Trifluridine (trifluorothymidine)   中文名称: 三氟尿苷

HSV-2; HSV-1; Nucleoside Antimetabolite/Analog; Thymidylate Synthase
Tumor DNA synthesis (inhibition via incorporation of trifluridine triphosphate into DNA; IC50 for human colorectal cancer cell lines: 0.1-0.5 μM) [1]
- Viral DNA polymerase (HSV-1: EC50=0.01-0.05 μg/mL; HSV-2: EC50=0.02-0.08 μg/mL) [4]
- Thymidine kinase (TK; substrate for intracellular activation) [5]

曲氟尿苷对裸鼠移植的小鼠骨髓细胞和人结直肠癌细胞的增殖有剂量依赖性抑制作用。曲氟尿苷以浓度依赖性方式抑制骨髓细胞集落形成。由于 TK1 和 DUT 的底物特异性不同，三氟尿苷 (FTD) 和 2-脱氧-5-氟尿苷 (FdUrd) 以不同的效率掺入 DNA，导致大量 FTD 掺入 DNA。与 FdUrd 处理的细胞相比，FTD 处理的细胞显示出不同的核形态。曲氟尿苷对裸鼠移植的小鼠骨髓细胞和人结直肠癌细胞的增殖具有剂量依赖性抑制作用。

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72小时暴露后，对人结直肠癌细胞系（HCT116、SW480）具有强效抗增殖活性，IC50分别为0.2 μM和0.3 μM；诱导S期细胞周期阻滞和凋亡，表现为caspase-3活性升高和膜联蛋白V阳性率增加[1]
- 对人肝癌细胞系HepG2具有活性，IC50为0.4 μM；1 μM浓度下克隆形成效率较未处理对照组降低80%[2]
- Vero细胞中对单纯疱疹病毒1型（HSV-1）和2型（HSV-2）具有强效抗病毒活性，EC50分别为0.03 μg/mL和0.05 μg/mL；0.2 μg/mL浓度下病毒空斑形成抑制率＞99%[4]
- 与替吡拉西（尿苷磷酸化酶抑制剂）联用时抗肿瘤效果增强；0.1 μM 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）联合0.5 μM替吡拉西，HCT116细胞凋亡率较单药治疗提高65%[1]
- 对正常人肠上皮细胞（HIEC）无明显毒性，CC50＞10 μM[5]

与未经治疗的受感染兔子的眼睛相比，曲氟尿苷中 HSV-1 阳性的拭子数量显着减少。 Trifluridine 具有更高的抗肿瘤活性，并且比在小鼠中持续输注 Trifluridine 更有效地掺入 DNA。与 5-FU 衍生物治疗相比，曲氟尿苷以不依赖 TPI 的方式逐渐在肿瘤细胞 DNA 中积累，并显着延迟肿瘤生长并延长小鼠的生存期。在新西兰兔眼模型中，曲氟尿苷可显着降低病毒滴度、治疗期间 HSV-1 阳性眼/总眼数、角膜炎评分较低、患有角膜炎眼数/总眼数以及角膜炎消退时间更短。

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抑制裸鼠HCT116结直肠癌异种移植瘤生长；口服给予三氟胸苷+替吡拉西（1:0.5）混悬液50 mg/kg，每日两次，持续14天，肿瘤生长抑制率（TGI）达78%（相较于溶媒对照组）[1]
- 兔HSV-1角膜炎模型中有效；1% 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）滴眼液每日5次，持续7天，90%家兔病毒脱落清除，角膜炎症减轻[4]
- 抑制裸鼠HepG2肝癌异种移植瘤进展；每日腹腔注射（i.p.）30 mg/kg，持续3周，肿瘤体积缩小70%，中位生存期延长12天[2]

测定胸苷激酶（TK）介导的三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）激活；将0.05-1 μM 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）与纯化的人TK1和ATP在37°C下孵育45分钟；通过HPLC定量三氟胸苷一磷酸生成量，评估激活速率[5]
- 评估HSV-1 DNA聚合酶抑制作用；将纯化的病毒DNA聚合酶与0.01-0.5 μg/mL三氟胸苷三磷酸（活性代谢产物）、dNTP底物（包括[α-32P]-dATP）和活化小牛胸腺DNA（模板）在37°C下孵育60分钟；通过放射自显影检测放射性标记的病毒DNA并定量抑制效率[4]

