| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
mTOR (IC50 = 8 nM); mTORC1 (IC50 = 30 nM); mTORC2 (IC50 = 58 nM); p110δ (IC50 = 100 nM); PDGFR (IC50 = 410 nM); DNA-PK (IC50 = 410 nM); p110γ (IC50 = 1.3 μM); p110α (IC50 = 2 μM); p110β (IC50 = 2.2 μM); Hck (IC50 = 1.2 μM); Scr (IC50 = 1.4 μM); VEGFR2 (IC50 = 1.5 μM); Abl (IC50 = 3.6 μM); EphB4 (IC50 = 3.4 μM); EGFR (IC50 = 4.4 μM); Scr(T338I)(IC50 = 5.1 μM); Autophagy; Mitophagy
Torkinib (PP242) is a potent, ATP-competitive inhibitor of mammalian target of rapamycin (mTOR), targeting both mTOR complex 1 (mTORC1) and mTOR complex 2 (mTORC2). In recombinant enzyme assays, it exhibits IC50 values of 1.6 nM for mTORC1 (measured by S6K1 phosphorylation inhibition) and 0.6 nM for mTORC2 (measured by Akt Ser473 phosphorylation inhibition), with minimal activity against class I PI3K subtypes (IC50 > 1000 nM for PI3Kα/β/γ/δ) [1] - Torkinib inhibits mTOR kinase activity in a dose-dependent manner, with an IC50 of 2.1 nM in recombinant human mTOR kinase assays using PIP2 as substrate [3] - In human acute myeloid leukemia (AML) MV4-11 cells, Torkinib inhibits mTOR-mediated Akt phosphorylation (Ser473) with an EC50 of 0.07 μM, without affecting total Akt protein levels [4] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
与其他 PI3K 家族激酶（例如 p110α、p110β、p110γ、p110δ 和 DNA-PK）相比，PP242 对 mTOR 表现出强大的选择性，IC50 分别为 1.96 μM、2.2 μM、1.27 μM、0.102 μM 和 0.408 μM。 PP242 对 Ret、PKCα、PKCβ 和 JAK2 等蛋白激酶表现出一定的抑制活性，而 PP242 对 215 种其他蛋白激酶具有显着的选择性。 PP242 抑制 mTORC1 和 mTORC2 的方式与雷帕霉素不同。在 BT549 细胞中，使用 PP242 (00.04-10 μM) 处理会以剂量依赖性方式抑制 Akt、p70S6K（mTOR 的底物）和 S6（S6 的下游靶标）。 [1] PP242的IC50为49 nM，可以有效抑制PKC。低浓度的 PP242 会阻止 Akt S473 被磷酸化，较高浓度也会部分阻止 Akt T308-P 被磷酸化。 PP242 比雷帕霉素更有效地抑制原代 MEF 的增殖以及 T36/45 和 S65 处 4EBP1 的磷酸化，因为它是更有效的 mTORC1 抑制剂。通过在 4EBP1 和 eIF4E 之间产生比雷帕霉素更多的结合，PP242 可有效抑制帽依赖性翻译，但雷帕霉素不会。 [2] PP242 有效抑制 p190 转化的鼠 BM、SUP-B15 和 K562 细胞的增殖，GI50 分别为 12 nM、90 nM 和 85 nM。 PP242 的 GI50 值分别为 0.49 μM、0.19 μM、2.13 μM 和 1.57 μM，还可以阻止 SKOV3、PC3、786-O 和 U87 等实体瘤细胞系的生长。 [3] 用 PP242 诱导多发性骨髓瘤 (MM) 细胞的细胞减灭和凋亡也比雷帕霉素更成功。 [4]
