Tarenflurbil (R-flurbiprofen) is the R-enantiomer of the racemate NSAID flurbiprofen. This study identifies that its effect on amyloid-β (Aβ) generation is mediated through the retinoid X receptor α (RXRα).

- Interferes with the binding of 9-cis-retinoic acid (9-cis-RA) to RXRα, with an IC₅₀ of approximately 75 μM in a competitive ligand binding assay using the RXRα ligand-binding domain (LBD). [1]
- Does not affect cell surface levels of APP, total APP, BACE1, or PS1 levels. [1]

(R)-氟比洛芬（或称塔坦氟比芬）能够显著降低Aβ的释放，同时提高细胞内Aβ水平。9-顺式-RA和未标记的(R)-氟比洛芬均能竞争性阻断[3H]9-顺式-RA与RXRα的相互作用。(9-顺式-视黄酸，或称9-顺式-RA)抑制塔坦氟比芬（(R)-氟比洛芬）降低Aβ分泌的作用，而(R)-氟比洛芬则能干扰RXRα与9-顺式-RA的相互作用。塔坦氟比芬（(R)-氟比洛芬）治疗后，细胞内Aβ水平显著升高[1]。显然，第二代GSM和非甾体抗炎药类GSM在Notch信号通路加工方面的作用机制不同，因为众所周知的非甾体抗炎药Tarenflurbil ((R) )-氟比洛芬仅影响Aβ，而不影响Notch β的形成[2]。

---

Tarenflurbil对N2a695细胞（稳定表达人APP695的小鼠神经母细胞瘤细胞）中的Aβ水平表现出双重作用，降低细胞外Aβ水平，同时增加细胞内Aβ水平。这种作用依赖于RXRα。

1. 细胞外和细胞内Aβ的差异性调节：用Tarenflurbil（150 μM，24 h）处理N2a695细胞后，通过ELISA检测发现，条件培养基中分泌的Aβ40、Aβ42和Aβ38水平显著降低。相反，它显著提高了细胞裂解液中这些Aβ种类的水平。免疫沉淀和免疫印迹实验证实了这些结果。免疫细胞化学也显示，经处理的细胞中细胞内Aβ40染色更强。生物素标记法检测的细胞表面APP水平未受影响。[1]
2. RXRα对Aβ调节的必要性：在用特异性siRNA敲低RXRα的细胞中，他仑氟比降低细胞外Aβ和增加细胞内Aβ的作用均消失。RXRα的过表达并不能阻止这些作用。作为对照，他仑氟比在用TNFα/IFNγ处理的细胞中仍然能有效降低Aβ分泌，而TNFα/IFNγ也会增加Aβ分泌。 [1]
3. 与 RXRα 的相互作用：在竞争性配体结合实验中，他仑氟比抑制了 [³H]9-顺式-RA 与 RXRα LBD 的结合，IC₅₀ 值约为 75 μM。未标记的 9-顺式-RA 作为阳性对照。[1]
4. 9-顺式-RA 的干扰：用低浓度 9-顺式-RA (100 nM) 处理 N2a695 细胞可显著减弱 他仑氟比 (150 μM) 引起的 Aβ40 和 Aβ42 分泌减少。在此浓度下，单独使用 9-顺式-RA 可略微增加 Aβ 的分泌。 [1]
5. 对 APP 加工机制无影响：RXRα 水平的调节或使用他仑氟比治疗均未改变总 APP、BACE1 或 PS1 蛋白水平，也未影响 BACE1 酶活性或 Notch 裂解（γ-分泌酶底物）。RXRα 也未影响细胞外 Aβ 的降解。[1]

