| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DNA: Acelarin is a phosphoramidate prodrug of gemcitabine. Its mechanism of action involves intracellular delivery of gemcitabine monophosphate, which is further phosphorylated to the active triphosphate metabolite (dFdCTP). dFdCTP replaces deoxycytidine during DNA replication, leading to cell cycle arrest and apoptosis. The diphosphate metabolite (dFdCDP) inhibits ribonucleotide reductase (RNR), potentiating the anticancer effect. [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
吉西他滨是一种核苷类似物，常用于治疗癌症；然而，由于癌细胞对耐药性高度敏感，其疗效受到限制。通过添加磷酰胺基团，吉西他滨可以免受多种重要抗癌通路的影响。我们制备了一系列吉西他滨磷酰胺前药，并测试了它们在多种肿瘤细胞系中抑制肿瘤生长的能力。在所制备的化合物中，NUC-1031在体外表现出显著的抑制作用。
细胞抑制活性：Acelarin (6f) 对多种癌细胞系表现出强效的体外细胞抑制活性。 IC50 值（μM）分别为：L1210（小鼠白血病细胞）0.035 ± 0.02，CEM（人 T 淋巴细胞）0.1 ± 0.03，MiaPaCa-2（人胰腺癌细胞）0.44 ± 0.06，以及 BxPC-3（人胰腺癌细胞）0.15 ± 0.04。与吉西他滨相比，阿西拉林在这些胰腺癌细胞系中的效力提高了 2 至 4 倍。[1] 克服 dCK 耐药性：在 RT112 癌细胞中，脱氧胞苷（dCK 底物）的存在使吉西他滨的 EC50 值提高了 75 倍（从 1.4 nM 提高到 104.9 nM）。相反，Acelarin 的活性未受到显著影响（不含脱氧胞苷时 EC50 = 0.2 nM，含脱氧胞苷时 EC50 = 0.7 nM），表明其绕过了 dCK 依赖性激活。[1] 克服 hENT1 转运体耐药性：在 PANC1 胰腺癌细胞中，核苷转运抑制剂双嘧达莫显著降低了吉西他滨的活性（EC50 从 611 μM 增加到 >2000 μM）。Acelarin 在双嘧达莫存在下仍保持了较强的细胞毒性（EC50 = 162 μM，不含抑制剂时为 190 μM），表明其摄取不依赖于转运体。[1] 对胞苷脱氨酶 (CDA) 的耐药性：紫外吸收光谱显示，吉西他滨在 2 分钟内迅速脱氨（吸光度从 267 nm 偏移至 257 nm）。在 30 分钟内，Acelarin 在 267 nm 处的吸收光谱保持不变，证实其对 CDA 介导的降解具有抵抗力。[1] 细胞内 dFdCTP 水平：在 BxPC-3 和 MiaPaCa-2 细胞中，即使在 dCK 抑制剂 (2T2D) 或 hENT1 转运体抑制剂 (NBTI) 存在的情况下，Acelarin 仍能维持活性三磷酸代谢物 (dFdCTP) 的稳定细胞内水平。在这些条件下，吉西他滨的 dFdCTP 水平显著降低。[1] 人肝细胞中的代谢稳定性：Acelarin (6f) 在人肝细胞提取物中的半衰期为 139 分钟，表明其具有中等稳定性，适合临床开发。[1] 肝微粒体中的代谢稳定性：与肝微粒体孵育 1 小时后，仍有 18% 的 Acelarin 可检测到。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在胰腺异种移植模型中，ProTide显著缩小了肿瘤体积，且对体重的影响小于吉西他滨治疗组，表明其安全性更佳。研究结果明确表明，ProTide在脱氨酶存在下保持稳定，且在肿瘤细胞内发挥作用不依赖于激酶或核苷转运蛋白。ProTide NUC-1031目前正在进行I/II期临床试验，已显示出令人鼓舞的早期疗效信号、优异的安全性以及可靠的药代动力学数据，显示其可显著提高细胞内吉西他滨三磷酸的水平。磷酰胺类化合物有望成为新型高效抗癌药物的重要来源，从而产生大量旨在克服癌症耐药机制并改善患者预后的前沿疗法[1]。
MiaPaCa-2异种移植模型（胰腺癌）：在携带MiaPaCa-2人胰腺肿瘤的裸鼠中，首次给药后第7天，腹腔注射Acelarin（0.076 mmol/kg）可显著降低肿瘤体积，与载体对照组相比差异显著。该降低幅度显著大于吉西他滨在同一时间点的降低幅度。体重变化小于4%，与吉西他滨治疗组小鼠相似，表明其耐受性良好。 [1] BxPC-3异种移植模型（吉西他滨耐药胰腺癌）：在携带BxPC-3人胰腺肿瘤（吉西他滨耐药细胞系）的裸鼠中，与对照组相比，Acelarin显著抑制了肿瘤生长，而吉西他滨则没有这种效果。Acelarin治疗组小鼠的平均体重变化小于吉西他滨治疗组，表明Acelarin具有更好的耐受性。[1] 最大耐受剂量研究：在Balb/c裸鼠中，将Acelarin溶于40% Captisol溶液中，以0.228 mmol/kg（132.3-141.9 mg/kg）的剂量腹腔注射，每周两次，持续2周。监测小鼠的体重变化和临床症状。[1] |
| 酶活实验 |
羧肽酶 Y 活性测定（活化途径）：将 Acelarin (6f) 溶解于含 Trizma 缓冲液（pH 7.6）的丙酮-d6 中，并用羧肽酶 Y 处理。记录 ³¹P NMR 谱图随时间的变化。10 分钟内，δ 4.35 ppm 处出现一个峰（中间体 A，不含酯基）。随后，δ 6.80 ppm 处出现一个峰，并在 12 小时内逐渐增强，这与稳定的非手性中间体 (C) 相符。这证实了所提出的活化途径：酯水解 → 自发环化（芳基取代）→ 水解 → 氨基酸裂解释放吉西他滨单磷酸酯。[1]
