| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
The primary molecular target of TAS4464 hydrochloride is NEDD8-activating enzyme (NAE), a heterodimeric enzyme composed of NAE1 and UBA3 subunits. NAE catalyzes the first step in the neddylation pathway, activating the ubiquitin-like protein NEDD8 via an ATP-dependent adenylation reaction. TAS4464 hydrochloride binds to the active site of NAE with high affinity, competitively inhibiting the enzyme with an IC50 of 0.955 nM. By inhibiting NAE, the compound prevents the conjugation of NEDD8 to cullin proteins, which are essential components of cullin-RING ubiquitin ligases (CRLs). CRLs regulate the ubiquitination and proteasomal degradation of numerous proteins involved in cell cycle progression, DNA replication, and signal transduction. The compound shows high selectivity for NAE over other ubiquitin-like activating enzymes (E1s).
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| 体外研究 (In Vitro) |
在无细胞酶活性测定中，TAS4464 盐酸盐对 NEDD8 激活酶表现出强效抑制作用，IC50 值为 0.955 nM。该化合物对 NAE 具有高度选择性，优于其他 E1 酶，包括泛素激活酶 (UBA1) 和 SUMO 激活酶 (SAE)，从而确保了其对 NEDD8 化途径的特异性。在生化测定中，TAS4464 盐酸盐抑制了 ATP 依赖的 NEDD8-NAE 硫酯中间体的形成，阻止了 NEDD8 向下游结合酶 (Ubc12) 的转移，进而阻止了 NEDD8 向 cullin 底物的转移。该化合物具有持久的靶标抑制作用，即使在化合物洗脱后，cullin 的 NEDD8 化仍能持续受到抑制。可进行酶动力学研究以确定抑制模式（竞争性或非竞争性）并计算 Ki 值。在细胞学研究中，TAS4464盐酸盐能有效阻断cullin蛋白的NEDDylation修饰，导致CRL底物（如p21、p27和Wee1）的积累。这会导致细胞周期阻滞、诱导细胞凋亡并抑制癌细胞增殖。该化合物在血液肿瘤细胞系和实体瘤细胞系中均显示出活性。在多种癌细胞系中，TAS4464盐酸盐能降低细胞活力，其IC50值在低纳摩尔至亚微摩尔范围内。该化合物通过细胞周期检查点蛋白的失调诱导DNA损伤和复制应激。TAS4464盐酸盐已被证明能增强癌细胞对其他治疗药物（包括DNA损伤剂和靶向治疗药物）的敏感性。该化合物对靶点的持续抑制作用使其具有持久的抗增殖效应，即使在停药后仍能观察到活性。
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| 体内研究 (In Vivo) |
体内研究表明，TAS4464盐酸盐在小鼠血液肿瘤和实体瘤异种移植模型中均表现出优异的抗肿瘤活性。该化合物可持久抑制靶点，给药后肿瘤组织中cullin蛋白的NEDDylation修饰持续受到抑制。TAS4464盐酸盐通常采用口服或腹腔注射给药，剂量根据药代动力学和毒理学研究确定。在异种移植模型中，该化合物可显著抑制肿瘤生长，在某些情况下甚至可导致肿瘤消退。其抗肿瘤活性伴随着靶点结合的药效学证据，包括cullin蛋白NEDDylation修饰减少以及CRL底物（例如p21、p27）在肿瘤组织中的积累。该化合物在有效剂量下耐受性良好，仅观察到极少的体重减轻。TAS4464盐酸盐被认为是一种治疗多种肿瘤的潜在有效药物。
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| 酶活实验 |
在 NAE 抑制实验中，重组人 NAE 的酶活性通过荧光法或放射性测定法进行测定。将纯化的 NAE（NAE1/UBA3 异二聚体）与不同浓度的 TAS4464 盐酸盐（通常为 0.001-10 µM）在含有 50 mM Tris-HCl (pH 7.5)、5 mM MgCl₂、1 mM ATP 和 0.1% BSA 的反应缓冲液中于 37°C 孵育 15-30 分钟。加入 NEDD8 和 NEDD8 结合酶 Ubc12 启动反应，并继续孵育 30-60 分钟。使用抗 NEDD8 或抗 cullin 抗体通过 Western 印迹法检测产物（NEDD8-Ubc12 硫酯或 NEDD8 化 cullin）。此外，也可使用标记的NEDD8进行荧光偏振或时间分辨FRET检测，以实现高通量筛选。IC50值通过剂量反应曲线的非线性回归分析计算得出。针对其他E1酶（例如UBA1、SAE）的选择性检测采用类似的方案，并使用其各自的底物进行。
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| 细胞实验 |
在细胞NEDDylation抑制研究中，将癌细胞培养于含10% FBS和抗生素的适宜培养基（RPMI-1640或DMEM）中，置于37°C、5% CO₂的培养箱中。将细胞接种于6孔或12孔板中，待其汇合度达到70-80%后，用培养基稀释至所需终浓度（通常为0.001-10 µM）。细胞处理4-24小时后，用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解细胞。通过Western blot分析裂解液中cullin蛋白的NEDDylation状态（NEDDylation修饰的cullin与未修饰的cullin）、CRL底物（p21、p27、Wee1、NRF2）的积累以及凋亡标志物（cleaved PARP、caspase-3）的表达。细胞活力检测中，将细胞接种于96孔板（5,000-10,000个细胞/孔），并用TAS4464盐酸盐系列稀释液（0.001-100 µM）处理48-96小时。采用MTT、CCK-8或CellTiter-Glo法检测细胞活力，并计算IC50值。细胞周期分析中，将处理后的细胞固定，用碘化丙啶染色，并通过流式细胞术进行分析。细胞凋亡通过Annexin V/PI染色或caspase-3/7活性检测进行评估。
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| 动物实验 |
