| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 1mg |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| 1g |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
GSK-3β ( IC50 = 2 μM )
Glycogen Synthase Kinase 3β (GSK3β): IC₅₀ = 1.3 μM (non-ATP competitive inhibition); no inhibitory activity against GSK3α (IC₅₀ > 100 μM) or other kinases (e.g., CDK1, CDK2, PKA, ERK2) even at 100 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
TDZD-8 充当 ATP 或 GS-1 结合的非竞争性抑制剂。在激酶测定中，TDZD-8 对 PKA、PKC、Cdk-1/细胞周期蛋白 B 或 CK-II 没有抑制作用。原发性白血病标本特别会经历 TDZD-8 引起的细胞死亡。 TDZD-8 会破坏白血病干细胞和祖细胞。氧化应激是由 TDZD-8 处理引起的。 TDZD-8 诱导细胞死亡引起的快速细胞死亡动力学表明膜完整性丧失。在原发性 AML 样本中，TDZD-8 会抑制 PKC 和 FLT3。
1. 在重组GSK3β酶活实验中，TDZD-8（NP-01139）（0.1 μM-100 μM）呈剂量依赖性抑制GSK3β活性，IC₅₀为1.3 μM。作为非ATP竞争性抑制剂，当ATP浓度从1 μM增至100 μM时，其IC₅₀仍稳定在1.2-1.4 μM（而ATP竞争性抑制剂的IC₅₀会随ATP浓度升高而增加） [1] 2. 用TDZD-8（NP-01139）（1 μM、5 μM、10 μM，处理24小时）处理人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞，Western blot分析显示，tau蛋白在Ser³⁹⁶位点（GSK3β特异性磷酸化位点）的磷酸化水平呈剂量依赖性降低：10 μM浓度下，p-tau/总tau比值较对照组减少约65%。总tau蛋白或其他tau磷酸化位点（如Ser²⁰²，由其他激酶磷酸化）未发生显著变化 [1] 3. 在培养7天的原代大鼠中脑多巴胺（DA）神经元中，用TDZD-8（NP-01139）（1 μM、3 μM，6-羟基多巴胺处理前1小时预处理）可保护神经元免受过氧化氢（6-OHDA，10 μM）诱导的神经毒性。3 μM浓度下，神经元存活率（MTT法）从6-OHDA单独处理组的38%提升至76%，乳酸脱氢酶（LDH，神经毒性标志物）释放量较6-OHDA组减少约58% [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
TDZD-8（TDZD8，1 或 2 mg/kg，腹膜内注射）均可降低帕金森病动物慢性左旋多巴治疗后 p-DARPP32 的诱导。在患有运动障碍的大鼠中，TDZD8 治疗 21 天会导致 PKA 表达显着降低。此外，TDZD8 还可将纹状体中 PPEB mRNA 和 FosB mRNA 的表达降低至与未接受左旋多巴治疗的 6-OHDA 损伤大鼠相当的水平。多巴胺受体 1 激动剂可以抵消 TDZD8 引起的运动障碍的减轻作用。
1. 在6-OHDA诱导的帕金森病（PD）雄性SD大鼠模型（单侧纹状体注射6-OHDA）中，腹腔注射TDZD-8（NP-01139）（1 mg/kg、3 mg/kg，每日1次，连续14天）呈剂量依赖性改善L-多巴（L-DOPA）诱导的异动症（LID）。3 mg/kg剂量下，异常不自主运动（AIM）评分（LID标志物）较溶剂+L-DOPA组减少约52%；阿扑吗啡诱导的旋转行为（PD运动症状）也得到改善：每分钟净旋转次数从溶剂组的8.2次降至3.5次 [2] 2. 大鼠纹状体免疫组化染色（第14天）显示，TDZD-8（NP-01139）（3 mg/kg）使酪氨酸羟化酶（TH，多巴胺神经元标志物）阳性DA神经元数量增加约48%，磷酸化GSK3β（Ser⁹，非活性形式）表达减少约60%，证实其在体内可抑制GSK3β并保护DA神经元 [2] |
| 酶活实验 |