本研究评估了在C57BL6/J小鼠（表现为非缓解型EAE）和SJL小鼠（表现为复发缓解型EAE）中，早期和晚期给予他伦氟比（(R)-氟比洛芬）治疗的效果。在免疫接种后三天内给予他伦氟比（(R)-氟比洛芬）可完全阻止C57BL6/J小鼠出现临床EAE评分。我们将此方案称为“预防性治疗”。由于其疗效呈剂量依赖性，因此完全预防所需的最低日剂量为5 mg/kg/天。阳性对照药物芬戈莫德（FTY720，0.5 mg/kg/天）的效果与他伦氟比（(R)-氟比洛芬）相似。在 C57BL6/J 小鼠中，当在临床症状出现前开始治疗时（这种策略被称为半治疗策略，剂量为 10 mg/kg/天），以及在疾病完全发展后（第 13 天开始治疗，剂量为 5 mg/kg/天），他氟比洛芬 ((R)-氟比洛芬) 也能显著降低临床 EAE 评分[3]。

---

他氟比洛芬 在两种多发性硬化症 (EAE) 小鼠模型中均表现出强大的治疗效果，可预防和减轻疾病进展，减少炎症并缓解疼痛。

1. 预防和减轻临床 EAE（C57BL6/J 小鼠 - 原发性进行性 EAE）：早期（免疫后 3 天）口服 他氟比洛芬（饮用水中剂量为 2.5、5、10 mg/kg/天）可剂量依赖性地预防临床 EAE 评分的发展。每日 5 mg/kg 的剂量可完全预防疾病。半治疗方案（免疫后 7-8 天开始，每日 10 mg/kg）和晚期治疗方案（免疫后 13 天开始，每日 5 mg/kg）也显著降低了评分。其疗效与芬戈莫德 (FTY720，0.5 mg/kg/天) 相当。[3]
2. 缓解复发缓解型 EAE（SJL 小鼠）：预防性使用他仑氟比尔（从第 3 天开始，每日 5 mg/kg）几乎完全阻止了临床评分的出现。晚期治疗（在首次缓解期，即第 19 天开始）显著降低了复发率和后续评分的严重程度。此外，它还改善了缓解期小鼠的转棒试验表现。 [3]
3. 减轻 EAE 诱发的疼痛：在 C57BL6/J 小鼠中，他仑氟比（从第 3 天开始，10 mg/kg/天）显著减轻了热痛觉过敏（热板试验）、机械痛觉过敏（动态足底试验）和冷触诱痛（丙酮试验）。在接受后期治疗的 SJL 小鼠中，他仑氟比 在第二次缓解期显著减轻了热痛觉过敏（Hargreaves 试验和甩尾试验）。[3]
4. 减少免疫细胞浸润和小胶质细胞活化（免疫荧光和 FACS）：在 C57BL6/J 小鼠中，他仑氟比 阻止了 CD11b+ 髓系细胞、CXCR3+ 细胞和 CD3+ T 细胞浸润到脊髓中，并维持了驻留小胶质细胞的静息分支表型。使用β-actin-EGFP供体进行的骨髓移植研究证实，浸润的CD11b+和CD4+细胞显著减少。在接受后期治疗的SJL小鼠中，他仑氟比减少了CD11b+和F4/80+巨噬细胞/小胶质细胞的浸润，并阻止了髓鞘的破坏。[3]
5. 调节性T细胞和IL-10的增加（脾细胞FACS分析）：他仑氟比治疗增加了脾脏中CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞（Tregs）和CTLA4+抑制性T细胞的频率。它还显著提高了抗炎细胞因子IL-10的水平。 [3]
6. 促炎基因表达降低（微阵列）：脊髓微阵列分析显示，Tarenflurbil显著降低了EAE诱导的523个促炎基因的上调，特别是那些参与刺激反应、免疫系统过程和信号转导的基因，而与代谢过程相关的基因则不受影响。[3]
7. 视神经炎和脑部炎症减轻（体内成像）：在SJL小鼠中，Tarenflurbil在首次疾病发作期间显著减轻了视神经炎（使用生物发光炎症探针测量）和脑/脊髓炎症（使用MMPsense-680近红外探针测量）。 [3]
8. 减少血脑屏障渗漏和髓鞘损伤：后期给予他仑氟比尔治疗可减少SJL小鼠的血脑屏障渗漏（BSA-Cy5.5成像），并减少C57BL6/J小鼠的髓鞘炎症/破坏（DBT成像和MBP ELISA）。视神经免疫荧光显示髓鞘碱性蛋白（MBP）和神经丝蛋白（NF200）染色正常。[3]

