Acetamiprid is a neonicotinoid insecticide that targets nicotinic acetylcholine receptors in insects. In this rat study, no specific molecular target is identified, but it is shown to inhibit testosterone synthesis in Leydig cells through induction of oxidative stress and mitochondrial damage, leading to disruption of the steroidogenic pathway [2]
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睾丸间质细胞的分离与鉴定：采用Percoll密度梯度离心法从大鼠睾丸中分离睾丸间质细胞。细胞在30%和60% Percoll层之间形成清晰的条带。通过免疫荧光染色检测睾丸间质细胞标志物HSD3B，证实了细胞的纯度。分离的睾丸间质细胞纯度为85.63 ± 7.68% [2]。
- 睾丸间质细胞的氧化应激：啶虫脒暴露显著增加了分离的睾丸间质细胞中的氧化应激标志物。丙二醛（MDA）水平从0.43 ± 0.08 nmol/mg蛋白（对照组）增加到1.96 ± 0.13 nmol/mg蛋白（10 mg/kg组）和4.31 ± 0.18 nmol/mg蛋白（30 mg/kg组）。一氧化氮 (NO) 水平从 0.23 ± 0.05 μM（对照组）升高至 0.41 ± 0.06 μM（10 mg/kg 组）和 0.59 ± 0.06 μM（30 mg/kg 组）[2]。
- 睾丸间质细胞中的 ATP 和 cAMP 水平：啶虫脒暴露显著降低了睾丸间质细胞中 ATP 和 cAMP 的生成。ATP 水平呈剂量依赖性下降，cAMP 水平也呈现类似的模式。与维生素 E (20 mg/kg) 联合给药可部分阻止这些降低[2]。
- 腺苷酸环化酶活性：在对照组、低剂量组、高剂量组或维生素 E 联合治疗组之间，腺苷酸环化酶 (ADCY) 活性均未观察到显著差异，表明 cAMP 的降低并非由于 ADCY 的抑制所致[2]。

啶虫脒可降低体重，并对精子发生有轻微影响。[1] 啶虫脒可降低小鼠睾酮代谢基因、nAChR亚基基因和增殖相关基因的表达。[1] 啶虫脒通过降低胆固醇转化为睾酮的速率并阻止胆固醇进入Leydig细胞线粒体，从而干扰后续的睾酮生物合成。这些作用会导致大鼠生殖损伤。[2] 动物处理方案：将5周龄雄性Sprague Dawley大鼠随机分为四组（每组n=20）：对照组（0.5 mL花生油）、低剂量组（10 mg/kg啶虫脒）、高剂量组（30 mg/kg啶虫脒）和维生素E组（30 mg/kg啶虫脒 + 20 mg/kg维生素E）。所有化合物均溶于花生油（0.5 mL）中，每日灌胃给药，持续35天[2]。
- 体重和睾丸重量：与对照组相比，啶虫脒暴露显著降低了体重和睾丸重量。体重：对照组（390.63 ± 29.81 g），低剂量组（378.78 ± 21.31 g，P<0.05），高剂量组（351.58 ± 19.65 g，P<0.01）。睾丸重量：对照组（4.63 ± 0.21 g），低剂量组（4.38 ± 0.18 g，P<0.05），高剂量组（3.75 ± 0.28 g，P<0.01）。维生素E联合治疗可部分预防这些下降[2]。
