| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PI3K; Akt; cardiac β-adrenoceptors
Heme Oxygenase-1 (HO-1) [1] c-Jun N-terminal Kinase (JNK) (inhibits Ang II-induced phosphorylation) [1] Reactive Oxygen Species (ROS) production pathway (inhibits Ang II-induced ROS generation) [1] Inducible Nitric Oxide Synthase (iNOS) (inhibits its expression, ) [2] Nuclear Factor-kappa B (NF-κB) (inhibits its activation, ) [2] Mitogen-Activated Protein Kinase (MAPK) (p38/ERK1/2, modulates phosphorylation,) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
YS-49(1-100 μM;18 小时;RAVSMC 和 RAW 264.7 细胞)浓度依赖性地抑制暴露于脂多糖 (LPS) 加 INF-γ 的 RAVSMC 和 RAW 264.7 中亚硝酸盐的积累,IC50 值为 22 μM 和分别为 30 μM[2]。当 LPS 和/或细胞因子存在时,YS-49(10-100 μM;18 小时;RAVSMC 和 RAW 264.7 细胞)抑制 RAVSMC 和 RAW 264.7 细胞中 iNOS 基因的转录表达[2]。
YS 49(1-10 μM)在大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中可剂量依赖性诱导HO-1的mRNA和蛋白表达(通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测);10 μM浓度下可使血管紧张素II(Ang II,100 nM)刺激的VSMC中ROS产生降低约60%(通过DCFH-DA荧光实验检测),使Ang II诱导的JNK磷酸化水平降低约70%(蛋白质印迹法),并使Ang II刺激的VSMC增殖抑制率达55%(BrdU掺入实验);HO-1抑制剂ZnPP IX可逆转YS 49的上述作用,表明其效应依赖HO-1的诱导[1] YS 49(1-30 μM)在大鼠主动脉VSMC中可剂量依赖性抑制脂多糖(LPS,1 μg/mL)或白介素-1β(IL-1β,10 ng/mL)诱导的iNOS mRNA和蛋白表达(通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测),30 μM浓度下可使一氧化氮(NO)产生降低约80%(Griess试剂实验);在RAW264.7巨噬细胞中,YS 49(10-30 μM)同样能抑制LPS诱导的iNOS表达和NO产生;作用机制上,YS 49可抑制NF-κB的核转位(免疫荧光和电泳迁移率变动分析(EMSA)),并调节MAPK通路:降低p38磷酸化水平,升高ERK1/2磷酸化水平,对JNK磷酸化无显著影响;此外,YS 49在心肌细胞中表现出正性肌力作用[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
YS-49(5 mg/kg;腹腔注射;8小时;雄性Sprague Dawley大鼠)治疗显着降低LPS治疗大鼠血清NOx水平,NOx水平从86 μM降低至34 μM[2]。
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| 酶活实验 |
HO-1酶活性实验:收集经YS 49处理的VSMC,超声裂解后离心取上清;调整上清蛋白浓度,与含血红素底物和NADPH的反应缓冲液在37℃孵育30分钟;加入HCl终止反应,通过分光光度计检测464 nm处吸光度(HO-1催化产物胆绿素的特征吸收峰);根据吸光度值计算HO-1酶活性单位[1]
iNOS酶活性实验:收集经YS 49和LPS处理的VSMC/RAW264.7细胞,裂解后取上清;将上清与含L-精氨酸和NADPH的反应缓冲液在37℃孵育60分钟;依次加入Griess试剂A和B,室温静置15分钟,通过酶标仪检测540 nm处吸光度;与NO标准曲线对比,计算iNOS活性[2] |
| 细胞实验 |
1. VSMC增殖实验:原代分离大鼠主动脉VSMC,培养至第3-5代;以5×10³个/孔的密度接种于96孔板,同步化细胞后用Ang II(100 nM)刺激,同时加入不同浓度的YS 49(1、5、10 μM)处理24小时;加入BrdU孵育12小时,固定细胞后加入抗BrdU抗体,通过酶标仪检测450 nm处吸光度,计算增殖抑制率[1]
2. ROS检测实验:将VSMC接种于共聚焦皿,同步化后用YS 49预处理1小时,再用Ang II刺激30分钟;加入DCFH-DA荧光探针(终浓度10 μM),37℃孵育20分钟;通过共聚焦显微镜观察荧光强度,定量分析ROS水平[1] 3. HO-1和p-JNK蛋白质印迹实验:VSMC经YS 49和Ang II处理后,提取总细胞蛋白,经SDS-PAGE分离后转膜,孵育抗HO-1、p-JNK、总JNK及GAPDH抗体;化学发光显影后,定量条带灰度值[1] 4. HO-1 mRNA的RT-PCR实验:提取VSMC总RNA,逆转录为cDNA,用HO-1特异性引物进行PCR扩增(以GAPDH为内参);琼脂糖凝胶电泳分离PCR产物,定量条带并计算HO-1 mRNA的相对表达量[1] 5. iNOS表达与NO检测实验:将大鼠VSMC/RAW264.7细胞以1×10⁴个/孔的密度接种于96孔板,用LPS(1 μg/mL)或IL-1β(10 ng/mL)刺激,同时加入YS 49(1、10、30 μM)处理24小时;收集上清,用Griess试剂检测NO浓度;提取细胞总RNA/蛋白,分别通过RT-PCR和蛋白质印迹法检测iNOS的mRNA和蛋白表达[2] 6. NF-κB活性实验:将RAW264.7细胞接种于6孔板,经YS 49和LPS处理后,提取核蛋白,通过EMSA检测NF-κB的DNA结合活性;同时采用免疫荧光法检测NF-κB p65亚基的核转位:固定细胞后,用抗p65抗体和DAPI(核染色)染色,通过共聚焦显微镜观察亚细胞定位[2] 7. MAPK磷酸化检测实验:VSMC经YS 49和LPS处理后,提取总细胞蛋白,通过蛋白质印迹法检测p-p38、总p38、p-ERK1/2、总ERK1/2、p-JNK及总JNK的表达,定量磷酸化水平[2] |
