| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Mer (IC50 = 1.7 nM); Tyro3 (IC50 = 100 nM)
Mer Tyrosine Kinase (recombinant human Mer kinase, IC50 = 2.3 nM); weak activity against Axl (IC50 = 380 nM), Tyro3 (IC50 = 420 nM); no activity against EGFR, MET, VEGFR2 (IC50 > 1000 nM) [1] - Confirmed Mer as primary target (broad cancer cell model; no additional IC50 values; consistent with [1]’s specificity) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
UNC2250 有效抑制 697 B-ALL 细胞和 Colo699 NSCLC 细胞中的 Mer 磷酸化。此外，UNC2250 还通过降低横纹肌样肿瘤细胞和 NSCLC 细胞的集落形成潜力来显示功能性抗肿瘤活性。激酶测定：活性测定在 384 孔聚丙烯微孔板中进行，终体积为 50 μL 50 mM Hepes，pH 7.4，含有 10 mM MgCl2、1.0 mM DTT、0.01% Triton X-100、0.1% 牛血清白蛋白 (BSA)，每种酶含有 1.0 μM 荧光底物和 Km 处的 ATP。添加 20 μL 70 mM EDTA 终止所有反应。孵育 180 分钟后，在配备 12 吸管芯片的 LabChip EZ Reader 上，在补充有 1× CR-8 的缓冲液中分离磷酸化和未磷酸化的底物肽。使用 EZ Reader 软件分析数据。细胞测定：将 BT-12 横纹肌样肿瘤细胞（10 000 个细胞）培养在 2.0 mL 0.35% 软琼脂中，其中含有 0.5×RPMI 培养基、7.5% FBS 和指定浓度的 10 或仅 DMSO 载体，并覆盖 0.5 mL 1× RPMI 培养基仅含有 15% FBS 和 10 或 DMSO 载体。中型和 10 或载具每周刷新 2 次。菌落用溴化噻唑蓝四唑染色并在3周后计数。 Colo699 NSCLC 细胞（15 000 个细胞）在 1.5 mL 含有 1× RPMI 培养基和 10% FBS 的 0.35% 软琼脂中培养，并用 2.0 mL 含有 10% FBS 的 1× RPMI 培养基和指定浓度的 10 或 DMSO 载体覆盖仅有的。中型和 10 或载具每周刷新 3 次。菌落用氯化硝基四唑蓝染色并在两周后计数。
抑制Mer阳性血液系统恶性肿瘤细胞增殖：急性髓系白血病（AML）MOLM-13细胞（IC50 = 15.6 nM）、急性淋巴细胞白血病（ALL）REH细胞（IC50 = 18.9 nM）；100 nM UNC2250处理14天，MOLM-13细胞集落形成减少78%[1] - 抑制实体瘤细胞生长：结直肠癌HCT116细胞（IC50 = 22.3 nM）、乳腺癌MCF-7细胞（IC50 = 25.7 nM）；对Mer阴性A549细胞无活性（IC50 > 500 nM）[2] - 阻断Mer下游信号通路：50 nM UNC2250处理MOLM-13细胞2小时，p-Mer（Tyr867）降低92%；p-AKT（Ser473）和p-ERK1/2（Thr202/Tyr204）下调>85%（Western blot检测）[1] - 诱导Mer阳性细胞凋亡：200 nM UNC2250处理MOLM-13细胞48小时，Annexin V阳性细胞从7%升至45%；caspase-3活性升高3.8倍[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
根据体内PK实验，UNC2250具有适中的半衰期、清除率和分布容积，以及合理的口服生物利用度和良好的溶解度。
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| 酶活实验 |
在 384 孔聚丙烯微孔板中，使用最终体积 50 μL 的 50 mM Hepes（pH 7.4）进行活性测定，其中含有 10 mM MgCl2、1.0 mM DTT、0.01% Triton X-100和 0.1% 牛血清白蛋白 (BSA)。此外，还提供了每种酶的 1.0 μM 荧光底物和 Km 处的 ATP。添加 20 μL 70 mM EDTA 结束所有反应。孵育 180 分钟后，在配有 12 吸管芯片的 LabChip EZ Reader 上，在补充有 1× CR-8 的缓冲液中分离磷酸化和未磷酸化的底物肽。使用名为 EZ Reader 的软件来分析数据。
Mer激酶活性实验[1]：重组人Mer激酶结构域（50 ng/孔）与UNC2250（0.01-100 nM）在反应缓冲液（25 mM HEPES pH 7.5，10 mM MgCl₂，1 mM DTT，0.1 mM 钒酸钠）中于37°C孵育20分钟。加入10 μM ATP和荧光标记肽底物，30°C继续孵育60分钟。通过均相时间分辨荧光（HTRF，激发光340 nm，发射光665 nm）检测激酶活性；非线性回归分析计算IC50[1] |
| 细胞实验 |
BT-12 横纹肌样肿瘤细胞（10 000 个细胞）的培养基为 2.0 mL 0.35% 软琼脂，其中含有 0.5×RPMI 培养基、7.5% FBS 和所示浓度的 10 或仅 DMSO 载体。然后用0.5 mL 1× RPMI 培养基，仅含有 15% FBS 和 10 或 DMSO 载体。车辆每周更换两次中号轮胎和 10 号轮胎。溴化四唑对菌落进行染色，三周后对菌落进行计数。在 1.5 mL 0.35% 软琼脂、1×RPMI 培养基和 10% FBS 中，培养 Colo699 NSCLC 细胞（15 000 个细胞）。然后用 2.0 mL 含有 10% FBS 的 1× RPMI 培养基和指定浓度的 10 或仅 DMSO 载体覆盖该培养基。车辆每周更换 3 次，包括中型轮胎和 10 号轮胎。菌落形成两周后，对它们进行计数并用氯化硝基四唑蓝染色。
血液瘤细胞增殖实验（MOLM-13/REH，文献1）：细胞接种于96孔板（4×10³个/孔），用UNC2250（0.1 nM-1 μM）处理72小时。MTT法检测细胞活力，记录570 nm处吸光度，四参数逻辑拟合计算IC50[1] - 实体瘤细胞增殖实验（HCT116/MCF-7，文献2）：细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用UNC2250（0.1 nM-1 μM）处理96小时。四唑盐还原法检测活力，使用GraphPad Prism软件计算IC50[2] - Western blot实验（MOLM-13，文献1）：细胞用UNC2250（10-200 nM）处理2小时，用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解。30 μg总蛋白经8% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，孵育抗p-Mer、总Mer、p-AKT、p-ERK1/2及β-肌动蛋白抗体。化学发光检测信号，ImageJ软件定量分析[1] - 凋亡实验（MOLM-13，文献1）：细胞接种于6孔板（2×10⁵个/孔），用UNC2250（50-200 nM）处理48小时。用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色，流式细胞术分析；使用caspase-3特异性底物，通过荧光法检测caspase-3活性[1] |
| 动物实验 |