- 精子数量和活力：啶虫脒暴露显著降低了附睾精子数量和活力。精子数量（×10⁶）：对照组（7.98 ± 0.46），低剂量组（7.13 ± 0.53，P<0.05），高剂量组（5.83 ± 0.35，P<0.05）。精子活力（A+B级%）：对照组（68.16 ± 11.19），高剂量组（41.51 ± 10.65，P<0.05）。维生素E联合治疗显著提高了精子数量（6.53 ± 0.61，与高剂量组相比，P<0.05）[2]。
- 血浆激素水平：啶虫脒暴露显著降低了血浆睾酮水平，并升高了黄体生成素（LH）水平。高剂量组的睾酮水平显著低于对照组（P<0.01），而LH水平显著升高（P<0.01）。维生素E联合治疗部分逆转了这些激素变化（P<0.05）[2]。
- 睾丸组织病理学影响：光镜检查显示睾丸损伤呈剂量依赖性。低剂量组：生精细胞退化并出现空泡化。高剂量组：生精小管严重受损，精子细胞和间质Leydig细胞显著减少。 HSD3B免疫荧光染色证实Leydig细胞数量显著减少。Leydig细胞与生精小管的比例呈剂量依赖性显著下降[2]。
- 线粒体超微结构：电镜观察显示，随着啶虫脒剂量的增加，Leydig细胞线粒体损伤逐渐加重。对照组：线粒体嵴完整。低剂量组：部分线粒体嵴断裂，间距增大。高剂量组：大量线粒体嵴断裂消失，内膜严重受损。线粒体损伤率随剂量增加而显著升高（P<0.05或P<0.01）。维生素E联合治疗显著降低了线粒体损伤（P<0.05）[2]。
- 睾丸mRNA和蛋白水平：啶虫脒暴露显著降低了睾丸中关键类固醇生成因子Star、Cyp11a1和Hsd3b的mRNA和蛋白水平。Lhcgr表达未见显著变化。与高剂量组相比，维生素E联合治疗显著提高了Star、Cyp11a1和Hsd3b的水平（P<0.05）[2]。
- 啶虫脒残留：使用UPLC-QQQ-MS/MS检测到暴露大鼠血液和睾丸中的啶虫脒残留。残留水平呈剂量依赖性。维生素E联合治疗不影响啶虫脒残留水平，表明维生素E不改变啶虫脒的代谢[2]。

腺苷酸环化酶活性测定：将Leydig细胞匀浆并离心。将沉淀物重悬于冰冷的测定缓冲液（1.6 mM EGTA、320 mM蔗糖、2 mM Tris pH 7.4）中。反应混合物（500 μL）包含2 mM EGTA、80 mM Tris pH 7.4、0.5 mM IBMX、3 mM MgCl₂和5 μM福斯克林。加入ATP（200 μM）启动反应，并在30°C下孵育10分钟。通过煮沸3分钟终止反应。离心后，定量cAMP。ADCY活性以pmol cAMP/mg蛋白/min表示[2]。- ATP生物发光测定：收集Leydig细胞上清液。根据制造商说明，使用ATP生物发光检测试剂盒测定ATP水平。使用发光仪测定光强度。ATP浓度以nmol/mg蛋白表示，基于线性回归分析[2]。
- cAMP测定：根据制造商说明，使用cAMP检测试剂盒测定Leydig细胞中的cAMP水平[2]。
- 氧化应激测定：根据制造商说明，使用商业检测试剂盒测定Leydig细胞中的MDA和NO浓度[2]。
- 乙腈残留的UPLC-QQQ-MS/MS分析：将睾丸样本（100 mg）和血清样本（200 μL）转移至含有200 μL水和800 μL甲醇：乙腈（1:1）的试管中。样品经匀浆处理后，超声提取5分钟（重复三次），并在4℃下以12,000 rpm离心10分钟。上清液经0.22 μm孔径滤膜过滤后，使用配备C18色谱柱的超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪进行分析。浓度通过标准曲线[2]进行线性回归确定。
- 实时定量PCR：使用RNeasy Mini试剂盒从左侧睾丸中提取总RNA。取1 μg总RNA反转录为cDNA。在96孔板中，使用SYBR Green Master Mix进行实时PCR。使用Lhcgr、Star、Cyp11a1、Hsd3b和Actb（管家基因）的引物。反应进行50个循环。 mRNA表达水平以Actb为内参进行标准化[2]
