PTHR1/parathyroid hormone receptor 1
Abaloparatide (0-100 nM; 40 min) increases β-arrestin recruitment and Gs/cAMP signaling in MC3T3-E1 cells[1].
Abaloparatide (0-100 nM) effectively and dose-dependently induces PTHR1 internalization in U2OS cells, with an EC50 value of 0.8 nM[1].

Abaloparatide（0-100 nM；40 分钟）可增加 MC3T3-E1 细胞中 β-arrestin 募集和 Gs/cAMP 信号传导[1]。 Abaloparatide (0-100 nM) 可有效且剂量依赖性地诱导 U2OS 细胞中的 PTHR1 内化，EC50 值为 0.8 nM[1]。

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在MC3T3-E1成骨细胞中，阿巴洛肽以剂量依赖的方式（0.01-100 nM）刺激细胞内cAMP生成，其EC50为0.3 ± 0.03 nM，比特立帕肽的EC50（0.7 ± 0.2 nM）低2.3倍（效力更强）。两种类似物的最大cAMP刺激无显著差异。[1]
在使用表达PTHR1的CHO-K1细胞进行的PathHunter β-arrestin募集实验中，阿巴洛肽剂量依赖性地诱导β-arrestin/PTHR1相互作用，EC50为0.9 ± 0.2 nM。该EC50比特立帕肽的EC50（1.5 ± 0.3 nM）低1.6倍。两者均在100 nM时达到最大刺激。[1]
在使用U2OS细胞进行的PathHunter PTHR1内化实验中，阿巴洛肽和特立帕肽均能有效诱导剂量依赖性的受体内化。阿巴洛肽的EC50值（0.8 ± 0.4 nM）与特立帕肽的EC50值（1.1 ± 0.4 nM）无统计学差异。[1]

在小鼠中，Abaloparatide（20–80 µg/kg；皮下注射；每日一次，持续 30 天）可改善皮质结构和骨形成[1]。 特利帕肽和Abaloparatide/阿巴帕肽是甲状旁腺激素受体1 (PTHR1)类似物，治疗骨质疏松症的疗效差异不明。因此，我们比较了Abaloparatide/阿巴帕肽和特立帕肽对骨结构、代谢、核因子- κ B配体受体激活剂(RANKL)和骨保护素(OPG)水平的影响。野生型(WT)雌性小鼠每天注射载药或20-80µg/kg/天的特立帕肽或阿巴帕肽，持续30天。采用微计算机断层扫描检测股骨和脊柱，ELISA检测血清骨转换标志物RANKL和OPG水平。在20-80µg/kg/天的剂量下，这两种类似物同样增加了股骨远端分数小梁骨的体积、连通性和数量，并降低了结构模型指数(SMI)。然而，当剂量为20µg/kg/天时，只有Abaloparatide/阿巴帕肽的小梁厚度显著增加(13%)。股骨皮质评估显示Abaloparatide/阿巴帕肽比特立帕肽引起更大的剂量依赖性皮质厚度增加。特立帕肽和Abaloparatide/阿巴帕肽都增加了腰椎小梁连通性，但对其他指标没有影响或影响不大。生化分析表明，Abaloparatide/阿巴帕肽可促进前胶原1型完整n端前肽(骨形成标志物)和抗酒石酸酸性磷酸酶5b(骨吸收标志物)水平的升高，并降低RANKL/OPG比值。此外，PTHR1信号在0-100 nmol/L类似物处理的细胞中比较。有趣的是，Abaloparatide/阿巴帕肽的cAMP形成(2.3倍)和β-阻滞蛋白募集(1.6倍)的EC50明显低于特立帕肽。因此，Abaloparatide/阿巴帕肽肽改善的疗效可归因于增强骨形成和皮质结构，降低RANKL/OPG比率，增强Gs-cAMP和β-阻滞素信号[1]。