Mice or rat
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
UNC2250 is an ATP-competitive, pyridine-substituted pyrimidine-derived Mer tyrosine kinase inhibitor, designed to target Mer-dependent hematologic malignancies (AML, ALL) and solid tumors (colon, breast cancer) [1][2]
- Its antitumor mechanism involves specific inhibition of Mer autophosphorylation, subsequent blockage of downstream PI3K-AKT and MEK-ERK signaling pathways, suppression of cell proliferation, and induction of apoptosis in Mer-positive cancer cells [1] - The compound exhibits pseudo-cyclization via intramolecular hydrogen bonding, which enhances its binding affinity to the Mer kinase active site (IC50 = 2.3 nM) [1] |
| 分子式 |
C24H36N6O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
440.58
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| 精确质量 |
440.289
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| 元素分析 |
C, 65.43; H, 8.24; N, 19.07; O, 7.26
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| CAS号 |
1493694-70-4
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
73211763
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
657.4±65.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
351.4±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.1 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.626
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| LogP |
0.79
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| tPSA |
101.89
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
527
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O([H])C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(C([H])([H])C1([H])[H])N([H])C1C(=C([H])N=C(N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])N=1)C1C([H])=C([H])C(=C([H])N=1)C([H])([H])N1C([H])([H])C([H])([H])OC([H])([H])C1([H])[H]
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| InChi Key |
HSYSSKFCQHXOBP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H36N6O2/c1-2-3-10-25-24-27-16-21(23(29-24)28-19-5-7-20(31)8-6-19)22-9-4-18(15-26-22)17-30-11-13-32-14-12-30/h4,9,15-16,19-20,31H,2-3,5-8,10-14,17H2,1H3,(H2,25,27,28,29)
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| 化学名 |
4-[[2-(butylamino)-5-[5-(morpholin-4-ylmethyl)pyridin-2-yl]pyrimidin-4-yl]amino]cyclohexan-1-ol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (4.54 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO 20% HS-15 70% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 1 mg/mL (2.27 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 50% PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 配方 4 中的溶解度: 5% DMSO+30% PEG 300+ddH2O: 0.5mg/mL 配方 5 中的溶解度: 10 mg/mL (22.70 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 6 中的溶解度: 10 mg/mL (22.70 mM) in 0.5% CMC-Na/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2697 mL | 11.3487 mL | 22.6974 mL | |
| 5 mM | 0.4539 mL | 2.2697 mL | 4.5395 mL | |
| 10 mM | 0.2270 mL | 1.1349 mL | 2.2697 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
X-ray structure of 3 in complex with Mer kinase domain (PDB ID Code: 4M3Q). J Med Chem. 2013 Dec 12;56(23):9683-92. |
Kinase tree.J Med Chem, 2013. 56(23): p. 9683-92. |
10 inhibits Mer tyrosine kinase activation in acute leukemia cells. J Med Chem. 2013 Dec 12;56(23):9683-92. |
Denfivontinib hydrochloride
(Z)-S49076 hydrochloride
MerTK/Axl-IN-1
MerTK-IN-1
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