| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
CDK9/cyclinT1 6 nM (IC50)
- CDK9/cyclin T1 (Positive transcription elongation factor b, P-TEFb): KB-0742 is a potent and selective inhibitor of CDK9. The biochemical IC50 for CDK9/cyclin T1 is 6 nM (at 10 μM ATP). [1] - Selectivity Profile: KB-0742 shows >50-fold selectivity over all CDK family members profiled (CDK1-8, 12-19) and >100-fold selectivity against cell-cycle CDKs (CDK1-6). Specific IC50 values (μM) for other CDKs: CDK1/cyclin A (>10), CDK2/cyclin A (>10), CDK4/cyclin D1 (>10), CDK6/cyclin D1 (>10), CDK7/cyclin H (0.736), CDK8/cyclin C (0.721), CDK12/cyclin K (>10), CDK13/cyclin K (>10). [1] Istisociclib (KB-0742) dihydrochloride likely targets cyclin-dependent kinases (CDKs), which are key regulators of the cell cycle and transcription. Based on the name "istisociclib," which follows the naming convention for CDK inhibitors (e.g., palbociclib, ribociclib), this compound is likely a selective CDK inhibitor. It may target CDK4/6 or CDK9, depending on its specific design. The dihydrochloride salt form enhances aqueous solubility. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
CDK9抑制及其下游效应：在22Rv1前列腺癌细胞中，低剂量（0.1-0.5 μM，6小时）KB-0742处理可降低RNA聚合酶II在Ser2和Ser7位点的磷酸化水平。在最高剂量（2.5 μM）下，它还会降低Ser5位点的磷酸化水平。总RNA聚合酶II和CDK9蛋白水平不受影响。在时间进程研究（1 μM）中，KB-0742在6小时开始降低AR-FL和AR-V蛋白的整体水平，并在16小时完全耗竭，同时伴有AR在Ser81位点磷酸化水平的降低。[1]
- 生长抑制（GR50）：在22Rv1前列腺癌细胞中，KB-0742的GR50为0.18 μM。在 MV-4-11 AML 细胞中，GR50 为 0.097 μM。[1] - 细胞凋亡诱导：KB-0742 以剂量依赖的方式诱导 22Rv1 细胞凋亡，这可通过 caspase-3/7 激活来检测。在高剂量 (≥3 μM) 下观察到强烈的诱导作用，而在亚微摩尔剂量 (0.3 μM) 下诱导作用较弱。与 22Rv1 细胞相比，在 MV-4-11 AML 细胞中，较低浓度下细胞凋亡诱导作用更为显著。[1] - 新生转录抑制 (SLAM-seq)：在 22Rv1 细胞中，用 KB-0742 (1.2 μM) 处理可整体下调新生 mRNA 转录。 8小时后，95%的高置信度活跃转录基因的新生转录水平下调。这种转录反应与KI-ARv-03（4 μM）相似。该药物优先下调高转录基因，包括谱系转录因子（例如FOXA1、SOX4、KLF6）和AR/PSA基因座基因，这与靶向超级增强子相关转录相一致。[1] 用KB-0742（0.1–10 μM；22Rv1细胞）处理6小时后，RNA聚合酶II下游Ser2和Ser7位点的磷酸化水平显著降低，而Ser5位点的磷酸化水平也降低。大约在处理6小时后，雄激素受体（AR）-FL和AR-V蛋白的整体水平显著降低，同时磷酸化AR（Ser81）水平也降低。[1] KB-0742（48-72小时）处理对白血病和前列腺癌细胞系具有细胞抑制作用。KB-0742对22Rv1细胞和MV-4-11 AML细胞的GR50值分别为0.183 μM和0.288 μM，表明其具有抗增殖活性[1]。KB-0742能快速抑制22Rv1细胞中新出现的转录，特别是减少短半衰期转录本和AR驱动的癌变程序[1]。 关于盐酸伊司西西利（KB-0742）的体外数据在公开资料中报道较少。作为一种CDK抑制剂，它有望抑制CDK激酶活性，从而导致癌细胞周期阻滞和增殖减少。该化合物可能对特定的CDK亚型具有选择性。然而，现有文献中尚未详细描述具体的IC50值和细胞活性数据。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
