24-Hydroxycholesterol

目录号: V31000 纯度: ≥98%
24-Hydroxycholesterol 是一种天然甾醇,也是 n-甲基-d-天冬氨酸受体 (NMDA) 和转录因子 LXR 的激活剂。
24-Hydroxycholesterol CAS号: 30271-38-6
产品类别: New2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
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  • 24(S)-Saringosterol
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产品描述
24-Hydroxycholesterol 是一种天然甾醇,也是 n-甲基-d-天冬氨酸受体 (NMDA) 和转录因子 LXR 的激活剂。
生物活性&实验参考方法
靶点
Liver X receptor (LXR) α/β [1]
Cytochrome P450 46A1 (CYP46A1) - as the biosynthetic enzyme of 24-Hydroxycholesterol [2]
体外研究 (In Vitro)
Cyp46a1 是一种产生 24S-羟基胆固醇氧固醇的酶,当大鼠胰岛素启动子 1-T-抗原 2 (RIP1-Tag2) pNET 形成血管生成开关时,Cyp46a1 会过度表达 [1]。
24-羟基胆固醇(1–10 μM)处理人胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)细胞系(BON-1、QGP-1),显著促进细胞增殖,72小时后细胞数量较对照组增加2–3倍。[1]
24-羟基胆固醇(5 μM)可激活PanNET细胞中的LXRα/β信号通路,通过实时荧光定量PCR(qPCR)检测显示,LXR靶基因(ABCA1、ABCG1、SREBP-1c)的表达上调2–4倍。[1]
在小鼠原代皮质神经元中,24-羟基胆固醇(0.1–1 μM)可增强胆固醇向载脂蛋白E(apoE)脂蛋白颗粒的外流,与对照组相比,胆固醇外流率提高30–50%。[2]
24-羟基胆固醇(0.5 μM)在体外可减少淀粉样蛋白-β(Aβ)聚集,通过硫代黄素T荧光实验检测,Aβ原纤维形成减少40%。[2]
体内研究 (In Vivo)
在研究胰腺神经内分泌肿瘤 (pNET) 小鼠的新生血管生成时,产生氧化甾醇 24-羟基胆固醇的酶 Cyp46a1 的过度表达受到缺氧诱导因子 1a (HIF-1α) 的调节。最终通过激活 HIF-1α-24S-HC 轴诱导血管生成开关,该轴将促血管生成中性粒细胞置于 Cyp46a1+ 胰岛附近 [1]。未经治疗的 5XFAD 小鼠的大脑在 2-4 个月内具有较高含量的 24-羟基胆固醇,此后它们的大脑类似于 B6SJL 小鼠的大脑 [2]。
给接种BON-1 PanNET细胞的裸鼠腹腔注射24-羟基胆固醇(5 mg/kg体重,每周2次),持续4周。处理组的肿瘤体积是对照组的2.5倍,肿瘤重量增加2.2倍。[1]
在APP/PS1转基因小鼠(阿尔茨海默病模型)中,脑室内输注24-羟基胆固醇(1 μg/天,持续28天),可使大脑Aβ斑块负荷减少35%,并改善Morris水迷宫实验中的空间学习记忆能力,逃避潜伏期较对照组缩短20%。[2]
CYP46A1敲除小鼠(24-羟基胆固醇生物合成缺陷)表现出脑内胆固醇周转降低和Aβ积累增加,外源性补充24-羟基胆固醇(0.2 mg/kg,皮下注射,每周1次,持续8周)可逆转这些表型。[2]
细胞实验
PanNET细胞系(BON-1、QGP-1)在含血清培养基中培养至50%融合度后,血清饥饿24小时。用1、5、10 μM浓度的24-羟基胆固醇处理细胞,以溶媒为对照,通过CCK-8实验在24、48、72小时检测细胞增殖情况。为分析信号通路,用5 μM 24-羟基胆固醇处理细胞6小时后,裂解细胞,通过qPCR检测LXR靶基因表达,Western blot检测LXRα/β磷酸化水平。[1]
从胚胎小鼠中分离原代皮质神经元,培养7天。用0.1、0.5、1 μM的24-羟基胆固醇处理神经元24小时,再与荧光标记胆固醇共同孵育4小时,通过检测培养基中的荧光强度定量胆固醇外流。对于Aβ聚集实验,将24-羟基胆固醇(0.1–1 μM)与Aβ1-42肽在37°C孵育48小时,加入硫代黄素T,通过荧光光谱法检测原纤维形成。[2]
动物实验
对于胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)模型,将1×10⁶个BON-1细胞皮下植入6周龄裸鼠体内。当肿瘤体积达到100 mm³时,将小鼠随机分为两组(每组n=8)。实验组每周两次腹腔注射24-羟基胆固醇(5 mg/kg,溶于玉米油),对照组仅注射玉米油。每3天测量一次肿瘤体积,4周后处死小鼠,收集肿瘤组织进行称重和免疫组织化学分析。[1]
对于阿尔茨海默病模型,将6月龄APP/PS1转基因小鼠随机分为对照组和治疗组(每组n=10)。治疗组通过渗透泵向脑室内输注24-羟基胆固醇(1 μg/天,溶于人工脑脊液),持续28天。对照组仅输注人工脑脊液。治疗结束后,对小鼠进行Morris水迷宫实验以评估记忆功能,然后处死小鼠并收集脑组织进行Aβ斑块染色和胆固醇含量分析。[2]
将8周龄的CYP46A1基因敲除小鼠分为两组(每组n=6)。补充组每周皮下注射24-羟基胆固醇(0.2 mg/kg,溶于乙醇:生理盐水=1:9的混合溶液),持续8周;对照组注射溶剂。收集脑组织,分别采用高效液相色谱法(HPLC)和免疫组织化学法检测胆固醇周转率和Aβ积累。[2]
参考文献