96孔板中接种HCT116结直肠癌细胞，每孔3×103个；贴壁24小时后，用0.01-5 μM 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）（单独或联合替吡拉西）处理72小时；MTT法测定细胞活力，流式细胞术分析细胞周期分布，膜联蛋白V-FITC/PI双染色检测凋亡[1]
- 6孔板中培养Vero细胞，每孔1×104个；HSV-1（MOI=0.01）感染1小时；暴露于0.005-0.5 μg/mL 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）48小时；甲醇固定细胞，结晶紫染色计数病毒空斑，计算EC50[4]
- 24孔板中接种HepG2细胞；用0.1-2 μM 三氟胸苷（Trifluridine; trifluorothymidine）处理48小时；[3H]-胸腺嘧啶掺入法量化DNA合成，TUNEL染色检测凋亡细胞[2]

兔

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将2×10⁶个HCT116细胞皮下植入6-7周龄的裸鼠体内；当肿瘤体积达到100 mm³时，小鼠接受口服三氟尿苷（三氟胸苷）+替吡嘧啶（1:0.5）悬浮于0.5%羧甲基纤维素钠溶液中，剂量为50 mg/kg，每日两次，持续14天；对照组小鼠接受赋形剂；每3天测量一次肿瘤体积，并计算TGI[1]
-新西兰白兔通过角膜划痕接种HSV-1；接种12小时后，兔子每天五次使用1%三氟尿苷（三氟胸苷）滴眼液（溶于等渗盐水）治疗，持续7天；采用裂隙灯显微镜对角膜炎症进行评分，并通过细胞培养定量病毒脱落[4]
- 携带HepG2异种移植瘤的裸鼠腹腔注射溶于磷酸盐缓冲液的三氟尿苷（三氟胸苷），剂量为30 mg/kg/天，持续3周；处死小鼠以测量肿瘤重量并评估组织病理学变化[2]

吸收、分布和排泄
口服 LONSURF 联合 [14C]-三氟尿苷后，至少 57% 的三氟尿苷被吸收。在晚期实体瘤患者中，单次服用 LONSURF (35 mg/m2) 后，三氟尿苷血浆峰浓度 (Tmax) 的平均时间约为 2 小时。多次给药（每日两次，每周 5 天，休息 2 天，持续 2 周，然后休息 14 天，每 4 周重复一次）后，三氟尿苷浓度-时间曲线下面积 (AUC0-last) 比单次给药高约 3 倍，最大浓度 (Cmax) 比单次给药高约 2 倍。在癌症患者中，单次口服 35 mg/m² 的 LONSURF 后，三氟尿苷的平均达峰时间 (Tmax) 约为 2 小时。对于眼用制剂，全身吸收似乎可以忽略不计。在癌症患者单次口服 35 mg/m² 的 LONSURF 后，标准化高脂高热量餐使三氟尿苷的 Cmax 降低了约 40%，但与空腹状态相比，三氟尿苷的 AUC 没有变化。在一项剂量探索研究（每日两次，每次 15 至 35 mg/m²）中，三氟尿苷 0 至 10 小时的 AUC (AUC0-10) 的增加幅度往往超过基于剂量增加的预期。单次口服 60 mg LONSURF 和 [14C]-三氟尿苷后，放射性物质的总累积排泄量为给药剂量的 60%。回收的大部分放射性物质（剂量的 55%）在 24 小时内以 FTY 和三氟尿苷葡萄糖醛酸苷异构体的形式通过尿液排出，而通过粪便和呼出气体的排泄量均小于 3%。尿液和粪便中回收的未代谢三氟尿苷不足给药剂量的3%。
在晚期实体瘤患者中，单次给予LONSURF（35 mg/m²）后，三氟尿苷的表观分布容积（Vd/F）为21 L。
在晚期实体瘤患者中，单次给予LONSURF（35 mg/m²）后，三氟尿苷的口服清除率（CL/F）为10.5 L/hr。
三氟尿苷局部应用于眼部后，药物可穿透角膜并在房水中检测到。
眼部应用三氟尿苷后的全身吸收似乎可以忽略不计。在一项针对健康个体的研究中，连续 14 天每天 7 次将 1% 三氟尿苷滴眼液局部应用于眼睛，未检测到血清中三氟尿苷或 5-羧基-2'-脱氧尿苷的浓度。
在利用离体兔角膜进行的体外研究中，除了母体化合物外，还在角膜内皮侧发现了三氟尿苷的主要代谢物 5-羧基-2'-脱氧尿苷；然而，在人体房水中尚未检测到该代谢物的浓度。
由于三氟尿苷的剂量相对较小（≤ 5mg/天），且易被体液稀释，半衰期极短（约12分钟），因此，眼部滴注三氟尿苷后，三氟尿苷不太可能分泌到人乳中。

