| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EGFR (IC50 = 4 μM); KDR (IC50 = 66 nM); RET (IC50 = 5 nM)
WHI-P180 is also a potent inhibitor of mast cell responses mediated by IgE. WHI-P180 has an elimination half-life of less than ten minutes in CD-1 (BALB/c) mice after intravenous, intraperitoneal, or po administration. In CD-I mice, the systemic clearance of WHI-P180 is 6742 mL/h/kg, whereas in BALB/c mice, it is 8188 mL/h/kg. Interestingly, in a well-established murine model of passive cutaneous anaphylaxis, WHI-P180 inhibits IgE/antigen-induced vascular hyperpermeability when given in two consecutive nontoxic intraperitoneal bolus doses of 25 mg/kg[3]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
WHI-P180 也是 IgE 介导的肥大细胞反应的有效抑制剂。在静脉内、腹膜内或口服给药后，WHI-P180 在 CD-1 (BALB/c) 小鼠中的消除半衰期小于 10 分钟。在CD-I小鼠中，WHI-P180的全身清除率为6742mL/h/kg，而在BALB/c小鼠中为8188mL/h/kg。有趣的是，在一个完善的被动皮肤过敏反应小鼠模型中，当连续两次无毒腹膜内推注剂量 25 mg/kg 时，WHI-P180 可以抑制 IgE/抗原诱导的血管通透性过高[3]。
在使用改造为依赖 KIF5B-RET 的 BaF3 细胞的细胞实验中，化合物 36 抑制 RET 驱动的细胞增殖，IC₅₀ 为 2100 nM。在平行的 KDR 依赖性 BaF3 细胞中，其 IC₅₀ >10000 nM，从而在细胞水平上获得对 RET 相对于 KDR ≥5 倍的选择性。[1] 化合物 36 在野生型 BaF3 细胞中未表现出非特异性细胞毒性（IC₅₀ >10000 nM），表明其在细胞环境中具有有意义的激酶选择性。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
WHI-P180 也是 IgE 介导的肥大细胞反应的有效抑制剂。在 CD-1 小鼠（BALB/c 小鼠）中，静脉内、腹膜内或口服注射后，WHI-P180 的消除半衰期小于 10 分钟。对于CD-I小鼠，WHI-P180的全身清除率为6742mL/h/kg，但对于BALB/c小鼠，为8188mL/h/kg。值得注意的是，在被动皮肤过敏小鼠模型中，当连续两次腹腔内无毒推注剂量 25 mg/kg 给药时，WHI-P180 降低了 IgE/抗原诱导的血管通透性。性欲过度[3]。
在患有肝脂肪变性的饮食诱导肥胖（DIO）小鼠中，用SR9238治疗（30 mg/kg/天，腹腔注射，持续30天）显著抑制了肝脏脂肪生成基因的表达（Fasn，约60%；Srebp1c，约80%；Scd1，约90%）。[2] 治疗减少了肝脏脂质积累（通过Bodipy 493/503染色观察和定量）。[2] 它抑制了肝脏促炎细胞因子的表达（Tnfa，约80%；Il1b，>95%），并减少了库普弗细胞（肝脏巨噬细胞，通过F4/80免疫组织化学评估）的浸润。[2] 治疗降低了肝细胞损伤的血浆标志物：碱性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）。[2] 治疗显著降低了总血浆胆固醇、HDL和LDL水平。[2] 它抑制了胆固醇合成限速酶基因Cyp7a1和Hmgcr（约80%）的肝脏表达。[2] 在DIO小鼠中，未观察到血浆葡萄糖、胰岛素、甘油三酯、体重或体脂成分的显著变化。[2] 在DIO小鼠的棕色脂肪组织中，治疗后未观察到LXR靶基因Fasn和Abca1表达的显著变化，表明其作用具有肝脏特异性。[2] 在喂食普通饲料的小鼠中治疗7天，SR9238增加了肝脏Il1b的表达，同时降低了Fasn和Srebp1c的表达，表明在炎症疾病模型中长期使用可能抵消其初始的促炎作用。[2] |
| 酶活实验 |
将抑制剂 (WHI-P180) 在含有 5 微升激酶和浓度为 13 pM RET 和 100 pM KDR 的测定缓冲液的板中预孵育 15 分钟。以 2×最终反应浓度添加 5 μL ATP 和底物开始反应。 RET 的浓度分别为 18 μM 和 2 μM，KDR 的浓度分别为 16 μM 和 1 μM。在 ATP Km 中，针对每个目标进行反应。室温下测定 20 分钟后，添加 10 μL HTRF 检测缓冲液，辅以 Eu3+-Cryptate 标记的 TK 抗体（1:100 稀释）和链霉亲和素-XL665 (128 nM)，以结束实验。 FRET 信号是在室温下孵育一小时后测量的[1]。
RET 和 KDR 的生化激酶抑制实验采用时间分辨荧光共振能量转移（FRET）方法进行。测定在 384 孔板中 10 µL 反应体积中进行。对于 RET 测定，缓冲液含有氯化镁、DTT 和其他成分。反应混合物先与激酶（特定浓度）和测试化合物预孵育 15 分钟。然后通过添加 ATP 和生物素化的底物肽（浓度接近每种激酶的 Km 值：RET：18 µM ATP，2 µM 底物；KDR：16 µM ATP，1 µM 底物）启动反应。在室温下孵育 20 分钟后，通过添加含有 EDTA、铕穴状化合物标记的抗磷酸酪氨酸抗体和链霉亲和素-XL665 的检测缓冲液终止反应。再孵育 1 小时后，测量 FRET 信号。IC₅₀ 值根据剂量反应曲线确定。[1] |
| 细胞实验 |
依赖 IL3 的 BaF3 细胞表达被激活的重组激酶。 IL3 去除后，重组激酶活性对于改变的细胞的生存和增殖是必需的。在补充有10% FBS和合适抗生素的RPMI-1640培养基中，培养表达KIF5B-RET和KDR的BaF3细胞系。将重组小鼠 IL-3 (10 ng/mL) 添加到含有 10% FBS 的 RPMI-1640 培养基中，以维持未修饰的 BaF3 细胞 (WT)。将细胞以每孔 1500 或 3000 个的密度接种到 30 μL 培养基中后，使用声学液体处理平台分配化合物，以确定化合物的 IC50。通过添加 10 μL CellTiter-Glo 试剂并在 37 °C、湿润的 5% CO2 气氛中孵育 48 小时后测量发光来评估细胞的活力[1]。
细胞效力使用工程化的 BaF3 细胞系进行评估。这些 IL3 依赖性细胞经过改造，其存活和增殖依赖于表达的活化 RET 融合蛋白（KIF5B-RET）或 KDR。实验时，将细胞接种到 384 孔板中。使用声波液体处理器分配测试化合物。将细胞与化合物在 37°C、5% CO₂ 的湿润环境中孵育 48 小时后，通过添加发光法细胞活力试剂并测量信号来确定细胞活力。IC₅₀ 值根据剂量反应曲线计算。使用在 IL3 存在下培养的亲本野生型 BaF3 细胞系以类似方式评估非特异性细胞毒性。[1] |
| 动物实验 |