22Rv1前列腺癌异种移植模型（小鼠）：在皮下接种22Rv1肿瘤的雄性CB17-SCID小鼠中，口服KB-0742（3 mg/kg，每日一次，连续21天）耐受性良好，肿瘤生长抑制率（TGI）为46%（p=0.007）。10 mg/kg，每日一次给药时，TGI为58%（p<0.0001）。30 mg/kg，每日一次给药时，TGI为82%（p=0.000003）。这优于多西他赛（15 mg/kg，腹腔注射，每周一次，TGI = 70%）。定时给药方案（30 mg/kg，用药3天，停药4天）的TGI为58%（p<0.00005），且耐受性更佳。 [1]
- MV-4-11 AML 异种移植模型（小鼠）：在皮下接种 MV-4-11 肿瘤的雌性 BALB/c 裸鼠中，每日一次口服 KB-0742（25 mg/kg）可使肿瘤生长抑制率 (TGI) 达到 74% (p<0.00002)。采用 60 mg/kg 的周期性给药方案（用药 3 天，停药 4 天）可使 TGI 达到 81% (p<0.00001)。较低的周期性给药方案（15 和 30 mg/kg）分别使 TGI 达到 24% 和 40%。所有治疗方案均耐受良好，未观察到明显的体重变化。 [1] 在22Rv1人前列腺癌细胞系来源的异种移植（CDX）模型中，KB-0742（3-30 mg/kg；口服；每日一次；持续21天）可显著降低肿瘤负荷，即使在高剂量下也具有良好的耐受性[1]。关于盐酸伊司西西利（KB-0742）的体内数据在公开资料中报道较少。作为一种具有潜在抗癌活性的CDK抑制剂，该化合物可能已在异种移植小鼠癌症模型中进行过测试。然而，目前文献中并未详细描述已发表的具体体内疗效研究。该化合物主要用作研究CDK生物学和癌症治疗的科研工具。 |
| 酶活实验 |
体外激酶活性测定（HotSpot激酶测定）：KB-0742在Reaction Biology公司使用其HotSpot激酶测定试剂盒对16种CDK进行了测试。每种化合物均以10个重复剂量（起始浓度为10 μM，进行3倍系列稀释）在每种激酶的Km ATP浓度下进行测试。使用星形孢菌素作为对照化合物。使用GraphPad PRISM绘制归一化数据图并计算IC50值。对于10 μM浓度下抑制率<65%或IC50值超出范围的激酶-化合物组合，在热图绘制中将其IC50值设为10 μM。该实验证实了KB-0742对CDK9的高选择性（IC50 = 6 nM）。 [1]
- 热迁移分析 (TSA)：将 CDK9/cyclin T1 (2 μM) 与 KB-0742 (10 μM) 和 SYPRO-Orange 染料一起进行检测。以 3°C/min 的速率升温，并测量荧光强度以评估化合物结合后蛋白质的热稳定性。[1] Istisociclib (KB-0742) 二盐酸盐的体外 CDK 抑制分析将使用重组 CDK 酶和肽底物。激酶活性采用放射性或发光检测方法进行测定，IC50 值由剂量反应曲线计算得出。将进行针对其他 CDK 亚型和激酶的选择性分析，以确定化合物的特异性。 |
| 细胞实验 |
细胞活力（CellTiter-Glo）：将前列腺癌细胞接种于384孔板中。24小时后，用DMSO或KB-0742处理细胞72小时。使用CellTiter-Glo检测ATP含量，以此作为细胞活力的指标。将原始发光值取平均值，并以DMSO对照组进行标准化。[1]
- 生长速率抑制（GR）和细胞凋亡（IncuCyte）：将细胞接种于96孔板中，加入IncuCyte Caspase-3/7 Green凋亡检测试剂，并用DMSO或KB-0742处理。使用IncuCyte S3成像系统，每3小时对孔板进行一次成像，持续72小时（22Rv1）或48小时（MV-4-11）。对图像进行分析，检测细胞融合度（GR 指标）和凋亡信号（caspase-3/7 阳性细胞）。使用 GRcalculator 工具计算 GR50 值。[1] - Western 印迹：用含有蛋白酶/磷酸酶抑制剂的 RIPA 缓冲液裂解细胞。蛋白质经 SDS-PAGE 电泳分离后，转移至硝酸纤维素膜，并用特异性一抗（例如，抗 CDK9、抗 pRNA Pol II Ser2、抗 AR、抗 AR pSer81）进行检测。使用 HRP 或荧光染料标记的二抗，在 ChemiDoc 或 Odyssey CLx 系统上进行检测。GAPDH 或 β-actin 用作上样对照。 [1] - SLAM-seq（新生转录组分析）：将 22Rv1 细胞用 800 μM s4U 脉冲标记 30 分钟，然后用 DMSO、KB-0742 (1.2 μM) 或 KI-ARv-03 (4 μM) 处理 2、4 或 8 小时。提取 RNA，用碘乙酰胺 (IAA) 处理以烷基化 s4U 标记的 RNA，并使用 QuantSeq 3' mRNA-Seq 文库制备试剂盒构建文库。在 NextSeq 500 上进行测序。使用 SlamDunk 流程对 reads 进行比对和处理，以定量新生 mRNA 片段。[1] - RT-qPCR：对于 PSA (KLK3) 表达，将 LNCaP 细胞用化合物处理 24 小时。细胞裂解后，进行mRNA逆转录。使用PrimePCR探针检测GAPDH（FAM）和KLK3（Cy5），在CFX384 Touch系统上进行qPCR。倍数变化采用ΔΔCt法计算。[1] 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： 22Rv1细胞 测试浓度： 0.1 μM、0.5 μM、1 μM、10 μM 孵育时间： 6小时 实验结果： RNA聚合酶II在Ser2和Ser7位点的下游磷酸化显著降低，Ser5位点的磷酸化也减少。 在癌细胞系中进行了Istisociclib (KB-0742)二盐酸盐的细胞实验。将细胞用不同浓度的化合物处理，并使用 MTT 或 CellTiter-Glo 等标准检测方法测量细胞活力和增殖情况。采用流式细胞术进行细胞周期分析。通过测量视网膜母细胞瘤蛋白 (Rb) 等 CDK 底物的磷酸化水平来确认 CDK 抑制情况。 |
