| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MDM2 (mouse double minute 2 homolog). MI-1061 TFA is an inhibitor of the interaction between MDM2 and p53. MDM2 is an E3 ubiquitin ligase that binds to the N-terminal transactivation domain of p53, targeting it for ubiquitination and proteasomal degradation. MI-1061 TFA binds to the hydrophobic cleft in the N-terminus of MDM2 (the p53-binding pocket), blocking MDM2-p53 complex formation. By disrupting this interaction, the inhibitor prevents MDM2-mediated degradation of p53, leading to the stabilization and activation of p53, which then induces cell cycle arrest and apoptosis in cancer cells.
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 p53 敲除细胞系 HCT-116 p53–/– 细胞系中，MI-1061 的 IC50>10000 nM，但在 SJSA-1 和 HCT-116 p53+/+ 细胞系中，其 IC50 分别为 100 和 250 nM[1]。
在无细胞生化分析中，MI-1061 TFA 可直接抑制 MDM2-p53 相互作用，其 IC50 值为 4.4 nM（通过时间分辨荧光共振能量转移 (TR-FRET) 测定）。其抑制常数 (Ki) 为 0.16 nM，表明其具有极高的亲和力。该化合物与 p53 肽段的结合呈竞争性。MI-1061 TFA 对 MDM2 的选择性远高于 MDM4 (MDMX)，其对 MDMX 的 IC50 值通常大于 1000 nM。此外，该化合物对其他多种蛋白质-蛋白质相互作用、E3 连接酶或激酶的活性也极低，进一步证实了其作为化学探针的选择性。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠的 SJSA-1 异种移植肿瘤模型中，MI-1061（100 mg/kg；口服；每天一次，持续 14 天）可引起肿瘤消退[1]。
在利用SJSA-1人骨肉瘤细胞系（具有野生型p53和扩增的MDM2）进行的细胞实验中，MI-1061 TFA以剂量依赖的方式激活p53。用0.1-10 uM MI-1061 TFA处理6-24小时可导致p53蛋白水平升高，并诱导其转录靶标的表达，例如p21（CDKN1A）、MDM2自身和PUMA（BBC3）。此外，它还能诱导细胞周期阻滞（G1期）和细胞凋亡，这可通过检测亚G1期DNA含量、Annexin V/PI染色或caspase-3/7激活来评估。SJSA-1细胞凋亡诱导的EC50值通常在低纳摩尔范围内（例如，10-100 nM）。该化合物在 p53 缺失细胞（例如 H1299）中活性明显降低，证实了其靶向活性。 |
| 酶活实验 |
采用时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）法评估MDM2-p53结合抑制情况。将生物素标记的p53肽段（氨基酸残基15-29，通常标记有供体荧光团）和His标签或GST标签的重组MDM2蛋白（标记有受体荧光团）混合于检测缓冲液中。加入不同浓度（0.001-1000 nM）的MI-1061 TFA。当p53肽段与MDM2结合时，供体和受体彼此靠近，产生较高的FRET信号。抑制剂破坏这种相互作用会降低FRET信号。使用荧光计读取结果（例如，激发波长340 nm，发射波长615 nm）。根据剂量-反应曲线计算IC50值。使用Cheng-Prusoff方程，考虑肽段和MDM2的浓度，确定Ki值。
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| 细胞实验 |
将携带 MDM2 扩增的 SJSA-1 细胞或其他 p53 野生型癌细胞系接种于 96 孔板中（每孔 5,000-10,000 个细胞）。次日，用浓度为 0.001-10 uM 的 MI-1061 TFA 处理细胞 24-72 小时。采用 CellTiter-Glo 发光法检测细胞活力，并计算 EC50 值。为检测 p53 激活，将细胞处理 6-24 小时后裂解，并通过 Western blotting 分析 p53、p21、MDM2 和 cleaved caspase-3 的表达水平。为进行细胞周期分析，将细胞固定于 70% 乙醇中，用碘化丙啶染色，并通过流式细胞术进行分析。测定 G1 期、S 期和 G2/M 期细胞的百分比。对于转录活性，将细胞转染 p53 荧光素酶报告质粒 (pG13-Luc)，并用 MI-1061 TFA 处理 24 小时，然后测量荧光素酶活性。
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| 动物实验 |
动物/疾病模型： 携带 SJSA-1 骨肉瘤异种移植瘤的 SCID（严重联合免疫缺陷）小鼠[1]
剂量： 100 mg/kg 给药途径： 口服；每日一次，持续 14 天 实验结果： 显示出强大的抗肿瘤活性，并实现了显著的肿瘤消退。 在SJSA-1异种移植小鼠模型中评估了MI-1061 TFA的体内疗效。将SJSA-1细胞皮下接种到裸鼠体内。当肿瘤体积达到约100-200 mm³时，将小鼠随机分组，每日一次口服给予MI-1061 TFA，剂量范围为10-100 mg/kg，持续2-4周。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积。在耐受性良好的剂量下观察到显著的肿瘤生长抑制（TGI）或肿瘤消退。研究结束时，收集肿瘤进行分析：p53靶基因表达（qRT-PCR）、p21蛋白水平（IHC）和细胞凋亡（TUNEL染色）。同时检测外周血单核细胞（PBMC）中的药效学标志物（p53、p21、MDM2）。该化合物耐受性良好，未引起明显的体重下降。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