本研究未采用纯化酶直接进行他仑氟比的酶活性测定。主要的分子相互作用测定是竞争性配体结合测定。

1. RXRα配体结合测定：将人RXRα配体结合域（LBD，氨基酸223-462）制备成多组氨酸标签融合蛋白，并与7.5 nM [³H]9-顺式-RA在浓度递增的未标记9-顺式-RA或他仑氟比存在下于4°C孵育14小时。然后用镍包被磁珠捕获RXRα LBD，并用闪烁计数器测量结合的放射性以确定竞争性抑制。 [1]
2. BACE1活性检测：裂解RXRα水平调控的细胞，并使用商业试剂盒，按照制造商的说明书，检测裂解液中的β-分泌酶（BACE1）活性。此步骤旨在排除RXRα对BACE1的影响。[1]

采用多种基于细胞的检测方法来表征他仑氟比和RXRα的作用。

1. 细胞系和培养：使用稳定转染人APP695的N2a小鼠神经母细胞瘤细胞（N2a695细胞）。这些细胞在添加了400 μg/mL G418的标准N2a培养基中培养。[1]
2. Aβ定量（ELISA）：处理后，收集条件培养基和细胞裂解液。使用MSD商业ELISA试剂盒，按照制造商的说明书，测定Aβ38、Aβ40和Aβ42的水平。[1]
3. Aβ免疫沉淀和免疫印迹：对条件培养基和细胞裂解液中的Aβ进行免疫沉淀，然后用6E10抗体进行免疫印迹。使用密度分析法定量Aβ水平。 [1]
4. 免疫细胞化学：用或不用Tarenflurbil处理N2a695细胞，然后用兔抗Aβ40抗体进行免疫染色，随后用荧光标记的二抗和DAPI核染色。使用荧光显微镜采集图像。[1]
5. 细胞表面生物素化：将细胞与0.5 mg/mL Sulfo-NHS-LC-Biotin在4°C下孵育。用甘氨酸淬灭过量的生物素。用链霉亲和素磁珠沉淀细胞裂解液，并用抗APP抗体（22C11）进行免疫印迹，以检测细胞表面APP。 [1]
6. RXRα 调控（过表达和敲低）：为过表达 RXRα，使用 Lipofectamine 2000 将 RXRα 表达载体转染至细胞。为敲低 RXRα，使用 Lipofectamine RNAi MAX 将 RXRα 特异性 siRNA 的 SMARTpool 或对照 GFP siRNA 转染至细胞。[1]
7. Notch 切割分析：将 Myc 标签的 Notch 构建体 (NAE) 转染至细胞。在调控 RXRα 水平后，使用抗 Myc 抗体 (9E10) 和针对切割后的 Notch 胞内结构域 (NICD) 的特异性抗体对细胞裂解液进行免疫印迹分析，以检测总 Notch 蛋白。 [1]
8. Aβ降解实验：将RXRα水平经过调控的N2a细胞用从N2a695细胞收集的含Aβ培养基处理。在不同时间点收集条件培养基，并通过ELISA检测残留的Aβ40水平。[1]

