| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CLK1 (IC50 = 20 nM); CLK2 (IC50 = 200 nM); CLK4 (IC50 = 15 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：TG003 通过抑制 Clk1/Sty 介导的磷酸化，在体外抑制人 β-珠蛋白的 SF2/ASF 依赖性剪接。 TG003 抑制哺乳动物细胞中的 Clk1/Sty 激酶活性，而在 10 μM 浓度下对 HeLa 和 COS-7 细胞的生长无毒性作用。 TG003 通过抑制 IL-1β 异核 RNA 的剪接来阻断血小板产生 IL-1β RNA。在 3T3-L1 脂肪细胞分化过程中，TG003 还阻断 PKCβII 的选择性剪接以及 PPARγ1 和 PPARγ2 的表达。激酶测定：在反应混合物中测定 Clks 和 SRPK 的激酶活性，其中含有 200 mM Tris-HCl (pH 7.5)、12.5 mM MgCl2、8 mM 二硫苏糖醇、4 mM EGTA、1–20 μM ATP、1 μCi [γ -32P]ATP、1 μg SF2/ASF RS 结构域的合成肽 (NH2-RSPSYGRSRSRSRSRSRSRSRSRSNSRSRSY-OH) 和 0.1–1 μg 纯化激酶，最终体积为 40 μL。 cAMP 依赖性蛋白激酶活性在含有 80 mM Tris-HCl (pH 7.5)、12.5 mM MgCl2、8 mM 二硫苏糖醇、4 mM EGTA、10 μM ATP、1 μCi [γ-32P]ATP、5纯化的组蛋白 H1 和 1 μg 大鼠 cAMP 依赖性蛋白激酶催化亚基。在含有 200 mM Tris-HCl (pH 7.5)、12.5 mM MgCl2、1 mM CaCl2、80 μg/mL 磷脂酰丝氨酸、8 μg/mL 二油精、10 μM ATP、1 μCi [γ] 的反应混合物中测定蛋白激酶 C 活性。 -32P]ATP、5 μg 组蛋白 H1 和 2 μL 部分纯化的大鼠蛋白激酶 C。无论抑制剂浓度如何，Me2SO 的终浓度均调整为 1%。将哺乳动物或非洲爪蟾重组蛋白的反应混合物分别在 30 或 25 °C 下孵育 10 分钟，并将一半部分点样在 P81 磷酸纤维素膜上。激酶测定条件（包括孵育时间以及激酶和底物的浓度）经过优化，以保持孵育期间的线性。用 5% 磷酸溶液（SF2/ASF RS 结构域）或 5% 三氯乙酸溶液（组蛋白 H1）洗涤膜至少 15 分钟以上。使用液体闪烁计数器测量放射性。通过从不含激酶的反应混合物中减去背景计数来推导出净放射性，并且数据表示为相对于含有溶剂的对照样品的百分比。细胞测定：将 2 × 105 HeLa 细胞或 1.5 × 105 COS-7 细胞重悬于 2 mL 培养基中，铺板于 6 孔培养皿上，并加入 2 μL 10 mM TG003 溶解在 Me2SO 中（最终浓度为 10 μM），或 2将 μL Me2SO 添加到一些孔中。将细胞用胰蛋白酶消化，并每 24 小时计数一次密度，持续 3 天。然后用 1 mL 冰冷的 70% 乙醇固定细胞，用 PBS 洗涤，在 1 ml 含有 1 μg/mL DNase-free RNase A 和 50 μg/mL 碘化丙啶的 PBS 中于 37°C 孵育 20 分钟，并通过 FACSCalibur 进行细胞周期分析。
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| 体内研究 (In Vivo) |
TG003 (10 μM) 可挽救爪蟾中因过度 Clk 活性而引起的胚胎缺陷。
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| 酶活实验 |
在含有 200 mM Tris-HCl (pH 7.5)、12.5 mM MgCl2、8 mM 二硫苏糖醇、4 mM EGTA、1–20 μM ATP、1 μCi [γ–使用 32P]ATP、1 μg SF2/ASF RS 结构域合成肽和 0.1-1 μg 纯化激酶（最终体积为 40 μL）来测量 Clks 和 SRPKs 的激酶活性。无论抑制剂的浓度如何，Me2SO的终浓度均调整为1%。哺乳动物重组蛋白在 30 °C 下孵育 10 分钟，非洲爪蟾重组蛋白在 25 °C 下孵育 10 分钟后，一半的反应混合物被点样在 P81 磷酸纤维素膜上。孵育时间、底物和激酶浓度是激酶测定的参数之一，经过优化以保持线性。用 5% 磷酸溶液或 5% 三氯乙酸溶液清洗膜至少十五分钟。使用液体闪烁计数器来量化放射性[1]。
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| 细胞实验 |
将 2x105 HeLa 或 1.5x105 COS-7 细胞重悬于 2 mL 培养基中，置于 6 孔板上；在某些孔中，添加 2 μL 溶解在 Me2SO 中的 10 mM TG003（终浓度为 10 mM）或 2 μL Me2SO。三天内每 24 小时对胰蛋白酶处理的细胞进行计数，然后测定密度。将细胞固定在 1 mL 冰冷的 70% 乙醇中后，然后用 PBS 清洗，在含有 50 μg/mL 碘化丙啶和 1 μg/mL 无 DNase 的 1 mL PBS 中于 37 °C 孵育 20 分钟RNase A，然后进行细胞周期分析[1]。
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| 动物实验 |
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| 参考文献 |
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| 分子式 |
C13H15NO2S
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| 分子量 |
249.33
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| 精确质量 |
249.082
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| 元素分析 |
C, 62.62; H, 6.06; N, 5.62; O, 12.83; S, 12.86
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| CAS号 |
719277-26-6
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| 相关CAS号 |
300801-52-9;719277-26-6
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| PubChem CID |
1893668
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| 外观&性状 |
white solid powder
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| LogP |
2.381
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| tPSA |
59.47
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
17
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| 分子复杂度/Complexity |
329
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC(/C=C1SC2=CC=C(OC)C=C2N\1CC)=O
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| InChi Key |
BGVLELSCIHASRV-QPEQYQDCSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H15NO2S/c1-4-14-11-8-10(16-3)5-6-12(11)17-13(14)7-9(2)15/h5-8H,4H2,1-3H3/b13-7-
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| 化学名 |
(1Z)-1-(3-ethyl-5-methoxy-1,3-benzothiazol-2-ylidene)propan-2-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.0107 mL | 20.0537 mL | 40.1075 mL | |
| 5 mM | 0.8021 mL | 4.0107 mL | 8.0215 mL | |
| 10 mM | 0.4011 mL | 2.0054 mL | 4.0107 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CDK8-IN-16
CDK2-IN-37
CDK7-IN-32
CDK-IN-16
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