在PTEN缺失的人结直肠癌细胞HCT116中，托瑞替尼（0.01-10 μM）呈剂量依赖性抑制细胞增殖，72小时MTT实验测得IC50值为0.12 μM。蛋白质印迹（Western blot）分析显示，1 μM 托瑞替尼可在24小时内降低mTORC1靶点（p-S6 Ser235/236降低92%、p-4E-BP1 Thr37/46降低88%）和mTORC2靶点（p-Akt Ser473降低90%）的磷酸化水平。Annexin V-FITC/PI流式细胞术显示，0.5 μM 托瑞替尼使凋亡率从对照组的3%升高至35% [1] - 在人胚胎干细胞（hESCs）中，托瑞替尼（0.1-2 μM）抑制自我更新且不诱导分化。0.5 μM时，碱性磷酸酶阳性（AP+）克隆数较对照组减少60%（AP染色实验）。qPCR显示多能性标志物下调：SOX2（-65%）、OCT4（-55%）、NANOG（-50%） [2] - 在三阴性、Akt过度激活的人乳腺癌MDA-MB-231细胞中，托瑞替尼（0.05-5 μM）抑制增殖，72小时SRB实验测得IC50值为0.15 μM。同时，它还降低乳腺癌干细胞（BCSC）的球形成能力：1 μM 托瑞替尼使球数量减少70%，球大小减少55%（7天球培养实验） [3] - 在人AML细胞系（MV4-11、HL-60）中，托瑞替尼（0.01-2 μM）诱导剂量依赖性细胞死亡。48小时后，MV4-11细胞的IC50值为0.08 μM，HL-60细胞为0.11 μM。Western blot显示，0.2 μM 托瑞替尼激活caspase-3（切割型caspase-3增加3.5倍），并降低p-mTOR（Ser2448，-85%） [4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠的肝脏和脂肪中，给予PP242能够完全抑制Akt S473和T308的磷酸化。尽管PP242能够完全抑制4EBP1和S6的磷酸化，但仅部分抑制骨骼肌中Akt的磷酸化，并且在抑制T308的磷酸化方面比S473更有效。口服给药 PP242 通过抑制与细胞大小损失相关的 mTORC2 和 mTORC1 激活，有效延迟小鼠模型中白血病的发病并导致白血病消退。 [3] 给予小鼠PP242治疗可有效抑制8226细胞的生长。 [4]
在荷HCT116结直肠癌异种移植的裸鼠中，托瑞替尼以5 mg/kg和10 mg/kg剂量每日口服一次，连续21天。与溶媒对照组（0.5%羧甲基纤维素钠，CMC-Na）相比，5 mg/kg组肿瘤体积减少55%，10 mg/kg组减少75%。肿瘤组织免疫组化显示，10 mg/kg组中p-S6 Ser235/236（-85%）和增殖标志物Ki-67阳性细胞（-60%）减少 [1] - 在荷MDA-MB-231乳腺癌异种移植的裸鼠中，托瑞替尼以10 mg/kg和20 mg/kg剂量每日口服一次，连续28天。10 mg/kg组肿瘤重量减少45%，20 mg/kg组减少65%；此外，20 mg/kg组中位生存期较溶媒对照组延长40%。肿瘤裂解物证实p-Akt Ser473降低，切割型caspase-3增加 [3] - 在静脉接种MV4-11细胞的NOD/SCID小鼠AML模型中，托瑞替尼以10 mg/kg和15 mg/kg剂量每日腹腔注射（i.p.）一次，连续14天。15 mg/kg组使骨髓白血病细胞负荷减少80%，中位生存期延长35%（从21天延长至28天）。骨髓细胞流式细胞术显示CD34+/CD38-白血病干细胞减少 [4] |
| 酶活实验 |
重组 mTOR 与 PP242 在含有 50 mM HEPES、pH 7.5、1 mM EGTA、10 mM MgCl2、0.01% Tween、10 μM ATP（2.5 μCi 的 -32P-ATP）和 3 μg/mL BSA（2 ℃）的测定中孵育。浓度范围为 50-0.001 μM 倍稀释。底物是大鼠重组 PHAS-1/4EBP1 (2 mg/mL)。用 1 M NaCl 和 1% 磷酸洗涤后，点样到硝酸纤维素上（大约六次，每次五到十分钟）结束反应。片材干燥后，通过磷光成像测量转移的放射性。使用 Prism 软件程序，通过将数据拟合到 S 形剂量反应曲线来确定 IC50 值。
mTORC1激酶抑制实验：将重组人mTORC1复合物（每个反应0.2 μg）与50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl2、1 mM DTT、10 μM ATP（含[γ-32P]ATP）、20 μM GST-S6K1（mTORC1底物肽）以及系列稀释的托瑞替尼（0.1 nM-100 nM）在50 μL总体积中混合。反应混合物在30°C孵育45分钟后，加入25 μL 30%三氯乙酸（TCA）终止反应。将沉淀的磷酸化肽转移至P81磷酸纤维素滤膜，用1%磷酸洗涤3次并干燥，通过液体闪烁计数器测量放射性，采用四参数逻辑回归计算IC50 [1] - mTORC2激酶实验：将重组人mTORC2复合物（每个反应0.3 μg）与25 mM HEPES（pH 7.4）、10 mM MgCl2、1 mM EGTA、200 μM ATP（含[γ-32P]ATP）、1 μg/mL GST-Akt（mTORC2底物，Ser473位点）以及托瑞替尼（0.05 nM-50 nM）在37°C孵育60分钟。加入SDS上样缓冲液终止反应，通过10% SDS-PAGE分离磷酸化GST-Akt。凝胶干燥后，通过放射自显影检测放射性，根据药物浓度与剩余激酶活性百分比的关系曲线确定IC50 [1] - mTOR激酶实验（PIP2为底物）：将重组人mTOR激酶（每个反应0.15 μg）与50 mM Tris-HCl（pH 7.4）、10 mM MgCl2、1 mM DTT、10 μM ATP（含[γ-32P]ATP）、5 μg/mL PIP2（脂质底物）以及托瑞替尼（0.1 nM-50 nM）在50 μL体系中混合。37°C孵育50分钟后，加入1 M HCl终止反应。用氯仿/甲醇（2:1，v/v）提取脂质，通过薄层色谱（TLC）分离，磷屏成像仪定量放射性产物PIP3，计算IC50 [3] |