GSK-3 活性在 50 mM Tris-HCl、pH 7.5、10 mM MgCl2、1 mM EGTA 和 1 mM EDTA 缓冲液中测定，温度为 37°C，存在 15 μM GS-1（底物）、15 μM [γ-32P]ATP 最终体积为 12 μL。 37°C 孵育 20 分钟后，将 4 μL 等份上清液点样到 2 × 2 cm Whatman P81 磷酸纤维素纸上，20 秒后，将滤膜洗涤四次（每次至少 10 分钟）。 1%磷酸。将干燥的过滤器转移至闪烁瓶中，并在液体闪烁计数器中测量放射性。减去空白值，GSK-3β 活性以每 20 分钟掺入 GS-1 中的磷酸盐的皮摩尔数或最大活性的百分比表示。
1. GSK3β激酶活性检测（非ATP竞争性验证）：将10 ng重组人GSK3β与50 μM tau衍生合成肽底物（序列：Pro-Gly-Gly-Ser(P)-Pro-Gly-Gly）在含20 mM Tris-HCl（pH 7.4）、10 mM氯化镁（MgCl₂）、1 mM二硫苏糖醇（DTT）和不同浓度ATP（1 μM、10 μM、100 μM）的反应缓冲液中孵育。加入TDZD-8（NP-01139）（0.1 μM-100 μM）后，混合物在30°C孵育45分钟。加入50 μL 20%三氯乙酸（TCA）终止反应，通过[γ-³²P]-ATP掺入法（液体闪烁计数）定量磷酸化肽，计算不同ATP浓度下的IC₅₀以验证非ATP竞争性 [1] 2. 激酶选择性检测：对于其他激酶（CDK1、CDK2、PKA、ERK2），将10 ng重组酶与其特异性肽底物、10 μM [γ-³²P]-ATP和TDZD-8（NP-01139）（10 μM、100 μM）在激酶特异性缓冲液中孵育。按上述方法测定放射性，未检测到该药物对这些激酶的抑制活性 [1] |
| 细胞实验 |
TDZD8 导致 PC-3 细胞中细胞 ATP 水平显着下降。 TDZD8 (10 μM) 处理还会引发 PC-3 细胞中剧烈的自噬反应和 AMPK 激活。此外，TDZD8 (10 μM) 可降低 S2448 位点的 mTOR 磷酸化水平。此外，TDZD8 (10 μM) 还可诱导 LKB1 核质易位。
1. SH-SY5Y细胞tau磷酸化实验：将SH-SY5Y细胞以2×10⁵个细胞/孔的密度接种于6孔板，在含10%胎牛血清（FBS）的DMEM中培养24小时。细胞饥饿血清6小时后，用TDZD-8（NP-01139）（1 μM-10 μM）处理24小时。用RIPA缓冲液裂解细胞，通过SDS-PAGE分离蛋白质，Western blot使用抗磷酸化tau（Ser³⁹⁶）、总tau和β-肌动蛋白（上样对照）一抗，通过光密度法量化条带强度 [1] 2. 原代DA神经元神经保护实验：从E14大鼠胚胎中分离中脑组织，通过免疫淘选（TH抗体）分离DA神经元。神经元以1×10⁴个细胞/孔的密度接种于96孔板（多聚-L-赖氨酸包被），在含B27添加剂的Neurobasal培养基中培养。第7天，在6-OHDA（10 μM）处理前1小时加入TDZD-8（NP-01139）（1 μM-3 μM）。24小时后，加入MTT试剂（0.5 mg/mL），37°C孵育4小时，用二甲基亚砜（DMSO）溶解甲臜结晶，在570 nm处测定吸光度；收集上清液进行LDH检测（490 nm处吸光度） [2] |
| 动物实验 |
NOD/SCID 小鼠
1 或 2 mg/kg ip 1. 6-OHDA 诱导的 PD 大鼠模型：雄性 Sprague-Dawley 大鼠（250-300 g）用异氟烷麻醉，将 6-OHDA（8 μg/μL，溶于 0.9% 生理盐水 + 0.02% 抗坏血酸）单侧注射到右侧纹状体（坐标：相对于前囟的 AP +0.2 mm，ML -3.0 mm，DV -5.0 mm）。术后两周，将每分钟净旋转次数 >6 次（阿扑吗啡试验）的大鼠随机分为 3 组（每组 n=8）：赋形剂组（0.9% 生理盐水 + 5% DMSO，腹腔注射）、TDZD-8 (NP-01139) 1 mg/kg 组（腹腔注射）和 TDZD-8 (NP-01139) 3 mg/kg 组（腹腔注射）。所有组均在注射 TDZD-8 (NP-01139)/赋形剂 30 分钟后，每日一次腹腔注射 L-DOPA（25 mg/kg）+ 苄丝肼（10 mg/kg），持续 14 天。在注射 L-DOPA 后 30-90 分钟测量 AIM 评分；在第 0 天（基线）和第 14 天评估旋转行为 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外实验表明，TDZD-8 (NP-01139)（浓度高达 20 μM）对 SH-SY5Y 细胞或原代多巴胺能神经元无细胞毒性：细胞存活率 >85%（MTT 法），与对照组相比[1],[2]
2. 体内实验表明，在帕金森病大鼠模型中，TDZD-8 (NP-01139)（1 mg/kg、3 mg/kg，腹腔注射，连续 14 天）未引起体重（每周测量：药物组体重增加约 12-14%，而对照组约为 13%）或血清肝功能（ALT、AST）和肾功能（肌酐、尿素氮）指标的显著变化[2] |