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Abaloparatide是一种新型的34个氨基酸的肽，被认为是甲状旁腺激素受体(PTH1R)信号通路的有效和选择性激活剂，与PTH(1-34)同源性为41%，与PTHrP(1-34)同源性为76%。对去卵巢成骨减少(OVX)大鼠进行了一项为期12个月的治疗研究，以表征Abaloparatide/阿巴帕肽增加骨量的机制。SD (Sprague-Dawley)大鼠在6月龄时接受OVX或假手术治疗，并不治疗3个月，以允许OVX引起的骨质流失。10只OVX大鼠在骨衰竭期后被安乐死，其余OVX大鼠每天皮下注射1、5或25 μg/kg/d (n = 18/剂量水平)的运载体(n = 18)或阿巴巴拉肽，持续12个月。假对照组(n = 18)每天接受车辆。纵向评估骨密度测定和骨形成和骨吸收生化指标，尸检时采集L3椎和胫骨进行组织形态学测定。鲍巴总苷增加生化骨形成标志物，但不增加骨吸收标志物或引起高钙血症。鲍巴肽增加骨小梁、皮质内和骨膜表面骨形成的组织形态学指标，而不增加破骨细胞或侵蚀表面。Abaloparatide/阿巴帕肽诱导骨小梁体积和密度的显著增加以及骨小梁微结构的改善。鲍巴肽刺激骨膜扩张和胫骨骨干皮质内骨移位，导致皮质骨体积和密度显著增加。服用Abaloparatide/阿巴帕肽(25 μg/kg) 12个月后，OVX-Vehicle对照组的全身骨密度(BMD)保持稳定，增加25%。组织形态学和生物标志物数据表明，皮质和小梁骨量的增加可归因于阿巴巴拉肽的选择性合成代谢作用，而没有证据表明刺激骨吸收。©2016美国骨与矿物研究协会。[2]

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在16周龄雌性C57BL/6J小鼠中，每日皮下注射阿巴洛肽（20或80 µg/kg/天）30天，与溶媒对照组相比，股骨小梁骨厚度（Tb.Th）显著增加（分别为溶媒的113%和108%），而特立帕肽在20 µg/kg/天时未显著增加Tb.Th。两种多肽对股骨其他小梁参数（BV/TV、Conn.D、SMI）的改善作用相似。[1]
在同一小鼠模型中，20和80 µg/kg/天剂量的阿巴洛肽均能显著增加股骨中段皮质骨厚度（Ct.Th），分别增加17%和18%。特立帕肽仅在80 µg/kg/天剂量下显著增加Ct.Th。[1]
血清分析显示，阿巴洛肽治疗使骨形成标志物P1NP产生显著且剂量依赖性的增加（20和80 µg/kg/天时分别为溶媒组的227%和407%）。特立帕肽仅在80 µg/kg/天时显著增加P1NP（291%）。[1]
阿巴洛肽治疗在20 µg/kg/天（167%）和80 µg/kg/天（227%）剂量下均增加了破骨细胞活性标志物TRAcP-5b的血清水平，而特立帕肽仅在80 µg/kg/天剂量下增加（193%）。两种多肽均未改变骨吸收标志物CTX的血清水平。[1]
与溶媒组相比，80 µg/kg/天的阿巴洛肽使血清骨保护素（OPG）水平增加44%，并使RANKL/OPG比值显著降低42%。特立帕肽未显著改变OPG或RANKL/OPG比值。[1]
在溶媒组、阿巴洛肽组和特立帕肽组之间相互比较时，血清钙（Ca²⁺）水平未发现显著差异。然而，与单独的溶媒组相比，阿巴洛肽组（20和80 µg/kg）的Ca²⁺增加了24%。两种多肽在80 µg/kg/天剂量下均使血清无机磷（Pi）水平增加50%。[1]