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- Western Blot分析：将睾丸组织样本在裂解缓冲液中匀浆并离心。采用microBCA法测定蛋白浓度。将蛋白通过SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜上并封闭。将膜与抗LHCGR、STAR、CYP11A1、HSD3B或ACTB的抗体在4℃孵育过夜，然后与HRP标记的二抗孵育。使用电化学发光法显色，并使用Scion Image Program [2]进行定量分析
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动物/疾病模型：雄性Sprague Dawley (SD)大鼠[2]
剂量：10 mg/kg，30 mg/kg
给药途径：口服（灌胃）；每日一次；持续35天
实验结果：通过影响大鼠睾丸间质细胞的线粒体功能，抑制睾酮合成，从而减少胞质三磷酸腺苷的产生。

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实验设计：**将5周龄雄性SD大鼠随机分为四组（每组n=20）：对照组（0.5 mL花生油）、低剂量组（10 mg/kg啶虫脒）、高剂量组（30 mg/kg啶虫脒）和维生素E组（30 mg/kg啶虫脒 + 20 mg/kg维生素E）。所有化合物均溶于花生油中，每日灌胃给药，持续35天。第36天，用氟烷麻醉大鼠，并通过切断颈部血管处死[2]。剂量选择：**剂量选择：**根据既往研究和初步试验，选择10 mg/kg和30 mg/kg体重作为低剂量和高剂量。据报道，对乙酰氨基酚在雄性SD大鼠中的无不良反应剂量和口服LD₅₀分别为7.1 mg/kg和217 mg/kg[2]。**样本采集：**在麻醉状态下从眼眶采集血样。通过离心分离血清，并储存于-80°C。收集睾丸组织进行组织学分析、电镜观察、RNA提取和蛋白质分析[2]。
实验设计：将5周龄雄性SD大鼠随机分为四组（每组n=20）：对照组（0.5 mL花生油）、低剂量组（10 mg/kg啶虫脒）、高剂量组（30 mg/kg啶虫脒）和维生素E组（30 mg/kg啶虫脒 + 20 mg/kg维生素E）。所有化合物均溶于花生油，每日灌胃给药，连续35天。第36天，用氟烷麻醉大鼠，并通过切断颈部血管处死[2]。
剂量选择：根据既往研究和初步试验，选择10 mg/kg和30 mg/kg体重作为低剂量和高剂量。据报道，在雄性SD大鼠中，啶虫脒的未观察到不良反应剂量和口服LD₅₀分别为7.1 mg/kg和217 mg/kg [2]。
- 样本采集：在麻醉状态下，从眼眶采集血液样本。通过离心分离血清，并储存在-80°C。采集睾丸用于组织学分析、电镜观察、RNA提取和蛋白质分析[2]。

吸收、分布和排泄
为了获得关于啶虫脒的吸收、分布、排泄速率和途径、代谢和药代动力学信息，本研究在成年Sprague-Dawley大鼠（雄性体重154-193 g，雌性体重134-152 g；给药开始时年龄5-6周；给药后15天）中考察了[(14)C]啶虫脒。放射性标记的试验物质（化学纯度>99.9%，放射化学纯度97.1-97.2%）由申办方提供给合同研究机构。未标记的试验物质的化学纯度大于99.9%。本研究在口服试验物质15天后进行。本研究共纳入五个治疗组（I、II、III、IV和V组）。前三组各包含6只大鼠（3只雄性，3只雌性），后两组各包含10只大鼠（5只雄性，5只雌性）。另设一个对照组（第六组），包含4只大鼠（2只雄性，2只雌性）。第一、二、三组大鼠连续15天口服[(14)C]啶虫脒（溶于0.9%生理盐水），目标剂量为1.0 mg/kg体重。