我们采用了多种详细的体内实验方案来评估他仑氟比在EAE模型中的疗效。

1. **动物：**我们使用了10-12周龄的雌性C57BL6/J小鼠（用于原发性进行性EAE模型）和雌性SJL小鼠（用于复发缓解型EAE模型）。[3]
2. **药物配制和给药：**他仑氟比以2.5、5或10 mg/kg/天的剂量通过饮用水灌胃给药。对于病情严重的C57BL6/J小鼠，在后期治疗中，我们将药物浸泡在甜玉米片中，以确保小鼠摄入。FTY720（芬戈莫德，0.5 mg/kg/天）用作阳性对照。 [3]
3. **EAE 诱导：**
- **C57BL6/J：**小鼠皮下注射 200 μg MOG35-55 肽（溶于弗氏完全佐剂 (CFA)）进行免疫，随后在免疫后 1-2 小时和 24 小时腹腔注射 200 ng 百日咳毒素 (PTX)。[3]
- **SJL：**小鼠皮下注射 200 μg PLP139-151 肽（溶于 CFA）进行免疫，随后腹腔注射 200 ng PTX。[3]
4. **治疗方案：**
- **预防：**免疫后 3 天开始。 [3]
- **半治疗组：**免疫后7-8天开始（症状出现前）。[3]
- **晚期治疗组：**疾病完全发展后开始（C57BL6/J小鼠为第13天；SJL小鼠在首次缓解期为第19天）。晚期治疗组小鼠按评分匹配配对。[3]
5. **骨髓移植（BMX）：**受体C57BL6/J小鼠接受9.5 Gy照射，并静脉注射来自β-actin-EGFP供体小鼠的6 × 10⁶个骨髓细胞。移植后3周诱导EAE。[3]
6. **临床评分和行为测试：**每日评估EAE评分。在不同时间点评估了转棒试验表现和伤害性行为（热板试验、Hargreaves试验、动态足底刺激试验、丙酮试验、甩尾试验）。[3]
7. **体内成像：**小鼠用异氟烷麻醉，并使用IVIS Lumina Spectrum成像系统进行成像。使用的探针包括：Xenolight RediJect炎症探针（腹腔注射，用于检测髓过氧化物酶活性）、MMPsense-680（静脉注射，用于检测金属蛋白酶活性）、BSA-Cy5.5（静脉注射，用于检测血脑屏障渗漏）和DBT（静脉注射，用于髓鞘成像）。 [3]
8. **组织采集和离体分析：** 在设定的时间点，对小鼠进行灌注，并采集组织（脊髓、脑、脾脏、视神经）用于免疫荧光、FACS分析、LC-MS/MS（内源性大麻素、前列腺素、氟比洛芬对映体）、ELISA（MBP）和基因芯片表达分析。[3]

---

采用多种详细的体内实验方案来评估他仑氟比尔在EAE模型中的作用。

1. 动物：使用10-12周龄的雌性C57BL6/J小鼠（用于原发性进行性EAE）和雌性SJL小鼠（用于复发缓解型EAE）。 [3]
2. 药物配制和给药：Tarenflurbil以2.5、5或10 mg/kg/天的剂量通过饮用水口服给药。对于病情严重的C57BL6/J小鼠，在后期治疗中，将药物浸泡在甜玉米片中，以确保摄入。FTY720（芬戈莫德，0.5 mg/kg/天）用作阳性对照。[3]
3. EAE诱导：
- C57BL6/J小鼠：皮下注射200 μg乳化于弗氏完全佐剂（CFA）中的MOG35-55肽进行免疫，随后在免疫后1-2小时和24小时腹腔注射200 ng百日咳毒素（PTX）。 [3]
- SJL：小鼠皮下注射 200 μg PLP139-151 肽（溶于 CFA）进行免疫，随后腹腔注射两次 200 ng PTX。[3]
4. 治疗方案：
- 预防性治疗：免疫后 3 天开始。[3]
- 半治疗性治疗：免疫后 7-8 天开始（症状出现前）。[3]
- 晚期治疗性治疗：疾病完全发展后开始（C57BL6/J 小鼠为第 13 天；SJL 小鼠在首次缓解期为第 19 天）。晚期治疗组小鼠按评分匹配配对。 [3]
5. 骨髓移植 (BMX)：受体 C57BL6/J 小鼠接受 9.5 Gy 照射，并静脉注射 6 × 10⁶ 个来自 β-actin-EGFP 供体小鼠的骨髓细胞。移植后 3 周诱导 EAE。[3]
6. 临床评分和行为学测试：每日评估 EAE 评分。在不同时间点评估转棒试验表现和伤害性行为（热板试验、Hargreaves 试验、动态足底刺激试验、丙酮试验、甩尾试验）。[3]
7. 活体成像：小鼠用异氟烷麻醉，并使用 IVIS Lumina Spectrum 成像系统进行成像。所用探针：Xenolight RediJect炎症探针（腹腔注射，用于检测髓过氧化物酶活性）、MMPsense-680（静脉注射，用于检测金属蛋白酶活性）、BSA-Cy5.5（静脉注射，用于检测血脑屏障渗漏）和DBT（静脉注射，用于髓鞘成像）。[3]
8. 组织采集和离体分析：在设定的时间点，对小鼠进行灌注，并采集组织（脊髓、脑、脾脏、视神经）用于免疫荧光、FACS分析、LC-MS/MS（内源性大麻素、前列腺素、氟比洛芬对映体）、ELISA（髓鞘碱性蛋白）和基因芯片表达分析。[3]