| 动物实验 |
22Rv1异种移植模型：将2×10⁶个22Rv1细胞皮下植入6-8周龄的雄性CB17-SCID小鼠体内。当肿瘤体积达到约170 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=10）。KB-0742配制于10%乙醇、20%聚乙二醇400和70%（20%羟丙基-β-环糊精）的混合溶液中，并以3、10或30 mg/kg的剂量每日一次（QD）口服给药，持续21天。另设一组小鼠以3天用药/4天停药的方案接受30 mg/kg的KB-0742给药。多西他赛（15 mg/kg，腹腔注射，每周一次）作为对照。每周测量两次小鼠体重，并根据公式V = 0.5 × a × b²计算肿瘤体积。肿瘤生长抑制率（TGI）以对照组为基准进行计算。 [1]
- MV-4-11异种移植模型：将1×10⁶个MV-4-11细胞皮下植入6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠体内。当肿瘤体积达到约154 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=10）。KB-0742按上述方法配制，并以25 mg/kg的剂量每日一次口服给药，连续21天；或采用3天给药/4天停药的方案，分别以15、30或60 mg/kg的剂量给药。肿瘤体积和体重也以类似方式进行监测。 [1] 动物/疾病模型： 注射22Rv1人前列腺癌细胞的雄性CB17-SCID（重症联合免疫缺陷）小鼠[1] 剂量： 3 mg/kg、10 mg/kg和30 mg/kg 给药途径： 口服；每日一次；持续21天 实验结果： 显著抑制去势抵抗性前列腺癌（CRPC）的肿瘤生长。 Istisociclib (KB-0742) 二盐酸盐的体内研究通常采用异种移植小鼠癌症模型。该化合物将通过口服或腹腔注射途径给药，剂量根据药代动力学研究确定。疗效将通过测量肿瘤生长抑制率来评估。然而，目前文献中还没有关于 Istisociclib (KB-0742) 二盐酸盐的具体体内试验方案。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
该化合物被描述为“口服生物利用度高”，这已通过口服给药后的体内疗效得到证实。所用制剂为10%乙醇、20%聚乙二醇400和70%（20%羟丙基-β-环糊精）。[1]
公开资料中关于伊司西西利（KB-0742）二盐酸盐的药代动力学数据报道较少。作为一种小分子CDK抑制剂，预计其口服生物利用度中等。使用二盐酸盐形式是为了提高溶解度。目前文献中尚无该研究化合物的详细药代动力学参数，例如半衰期和生物利用度。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外选择性：KB-0742 比其他 CDK 具有 50 倍以上的选择性，表明其与泛 CDK 抑制相关的脱靶毒性风险降低。[1]
- 体内耐受性（体重减轻）：在 22Rv1 异种移植模型中，每日口服 3 和 10 mg/kg 的 KB-0742 仅导致极小的体重减轻（<10%）。每日一次 30 mg/kg 的剂量下，治疗期间体重减轻达到 15%，但在第一周后趋于稳定。通过采用 3 天用药/4 天停药的给药方案，体重减轻减少至 7.5%。在 MV-4-11 模型中，在所有测试剂量（最高达 60 mg/kg 周期性给药）下均未观察到显著的体重变化。 [1] - 化合物锚定靶点结合（下拉实验）：KB-0742（作为游离竞争剂）能够将 CDK9 从 KI-ARv-03 功能化磁珠上置换下来，证实了其可逆的靶点结合。[1] 公开资料中关于 Istisociclib (KB-0742) 二盐酸盐的毒性数据有限。与所有研究化合物一样，Istisociclib (KB-0742) 二盐酸盐仅供研究使用，不得用于人体治疗。完整的毒性评估需要进行标准的体外细胞毒性试验和体内耐受性研究。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制 (MOA)：KB-0742 是一种选择性的 ATP 竞争性 CDK9 抑制剂，CDK9 是 P-TEFb 复合物的激酶亚基。CDK9 可磷酸化 RNA 聚合酶 II C 端结构域 (CTD) 的 Ser2 位点，而该位点对于有效的转录延伸至关重要。抑制 CDK9 会导致 RNA 聚合酶 II 整体停滞，从而对半衰期短的转录本和高转录活性基因产生不成比例的影响，包括致癌驱动因子，例如 AR、MYC 和谱系特异性转录因子（例如 FOXA1）。在前列腺癌中，这会导致 AR 和 AR-V7 蛋白表达和稳定性降低（通过降低 Ser81 位点的磷酸化水平），从而破坏 AR 驱动的致癌程序，并诱导细胞周期阻滞和凋亡。 [1]