小鼠：采用基于高效液相色谱 (HPLC) 的定量检测方法测定小鼠血浆中 WHI-P180 的浓度。使用 WinNonlin 程序计算药代动力学参数，以便将血浆浓度-时间数据拟合到单室药代动力学模型。采用皮肤过敏模型研究 WHI-P180 对过敏相关血管高通透性的药效学作用[3]。
化合物36的药代动力学研究在雄性 CD-1 小鼠中进行，给药途径为单次静脉注射或口服。在不同时间点采集血样，制成干血斑。样品经溶剂萃取和磷脂去除板处理，然后进行 LC-MS/MS 分析以测定药物浓度。使用非房室模型分析，根据浓度-时间数据计算药代动力学参数。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
化合物36在人肝细胞中的固有清除率（CLint）高于在人肝微粒体中的清除率（微粒体中为6.2 µL/min/mg），表明其代谢涉及II相代谢。在小鼠体内，该化合物的代谢速度更快（微粒体：28.2 µL/min/mg；肝细胞：38.1 µL/min/10⁶ 个细胞）。[1]
化合物36具有良好的水溶性（>100 µM）。其在Caco-2细胞中的渗透性中等（Papp = 8.2 × 10⁻⁶ cm/s），外排比为4.9。[1] 在小鼠体内，静脉给药后，总血清除率较低（<10%肝血流量）。口服给药后，生物利用度约为35%，口服半衰期约为2小时。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在利用野生型 BaF3 细胞（工程细胞的亲代细胞系）进行的细胞毒性试验中，化合物 36 在浓度高达 10000 nM 时未显示出非特异性毒性（IC₅₀ > 10000 nM）。[1]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
这项研究的驱动力在于临床上对选择性RET激酶抑制剂的需求，因为现有的多靶点药物如凡德他尼会因对KDR等激酶的脱靶抑制而导致剂量限制性毒性。[1]化合物36是通过基于结构的药物设计发现的，其起始骨架类似于凡德他尼。在苯胺环的R²位引入酚羟基，在R¹位引入甲基是关键。酚羟基与RET激酶活性位点的Glu775和Asp892形成氢键，从而提高亲和力。R¹位的甲基虽然由于靠近Ser891而在RET中略微不利，但它会导致对KDR（其中Ser891被体积更大的半胱氨酸Cys1045取代）的亲和力大幅下降，从而提高选择性。[1]最初的酚类先导化合物代谢清除率较高。研究发现，在R¹位引入侧翼甲基取代基可以提高肝细胞的代谢稳定性。[1]
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| 分子式 |
C16H15N3O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
297.31
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| 精确质量 |
297.111
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| 元素分析 |
C, 64.64; H, 5.09; N, 14.13; O, 16.14
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| CAS号 |
211555-08-7
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| 相关CAS号 |
WHI-P180 hydrochloride;153437-55-9
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| PubChem CID |
5687
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
476.5±40.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
242.0±27.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.2 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.689
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| LogP |
2.44
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| tPSA |
76.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
22
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| 分子复杂度/Complexity |
358
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C([H])([H])[H])C1=C(C([H])=C2C(=C1[H])C(=NC([H])=N2)N([H])C1C([H])=C([H])C([H])=C(C=1[H])O[H])OC([H])([H])[H]
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| InChi Key |
BNDYIYYKEIXHNK-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H15N3O3/c1-21-14-7-12-13(8-15(14)22-2)17-9-18-16(12)19-10-4-3-5-11(20)6-10/h3-9,20H,1-2H3,(H,17,18,19)
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| 化学名 |
3-[(6,7-dimethoxyquinazolin-4-yl)amino]phenol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 10 mg/mL (33.63 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.3635 mL | 16.8175 mL | 33.6349 mL | |
| 5 mM | 0.6727 mL | 3.3635 mL | 6.7270 mL | |
| 10 mM | 0.3363 mL | 1.6817 mL | 3.3635 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
RET Y791F Recombinant Human Active Protein Kinase
RET V804M Recombinant Human Active Protein Kinase
RET M918T Recombinant Human Active Protein Kinase
RET L730M Recombinant Human Active Protein Kinase
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COA
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463611831