代谢/代谢物
已知的氟比洛芬人体代谢物包括(2S,3S,4S,5R)-6-[(2R)-2-(3-氟-4-苯基苯基)丙酰基]氧基-3,4,5-三羟基氧杂环己烷-2-羧酸。

---

提供了他仑氟比的详细药代动力学数据。

- 血浆浓度-时间进程（单次口服剂量）：C57BL6/J小鼠单次口服10 mg/kg后，测定了R-氟比洛芬血浆浓度随时间的变化。基于0-8小时的AUC，R-向S-转化的百分比约为23%。 [3]
- 持续口服给药（饮用水）：在接受持续R-氟比洛芬（10 mg/kg/天）的C57BL6/J和SJL小鼠中，R-和S-氟比洛芬的血浆浓度在不同品系间显示出等效的生物利用度和转化率，且昼夜节律与饮水行为相符。[3]
- 组织分布：在C57BL6/J小鼠单次口服10 mg/kg R-氟比洛芬7小时后，肝脏、皮肤和脑区（前额叶皮层、海马）的组织浓度比血浆浓度低约5000至10000倍，这与高血浆蛋白结合率相符。[3]

该研究提供了关于Tarenflurbil安全性的信息。

- 低毒性：引言指出，R-氟比洛芬“几乎没有传统非甾体抗炎药的典型副作用，例如胃肠道或肾脏毒性”。即使在人体中每日服用高剂量，其毒性也很低。[3]
- 胃肠道毒性：该研究明确对比了R-氟比洛芬和S-氟比洛芬，指出“只有服用S-氟比洛芬才会引起胃肠道毒性”。[3]
- 小鼠体内安全性：在EAE实验中，接受Tarenflurbil治疗的小鼠未出现明显的不良反应。在一项后期治疗实验中监测了体重，结果显示R-氟比洛芬组的平均体重显著高于对照组，表明其整体健康状况更佳。 [3]
- 无正式毒性评估：该论文未提供正式的毒理学终点指标，例如 LD₅₀ 或详细的器官组织病理学毒性分析，因为其主要关注点在于疗效。[3]

[1]. Retinoid X receptor-alpha mediates (R )-flurbiprofen's effect on the levels of Alzheimer's beta-amyloid. J Neurochem. 2009 Oct;111(1):142-9.

[2]. Second generation γ-secretase modulators exhibit different modulation of Notch β and Aβ production. J Biol Chem. 2012 Sep 21;287(39):32640-50.

[3]. R-flurbiprofen attenuates experimental autoimmune encephalomyelitis in mice. EMBO Mol Med. 2014 Sep 30;6(11):1398-422.

