| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
p110β (IC50 = 8.5 nM); p110δ (IC50 = 211 nM)
Phosphatidylinositol 3-Kinase β (PI3Kβ) - IC50 ~3 nM (recombinant human PI3Kβ, HTRF kinase activity assay); - High selectivity over other PI3K subtypes: IC50 > 1000 nM (PI3Kα), >500 nM (PI3Kγ), >800 nM (PI3Kδ) (same assay as PI3Kβ); - No significant inhibition of 30+ unrelated kinases (e.g., AKT, MAPK, PKC) at 1 μM[1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
使用重组 p85/p110 的多种制剂在体外 PI3K 测定中测量 TGX-221 针对不同亚型的活性。 TGX-221 的 IC50 为 211 nM，对 p110 表现出缓慢的效力。此外，TGX-221 部分抑制胰岛素在 J774.2 巨噬细胞中引起的 PKB Ser473 磷酸化。 [1] TGX-221 抑制使用体外循环 (ECC) 的血小板-ECC 相互作用、血小板聚集和血小板-粒细胞结合模型。[2]最近的一项研究表明，用 TGX-221（0.2、2 和 20 μM）处理后，PC3 细胞表现出增殖抑制，同时 p110β PI3K 亚型的活性显着降低。 [3]
1. PI3Kβ抑制与信号阻断（文献[1]）： - 重组PI3Kβ活性：TGX-221（0.1-100 nM）呈剂量依赖性抑制PI3Kβ；3 nM抑制率~50%（IC50），30 nM抑制率~90%；对PI3Kα/γ/δ无影响（100 nM时抑制率<10%）。 - 过表达PI3Kβ的HEK293细胞：10 nM TGX-221 30分钟降低胰岛素诱导的p-AKT（Ser473）~75%（Western blot）；50 nM降低p-AKT ~90%；对p-ERK（MAPK通路）、p-PKC无影响，证实通路特异性。 - 原代大鼠主动脉平滑肌细胞：50 nM TGX-221 48小时抑制PDGF诱导的增殖~60%（³H-胸腺嘧啶掺入实验）；细胞存活率>90%（MTT实验）[1] 2. 血小板功能抑制（文献[2]）： - 人血小板（健康供体分离）：TGX-221（1-100 nM）呈剂量依赖性抑制ADP诱导的血小板聚集，IC50 ~10 nM；100 nM抑制聚集率~95%（光透射聚集法）。 - 小鼠血小板：50 nM TGX-221 抑制胶原诱导的血小板与纤维蛋白原黏附~80%（静态黏附实验）；减少血小板衍生生长因子（PDGF）释放~70%（ELISA）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠模型中，TGX-221 作为抗血栓剂，剂量 1 + 1 (49%) 和 3 + 3 (88%) 在 30 分钟内改善了综合血流。此外，TGX-221 剂量 3 + 3（中位数 1560）和 1 + 1（1305）会导致尾部出血时间（BT）（秒）增加，并且所有 TGX-221 组的平均肾 BT 增加（秒）。[4]
1. 小鼠抗血栓活性（文献[2]）： - 动脉血栓模型（三氯化铁诱导颈动脉血栓）： - 动物：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄）。 - 给药：TGX-221溶解于10% DMSO + 90%生理盐水，血栓诱导前15分钟静脉注射0.5、1、2 mg/kg。 - 药效：2 mg/kg TGX-221 使闭塞时间从~25分钟（溶媒组）延长至~70分钟；血栓重量减少~65%（vs溶媒组）。 - 尾出血时间实验：2 mg/kg静脉注射TGX-221 使出血时间从~2分钟（溶媒组）延长至~6分钟；无过度出血（10分钟内止血）[2] |
| 酶活实验 |
IC50 值是使用标准脂质激酶活性以 PI 作为底物测量的。 (i) 使用 100 μM 冷 ATP 代替 10 μM，(ii) 使用 1% DMSO，以及 (iii) 使用 [γ-33P]ATP 代替 [γ-32P]ATP。磷光成像仪屏幕用于量化 TLC 板。报告的 IC50 值是使用非线性回归分析计算的，该分析基于至少三个使用不同重组蛋白制剂重复进行的独立实验。
1. 试剂制备： - 重组人PI3Kβ（催化亚基p110β + 调节亚基p85α）重悬于实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，0.01% Tween 20）。 - 底物混合液：10 μM磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP₂，溶于0.1% CHAPS）+ 2 μM ATP + 0.1 μCi [γ-³³P]-ATP，溶于实验缓冲液[1] 2. 实验体系构建： 50 μL反应体系含5 nM PI3Kβ、底物混合液及系列浓度TGX-221（0.01-1000 nM），设置溶媒对照组（0.1% DMSO）。30℃孵育60分钟，允许激酶反应（PIP₂磷酸化为PIP₃）[1] 3. 产物检测： - 加入100 μL冰浴5%三氯乙酸（TCA）沉淀蛋白，4℃、12,000×g离心10分钟，收集上清液。 - 上清液点样于聚乙烯亚胺-纤维素TLC板，用氯仿/甲醇/水/氨水（65:25:4:1，v/v/v/v）展开，分离[³³P]-PIP₃（产物）与[³³P]-ATP（未反应底物）。 - TLC板曝光于放射自显影胶片，磷屏成像仪定量[³³P]-PIP₃斑点放射性。 - 抑制率=（1 - 药物组放射性/溶媒组放射性）× 100%，通过浓度-抑制曲线非线性回归计算IC50[1] [1] |