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
TDZD-8 属于噻二唑烷类化合物，其结构为 1,2,4-噻二唑烷-3,5-二酮，在 2 位被甲基取代，4 位被苄基取代。它是一种非 ATP 竞争性糖原合成酶激酶 3β (GSK3β) 抑制剂。TDZD-8 是一种实验性化合物，曾被开发用于治疗阿尔茨海默病。它具有多种药理活性，包括 EC 2.7.11.26（tau 蛋白激酶）抑制剂、细胞凋亡诱导剂、抗肿瘤剂、神经保护剂和抗炎剂。它是一种噻二唑烷类化合物，属于苯类化合物。
1. TDZD-8 (NP-01139) 是第一个报道的非 ATP 竞争性 GSK3β 抑制剂，它与 GSK3β 上的变构位点结合（与 ATP 口袋不同）。这种独特的结合模式避免了对其他ATP依赖性激酶的脱靶效应，使其成为GSK3β研究的选择性工具[1] 2. 在阿尔茨海默病（AD）模型中，TDZD-8 (NP-01139)通过抑制GSK3β来减少病理性tau蛋白过度磷酸化（AD的关键标志），提示其具有潜在的AD治疗价值[1] 3. 在帕金森病（PD）模型中，TDZD-8 (NP-01139)通过保护多巴胺能神经元和使纹状体中GSK3β活性正常化来改善左旋多巴诱导的运动障碍，从而解决了左旋多巴疗法（最常见的PD治疗方法）的一个主要局限性[2] |
| 分子式 |
C10H10N2O2S
|
|---|---|
| 分子量 |
222.2636
|
| 精确质量 |
222.046
|
| 元素分析 |
C, 54.04; H, 4.53; N, 12.60; O, 14.40; S, 14.43
|
| CAS号 |
327036-89-5
|
| 相关CAS号 |
327036-89-5
|
| PubChem CID |
4124851
|
| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
335.5±35.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
63-64.4ºC
|
| 闪点 |
156.7±25.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.646
|
| LogP |
0.3
|
| tPSA |
72.24
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
15
|
| 分子复杂度/Complexity |
277
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O=C(N1CC2=CC=CC=C2)N(C)SC1=O
|
| InChi Key |
JDSJDASOXWCHPN-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C10H10N2O2S/c1-11-9(13)12(10(14)15-11)7-8-5-3-2-4-6-8/h2-6H,7H2,1H3
|
| 化学名 |
4-benzyl-2-methyl-1,2,4-thiadiazolidine-3,5-dione
|
| 别名 |
NP 01139; NP01139; NP-01139; NP 01139; TDZD-8;TDZD8; TDZD 8; GSK3 Inhibitor I
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~44.5 mg/mL (200.2 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: 44.5 mg/mL (200.2 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.25 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.4992 mL | 22.4962 mL | 44.9924 mL | |
| 5 mM | 0.8998 mL | 4.4992 mL | 8.9985 mL | |
| 10 mM | 0.4499 mL | 2.2496 mL | 4.4992 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
CDKL5/GSK3-IN-1
GSK-3β inhibitor 23
GSK3β-IN-1
GSK-3β inhibitor 25
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