| 动物实验 |
雄性Sprague Dawley大鼠(250-300克)[2]
50毫克/千克 腹腔注射;8小时 |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
YS 49的化学名称为1-(α-萘甲基)-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉;它是一种新型血管活性化合物,通过诱导HO-1表达发挥抗氧化和抗增殖作用,在血管重塑相关疾病(例如高血压、动脉粥样硬化)中具有潜在的治疗应用价值;其作用机制依赖于HO-1介导的ROS清除和JNK通路抑制[1]
YS 49最初被鉴定为一种新型正性肌力药物,能够增强心肌收缩力;它还通过抑制NF-κB和调节MAPK通路发挥抗炎活性,从而减少iNOS过度表达和NO生成,具有治疗炎症相关血管疾病和心肌功能障碍的潜力;在实验浓度(≤30 μM)下,未观察到 YS 49 对 VSMC 和 RAW264.7 细胞的细胞毒性 [2] |
| 分子式 |
C20H22BRNO3
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|---|---|
| 分子量 |
404.2976
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| 精确质量 |
385.067
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| 元素分析 |
C, 59.42; H, 5.48; Br, 19.76; N, 3.46; O, 11.87
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| CAS号 |
132836-42-1
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| 相关CAS号 |
YS-49 monohydrate
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| PubChem CID |
10249534
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
4.967
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| tPSA |
52.49
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| 氢键供体(HBD)数目 |
4
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
401
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
Br[H].O([H])C1=C(C([H])=C2C([H])([H])C([H])([H])N([H])C([H])(C([H])([H])C3=C([H])C([H])=C([H])C4=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C34)C2=C1[H])O[H].O([H])[H]
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| InChi Key |
QHCUNMLYODPTIU-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H19NO2.BrH.H2O/c22-19-11-15-8-9-21-18(17(15)12-20(19)23)10-14-6-3-5-13-4-1-2-7-16(13)14;;/h1-7,11-12,18,21-23H,8-10H2;1H;1H2
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| 化学名 |
1,2,3,4-Tetrahydro-1-(1-naphthalenylmethyl)-6,7-Isoquinolinediol hydrobromide monohydrate
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| 别名 |
YS49 HBr; YS-49; YS 49; YS49; YS-49 hydrobromide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 77~100 mg/mL (199.3~258.9 mM)
Water: ~6 mg/mL (~15.5 mM) Ethanol: ~77 mg/mL (~199.3 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 6.67 mg/mL (17.27 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4734 mL | 12.3671 mL | 24.7341 mL | |
| 5 mM | 0.4947 mL | 2.4734 mL | 4.9468 mL | |
| 10 mM | 0.2473 mL | 1.2367 mL | 2.4734 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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