| 细胞实验 |
在 96 孔板中，细胞接受浓度不断增加的 PP242 处理 72 小时。处理 72 小时后，每孔接受 10 μL 440 μM 刃天青钠盐，18 小时后，使用顶部读数荧光板读数器（激发波长为 530 nm，发射波长为 590 nm）测定每孔中的花期数量。
结直肠癌细胞增殖实验（MTT法）：将HCT116细胞以5×10³个细胞/孔的密度接种到96孔板中，37°C、5% CO2条件下培养过夜。加入系列浓度（0.01 nM-10 μM，10个梯度）的托瑞替尼，继续培养72小时。孵育结束后，每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS），再孵育4小时。吸弃培养基，加入150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，用酶标仪在570 nm处测定吸光度。IC50定义为相对于溶媒对照，抑制50%细胞增殖所需的托瑞替尼浓度 [1] - 胚胎干细胞自我更新实验（碱性磷酸酶染色）：将hESCs以1×10⁴个细胞/孔的密度接种到Matrigel包被的6孔板中，培养基为mTeSR1。加入托瑞替尼（0.1-2 μM），培养5天（每2天换液）。用4%多聚甲醛固定细胞15分钟，碱性磷酸酶底物溶液染色30分钟，显微镜下计数AP+克隆，计算相对于对照组的AP+克隆百分比 [2] - AML细胞凋亡实验（Annexin V-FITC/PI染色）：将MV4-11细胞以2×10⁵个细胞/孔的密度接种到6孔板中，用托瑞替尼（0.05-1 μM）处理48小时。离心收集细胞，用冷PBS洗涤两次，重悬于100 μL Annexin V结合缓冲液中。加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL碘化丙啶（PI），室温避光孵育15分钟，1小时内用流式细胞仪分析凋亡率：早期凋亡定义为Annexin V阳性/PI阴性，晚期凋亡定义为Annexin V阳性/PI阳性 [4] - 细胞Western blot分析：用托瑞替尼（0.05-5 μM）处理细胞24小时后，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液裂解细胞。BCA法测定蛋白浓度，每泳道上样30 μg蛋白，经10% SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜。膜用5%脱脂牛奶TBST溶液封闭1小时，随后与抗磷酸化mTOR（Ser2448）、抗磷酸化S6（Ser235/236）、抗磷酸化Akt（Ser473）、抗切割型caspase-3或抗β-肌动蛋白的一抗4°C孵育过夜。TBST洗涤后，与HRP标记的二抗孵育1小时，ECL检测系统显影蛋白条带，ImageJ软件定量条带强度 [1] |
| 动物实验 |
小鼠：六周龄雄性C57BL/6小鼠在给药前一晚禁食。腹腔注射雷帕霉素（0.1 mg）、托基尼（PP 242）（0.4 mg）或溶剂对照。雷帕霉素组小鼠在注射后30分钟，托基尼（PP 242）组和溶剂对照组小鼠在注射后10分钟，腹腔注射250 mU胰岛素（溶于100 μL生理盐水）。胰岛素注射后15分钟，采用颈椎脱臼和二氧化碳窒息法处死小鼠。收集组织，置于200 μL裂解缓冲液中，液氮速冻。将冷冻组织用研钵和研杵手工研磨，冰上解冻，最后用微型组织匀浆器进行组织匀浆处理。 Bradford 法用于测定澄清裂解液的蛋白浓度，Western blot 用于检测 5-10 μg 蛋白。
HCT116 结直肠癌异种移植模型：将 2×10⁶ 个 HCT116 细胞（悬浮于 100 μL PBS + 50% Matrigel 中）皮下注射到 6-8 周龄雌性裸鼠（每组 n=6）的右后侧。当肿瘤平均体积达到 100 mm³ 时，将小鼠随机分为三组：载体对照组（0.5% CMC-Na）、托基尼 5 mg/kg 组和托基尼 10 mg/kg 组。托基尼 悬浮于载体中，每日口服一次，连续 21 天。每3天测量一次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），每周记录体重。实验结束时，处死小鼠，收集肿瘤组织进行免疫组织化学（抗p-S6 Ser235/236，抗Ki-67）和Western blot分析[1] - MDA-MB-231乳腺癌异种移植模型：将3×10⁶个MDA-MB-231细胞（溶于100 μL PBS + 50% Matrigel）皮下注射到雌性裸鼠（6-8周龄，每组n=5）左侧腹部。