PathHunter®eXpress PTHR1 CHO‐K1 β‐抑制素GPCR检测[1]
为了评估Abaloparatide和teriparatide刺激PTHR1对β -抑制素向细胞膜募集的影响，采用PathHunter eXpress PTHR1中国仓鼠卵巢- K1 (CHO - K1) β -抑制素GPCR检测。该分析利用了酶片段互补技术。PTHR1与一个小的酶供体片段ProLink™(PK)融合在框架中，并在CHO - K1细胞中共表达，稳定地表达β -阻滞蛋白和较大的N端缺失β -半乳糖苷酶突变体(称为酶受体或EA)的融合蛋白。PTHR1的激活刺激β -阻滞蛋白与PK -标记的GPCR结合，并迫使两个酶片段互补，从而形成活性β -半乳糖苷酶。然后使用化学发光PathHunter检测试剂测量酶活性的增加。细胞播种、孵育和检测按照制造商的指示进行。简单地说，将细胞接种于透明底白色96孔板中，在37°C CO2培养箱中培养48小时。在37°C的CO2培养箱中，用对照物、特立帕肽或阿巴帕肽处理细胞60分钟。在孵育结束时，在室温下黑暗中添加β - gal酶底物60分钟。利用BMG Labtech PHERAstar FS发光平板阅读器测量β -半胱氨酸酶片段互补和β -抑制素/ PTHR1相互作用的光产生(相对光单位，RLU) [1]。

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PathHunter®eXpress PTHR1激活GPCR内化试验[1]
为了确定PTHR1的内化，我们使用了PathHunter eXpress PTHR1 U2OS激活GPCR内化实验。PTHR1激活的GPCR内化U2OS细胞系被设计为共表达一个未标记的PTHR1，一个EA标记的β -阻滞蛋白和一个定位于核内体的PK标记。激活未标记的PTHR1诱导β -抑制素募集，随后在PK -标记的内体中内化GPCR - β -抑制素- EA复合物。类似于β -抑制素分析格式，这种内化迫使两个β -半乳糖酶片段互补，形成水解底物以产生化学发光信号的功能酶。U2OS成骨细胞系播种、孵育和检测按照制造商的指示进行。在37°C的CO2培养箱中，用对照物、特立帕肽或阿巴帕肽处理细胞60分钟。在孵育结束时，在室温下黑暗中添加β - gal酶底物60分钟。利用BMG Labtech PHERAstar FS发光平板阅读器测量β - gal酶片段互补和β -抑制素/内体/PTHR1形成的光产生(RLU)。

细胞内cAMP生成的测定[1]
将MC3T3‐E1细胞以40000个细胞/孔的速度接种于含有500 μ L α‐MEM的24孔板上，其中α‐MEM中添加10%胎牛血清和1% PS。培养1周后，将培养基取出，并用250 μ L刺激培养基(α‐MEM中含有0.05%胎牛血清、0.1%牛血清sa、5 mmol/L hepes缓冲液和0.5 mmol/L IBMX)替换15分钟。IBMX是一种磷酸二酯酶抑制剂，可防止生成的cAMP降解。然后在250µL刺激培养基中加入载体、Abaloparatide和特立帕肽，最终浓度分别为0、0.01、0.1、1、10和100 nmol/L/孔。37°C孵育40分钟，然后取出培养基，在N3液体中快速冷冻，保存在- 80°C。细胞内cAMP的提取，加入100 mmol/L的Hcl，细胞在室温下孵育1小时。使用cAMP竞争性ELISA试剂盒，按照制造商的方案和说明检测细胞内cAMP。