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| 细胞实验 |
细胞毒性试验 (MTS)：将癌细胞系（MiaPaCa-2、BxPC-3、L1210、CEM）接种于 96 孔板（0.5-100 × 10³ 个细胞/孔），并过夜培养。然后将细胞与不同浓度的测试化合物孵育 72 小时。加入 MTS 试剂 (50 μL)，在 37°C 下孵育 4 小时，并使用酶标仪读取吸光度以确定 IC50 值。[1]
dCK 旁路试验：在有或无脱氧胞苷（dCK 底物）的情况下，用吉西他滨或阿西拉林处理 RT112 细胞。通过 MTT 法测定活细胞数来确定 EC50 值。[1] 转运体旁路试验：在有或无双嘧达莫（核苷转运抑制剂）的情况下，用吉西他滨或阿西拉林处理 PANC1 细胞。 EC50 值按上述方法测定。[1] 细胞内 dFdCTP 测定：将 BxPC-3 和 MiaPaCa-2 细胞在有或无 dCK 抑制剂 (2T2D) 或 hENT1 抑制剂 (NBTI) 的情况下，用吉西他滨或阿西拉林处理 24 小时。洗涤细胞，裂解细胞，并通过 UPLC-MS/MS 定量细胞内 dFdCTP 水平。[1] 胞苷脱氨酶 (CDA) 测定：将吉西他滨和阿西拉林溶解于测定缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH 7.5）中，配制成 100 μM 的溶液。在 25°C 下记录紫外光谱（220-350 nm）。加入 CDA 酶溶液 (200 μL)，每隔 1 分钟记录一次光谱，持续 30 分钟。通过吸光度变化监测降解情况。[1] |
| 动物实验 |
异种移植研究：** 将6-8周龄、体重20±2 g的雌性Balb/c裸鼠皮下接种MiaPaCa-2或BxPC-3人胰腺癌细胞。待肿瘤达到合适大小后，将小鼠随机分组。将阿西拉林和吉西他滨溶解于40% Captisol溶液（Captisol溶于纯水，经0.22 μm滤膜过滤制备）。腹腔注射给药，持续3周。定期测量肿瘤体积和小鼠体重。数据采用Student's t检验进行分析。 [1]
* **最大耐受剂量研究：**雌性 Balb/c 裸鼠（6-8 周龄）每周两次腹腔注射 Acelarin（0.228 mmol/kg，132.3-141.9 mg/kg）或赋形剂（40% Captisol），持续 2 周。每日监测小鼠的体重变化和临床症状。[1] 异种移植研究：雌性 Balb/c 裸鼠（6-8 周龄，20±2 g）皮下接种 MiaPaCa-2 或 BxPC-3 人胰腺癌细胞。当肿瘤达到合适大小后，将小鼠随机分组。Acelarin 和吉西他滨溶解于 40% Captisol 溶液（由 Captisol 溶于纯水，经 0.22 μm 滤膜过滤制备）。化合物腹腔注射给药，持续 3 周。定期测量肿瘤体积和体重。数据采用学生t检验进行分析。[1] 最大耐受剂量研究：雌性Balb/c裸鼠（6-8周龄）每周两次腹腔注射Acelarin（0.228 mmol/kg，132.3-141.9 mg/kg）或赋形剂（40% Captisol），持续2周。每日监测小鼠的体重变化和临床症状。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
人血清稳定性：将阿西拉林与人血清在 37°C 下孵育，并用 ³¹P NMR 监测 13 小时。13 小时后，59% 的原始化合物仍然存在，其中 41% 转化为代谢物 C。估计半衰期 >14 小时，表明其适用于临床研究。[1]
物种特异性稳定性：在大鼠血清中，阿西拉林在 6.5 分钟内完全转化为代谢物 C（半衰期 <5 分钟）。在犬血清中，14 小时后仍有 >80% 的化合物残留（半衰期 >100 小时），证实了阿西拉林在啮齿动物体内由于循环酯酶的作用而快速降解，但在包括人类在内的其他物种中则表现出稳定性。[1] 人肝细胞稳定性：阿西拉林在人肝细胞提取物中的半衰期为 139 分钟。 [1] 肝微粒体稳定性：与肝微粒体孵育1小时后，仍有18%的Acelarin可检测到。[1] 细胞内代谢：Acelarin可将吉西他滨单磷酸酯递送至细胞内，绕过限速步骤dCK磷酸化。它进一步代谢为活性二磷酸酯（dFdCDP）和三磷酸酯（dFdCTP）形式。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体内耐受性（MiaPaCa-2模型）：接受Acelarin治疗的小鼠体重变化小于4%，与接受吉西他滨治疗的小鼠相似，表明其具有良好的耐受性。[1]
体内耐受性（BxPC-3模型）：接受Acelarin治疗的小鼠平均体重变化小于接受吉西他滨治疗的小鼠，表明其具有更好的耐受性。[1] 最大耐受剂量：小鼠每周两次、连续两周以0.228 mmol/kg（132.3-141.9 mg/kg）的剂量服用Acelarin，耐受性良好，未报告死亡或严重临床症状。[1] 毒性代谢物生成减少：Acelarin对CDA降解的抵抗性表明其释放的有害脱氨基代谢物dFdU较少，这可能使其在患者中具有更佳的安全性。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
背景：Acelarin（NUC-1031，化合物 6f）是一种采用 ProTide 技术开发的吉西他滨磷酰胺前药。它于 2005 年首次获得专利，专利号为 CPF-3126。该化合物旨在克服限制吉西他滨疗效的关键耐药机制：(1) 脱氧胞苷激酶 (dCK) 的下调；(2) 核苷转运蛋白（尤其是 hENT1）表达降低；以及 (3) 胞苷脱氨酶 (CDA) 的上调。[1]
