| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Verubecestat (MK-8931) targets β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1 (BACE1) with a Ki value of 0.4 nM (recombinant human BACE1) and an IC50 of 0.3 nM (enzymatic assay) [1]
Verubecestat (MK-8931) shows weak affinity for BACE2 with an IC50 of 450 nM, demonstrating >1500-fold selectivity for BACE1 over BACE2 [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在稳定过表达APP的SH-SY5Y细胞中，用约100 nM的MK-8931（约为其已发表IC50值的20倍）处理，可显著降低条件培养基中sAPPβ、Aβ34、Aβ38、Aβ40和Aβ42的水平。剂量抑制曲线显示，MK-8931在这些细胞中可剂量依赖性地降低sAPPβ、Aβ34和Aβ40的水平。 [3]
在稳定过表达BACE1的SH-SY5Y细胞中，用100 nM MK-8931处理可显著降低sAPPβ和Aβ34的水平，而Aβ38和Aβ40水平显著增加，Aβ42有升高趋势。剂量反应显示，MK-8931在这些BACE1过表达细胞中仅能剂量依赖性地降低sAPPβ和Aβ34的水平。 [3] β 位点淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶 1/2 (BACE1/2) 抑制剂称为 verubecestat (MK-8931)。由于 verubecestat 不会显着抑制人 CYP 异构体 1A2、2C9、2C19、2D6 和 3A4 (IC50 >40 μM)，因此该物质不太可能抑制 CYP 介导的药物间相互作用 [1]。 Verubecestat 在 HEK293 APPSwe/Lon 细胞中对 Aβ1-40、Aβ1-42 和 sAPPβ 的 IC50 值分别为 2.1 nM、0.7 nM 和 4.4 nM [1]。 重组人BACE1酶活性实验中，维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 以剂量依赖方式抑制BACE1活性，IC50为0.3 nM；浓度高达10 μM时，未显著抑制其他天冬氨酸蛋白酶（如组织蛋白酶D、肾素） - 在稳定表达人APP695的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞中，维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 降低Aβ40和Aβ42的分泌，IC50值分别为1.2 nM和1.5 nM - 在原代大鼠皮质神经元中，维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）（1-100 nM）剂量依赖性降低培养基中的Aβ40水平，10 nM浓度时抑制率达85% - 浓度高达10 μM的维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 孵育SH-SY5Y细胞或原代皮质神经元72小时后，未表现出细胞毒性 |
| 体内研究 (In Vivo) |
Sprague-Dawley (SD) 大鼠的 T1/2 为 1.9 小时，CL 为 46 mL/min/kg，Vss [1]，verubecestat（MK-8931；3 mg/kg；静脉注射或口服）具有C max 为 5.4 L/kg，C max 为 0.27 μM，AUC 为 1.1 μM·h。在食蟹猴中，verubecestat（1 mg/kg；IV）的 T1/2 为 4.9 小时，CL 为 21 mL/min/kg，Vss 为 7.5 L/kg [1]。在比格犬中，verubecestat（1 mg/kg；IV）的 T1/2 为 9.7 小时，CL 为 4.3 mL/min/kg，Vss 为 2.7 L/kg [1]。用 verubecestat（30 mg/kg；口服；BID，5 天）治疗的大鼠表现出 CYP 3A1 活性中度（1.4 倍）增加，但 CYP 1A1、1A2、2B、3A2 和 4A 表达没有显着变化[1 ]。 Verubecestat 以剂量依赖性方式降低脑脊液和皮质 Aβ40；对于未结合的血浆 CSF 和皮质 Aβ40，其 ED50 值分别为 5 和 8 mg/kg，EC50 值分别为 48 和 81 nM [1]。 Verubecestat，以 3 和 10 mg/kg 的剂量口服，可显着降低 CSF Aβ40 水平。该药物对 CSF Aβ 减少的效果在给药后 12 小时达到峰值，在这些剂量下分别达到 72% 和 81%[1]。
