| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 10g |
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| Other Sizes |
| 体外研究 (In Vitro) |
磺胺罗丹明 B 钠盐 (SRB) 经常用于细胞毒性测定，通过测量细胞蛋白来确定细胞密度，或作为膜不可渗透的分析物。使用 SRB 测定以低成本进行了许多筛选测定，以研究基于细胞的研究中的细胞毒性。该技术基于SRB的特性，其在微酸性条件下与蛋白质以化学计量结合，并且在碱性条件下可以提取；因此，结合染料的量可以诱导细胞发育。该方案的四个主要步骤如下：处理准备、细胞增殖和选择处理、细胞固定和 SRB 染色以及吸光度测量。该测定可灵敏地用于测试贴壁细胞或化疗药物中的高效小分子，但仅限于手动或半自动筛选。它用于评估基因表达调控（敲低、上调）的效果以及研究 miRNA 替代对细胞分裂的影响 [1]。
1. 与细胞数量的线性相关性：磺酰罗丹明B钠盐（Sulforhodamine B sodium salt, SRB）的吸光度与细胞数量呈强线性关系，可实现细胞增殖的定量评估。在96孔板中检测HeLa、A549和MCF-7细胞（密度范围1×10³至1×10⁵个/孔）时，所有细胞系的吸光度（515 nm波长检测）与细胞计数的相关系数（R²）均>0.99 [1] 2. 增殖检测的高重复性：SRB实验具有良好的重复性。批内精密度方面，对同一细胞样本（10 μM多柔比星处理的A549细胞）在8个复孔中检测，变异系数（CV）<5%；批间精密度方面，用同一批次细胞和处理条件连续3天重复实验，CV<8% [1] 3. 兼容药物诱导的增殖抑制评估：磺酰罗丹明B钠盐（Sulforhodamine B sodium salt）可有效检测药物诱导的细胞增殖变化。例如，MCF-7细胞用0.1–10 μM紫杉醇处理48小时后，SRB实验检测到吸光度呈浓度依赖性降低：1 μM紫杉醇时吸光度较溶媒对照组降低42%，10 μM时降低幅度达78%，与预期的抗增殖效应一致 [1] |
|---|---|
| 细胞实验 |
1. 标准SRB细胞增殖检测实验（96孔板格式）:
1) 细胞接种：将目标细胞（如HeLa、A549）胰酶消化后用完全培养基重悬，以5×10³个/孔的密度接种于96孔板，每孔终体积100 μL。 plates置于37°C、5% CO₂湿润培养箱中孵育24小时，使细胞贴壁 [1] 2) 药物处理（如需）：将测试化合物（如化疗药物）用完全培养基稀释至不同浓度，吸弃孔内原有培养基，每孔加入100 μL稀释后的化合物溶液（溶媒对照组加入不含化合物的培养基）。 plates继续在相同培养条件下孵育48–72小时 [1] 3) 细胞固定：处理结束后，每孔加入50 μL 10%（w/v）三氯乙酸（TCA）（终浓度3.33%）固定细胞，plates置于4°C放置1小时，随后用去离子水洗涤3次以去除TCA和残留培养基，室温晾干2–4小时 [1] 4) SRB染色：配制0.4%（w/v）磺酰罗丹明B钠盐（Sulforhodamine B sodium salt）溶液（溶于1%乙酸），每孔加入100 μL染色液，室温孵育30分钟。用1%乙酸洗涤4次去除未结合染料，再次室温晾干plates [1] 5) 染料溶解与检测：每孔加入150 μL 10 mM Tris碱溶液（pH 10.5）溶解结合的SRB染料，在微孔板振荡器上振荡10分钟确保完全溶解。用微孔板读数仪在515 nm波长下测定每孔吸光度，通过对比处理组与对照组的吸光度计算细胞增殖率或抑制率 [1] 2. 贴壁细胞与悬浮细胞的SRB检测适配：对于悬浮细胞（如Jurkat细胞），固定步骤需调整：加入TCA前先将细胞以1,000 × g离心5分钟，吸弃上清液避免细胞丢失，后续染色、洗涤和检测步骤与贴壁细胞一致 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Lissamine rhodamine is an organic sodium salt having 4-[3,6-bis(diethylamino)xanthenium-9-yl]benzene-1,3-disulfonate as the counterion. It has a role as a fluorochrome, a histological dye and a fluorescent probe. It contains a lissamine rhodamine anion.
- Sulforhodamine B sodium salt is a water-soluble, non-fluorescent cationic dye that binds to the basic amino acid residues (e.g., lysine, arginine) of intracellular proteins via electrostatic interactions. The amount of bound dye is proportional to the total protein content of cells, which directly correlates with cell number—this is the core mechanism for its use in cell proliferation assessment [1] - Compared to other cell proliferation assays (e.g., MTT assay), the SRB assay has several advantages: the stained complex is stable at room temperature for up to 7 days (no rapid fluorescence quenching), it is not affected by cell metabolic activity (cells are fixed before staining, avoiding interference from compounds that inhibit mitochondrial enzymes), and it has a wide linear detection range (suitable for cell densities from 1×10³ to 2×10⁵ cells/well) [1] - Sulforhodamine B sodium salt is compatible with most common cell culture media and does not react with common small-molecule drugs or nanoparticles, making it widely used in high-throughput screening of anti-proliferative compounds (e.g., chemotherapeutics, targeted drugs) [1] |
| 分子式 |
C27H29N2O7S2-.NA+
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|---|---|
| 分子量 |
580.64816
|
| 精确质量 |
580.131
|
| CAS号 |
3520-42-1
|
| 相关CAS号 |
2609-88-3 (Parent)
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| PubChem CID |
9916275
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| 外观&性状 |
Brown to reddish brown solid powder
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| LogP |
7.813
|
| tPSA |
150.78
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
| 重原子数目 |
39
|
| 分子复杂度/Complexity |
1150
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
SXQCTESRRZBPHJ-UHFFFAOYSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H30N2O7S2.Na/c1-5-28(6-2)18-9-12-21-24(15-18)36-25-16-19(29(7-3)8-4)10-13-22(25)27(21)23-14-11-20(37(30,31)32)17-26(23)38(33,34)35;/h9-17H,5-8H2,1-4H3,(H-,30,31,32,33,34,35);/q;+1/p-1
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| 化学名 |
sodium;4-[3-(diethylamino)-6-diethylazaniumylidenexanthen-9-yl]benzene-1,3-disulfonate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~62.5 mg/mL (~107.64 mM)
H2O : ~50 mg/mL (~86.11 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (86.11 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7222 mL | 8.6110 mL | 17.2221 mL | |
| 5 mM | 0.3444 mL | 1.7222 mL | 3.4444 mL | |
| 10 mM | 0.1722 mL | 0.8611 mL | 1.7222 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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