- 发现路径：KB-0742 是通过对 SMM 衍生先导化合物 KI-ARv-03 进行药物化学优化而得到的。关键的结构变化包括在吡唑并嘧啶核心上引入支链 3-戊烷延伸，以及环戊烷-1,3-二胺的立体化学构型翻转，从而在保持选择性的同时提高了效力。[1] - 与母体化合物的比较：KB-0742 抑制 22Rv1 细胞增殖的效力约为 KI-ARv-03 的 18 倍（GR50 0.18 μM vs. KI-ARv-03 GR50 3.26 μM），并且显示出更高的生化活性（CDK9 IC50 6 nM vs. KI-ARv-03 IC50 68 nM）。 [1] 伊斯蒂索西利（KB-0742）二盐酸盐（CAS 2416874-75-2）是一种研究化合物，根据其名称推测可能是一种细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）抑制剂。它可能靶向 CDK4/6 或 CDK9，并用于肿瘤学和细胞周期研究。二盐酸盐可提高其水溶性。有关该化合物的更多信息需要查阅专门的化学数据库或原始文献。该化合物仅供研究使用。 |
| 分子式 |
C16H27CL2N5
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|---|---|
| 分子量 |
360.3251
|
| 精确质量 |
359.164
|
| 元素分析 |
C, 53.33; H, 7.55; Cl, 19.68; N, 19.44
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| CAS号 |
2416874-75-2
|
| 相关CAS号 |
2416874-75-2 (HCl);2416873-83-9;
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| PubChem CID |
155819527
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| tPSA |
68.2
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
23
|
| 分子复杂度/Complexity |
333
|
| 定义原子立体中心数目 |
2
|
| SMILES |
CCC(CC)C1=NC2=CC=NN2C(=C1)N[C@H]3CC[C@@H](C3)N.Cl.Cl
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| InChi Key |
OTUPXOLLHVLWQF-NJHZPMQHSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C16H25N5.2ClH/c1-3-11(4-2)14-10-16(19-13-6-5-12(17)9-13)21-15(20-14)7-8-18-21;;/h7-8,10-13,19H,3-6,9,17H2,1-2H3;2*1H/t12-,13-;;/m0../s1
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| 化学名 |
(1S,3S)-N1-(5-(pentan-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-7-yl)cyclopentane-1,3-diamine dihydrochloride
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| 别名 |
KB-0742; KB0742; KB 0742 2HCl;
Istisociclib; KB-0742 HCl; 2416873-83-9; KB0742; F7J6KSY5I8; KB 0742 dihydrochloride; KB 0742 hydrochloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : 100 mg/mL (277.52 mM)
DMSO : 62.5 mg/mL (173.45 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 100 mg/mL (277.52 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7752 mL | 13.8762 mL | 27.7523 mL | |
| 5 mM | 0.5550 mL | 2.7752 mL | 5.5505 mL | |
| 10 mM | 0.2775 mL | 1.3876 mL | 2.7752 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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