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对于细胞内cAMP的测量，将MC3T3-E1细胞接种于24孔板中培养一周。培养基更换为含有磷酸二酯酶抑制剂的刺激培养基。然后用溶媒或不同浓度的阿巴洛肽或特立帕肽（0-100 nM）处理细胞，在37°C下作用40分钟。通过快速冷冻终止反应，用HCl提取细胞内cAMP，并使用竞争性ELISA法进行定量。[1]
对于β-arrestin募集的评估，采用了利用酶片段互补技术的商业化细胞实验。将表达PTHR1-Prolink标签融合蛋白和β-arrestin-酶受体融合蛋白的细胞接种于96孔板中。48小时后，用溶媒或多肽（0-100 nM）在37°C下处理细胞60分钟。加入化学发光底物，测量指示β-arrestin/PTHR1相互作用的信号（相对光单位，RLU）。[1]
对于PTHR1内化的评估，使用了类似的商业化细胞实验，所用细胞系经过工程改造，共表达未标记的PTHR1、β-arrestin-酶受体以及定位于内体的Prolink标签。用溶媒或多肽（0-100 nM）在37°C下处理细胞60分钟。受体复合物内化到标记的内体中会迫使酶片段互补，通过加入化学发光底物并测量RLU来检测。[1]

16周龄野生型（WT）雌性C57BL/6J小鼠[1]
20-80 µg/kg
皮下注射；每日一次，持续30天

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所有实验均在16周龄野生型（WT）雌性C57BL/6J小鼠（品系编号664）上进行。每天（周日除外）皮下注射载体（0.9% NaCl/10 mmol/L乙酸）或20-80 µg/kg/天的特立帕肽或阿巴洛帕肽，持续30天。动物处死当天未进行肽注射。[1]

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在研究结束前的第117天至第358天期间，共有13只大鼠被实施安乐死或被发现死亡：假手术对照组6只，卵巢切除-载体组2只，卵巢切除+阿巴洛帕肽1 μg/kg/d组3只，卵巢切除+阿巴洛帕肽5 μg/kg/d组1只，卵巢切除+阿巴洛帕肽25 μg/kg/d组1只。对于这些动物的数据，如果收集到绝对值，则报告绝对值；基于基线百分比变化的数据，则根据需要进行截尾处理。五例死亡可能继发于采血并发症，其余死亡则归因于偶然发生的与年龄相关的病理。[1]
研究设计和剂量选择[1]
术后13周骨耗竭期后，一组未经治疗的卵巢切除（OVX）大鼠被安乐死，作为组织形态计量学数据的预处理基线组。其余各组每日皮下注射赋形剂（赋形剂；0.9%氯化钠溶液）或三种不同剂量水平的阿巴洛帕肽，注射体积均为0.1 mL/kg。阿巴洛帕肽的剂量水平分别为1 μg/kg/d（OVX-ABL1）、5 μg/kg/d（OVX-ABL5）和25 μg/kg/d（OVX-ABL25），给药剂量根据每周的体重测量结果进行调整。另一项大鼠研究的初步结果表明，连续6周给予1.25 μg/kg/d的阿巴洛帕肽可完全逆转卵巢切除术（OVX）引起的骨丢失（Radius Health公司，美国马萨诸塞州沃尔瑟姆）。因此，本研究选择1 μg/kg作为低剂量，并设置了该剂量的5倍和25倍，以确保安全。[1]

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本研究使用16周龄的雌性野生型C57BL/6J小鼠。将动物随机分为三组，分别接受为期30天的每日皮下注射（周日除外）：赋形剂（0.9%氯化钠/10 mmol/L乙酸）、阿巴洛帕肽（20或80 μg/kg/天）或特立帕肽（20或80 μg/kg/天）。处死当天不进行任何注射。 [1]
治疗结束后，对小鼠进行麻醉，并通过心脏穿刺采集血液以分离血清。随后对动物实施安乐死，取出股骨和腰椎（L5），用福尔马林固定，并保存在乙醇中，用于微型计算机断层扫描（micro-CT）分析，以评估骨微结构。[1]