作用机制：Acelarin 的细胞摄取不依赖于核苷转运蛋白。其磷酰胺部分通过以下途径代谢：酯水解（由羧肽酶型酶催化）→ 自发环化（芳基取代）→ 水解 → 磷酰胺酶裂解，释放吉西他滨单磷酸酯。这绕过了限速步骤dCK磷酸化。单磷酸进一步磷酸化为活性二磷酸（dFdCDP，抑制RNR）和三磷酸（dFdCTP，掺入DNA导致链终止）。[1] 临床开发：Acelarin（NUC-1031）在本文发表时正处于临床开发阶段，一项I/II期研究显示，该化合物在晚期实体瘤患者中具有令人鼓舞的疗效信号和良好的安全性。该化合物对多种实体瘤均显示出活性。[1] 结构特征：Acelarin是吉西他滨的L-丙氨酸苄酯苯基磷酰胺前药。磷酰胺部分连接在核糖的5'位。 [1] 与其他前药相比的优势：与其他仅针对一种或两种耐药机制的吉西他滨前药不同，Acelarin 可克服所有三种关键耐药途径：dCK 依赖性、转运体依赖性和 CDA 降解。[1] |
| 分子式 |
C25H27F2N4O8P
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|---|---|
| 分子量 |
580.4816
|
| 精确质量 |
580.153
|
| CAS号 |
840506-29-8
|
| PubChem CID |
11169170
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.616
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| tPSA |
174.04
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
11
|
| 可旋转键数目(RBC) |
12
|
| 重原子数目 |
40
|
| 分子复杂度/Complexity |
1020
|
| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
C[C@@H](C(=O)OCC1=CC=CC=C1)NP(=O)(OC[C@@H]2[C@H](C([C@@H](O2)N3C=CC(=NC3=O)N)(F)F)O)OC4=CC=CC=C4
|
| InChi Key |
NHTKGYOMICWFQZ-KKQYNPQSSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H27F2N4O8P/c1-16(22(33)36-14-17-8-4-2-5-9-17)30-40(35,39-18-10-6-3-7-11-18)37-15-19-21(32)25(26,27)23(38-19)31-13-12-20(28)29-24(31)34/h2-13,16,19,21,23,32H,14-15H2,1H3,(H,30,35)(H2,28,29,34)/t16-,19+,21+,23+,40?/m0/s1
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| 化学名 |
benzyl (2S)-2-[[[(2R,3R,5R)-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)-4,4-difluoro-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-phenoxyphosphoryl]amino]propanoate
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| 别名 |
GTPL 7389 CPF-31 CPF31Acelarin NUC-1031 NUC 1031 NUC1031GTPL7389 GTPL-7389
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 36 mg/mL (~62.02 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.58 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7227 mL | 8.6136 mL | 17.2271 mL | |
| 5 mM | 0.3445 mL | 1.7227 mL | 3.4454 mL | |
| 10 mM | 0.1723 mL | 0.8614 mL | 1.7227 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02351765 | COMPLETED | Drug: Acelarin Drug: Cisplatin |
Ampullary Cancer Biliary Tract Cancer Cholangiocarcinoma Gallbladder Cancer |
The Christie NHS Foundation Trust | 2016-01 | Phase 1 |
| NCT03610100 | SUSPENDED | Drug: Acelarin Drug: Gemcitabine |
Pancreatic Acinar Carcinoma Pancreatic Neoplasms |
The Clatterbridge Cancer Centre NHS Foundation Trust | 2015-12 | Phase 2 Phase 3 |
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