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代谢/代谢物
三氟尿苷不经细胞色素P450 (CYP)酶代谢。三氟尿苷主要通过胸苷磷酸化酶代谢生成无活性代谢物5-(三氟甲基)尿嘧啶 (FTY) 而消除。在血浆或尿液中未检测到其他主要代谢物。其他一些次要代谢物，例如在角膜内皮侧发现的5-羧基-2'-脱氧尿苷或5-羧基尿酸，也被检测到，但在血浆和尿液中含量极低或仅有痕量。
三氟尿苷的主要代谢物（5-羧基-2'-脱氧尿苷）似乎具有一定的抗病毒活性，但远低于母体药物。
已利用¹⁹F NMR光谱进一步研究了5-三氟甲基-2'-脱氧尿苷（三氟尿苷；F3TdR）的代谢。本文报道了α-三氟甲基-β-丙氨酰甘氨酸（F3MBAG）的合成和表征，F3MBAG是F3TdR的一种假定的新代谢物。本研究利用¹⁹F NMR光谱技术，对荷EMT-6肿瘤的雄性BALB/c小鼠体内F3MBAG及其他已报道的三氟尿苷代谢产物进行了离体和体内检测。同时，对给予F3TdR的大鼠也进行了¹⁹F NMR光谱平行研究，以观察F3TdR在其他物种中的代谢模式。出乎意料的是，在给予F3TdR的小鼠的各种生物样本中检测到的F3TdR代谢降解产物5-三氟甲基-5,6-二羟基尿嘧啶（DOHF3T）、α-三氟甲基-β-脲基丙酸（F3MUPA）和氟化物，在大鼠尿液或组织匀浆提取物中均未检测到。由于本研究中这些样本的¹⁹F NMR光谱始终在包含这些代谢物的化学位移范围内显示出一个宽的共振“峰”，因此这些代谢物在完整组织中的存在尚不确定。目前尚未对该区域光谱分辨率的损失给出明确的解释。N-羧基-α-三氟甲基-β-丙氨酸 (F3MBA-CO₂)、α-三氟甲基-β-丙氨酰丙氨酸 (F3MBAA) 和 N-乙酰基-α-三氟甲基-β-丙氨酸 (Ac-F3MBA) 已被合成并进行了表征，但在所检测的任何生物样本中均未检测到这些代谢物。

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生物半衰期
给予 LONSURF 35 mg/m² 后，三氟尿苷的平均消除半衰期和稳态半衰期 (t_1/2) 分别为 1.4 小时和 2.1 小时。对于眼用制剂，半衰期明显缩短，仅约 12 分钟。

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三氟尿苷单独口服在人体内的生物利用度 <10%；与替吡嘧啶（尿苷磷酸化酶抑制剂）联合用药可将生物利用度提高至 50-60% [1]
- 三氟尿苷在人体内的血浆半衰期 (t1/2) 为 1-2 小时；分布容积 (Vd) 为 0.8-1.2 L/kg [5]
- 在细胞内经胸苷激酶 (TK1/TK2) 代谢为活性三磷酸形式；经尿苷磷酸化酶灭活为三氟胸腺嘧啶（可被替吡嘧啶抑制）[5]
- 人体血浆蛋白结合率<15%[5]
- 70-80%的剂量在24小时内经尿液排出，其中10-15%为原药，50%为代谢物[5]

肝毒性
预注册临床试验的汇总分析报告显示，接受三氟尿苷/替吡嘧啶治疗的患者中，高达 24% 出现血清酶升高，而对照组中也有 27% 的患者出现血清酶升高。同样，接受三氟尿苷/替吡嘧啶治疗的患者中，2% 出现 ALT 值超过正常值上限 5 倍，而安慰剂组为 4%。在这些研究及后续研究中，未报告由三氟尿苷/替吡嘧啶引起的临床明显肝脏不良反应。
可能性评分：E（不太可能是临床明显肝损伤的原因）。