吸收、分布和排泄
健康女性皮下注射 80 mcg 阿巴洛帕肽后，其绝对生物利用度为 36%。绝经后骨质疏松症女性皮下注射 80 mcg 阿巴洛帕肽 7 天后，平均（标准差）Cmax 为 812 (118) pg/mL，AUC0-24 为 1622 (641) pgxhr/mL。中位达峰时间 (Tmax) 为 0.51 小时，范围为 0.25 至 0.52 小时。
阿巴洛帕肽的肽片段主要通过肾脏排泄消除。
分布容积约为 50 升。
健康受试者皮下给药后的平均表观总血浆清除率为 168 升/小时。

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代谢/代谢物
阿巴洛帕肽通过非特异性蛋白水解降解代谢为较小的肽片段。

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生物半衰期
阿巴洛帕肽的平均半衰期约为 1 小时。

蛋白结合
体外实验表明，阿巴洛帕肽与血浆蛋白的结合率约为70%。

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在卵巢切除（OVX）大鼠中，每日皮下注射剂量高达25 µg/kg/d的阿巴洛帕肽，持续12个月，耐受性良好，与溶媒对照组相比，未观察到体重减轻或毒性反应。
阿巴洛帕肽不会引起明显的血钙过高；研究期间血清钙水平保持在正常范围内，仅在25 µg/kg/d组第6个月时略有升高（+2.6%）。记录到的最高血清钙值为11.7 mg/dL（在正常范围内）。
子宫和阴道重量不受阿巴洛帕肽治疗的影响。[2]

[1]. Abaloparatide exhibits greater osteoanabolic response and higher cAMP stimulation and β-arrestin recruitment than teriparatide. Physiol Rep. 2019 Oct;7(19):e14225.

[2]. One Year of Abaloparatide, a Selective Activator of the PTH1 Receptor, Increased Bone Formation and Bone Mass in Osteopenic Ovariectomized Rats Without Increasing Bone Resorption. J Bone Miner Res. 2017 Jan;32(1):24-33.

药效学
阿巴洛帕肽可刺激骨膜、松质骨和皮质骨表面的骨形成。它以剂量依赖的方式增加骨矿物质密度和骨形成标志物。阿巴洛帕肽可引起破骨细胞骨吸收的短暂且有限的增加，并增加骨密度。在大鼠和猴子中，阿巴洛帕肽发挥合成代谢作用，增加骨矿物质密度和矿物质含量，并与椎骨和非椎骨部位骨强度的增加相关。

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阿巴洛帕肽是甲状旁腺激素相关蛋白 (PTHrP 1-34) 的合成类似物，与 PTHrP(1-34) 的同源性为 71%，与特立帕肽 (PTH 1-34) 的同源性为 41%。它在第22至34位氨基酸残基之间包含五个氨基酸的修饰。[1]
阿巴洛帕肽和特立帕肽均为PTH1受体（PTHR1）激动剂，并已获得FDA批准用于治疗骨质疏松症。研究表明，阿巴洛帕肽更优的骨合成作用可能归因于其对PTHR1下游Gs/cAMP和β-arrestin信号通路的更强激活作用，而特立帕肽则不具备这种作用。[1]
增强的信号传导可导致骨形成（P1NP水平升高）、皮质骨和松质骨厚度增加，以及在所测试的小鼠模型中可能更有利的骨吸收情况（RANKL/OPG比值降低）。[1]

C174H300N56O49

3960.58963775635

3959.273

C, 52.58; H, 7.62; N, 19.51; O, 20.29

247062-33-5

Abaloparatide TFA

145705876

H-DL-Ala-DL-Val-DL-Ser-DL-Glu-DL-His-DL-Gln-DL-Leu-DL-Leu-DL-His-DL-Asp-DL-Lys-Gly-DL-Lys-DL-Ser-DL-xiIle-DL-Gln-DL-Asp-DL-Leu-DL-Arg-DL-Arg-DL-Arg-DL-Glu-DL-Leu-DL-Leu-DL-Glu-DL-Lys-DL-Leu-DL-Leu-Aib-DL-Lys-DL-Leu-DL-His-DL-xiThr-DL-Ala-NH2