给野生型Sprague-Dawley大鼠静脉注射MK-8931（1 mg/kg和20 mg/kg），两个剂量均能显著降低脑内Aβ34水平，而脑内Aβ40和Aβ42水平仅在20 mg/kg剂量下降低。脑内Aβ34/Aβ40和Aβ34/Aβ42比值在两个剂量下均显著降低。 [3] 在相同大鼠的脑脊液中，1 mg/kg和20 mg/kg剂量的MK-8931均能显著降低Aβ34水平，而Aβ38、Aβ40和Aβ42水平无显著变化。CSF中的Aβ34/Aβ38、Aβ34/Aβ40和Aβ34/Aβ42比值在给药动物中均显著降低。 [3] 在6月龄APP/PS1转基因小鼠中，每日口服1、3或10 mg/kg 维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 连续28天，剂量依赖性降低脑内Aβ40和Aβ42水平；10 mg/kg剂量组较溶媒对照组Aβ40降低68%，Aβ42降低72% [1] - 在12月龄APP/PS1小鼠中，每日口服3 mg/kg 维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 连续90天，皮质淀粉样斑块负荷减少56%，并改善Morris水迷宫实验中的空间学习记忆能力（逃避潜伏期缩短38%，p < 0.01） [1] - 在健康人类志愿者中，单次口服5-40 mg 维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 剂量依赖性降低脑脊液（CSF）中Aβ40和Aβ42水平，40 mg剂量时最大降幅分别为62%（Aβ40）和65%（Aβ42） [2] - II期临床试验中，轻度至中度阿尔茨海默病患者每日口服12 mg或40 mg 维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 连续12周，脑脊液Aβ40/Aβ42水平持续降低 [2] |
| 酶活实验 |
重组人BACE1酶活性实验：将纯化的重组人BACE1与荧光肽底物及系列浓度的维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）（0.01 nM至1 μM）在pH 4.5的实验缓冲液中37°C孵育60分钟；检测裂解底物的荧光发射值以评估酶活性；从剂量-反应曲线计算IC50值 [1]
- BACE1选择性实验：采用相同的荧光实验方案，用相应的重组酶评估维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931） 对BACE2、组织蛋白酶D和肾素的抑制作用；通过比较BACE1与其他蛋白酶的IC50值确定选择性比率 [1] - 表面等离子体共振（SPR）结合实验：将人BACE1固定在传感芯片上，注入不同浓度的维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）；根据结合和解离速率常数计算结合亲和力（Ki） [1] |
| 细胞实验 |
培养稳定表达APP695或BACE1的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞。进行抑制剂处理时，将溶解于DMSO的MK-8931以约100 nM的终浓度（或如剂量反应曲线所示）与细胞共孵育，并以载体（DMSO）作为对照。在指定孵育时间（例如16小时）后收集条件培养基。使用定制的超灵敏4重Meso Scale Discovery电化学发光法对上清液中分泌的Aβ肽（Aβ34、Aβ38、Aβ40、Aβ42）水平进行定量。还通过蛋白质印迹法分析细胞裂解物或培养基浓缩物以检测sAPPβ和sAPPtotal等蛋白。 [3]
SH-SY5Y细胞实验：将稳定表达人APP695的SH-SY5Y细胞以5×10⁴个/孔接种到24孔板，培养24小时；加入维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）（0.1 nM至10 μM）孵育48小时；收集培养基，夹心ELISA法定量Aβ40/Aβ42水平 - 原代大鼠皮质神经元实验：解剖胚胎18天大鼠的大脑皮质，解离后接种到聚L-赖氨酸包被的24孔板；神经元培养7天后，用维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）（0.1 nM至1 μM）处理24小时；ELISA法检测培养基中的Aβ40水平 - 细胞活力实验：将SH-SY5Y细胞和原代皮质神经元接种到96孔板，用维鲁贝斯塔特（Verubecestat, MK-8931）（0.1 nM至10 μM）处理72小时；基于线粒体脱氢酶活性的比色法评估活力，计算相对于溶媒对照组的活细胞百分比。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： SD（Sprague-Dawley）大鼠[1]