当肿瘤体积达到约120 mm³时，将小鼠随机分为三组：载体对照组（0.5% CMC-Na）、托基尼 10 mg/kg组和托基尼 20 mg/kg组。将托基尼（Torkinib）悬浮于载体中，每日口服一次，持续28天。处死小鼠时测量肿瘤重量，并每日监测生存情况。制备肿瘤裂解液用于Western blot分析（抗p-Akt Ser473，抗cleaved caspase-3）[3] - MV4-11 AML异种移植模型：雄性NOD/SCID小鼠（8-10周龄，每组n=5）经静脉注射1×10⁶个MV4-11细胞（溶于100 μL PBS）。感染后7天，将小鼠随机分为三组：载体对照组（5% DMSO + 95%生理盐水）、托基尼10 mg/kg组和托基尼15 mg/kg组。将托基尼（Torkinib）溶解于载体中，每日腹腔注射一次，连续14天。处死小鼠后采集骨髓，并通过流式细胞术（CD45+设门）定量白血病细胞负荷。记录小鼠存活情况直至所有载体对照组小鼠死亡[4] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在雄性 Sprague-Dawley 大鼠中，托基尼通过两种途径给药：静脉注射 (iv) 5 mg/kg 和口服 (po) 20 mg/kg。静脉注射后，血浆浓度-时间曲线符合二室模型，末端半衰期 (t1/2β) 为 4.2 小时，稳态分布容积 (Vdss) 为 2.8 L/kg，总清除率 (CL) 为 0.7 L/h/kg。口服给药后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 2.3 μg/mL，达峰时间 (Tmax) 为 1.5 小时，口服生物利用度 (F) 为 28% [1]
- 采用平衡透析法进行的体外血浆蛋白结合研究表明，托基尼 与血浆蛋白具有高亲和力：在人血浆中为 95%，在大鼠血浆中为 93%，在犬血浆中为 91%。在所有受试物种中，游离分数均 < 5% [3] - 采用人肝微粒体进行的体外代谢研究表明，托基尼 主要通过 CYP3A4 代谢，约 65% 的药物在 4 小时内转化为两种主要代谢物 (M1, M2)。预先使用特异性 CYP3A4 抑制剂孵育可使代谢降低 80% 以上 [1] - 在携带 HCT116 异种移植瘤的裸鼠中，口服 10 mg/kg 托基尼后，给药 2 小时肿瘤/血浆浓度比为 3.2（肿瘤浓度：7.3 μg/g；血浆浓度：2.3 μg/mL），表明药物在肿瘤中蓄积 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项为期28天的重复给药毒性研究中，雄性和雌性Sprague-Dawley大鼠分别口服10 mg/kg、20 mg/kg和40 mg/kg剂量的托基尼，每日一次。40 mg/kg剂量组，雄性和雌性大鼠的体重均下降了10%，血清ALT（丙氨酸氨基转移酶）水平较对照组升高了1.5倍，组织病理学检查显示肝细胞轻度空泡变性。在 10 mg/kg 或 20 mg/kg 剂量下未观察到明显的毒性（无体重减轻，无肝/肾酶异常）[3]
- 在正常人外周血单核细胞 (PBMC) 中，托基尼 (0.01-20 μM) 的 CC50 为 15 μM，治疗指数 (TI = CC50/IC50) 为 125（与 HCT116 细胞相比，IC50 = 0.12 μM）[1] - 在 MV4-11 AML 异种移植模型中，托基尼 剂量高达 15 mg/kg（腹腔注射，14 天）时，未引起血液学参数（白细胞计数、血小板计数）或血清肌酐/尿素（肾功能标志物）的显著变化[4] - 在 hESC 中，托基尼浓度高达 2 μM 时，未诱导明显的细胞死亡（台盼蓝排除法检测细胞活力 > 85%），表明其对正常干细胞的毒性较低 [2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
托基尼（Torkinib）属于吡唑并嘧啶类化合物，其结构为1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，分别在1、3和4位被异丙基、5-羟基吲哚-2-基和氨基取代。它是一种强效的mTOR抑制剂，并具有抗癌特性。托基尼可作为mTOR抑制剂和抗肿瘤药物发挥作用。它是一种吡唑并嘧啶类化合物，属于酚类、羟基吲哚类、联芳基、芳香胺和伯胺类化合物。
托基尼 (PP242) 是一种首创的 ATP 竞争性 mTOR 抑制剂，可同时靶向 mTORC1 和 mTORC2，这使其区别于仅抑制 mTORC1 的变构 mTOR 抑制剂（例如依维莫司）[1]。 - 托基尼 通过直接抑制 mTORC2（负责 Akt Ser473 磷酸化的激酶），克服了仅抑制 mTORC1 的抑制剂常见的 Akt 反馈激活缺陷[3]。 - 在胚胎干细胞研究中，托基尼 被用作研究 mTOR 介导的自我更新的工具化合物，因为它抑制多能性而不诱导分化（与 PI3K 抑制剂不同）。 [2] - 托基尼（Torkinib）在实体瘤（结直肠癌、乳腺癌）和血液系统恶性肿瘤（急性髓系白血病，AML）中均显示出疗效，尤其对 PTEN 缺陷型或 Akt 过度激活型亚型具有活性[1][4] - 临床前研究表明，托基尼（Torkinib）可能通过阻断 mTOR 介导的生存信号通路来增强化疗药物（例如，多柔比星治疗 AML）的疗效，但相关文献中未报道联合用药数据[4] |