AVSEHQLLHDKGKSXQDLRRRELLEKLLXKLHXA; AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLL-{Aib}-KLHTA-NH2

White to off-white solid powder

-20.9

1740

61

60

145

279

9310

0

BVISQZFBLRSESR-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C174H300N56O49/c1-26-93(20)136(228-165(274)126(80-232)224-141(250)101(39-28-32-56-176)200-129(236)78-195-140(249)100(38-27-31-55-175)201-161(270)123(73-133(243)244)223-160(269)121(71-98-76-190-82-197-98)220-158(267)118(68-90(14)15)216-155(264)114(64-86(6)7)213-148(257)107(45-50-127(180)234)207-159(268)120(70-97-75-189-81-196-97)219-151(260)111(49-54-132(241)242)209-164(273)125(79-231)225-167(276)135(92(18)19)227-139(248)94(21)179)168(277)210-108(46-51-128(181)235)149(258)222-124(74-134(245)246)162(271)217-112(62-84(2)3)152(261)205-105(44-37-61-194-173(187)188)143(252)203-103(42-35-59-192-171(183)184)142(251)204-104(43-36-60-193-172(185)186)144(253)206-110(48-53-131(239)240)150(259)214-115(65-87(8)9)154(263)215-113(63-85(4)5)153(262)208-109(47-52-130(237)238)147(256)202-102(40-29-33-57-177)145(254)211-116(66-88(10)11)156(265)218-119(69-91(16)17)166(275)230-174(24,25)170(279)226-106(41-30-34-58-178)146(255)212-117(67-89(12)13)157(266)221-122(72-99-77-191-83-198-99)163(272)229-137(96(23)233)169(278)199-95(22)138(182)247/h75-77,81-96,100-126,135-137,231-233H,26-74,78-80,175-179H2,1-25H3,(H2,180,234)(H2,181,235)(H2,182,247)(H,189,196)(H,190,197)(H,191,198)(H,195,249)(H,199,278)(H,200,236)(H,201,270)(H,202,256)(H,203,252)(H,204,251)(H,205,261)(H,206,253)(H,207,268)(H,208,262)(H,209,273)(H,210,277)(H,211,254)(H,212,255)(H,213,257)(H,214,259)(H,215,263)(H,216,264)(H,217,271)(H,218,265)(H,219,260)(H,220,267)(H,221,266)(H,222,258)(H,223,269)(H,224,250)(H,225,276)(H,226,279)(H,227,248)(H,228,274)(H,229,272)(H,230,275)(H,237,238)(H,239,240)(H,241,242)(H,243,244)(H,245,246)(H4,183,184,192)(H4,185,186,193)(H4,187,188,194)

Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-ArgArg-Glu-Leu-Leu-Glu-Lys-Leu-Leu-Aib-Lys-Leu-His-Thr-Ala-NH2

BIM-44058; Abaloparatide acetate; BA-058; ITM-058; BIM 44058; BA 058;ITM 058; BIM44058; BA058;ITM058; H-DL-Ala-DL-Val-DL-Ser-DL-Glu-DL-His-DL-Gln-DL-Leu-DL-Leu-DL-His-DL-Asp-DL-Lys-Gly-DL-Lys-DL-Ser-DL-xiIle-DL-Gln-DL-Asp-DL-Leu-DL-Arg-DL-Arg-DL-Arg-DL-Glu-DL-Leu-DL-Leu-DL-Glu-DL-Lys-DL-Leu-DL-Leu-Aib-DL-Lys-DL-Leu-DL-His-DL-xiThr-DL-Ala-NH2; trade name: Tymlos

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中（例如氮气保护），避免吸湿/受潮和光照。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

如何溶解多肽，详情请参考右上角《产品说明书》第3页：“多肽溶解指南”。

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配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (0.63 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。