在体内疗效研究中，使用6-8周龄的雌性免疫缺陷小鼠（例如裸鼠或SCID小鼠）。将5 × 10⁶个癌细胞（血液肿瘤或实体瘤细胞系）皮下植入小鼠侧腹部。当肿瘤体积达到约100-200 mm³时，将动物随机分组（每组n = 6-10只）。TAS4464盐酸盐溶于赋形剂（例如，0.5%甲基纤维素或10% DMSO的PEG400溶液）中，以1-100 mg/kg的剂量口服或腹腔注射给药，通常每日一次或每日一次，持续2-4周。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2）。监测体重变化以评估毒性反应。研究结束时，切除肿瘤组织，称重，并进行蛋白质印迹分析，检测cullin蛋白NEDDylation修饰、CRL底物积累和细胞凋亡标志物。可采集血样进行药代动力学分析。在联合用药研究中，TAS4464盐酸盐可与其他药物（例如化疗、靶向治疗）联合使用，以评估其协同作用。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
盐酸TAS4464的药代动力学数据显示其具有良好的口服生物利用度和持久的靶点抑制作用。作为一种小分子抑制剂，该化合物预计具有中等至较高的口服生物利用度，其半衰期足以支持每日一次或两次给药。盐酸TAS4464表现出优异的抗肿瘤活性和持久的靶点抑制作用，这体现在给药后肿瘤组织中cullin neddylation的持续抑制。该化合物可能经肝脏CYP450酶代谢，并通过胆汁和肾脏排泄清除。其药代动力学特征支持其用于临床前疗效研究。详细的药代动力学参数，包括Cmax、Tmax、AUC、半衰期和清除率，可从已发表的研究中获取，但可能因制剂和给药途径的不同而有所差异。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
TAS4464盐酸盐的毒理学数据主要来源于动物模型的临床前毒理学研究。作为一种强效的NAE抑制剂，该化合物预计会产生与NEDDylation通路紊乱相关的靶向毒性，而NEDDylation通路对于正常的细胞周期调控和蛋白质稳态至关重要。在临床前研究中，TAS4464盐酸盐在有效剂量下耐受性良好，仅观察到极少的体重减轻。该化合物显示出良好的治疗窗，在不引起明显毒性的剂量下具有显著的抗肿瘤活性。由于NEDDylation通路在细胞周期调控中的作用，其潜在毒性可能包括对快速分裂组织（骨髓、胃肠道）的影响。然而，目前尚未公开报道详细的毒理学数据（例如，LD50、器官特异性毒性）。与所有研究化合物一样，在处理TAS4464盐酸盐时应采取适当的安全预防措施。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
盐酸TAS4464是一种高效且选择性极高的NEDD8激活酶（NAE）抑制剂，IC50值为0.955 nM。它是一种用于肿瘤学研究中NEDD8化通路的重要研究工具，在细胞和体内癌症模型中均显示出活性。NAE抑制代表了一种有前景的治疗策略，可用于靶向那些依赖CRL介导的蛋白质降解以维持生存的癌症。盐酸TAS4464通过阻断NEDD8化，导致CRL底物（包括细胞周期抑制剂（p21、p27）和肿瘤抑制因子（例如NRF2））的积累，从而导致细胞周期阻滞和凋亡。该化合物在血液肿瘤和实体瘤中均显示出活性。盐酸TAS4464含有炔基，可用于点击化学反应。该化合物尚未进入临床试验，仅供研究使用。
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| 分子式 |
C21H24CLFN6O6S
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|---|---|
| 分子量 |
542.968265533447
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| 精确质量 |
542.115
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| CAS号 |
1848959-11-4
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| 相关CAS号 |
TAS4464;1848959-10-3
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| PubChem CID |
124121823
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| tPSA |
196
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
6
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
12
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
911
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](CNS(=O)(=O)N)O[C@H]1N1C=C(C#CC2C(=CC=CC=2OCC)F)C2=C(N=CN=C12)N)O.Cl
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| InChi Key |
CDCFJYCKNAWPTL-WVAMHNCPSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H23FN6O6S.ClH/c1-2-33-14-5-3-4-13(22)12(14)7-6-11-9-28(20-16(11)19(23)25-10-26-20)21-18(30)17(29)15(34-21)8-27-35(24,31)32/h3-5,9-10,15,17-18,21,27,29-30H,2,8H2,1H3,(H2,23,25,26)(H2,24,31,32)1H/t15-,17-,18-,21-/m1./s1
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| 化学名 |
A name could not be generated for this structure.
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| 别名 |
TAS4464 HCl TAS 4464 hydrochloride TAS-4464 hydrochloride
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~184.17 mM)
H2O : ~5 mg/mL (~9.21 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.83 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8417 mL | 9.2086 mL | 18.4172 mL | |
| 5 mM | 0.3683 mL | 1.8417 mL | 3.6834 mL | |
| 10 mM | 0.1842 mL | 0.9209 mL | 1.8417 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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