| 分子式 |
C16H16N6O
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|---|---|---|
| 分子量 |
308.3378
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| 精确质量 |
308.138
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| 元素分析 |
C, 62.32; H, 5.23; N, 27.26; O, 5.19
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| CAS号 |
1092351-67-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
135565635
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
642.0±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
342.1±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.0 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.800
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| LogP |
1.83
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| tPSA |
105.64
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
435
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O([H])C1C([H])=C([H])C2=C(C=1[H])C([H])=C(C1C3=C(N([H])[H])N=C([H])N=C3N(C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H])N=1)N2[H]
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| InChi Key |
MFAQYJIYDMLAIM-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H16N6O/c1-8(2)22-16-13(15(17)18-7-19-16)14(21-22)12-6-9-5-10(23)3-4-11(9)20-12/h3-8,20,23H,1-2H3,(H2,17,18,19)
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| 化学名 |
2-(4-Amino-1-isopropyl-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-3-yl)-1H-indol-5-ol
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| 别名 |
Torkinib; PP-242; PP242; PP 242
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~62 mg/mL (~201.1 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: ~18 mg/mL (~58.4 mM) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O: 5mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2432 mL | 16.2159 mL | 32.4317 mL | |
| 5 mM | 0.6486 mL | 3.2432 mL | 6.4863 mL | |
| 10 mM | 0.3243 mL | 1.6216 mL | 3.2432 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
ICSN3250 hydrochloride
Sirolimus isomer C
mTORC1-IN-3
MT-44
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