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蛋白结合
体外研究结果表明，三氟尿苷在人血浆中的蛋白结合率大于 96%，主要与人血清白蛋白结合。三氟尿苷的蛋白结合与药物浓度和替吡嘧啶的存在无关。

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骨髓抑制（白细胞减少症、血小板减少症）是人类的主要剂量限制性毒性；在口服剂量≥35 mg/m²每日两次（与替吡嘧啶联用）时发生[1]
- 兔局部使用1%滴眼液超过7天后观察到眼部刺激（结膜充血、流泪）[4]
- 人类在治疗剂量下报告有轻度胃肠道毒性（恶心、腹泻）[5]
- 大鼠每日口服100 mg/kg，持续4周，未检测到明显的肝毒性或肾毒性[2]
- 药物相互作用：与其他骨髓抑制剂合用会增加血液毒性风险[1]

[1]. Cancer Chemother Pharmacol . 2015 Aug;76(2):325-33.

[2]. Int J Oncol . 2015;46(6):2327-34.

[3]. Mol Cell Endocrinol . 2014 Jan 25;382(1):1-7.

[4]. Invest Ophthalmol Vis Sci . 1989 Apr;30(4):678-83.

[5]. Oncol Rep . 2014 Dec;32(6):2319-26.

[6]. Invest Ophthalmol Vis Sci . 1999 Feb;40(2):378-84.

三氟尿苷是一种嘧啶2'-脱氧核苷化合物，其核碱基为5-三氟甲基尿嘧啶。它是一种抗病毒药物，主要用于治疗原发性角结膜炎和复发性上皮性角膜炎。它具有抗病毒、抗代谢、EC 2.1.1.45（胸苷酸合成酶）抑制剂和抗肿瘤作用。它是一种核苷类似物、有机氟化合物和嘧啶2'-脱氧核苷。
三氟尿苷是一种氟化嘧啶核苷，其结构与碘尿苷相关。它是眼用溶液中的一种活性抗病毒剂，主要用于治疗由单纯疱疹病毒引起的原发性角结膜炎和复发性上皮性角膜炎。它对1型和2型单纯疱疹病毒均显示出有效的抗病毒活性。三氟尿苷与替吡嘧啶的复方制剂Lonsurf已在日本、美国和欧盟获批用于治疗既往接受过氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康类化疗、抗VEGF生物疗法以及（若RAS为野生型）抗EGFR疗法治疗的转移性结直肠癌成人患者。在抗癌治疗中，三氟尿苷作为一种胸苷类核苷代谢抑制剂，在被癌细胞摄取后掺入癌细胞DNA中，从而干扰细胞复制过程中的DNA功能。
三氟尿苷是一种核苷类似物抗病毒药物和核苷代谢抑制剂。三氟尿苷的作用机制是作为核酸合成抑制剂。
三氟尿苷/替吡嘧啶是抗肿瘤嘧啶类似物（三氟尿苷）与其代谢抑制剂（替吡嘧啶）的复方制剂，用于治疗难治性转移性结直肠癌。三氟尿苷/替吡嘧啶治疗期间出现短暂性血清酶升高的发生率较低，但尚未发现与临床上明显的急性肝损伤伴黄疸病例相关。
三氟尿苷是一种氟化胸苷类似物，具有潜在的抗肿瘤活性。三氟尿苷可掺入DNA并抑制胸苷酸合成酶，从而抑制DNA合成、蛋白质合成和细胞凋亡。该药物还具有抗病毒活性。 （NCI04）
胸苷的抗病毒衍生物，主要用于治疗原发性角结膜炎和单纯疱疹病毒引起的复发性上皮性角膜炎。（摘自《马丁代尔药典》，第30版，第557页）
另见：盐酸替吡嘧啶；三氟尿苷（成分）；三氟尿苷；替吡嘧啶（成分）。

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药物适应症
作为单一产品，三氟尿苷用于治疗由1型和2型单纯疱疹病毒引起的原发性角膜结膜炎和复发性上皮性角膜炎。三氟尿苷也可与[替吡嘧啶]联合使用，该联合用药可单独使用或与[贝伐珠单抗]联合使用，用于治疗既往接受过氟尿嘧啶、奥沙利铂和伊立替康类化疗、抗VEGF生物疗法以及（如果RAS野生型）抗EGFR疗法治疗的转移性结直肠癌成年患者。该复方制剂也适用于既往接受过至少两线化疗的转移性胃癌或胃食管交界处腺癌成人患者，这些化疗方案包括氟尿嘧啶类药物、铂类药物、紫杉烷类药物或伊立替康，以及（如适用）HER2/neu靶向治疗。
FDA标签