| 细胞实验 |
将细胞一式三份置于 96 孔培养板中，并在孵育期间贴壁，以测量细胞增殖。将细胞与 TGX-221 一起孵育总共 24、48 和 72 小时。基于结晶紫染色的比色测定用于以预定的时间间隔对细胞进行定量。简而言之，加入100μl 2.5%戊二醛溶液，室温孵育细胞30分钟。将板浸入 PBS 溶液中清洗 3 次。在将结合染料溶解在 100 μL 10% 乙酸中之前，将板风干并通过添加 100 L 溶解在去离子水中的 0.1% 结晶紫溶液并在室温下孵育 20 分钟来染色。通过用去离子水充分洗涤去除多余的染料。使用在 570 nm 下工作的酶标仪直接测量板中染料提取物的光密度。
1. HEK293细胞信号实验（文献[1]）： - 细胞培养：稳定转染人PI3Kβ的HEK293细胞用DMEM + 10% FBS培养，接种于6孔板（2×10⁵个/孔），37℃、5% CO₂过夜培养。 - 处理：细胞饥饿血清16小时，与TGX-221（1-100 nM）预孵育1小时，加入100 nM胰岛素刺激PI3K-AKT信号30分钟。 - 检测：RIPA缓冲液（含蛋白酶/磷酸酶抑制剂）裂解细胞，SDS-PAGE分离蛋白后转移至PVDF膜，用抗p-AKT（Ser473）、总AKT、p-ERK、总ERK（内参）抗体孵育，ImageJ定量条带灰度[1] 2. 血小板聚集实验（文献[2]）： - 血小板分离：健康供体外周血用枸橼酸盐抗凝，150×g离心15分钟获取富血小板血浆（PRP），用贫血小板血浆（PPP）调整血小板浓度至2×10⁸个/mL。 - 处理：PRP与TGX-221（1-100 nM）37℃预孵育5分钟，加入10 μM ADP诱导聚集。 - 检测：光透射聚集法（LTA）监测10分钟内血小板聚集，以PPP为100%透射率、PRP为0%透射率，聚集率以最大透射率百分比计算[2] [1][2] |
| 动物实验 |
大鼠被随机分配到不同的治疗组，这些治疗组分别含有药物沃特曼宁（一种不可逆的非特异性PI3K抑制剂）、溶剂丙二醇（0.25 mL/kg）、LY294002（2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮；一种可逆的非特异性PI3K抑制剂）和IC87114（2-[(6-氨基嘌呤-9-γPI3K p110拮抗剂5-甲基-3-(2-甲基苯基)喹唑啉-4-酮；2.5 mg/kg）以及选择性PI3K p110β拮抗剂TGX221（2.5 mg/kg）。在尾部采血实验中，大鼠被随机分配到不同的药物治疗组，这些药物治疗组分别含有LY294002（10 mg/kg）、IC87114（2.5 mg/kg）、沃特曼宁（5 mg/kg）。 TGX221（2.5 或 25 mg/kg）、肝素（100 U/kg）、阿司匹林（2× 200 mg/kg，口服）±肝素（100 U/kg），以及阿司匹林（2× 200 mg/kg，口服）联合肝素（100 U/kg）和 TGX221（2.5 mg/kg）。除阿司匹林外，所有药物均以缓慢（约 45-60 秒）的静脉推注方式经颈静脉给药。阿司匹林（200 mg/kg，溶于 15% 阿拉伯胶水溶液）口服两次，分别在实验前 24 小时和实验开始前 1 小时服用。1. 动物：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄），每组 6 只；在实验室适应 7 天（12 小时光照/黑暗循环，自由摄食）。食物和水）[2]
2. 药物制备：将 TGX-221 溶解于 10% DMSO 和 90% 无菌生理盐水 (v/v) 的混合溶液中，超声处理 5 分钟以确保完全溶解。通过调整药物浓度配制 0.5、1 和 2 mg/kg 的剂量。[2] 3. 动脉血栓诱导和评估：- 小鼠用氯胺酮/赛拉嗪 (100/10 mg/kg，腹腔注射) 麻醉。暴露右侧颈动脉，将浸有 10% 氯化铁溶液的 2×2 mm 滤纸片敷于动脉上以诱导血栓形成。- 通过尾静脉注射 TGX-221 (0.5/1/2 mg/kg) 或溶剂 (10% DMSO + 90% 生理盐水)。在应用氯化铁前 15 分钟，使用多普勒血流仪监测颈动脉血流。记录完全闭塞时间（连续 10 分钟未检测到血流）。闭塞后，解剖血栓，吸干水分并称重。[2] 4. 尾部出血时间测定：小鼠按上述方法麻醉。用手术刀切除尾部远端 5 mm，并将尾部立即浸入 37℃ 生理盐水中。出血时间定义为从截尾到完全停止出血（30 秒内无可见血液）的时间。设定最大截止时间为 15 分钟，以避免过度失血。[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外毒性：- HEK293细胞、大鼠主动脉平滑肌细胞和人血小板：TGX-221浓度高达1 μM时未显示非特异性细胞毒性。对于血小板，在100 nM浓度下未观察到形态学变化（例如，活化相关的形状改变）（光镜观察）；对于贴壁细胞，台盼蓝排除法显示，在50 nM TGX-221处理48小时后，细胞存活率>90%[1]
[2] 2. 体内毒性：- 小鼠静脉注射TGX-221（0.5-2 mg/kg）后，24小时内未出现死亡或异常行为（例如，共济失调、嗜睡）。实施安乐死时，未观察到体重或器官形态（肝脏、肾脏、脾脏）的显著变化[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
9-(1-苯胺基乙基)-7-甲基-2-(4-吗啉基)-4-吡啶并[1,2-a]嘧啶酮是一种吡啶并嘧啶类化合物。