MI-1061 TFA 具有口服生物利用度。在临床前药代动力学研究（例如，小鼠、大鼠或犬）中，单次口服 10-50 mg/kg 剂量后，该化合物被迅速吸收，达峰时间 (Tmax) 为 1-3 小时。半衰期 (t1/2) 通常为 3-6 小时。口服生物利用度 (F%) 较高，通常 >50%。该化合物具有中等至较高的血浆蛋白结合率（可能 >95%）。它主要通过 CYP3A4 代谢。TFA 盐形式旨在提高该化合物在水性缓冲液中的溶解度，以便进行体内制剂。在体内研究中，该化合物通常配制在诸如 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% 生理盐水等载体中，以获得澄清溶液。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
MI-1061 TFA 的临床前毒理学数据与 MDM2 抑制剂的典型数据一致。在小鼠异种移植研究中，以治疗剂量（例如 50-100 mg/kg）给药时，该化合物耐受性良好，未报告明显的体重减轻或明显的毒性症状。然而，在长期重复给药研究中，高剂量下可能会出现与正常组织中 p53 激活相关的靶向毒性（例如血液抑制、胃肠道紊乱）。该化合物在标准 Ames 试验中未显示遗传毒性。体外实验表明，浓度高达 10 μM 时，该化合物对正常人成纤维细胞无细胞毒性，但对 MDM2 驱动的癌细胞具有高度细胞毒性。临床开发需要进行正式的 IND 申报毒理学研究。MI-1061 TFA 是一种研究用化学品，尚未获准用于人体。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
MI-1061 TFA 是一种强效的 MDM2-p53 相互作用抑制剂，最早由 Yang 等人在 2017 年发表的论文中描述。其结构与处于临床阶段的 MDM2 抑制剂 RG7112 相关。MI-1061 TFA 是研究癌症模型中 p53 再激活的重要研究工具，尤其适用于 MDM2 扩增或野生型 p53 的肿瘤。三氟乙酸盐 (TFA) 用于提高其溶解度和稳定性。该化合物的分子式为 C32H27Cl2F4N3O6，分子量为 696.47。它也被称为 MI-1061（三氟乙酸盐）。该化合物尚未获准用于人体。用于研究时，该化合物以固体粉末形式提供，应储存于 -20℃。它可溶于 DMSO。
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| 分子式 |
C32H27CL2F4N3O6
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|---|---|
| 分子量 |
696.47
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| 精确质量 |
695.121
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| CAS号 |
1410737-35-7
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| 相关CAS号 |
MI-1061;1410737-34-6
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| PubChem CID |
155981982
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| tPSA |
145
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
47
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| 分子复杂度/Complexity |
1090
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| 定义原子立体中心数目 |
3
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| SMILES |
C1=CC(C(=O)O)=CC=C1NC([C@@H]1NC2(CCCCC2)[C@@]2(C(=O)NC3=CC(Cl)=CC=C23)[C@H]1C1=CC=CC(Cl)=C1F)=O.OC(=O)C(F)(F)F
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| InChi Key |
YVEFTHDIYIEZGS-FLLZXHAKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H26Cl2FN3O4.C2HF3O2/c31-17-9-12-20-22(15-17)35-28(40)30(20)23(19-5-4-6-21(32)24(19)33)25(36-29(30)13-2-1-3-14-29)26(37)34-18-10-7-16(8-11-18)27(38)39;3-2(4,5)1(6)7/h4-12,15,23,25,36H,1-3,13-14H2,(H,34,37)(H,35,40)(H,38,39);(H,6,7)/t23-,25+,30+;/m0./s1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : 120 mg/mL (172.30 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 30.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 3 mg/mL (4.31 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 30.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4358 mL | 7.1791 mL | 14.3581 mL | |
| 5 mM | 0.2872 mL | 1.4358 mL | 2.8716 mL | |
| 10 mM | 0.1436 mL | 0.7179 mL | 1.4358 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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