剂量： 3 mg/kg（药代动力学/PK 分析） 给药途径： 静脉注射或口服 实验结果： 半衰期 (T1/2) 为 1.9 小时，清除率 (CL) 为 46 mL/min/kg，稳态分布容积 (Vss) 为 5.4 L/kg，峰浓度 (Cmax) 为 0.27 μM，曲线下面积 (AUC) 为 1.1 μM·h。使用 6 至 8 周龄雄性 Sprague-Dawley 大鼠。将 MK-8931 溶解后，以指定浓度（0.01、0.1、1 和 20 mg/kg 体重）单次静脉注射给药。对照组动物注射了载体（20%环糊精）。动物在治疗后1小时处死。使用立体定位仪收集脑脊液。立即采集脑组织，冷冻，随后在含有蛋白酶抑制剂的缓冲液中匀浆，用于蛋白质和肽分析。[3] APP/PS1转基因小鼠疗效研究（短期）：将6月龄雄性APP/PS1小鼠随机分为4组（每组n=10）：载体对照组、Verubecestat (MK-8931) 1 mg/kg组、Verubecestat (MK-8931) 3 mg/kg组、Verubecestat (MK-8931) 1 ...小鼠连续28天每日一次经口灌胃给药[1] - 治疗结束后，处死小鼠，取出脑组织，并匀浆皮质和海马组织；采用ELISA法定量Aβ40/Aβ42水平，并采用免疫组织化学法分析淀粉样斑块负荷[1] - 长期疗效和认知功能研究：12月龄APP/PS1小鼠接受Verubecestat (MK-8931) 3 mg/kg（口服，每日一次）治疗90天；采用Morris水迷宫测试（5天训练，1天探针试验）评估空间学习和记忆能力[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在大鼠中，口服10 mg/kg剂量的Verubecestat (MK-8931)的生物利用度为78%[1]
- Verubecestat (MK-8931)在大鼠中的末端消除半衰期(t1/2)为12小时，在犬中为18小时，在人中为27小时[1][2] - 人体单次口服40 mg后，血浆峰浓度(Cmax)为820 ng/mL，达峰时间(Tmax)为4小时[2] - Verubecestat (MK-8931)具有良好的脑渗透性，在大鼠中的脑血浆浓度比为0.8，在人中为0.6[1][2] - Verubecestat的血浆蛋白结合率维鲁贝司他 (MK-8931) 在人血浆中的浓度为 99.5%（平衡透析法）[1] - 维鲁贝司他 (MK-8931) 主要在人肝微粒体中通过 CYP3A4 代谢，未发现主要活性代谢物[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在大鼠（剂量高达 30 mg/kg/天）和犬（剂量高达 10 mg/kg/天）进行的 4 周重复给药毒性研究中，Verubecestat (MK-8931) 未引起体重、食物摄入量或临床化学参数（ALT、AST、肌酐、BUN）的显著变化[1]
- 在接受治疗剂量 Verubecestat (MK-8931) 治疗的大鼠和犬的主要器官（脑、肝、肾、心脏）中未观察到组织病理学异常[1] - 在临床试验中，最常见的不良事件 (AE) 为头痛 (18%)、腹泻 (15%) 和疲劳 (12%)；大多数不良事件的严重程度为轻度至中度[2] - 一小部分患者（3%）在脑部MRI检查中出现淀粉样蛋白相关影像学异常（ARIA），这是BACE1抑制剂的类效应[2] - Verubecestat (MK-8931)在体外和体内均未显示与CYP3A4底物或抑制剂存在显著的药物相互作用[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Verubecestat 正在研究用于治疗阿尔茨海默病、阿尔茨海默病前驱期和遗忘型轻度认知障碍。Verubecestat 是默克公司正在研究的口服β位点淀粉样前体蛋白裂解酶（BACE1 或 β 分泌酶）抑制剂。2013 年 7 月，默克公司宣布 Verubecestat 的 Ib 期临床试验取得积极结果。在该研究中，分别给予 12 mg、40 mg 和 60 mg 剂量的 Verubecestat 后，脑脊液中 BACE1 活性指标 Ab40 的水平呈剂量依赖性且持续降低，较基线分别降低了 57%、79% 和 84%。
作用机制 淀粉样蛋白假说认为，导致大脑中淀粉样斑块沉积的淀粉样肽的形成是阿尔茨海默病根本病因的主要因素。 BACE被认为是淀粉样β肽生成过程中的关键酶。证据表明，抑制BACE可减少β淀粉样蛋白的生成，从而可能减少淀粉样斑块的形成并延缓疾病进展。 Verubecestat (MK-8931)是一种强效、选择性、口服有效的BACE1抑制剂，用于治疗阿尔茨海默病[1][2]。 - 其作用机制是抑制BACE1介导的淀粉样前体蛋白(APP)裂解，从而减少神经毒性Aβ肽的生成并阻止淀粉样斑块的形成[1]。 - 尽管Aβ水平持续降低，但由于缺乏临床获益，Verubecestat (MK-8931)在轻度至中度阿尔茨海默病患者中的III期临床试验已终止[2]。 - Verubecestat (MK-8931)具有良好的药代动力学特性，包括较高的口服生物利用度。生物利用度高、半衰期长、脑渗透性好，支持每日一次给药[1][2]。MK-8931（verubecestat）是BACE1（β-分泌酶）的特异性抑制剂[3]。该研究使用MK-8931作为药理学工具，在大鼠和细胞模型中抑制BACE1活性，结果表明BACE1抑制对其淀粉样蛋白生成（产生更长的Aβ肽）和淀粉样蛋白溶解（将更长的Aβ降解为Aβ34）活性的影响不同。淀粉样蛋白溶解活性（Aβ34生成）似乎比淀粉样蛋白生成活性对BACE1的含量和活性变化更敏感。 [3]文章指出，包括MK-8931在内的BACE1抑制剂由于副作用、潜在毒性或缺乏认知获益，在阿尔茨海默病临床试验中面临挑战。在症状出现阶段给药的时机可能为时已晚。[3] |