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作用机制
三氟尿苷作为抗病毒药物的作用机制尚未完全阐明，但似乎与抑制病毒复制有关。三氟尿苷在病毒复制过程中掺入病毒DNA，导致缺陷蛋白的形成和突变率的增加。三氟尿苷也通过这种机制发挥抗肿瘤活性；被癌细胞摄取后，三氟尿苷迅速被胸苷激酶磷酸化为活性单磷酸形式。后续磷酸化生成三氟尿苷三磷酸，该物质易掺入肿瘤细胞的DNA中，取代胸苷碱基，从而干扰DNA功能、DNA合成和肿瘤细胞增殖。由于三氟尿苷易被胸苷酸合成酶（TPase）快速降解，且口服后首过效应显著，因此在抗肿瘤联合制剂中添加替吡嘧啶作为TPase抑制剂，以提高三氟尿苷的生物利用度。三氟尿苷单磷酸还能可逆性抑制胸苷酸合成酶（TS），TS是DNA合成所必需的酶，其水平在多种癌细胞系中均有升高。TS酶表达的上调也可能导致对5-氟尿嘧啶（5-FU）等抗肿瘤药物的耐药性。 [A35289 然而，这种抑制作用不足以完全解释其对癌细胞的细胞毒性。
三氟尿苷是一种氟化嘧啶核苷，具有体外和体内抗单纯疱疹病毒1型和2型以及痘苗病毒的活性。某些腺病毒株在体外也受到抑制。……三氟尿苷干扰培养的哺乳动物细胞的DNA合成。然而，其抗病毒作用机制尚未完全阐明。
三氟尿苷的确切抗病毒机制尚未完全阐明，但似乎与抑制病毒复制有关。在病毒复制过程中，三氟尿苷而非胸苷掺入病毒DNA中，导致缺陷蛋白的形成和突变率的增加。三氟尿苷还能可逆性抑制胸苷酸合成酶，该酶是DNA合成所必需的。
三氟尿苷在体外和体内均显示出对1型和2型单纯疱疹病毒（HSV-1和HSV-2）的抗病毒活性。该药物在体外对牛痘病毒有效，并在体内治疗兔牛痘性角膜炎方面显示出活性。三氟尿苷在细胞培养中也显示出对某些腺病毒株的抗病毒活性。三氟尿苷对细菌、真菌和衣原体无效。

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三氟尿苷（三氟胸苷）是一种氟化嘧啶核苷类似物，具有双重抗肿瘤和抗病毒活性[1]
- 其作用机制涉及细胞内活化为三氟尿苷三磷酸，后者掺入肿瘤/病毒DNA中，抑制DNA合成，并诱导细胞凋亡/病毒复制停滞[2]
- 已获FDA批准用于治疗单纯疱疹病毒（HSV）引起的角膜炎（局部用药）和转移性结直肠癌（与替吡嘧啶联合口服）[1]
- 替吡嘧啶联合用药可通过阻断三氟尿苷的降解来延长其半衰期，从而增强抗肿瘤疗效，同时降低全身暴露[5]
- 为最大限度减少眼部毒性，局部制剂仅限短期使用（≤21天）；口服联合疗法需要定期进行血液学监测，以评估骨髓抑制情况[4]

C10H11F3N2O5

296.2

296.062

C, 40.55; H, 3.74; F, 19.24; N, 9.46; O, 27.01

70-00-8

6256

White to off-white solid powder

1.6±0.1 g/cm3

190-193 °C(lit.)

1.534

0.07

104.55

3

8

2

20

464

3

FC(C1C(N([H])C(N(C=1[H])[C@@]1([H])C([H])([H])[C@@]([H])([C@@]([H])(C([H])([H])O[H])O1)O[H])=O)=O)(F)F

VSQQQLOSPVPRAZ-RRKCRQDMSA-N

InChI=1S/C10H11F3N2O5/c11-10(12,13)4-2-15(9(19)14-8(4)18)7-1-5(17)6(3-16)20-7/h2,5-7,16-17H,1,3H2,(H,14,18,19)/t5-,6+,7+/m0/s1

1-[(2R,4S,5R)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-(trifluoromethyl)pyrimidine-2,4-dione

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。