(R)-氟比洛芬是氟比洛芬的一种衍生物，它是(S)-氟比洛芬的对映异构体。他伦氟比（Tarenflurbil）是一种研究性药物，曾用于治疗轻度阿尔茨海默病患者。它是一种选择性淀粉样蛋白抑制剂（SALA），可降低培养的人类细胞和动物模型中毒性肽β-淀粉样蛋白42 (Aβ42) 的水平。Aβ42是阿尔茨海默病患者大脑中神经毒性和淀粉样斑块形成的主要启动因子。该药物用于治疗阿尔茨海默病的研发已于2008年6月终止。他伦氟比也曾用于前列腺癌的临床试验。他伦氟比是氟比洛芬的口服活性合成对映异构体。 Tarenflurbil 可激活 c-Jun N 端激酶，增加 AP-1 与 DNA 的结合，并下调细胞周期蛋白 D1 的表达，从而使肿瘤细胞停滞在细胞周期的 G1 期并发生凋亡。该药物还会影响核因子 κB 的表达，核因子 κB 是一种快速反应转录因子，可刺激机体对肿瘤细胞的免疫反应。R-氟比洛芬不抑制环氧合酶。

---

药物适应症
其在阿尔茨海默病和前列腺癌中的应用/治疗正在研究中。

---

作用机制
MPC-7869 不是环氧合酶（COX-1 和 COX-2）的抑制剂。该化合物调节与核因子 κB (NF-κB) 相关的信号转导和转录激活通路，NF-κB 是一种参与多种分子表达的主要转录因子，包括细胞生长、细胞死亡和炎症。此外，MPC-7869 近期已被证实能够调节 γ-分泌酶活性，并在体外和体内选择性地降低 Aβ42 肽的水平，从而减少大脑中的淀粉样蛋白病理。MPC-7869 具有良好的安全性，并在癌症和阿尔茨海默病动物模型中显示出高效性。在转基因小鼠研究中，MPC-7869 降低了大脑中的淀粉样蛋白水平并预防了记忆丧失。

---

他仑氟比（R-氟比洛芬）是消旋非甾体抗炎药 (NSAID) 氟比洛芬的 R-对映体。与 S-对映体不同，它几乎没有环氧合酶 (COX) 抑制活性。基于早期研究表明某些 NSAID（包括氟比洛芬）可以减少致淀粉样蛋白 Aβ42 肽的生成，他仑氟比作为一种潜在的阿尔茨海默病 (AD) 治疗药物引起了广泛关注。然而，一项大型 III 期临床试验未能显示出临床获益。本研究为这一失败提供了一种可能的机制解释。研究表明，尽管他仑氟比降低了 Aβ 的分泌（细胞外水平），但同时也增加了细胞内 Aβ 的水平，而细胞内 Aβ 的水平被认为与阿尔茨海默病 (AD) 的发病机制更直接相关。该研究确定视黄醇 X 受体 α (RXRα) 是这种效应的关键介质。他仑氟比与 RXRα 结合，与其天然配体 9-顺式-RA 竞争，这种相互作用是其调节 Aβ 所必需的。研究结果表明，简单地测量总 Aβ 或细胞外 Aβ 可能无法完全反映此类化合物的复杂效应，并且细胞内 Aβ 池的增加可能会抵消降低细胞外 Aβ 的任何潜在益处。[1]

C15H13FO2

244.26

244.089

51543-40-9

Flurbiprofen;5104-49-4

92337

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

376.2±30.0 °C at 760 mmHg

110-113ºC

181.3±24.6 °C

0.0±0.9 mmHg at 25°C

1.568

4.11

37.3

1

3

3

18

286

1

C[C@H](C1=CC(=C(C=C1)C2=CC=CC=C2)F)C(=O)O

SYTBZMRGLBWNTM-SNVBAGLBSA-N

InChI=1S/C15H13FO2/c1-10(15(17)18)12-7-8-13(14(16)9-12)11-5-3-2-4-6-11/h2-10H,1H3,(H,17,18)/t10-/m1/s1

(2R)-2-(3-fluoro-4-phenylphenyl)propanoic acid

(R)-Flurbiprofen; E 7869; MPC 7869; E-7869; MPC7869; E7869; Flurizan; Furbiprofen; MPC-7869;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 50 mg/mL (~204.70 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (10.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。