| 分子式 |
C17H17F2N5O3S
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|---|---|---|
| 分子量 |
409.41
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| 精确质量 |
409.102
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| 元素分析 |
C, 49.87; H, 4.19; F, 9.28; N, 17.11; O, 11.72; S, 7.83
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| CAS号 |
1286770-55-5
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| 相关CAS号 |
Verubecestat TFA;2095432-65-6
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| PubChem CID |
51352361
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.655
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| LogP |
-0.56
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|
| tPSA |
126.13
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
28
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| 分子复杂度/Complexity |
744
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=C(C1=NC=C(F)C=C1)NC2=CC=C(F)C([C@@](C3)(C)N=C(N)N(C)S3(=O)=O)=C2
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| InChi Key |
YHYKUSGACIYRML-KRWDZBQOSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H17F2N5O3S/c1-17(9-28(26,27)24(2)16(20)23-17)12-7-11(4-5-13(12)19)22-15(25)14-6-3-10(18)8-21-14/h3-8H,9H2,1-2H3,(H2,20,23)(H,22,25)/t17-/m0/s1
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| 化学名 |
N-[3-[(5R)-3-amino-2,5-dimethyl-1,1-dioxo-6H-1,2,4-thiadiazin-5-yl]-4-fluorophenyl]-5-fluoropyridine-2-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4425 mL | 12.2127 mL | 24.4254 mL | |
| 5 mM | 0.4885 mL | 2.4425 mL | 4.8851 mL | |
| 10 mM | 0.2443 mL | 1.2213 mL | 2.4425 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
BACE-1/Mpro-IN-1
GRL-8234
LY-2434074
TAK-070 hydrochloride hydrate
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COA
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463611831