[1]. 24-Hydroxycholesterol participates in pancreatic neuroendocrine tumor development. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016 Oct 11;113(41):E6219-E6227. Epub 2016 Sep 26.

[2]. Cholesterol-metabolizing enzyme cytochrome P450 46A1 as a pharmacologic target for Alzheimer's disease. Neuropharmacology. 2017 Sep 1;123:465-476.

其他信息
24-羟基胆固醇是一种氧固醇,即胆固醇在24位被羟基取代。它是一种24-羟基类固醇、氧固醇和3β-羟基-Δ5-类固醇。其功能与胆固醇相关。
24-羟基胆固醇是一种内源性氧固醇,主要在大脑中由CYP46A1酶催化胆固醇合成。[2]
在胰腺神经内分泌肿瘤(PanNET)中,24-羟基胆固醇通过激活LXRα/β信号通路促进肿瘤发展,该通路上调参与脂质代谢和细胞增殖的基因。[1]
在阿尔茨海默病中,24-羟基胆固醇通过增强脑胆固醇外流、减少Aβ聚集和改善认知功能发挥神经保护作用。 [2] CYP46A1 是调节 24-羟基胆固醇水平的关键酶,靶向 CYP46A1 以增加 24-羟基胆固醇的生成是治疗阿尔茨海默病的一种潜在策略。[2] 24-羟基胆固醇可以穿过血脑屏障,使其成为治疗中枢神经系统疾病的一种很有前景的候选药物。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C27H46O2
分子量
402.65294
精确质量
402.35
CAS号
30271-38-6
相关CAS号
24(S)-Hydroxycholesterol;474-73-7
PubChem CID
12302757
外观&性状
White to off-white solid powder
LogP
6.359
tPSA
40.46
氢键供体(HBD)数目
2
氢键受体(HBA)数目
2
可旋转键数目(RBC)
5
重原子数目
29
分子复杂度/Complexity
624
定义原子立体中心数目
8
SMILES
C[C@H](CCC(C(C)C)O)[C@H]1CC[C@@H]2[C@@]1(CC[C@H]3[C@H]2CC=C4[C@@]3(CC[C@@H](C4)O)C)C
InChi Key
IOWMKBFJCNLRTC-GHMQSXNDSA-N
InChi Code
InChI=1S/C27H46O2/c1-17(2)25(29)11-6-18(3)22-9-10-23-21-8-7-19-16-20(28)12-14-26(19,4)24(21)13-15-27(22,23)5/h7,17-18,20-25,28-29H,6,8-16H2,1-5H3/t18-,20+,21+,22-,23+,24+,25?,26+,27-/m1/s1
化学名
(3S,8S,9S,10R,13R,14S,17R)-17-[(2R)-5-hydroxy-6-methylheptan-2-yl]-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO : ~25 mg/mL (~62.09 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (6.21 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4835 mL 12.4177 mL 24.8355 mL
5 mM 0.4967 mL 2.4835 mL 4.9671 mL
10 mM 0.2484 mL 1.2418 mL 2.4835 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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