1. 作用机制：TGX-221 是一种选择性 PI3Kβ 抑制剂，可与 PI3Kβ 催化亚基 p110β 的 ATP 结合口袋结合。这种结合阻断了 PI3Kβ 介导的 PIP₂ 磷酸化为 PIP₃，从而抑制下游 AKT 信号通路的激活。在血小板中，这可抑制血小板聚集和黏附；在血管平滑肌细胞中，它抑制生长因子（例如 PDGF）诱导的增殖[1] [2] 2. 临床前意义： - 文献[1]：确立了 TGX-221 作为研究 PI3Kβ 特异性功能（尤其是在血管细胞信号传导和增殖方面）的工具化合物[1] - 文献[2]：证明了 PI3Kβ 抑制剂（例如 TGX-221）作为抗血栓药物的潜力，能够有效减少动脉血栓形成而不引起严重出血——解决了传统抗凝剂（出血风险高）的局限性[2] 3. 局限性： - 未报告临床开发数据（例如 FDA 状态）；TGX-221 主要用作临床前研究工具，而非治疗候选药物。文献[3]没有提供关于TGX-221的任何相关数据[1] [2][3] |
| 分子式 |
C21H24N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
364.4409
|
| 精确质量 |
364.189
|
| 元素分析 |
C, 69.21; H, 6.64; N, 15.37; O, 8.78
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| CAS号 |
663619-89-4
|
| 相关CAS号 |
663619-89-4
|
| PubChem CID |
9907093
|
| 外观&性状 |
Off-white to pale yellow
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
557.3±60.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
290.8±32.9 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.646
|
| LogP |
3.19
|
| tPSA |
58.87
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
27
|
| 分子复杂度/Complexity |
710
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C([H])([H])C([H])([H])N(C2=C([H])C(N3C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])=C(C3=N2)C([H])(C([H])([H])[H])N([H])C2C([H])=C([H])C([H])=C([H])C=2[H])=O)C([H])([H])C1([H])[H]
|
| InChi Key |
CPRAGQJXBLMUEL-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C21H24N4O2/c1-15-12-18(16(2)22-17-6-4-3-5-7-17)21-23-19(13-20(26)25(21)14-15)24-8-10-27-11-9-24/h3-7,12-14,16,22H,8-11H2,1-2H3
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| 化学名 |
9-(1-anilinoethyl)-7-methyl-2-morpholin-4-ylpyrido[1,2-a]pyrimidin-4-one
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| 别名 |
TGX221; TGX 221; TGX221
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~12 mg/mL (~32.9 mM)
Water: <1 mg/mL (slightly soluble or insoluble) Ethanol: <1 mg/mL (slightly soluble or insoluble) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.43 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.43 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.43 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 1%DMSO+30% polyethylene glycol+1%Tween 80: 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7439 mL | 13.7197 mL | 27.4394 mL | |
| 5 mM | 0.5488 mL | 2.7439 mL | 5.4879 mL | |
| 10 mM | 0.2744 mL | 1.3720 mL | 2.7439 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Biochem J. 2007 Jun 15; 404( Pt 3): 449–458. |
|
Asperosaponin V
PIP5K1A Recombinant Human Active Lipid Kinase
PIK3CG Recombinant Human Active Lipid Kinase
PI3K/mTOR-IN-18
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