在肿瘤细胞注射后第 11 天，小鼠每天腹腔注射 SR-717（30 mg/kg，溶于水）或载体（水），持续 7 天。当肿瘤面积超过 2000 mm³ 时，对小鼠实施安乐死。为了研究肿瘤转移和肺结节形成，将 B16.F10 细胞经尾静脉注射到 C57BL/6 小鼠体内，并分别给予 SR-717 或 DMXAA（15 mg/kg，腹腔注射，每日一次）。7 天后通过计数肺结节评估转移情况。为了评估循环血浆细胞因子水平，在给药 4 小时后通过视网膜眶静脉采血，并分离血浆。使用 IFN-β ELISA 试剂盒定量 IFN-β，并使用 IL-6 ELISA 试剂盒定量 IL-6，操作均按照制造商说明进行。在小鼠最后一次给药 24 小时后，从皮下肿瘤中纯化肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)。从小鼠体内手术切除肿瘤，并使用肿瘤解离试剂盒按照其针对软组织肿瘤的处理方案进行消化。疗效数据和肿瘤重量见图S18。淋巴细胞采用CD45微珠和制造商提供的操作方案进行富集。SR-717的体内研究通常采用同源小鼠癌症模型。该化合物通过腹腔注射或口服给药。疗效评估通过测量肿瘤生长抑制率进行。在肿瘤组织中评估免疫学参数，例如T细胞浸润、细胞因子水平和STING通路激活。然而，目前尚无已发表的SR-717体内研究方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
SR-717 的药代动力学数据在公开资料中报道较少。它是一种小分子化合物，CAS 编号为 2375420-34-9。该化合物是一种稳定的 cGAMP 类似物。作为一种小分子化合物，预计其生物利用度中等。目前文献中尚无关于其半衰期和生物利用度等详细药代动力学参数。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
SR-717 的毒性数据有限。与所有研究化合物一样，SR-717 仅供研究用途，不得用于人体治疗。需要进行标准的体外细胞毒性试验和体内耐受性研究才能进行完整的毒性评估。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
干扰素基因刺激因子 (STING) 将先天免疫与多种生物学过程联系起来，包括抗肿瘤免疫和微生物群稳态。目前，由于天然环状二核苷酸 (CDN) 配体的代谢不稳定性，我们对 STING 受体激活发挥抗癌作用的机制了解仍然有限。通过基于细胞的通路靶向筛选，我们鉴定出一种非核苷酸类小分子 STING 激动剂，命名为 SR-717，其具有广泛的种间和等位基因特异性。1.8 Å 的共晶体结构显示，SR-717 作为环状鸟苷酸-腺苷单磷酸 (cGAMP) 的直接类似物，可诱导 STING 呈现相同的“闭合”构象。SR-717 表现出抗肿瘤活性；促进相关组织中 CD8+ T 细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞的活化；并促进抗原交叉起始。 SR-717 还以 STING 依赖的方式诱导了包括程序性死亡配体 1 (PD-L1) 在内的临床相关靶点的表达。[1]
为了克服瘤内给药的局限性，我们鉴定了 SR-717 家族的功能性 cGAMP 模拟 STING 激动剂。研究表明，全身给药后，这些化合物可促进抗肿瘤免疫，激活肿瘤和引流淋巴结 (dLN) 中的 CD8+ T 细胞，并激活引流淋巴结中的 NK 细胞。在 B16.F10 黑色素瘤模型中，全身给药 SR-717 可降低肿瘤负荷，与在该低免疫原性模型中观察到的抗 PD-1 或抗 PD-L1 疗法相比，显示出更优的疗效。重要的是，尽管 SR-717 诱导的 IFN-β 水平较低，但全身给药仍然产生了显著的疗效，这表明在肿瘤模型中，疗效阈值可能远低于先前报道的水平，并且可以在不产生显著毒性的情况下达到。此外，SR-717 以 STING 依赖的方式激活 STING 并诱导 PD-L1 表达这一发现也至关重要。这些结果对于选择与 STING 激动剂联合用于癌症治疗的药物以及确定给药方案的相对时间安排具有重要意义。由此可以推断，使用增加第二个药物靶点相对丰度的药物进行治疗可能无效。与诱导开放构象的配体不同，SR-717 可以诱导 cGAMP 介导的 STING 闭合构象，这使我们能够探索不同潜在支架功能在体内以及抗肿瘤免疫系统分布和其他相关领域中的相对重要性。很容易理解，而且很可能是事实，与识别细菌环状二磷酸核苷酸（例如，来自共生细菌的鸟苷二磷酸）和内源性产生的 cGAMP（在各种病理事件（例如基因组不稳定）中由细胞质 DNA 产生）相关的通路激活存在差异。根据具体情况，各类激动剂可能提供不同的治疗益处。[1]SR-717（CAS 2375420-34-9）是一种非核苷酸类STING激动剂，具有广泛的种间和等位基因间特异性。它是一种稳定的cGAMP模拟物。SR-717在ISG-THP1细胞中的EC50值分别为2.1 μM和2.2 μM，并已证实具有抗肿瘤活性。它用于肿瘤免疫治疗研究，仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C15H9F2N5O3
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|---|---|
| 分子量 |
345.260469198227
|
| 精确质量 |
345.067345
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| 元素分析 |
C, 51.30; H, 2.30; F, 10.82; Li, 1.98; N, 19.94; O, 13.67
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| CAS号 |
2375420-34-9
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| 相关CAS号 |
SR-717;2375421-09-1
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| PubChem CID |
139434659
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
1.4
|
| tPSA |
110Ų
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
512
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1C(=CC(C(=O)O)=C(C=1)NC(C1=CC=C(N=N1)N1C=NC=C1)=O)F
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| InChi Key |
WEBVQIJGIZVRGA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H9F2N5O3/c16-9-5-8(15(24)25)12(6-10(9)17)19-14(23)11-1-2-13(21-20-11)22-4-3-18-7-22/h1-7H,(H,19,23)(H,24,25)
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| 化学名 |
4,5-difluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]benzoic acid
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| 别名 |
SR-717 (free acid); CHEMBL4867353; 4,5-difluoro-2-[(6-imidazol-1-ylpyridazine-3-carbonyl)amino]benzoic acid; 2-(6-(1H-Imidazol-1-yl)pyridazine-3-carboxamido)-4,5-difluorobenzoic acid; 4,5-difluoro-2-{[6-(1H-imidazol-1-yl)pyridazine-3-carbonyl]amino}benzoic acid; 4,5-difluoro-2-[6-(1H-imidazol-1-yl)pyridazine-3-amido]benzoic acid;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
May dissolve in DMSO (in most cases), if not, try other solvents such as H2O, Ethanol, or DMF with a minute amount of products to avoid loss of samples
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方，主要用于溶解难溶或不溶于水的产品（水溶度<1 mg/mL）。 建议您先取少量样品进行尝试，如该配方可行，再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80： Saline = 10 : 5 : 85 (如： 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备：将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中，得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 ：Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如： 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如： 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液，加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如：100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中，得到0.5%CMC-Na澄清溶液；然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中，得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8964 mL | 14.4818 mL | 28.9637 mL | |
| 5 mM | 0.5793 mL | 2.8964 mL | 5.7927 mL | |
| 10 mM | 0.2896 mL | 1.4482 mL | 2.8964 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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