第四、五组大鼠连续14天口服[(14)C]啶虫脒（溶于0.9%生理盐水），并在第15天单次口服[(14)C]啶虫脒（溶于0.9%生理盐水）。所有五组大鼠的实际给药剂量范围为0.97至1.01 mg/kg体重。采用高效液相色谱法（HPLC）测定剂量溶液中[(14)C]啶虫脒的放射化学纯度为97.9%。剂量溶液在冷藏条件下至少稳定15天。放射性标记剂量溶液的比活度测定为1.85 × 10⁺³ Bq/μg。第6组仅注射0.9%生理盐水。第1、2和3组大鼠分别在连续注射[(14)C]啶虫脒15天后1、10和96小时处死。第4组大鼠在单次注射[(14)C]啶虫脒96小时后处死，用于组织和器官采集。第5组仅用于噬血细胞分析。在第3组大鼠给药后约1小时（第1、3、7和15天），采集其全血，以测定血液中[(14)C]啶虫脒的浓度。雄性大鼠血液中[(14)C]啶虫脒的平均浓度范围为0.477至0.747 μg/mL，雌性大鼠为0.465至0.698 μg/mL。不同动物间存在差异。这些结果表明，在整个给药期间，给药后1小时血液中[(14)C]啶虫脒的浓度保持稳定。在第5组大鼠给药后约0.25、0.5、1、2、3、4、5、7、9、12、24和48小时，采集其全血，以测定血液中[(14)C]啶虫脒的浓度。雄性大鼠的平均峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）、吸收半衰期和浓度-时间曲线下面积（AUC）分别为0.798 ± 0.111 μg/mL、2.80 ± 0.637 h、1.35 ± 0.825 h和8.35 ± 1.12 μg eqhr/mL。雌性大鼠的相应参数平均值分别为0.861 ± 0.132 μg/mL、2.81 ± 0.894 h、1.18 ± 0.868 h和10.3 ± 2.90 μg eqhr/mL。雄性和雌性大鼠的消除半衰期分别为4.42 ± 1.10 h和5.56 ± 1.93 h。两性之间的药代动力学参数无显著差异。雌雄两性的Tmax值均表明啶虫脒吸收迅速，约2-3小时内即可达到血浆峰浓度并可能达到饱和。清除结果显示，大部分啶虫脒（53-65%）经尿液排出。尿液和笼内冲洗液中的总排泄量为61-73%。结果还表明，啶虫脒在胃肠道内吸收迅速（1小时内），超过90%的给药剂量在1小时内排出。连续14天服用啶虫脒，并在第15天单次给予放射性标记啶虫脒（IV组）与连续15天服用放射性标记啶虫脒（I、II和III组）之间，药物清除率无显著差异。雌性大鼠粪便中放射性物质的排泄量（22-29%）低于雄性大鼠（30-35%）。从I、II、III和IV组的每只大鼠中采集全血、肝脏、肾脏、肺脏、胰腺、脾脏、心脏、脑、睾丸（雄性）、卵巢（雌性）、骨骼肌、腹股沟脂肪（白色）、有毛皮肤、甲状腺、骨骼、肾上腺、胃肠道及其内容物、笼内冲洗液和残余尸体。所有采集的样本均未混合，而是分别保存和分析，以确保每只大鼠的样本量平衡。在最后一次慢性给药后，每只大鼠所有组织中最早的采样点（1小时）均可检测到放射性。大多数组织中的放射性在给药后1小时达到峰值，然后迅速下降（II组和III组）。雄性和雌性大鼠体内[(14)C]啶虫脒的Tmax表明其吸收迅速，在大约2-3小时内达到最大血浆浓度（约0.8 μg/mL），并可能达到饱和。给药后1小时采集的组织中[(14)C]啶虫脒的残留水平证实了药代动力学分析的结果。给药后10小时采集的组织中[(14)C]啶虫脒的残留水平（II组）显著低于给药后1小时采集的组织中的残留水平。雄性和雌性大鼠的消除半衰期均表明药物清除迅速。给药后10小时采集的组织中[(14)C]啶虫脒的残留水平证实了药代动力学研究的结果。给药后96小时采集的组织中[(14)C]啶虫脒的残留水平（III组）与给药后1小时和10小时采集的组织中的残留水平相比非常低。雄性和雌性大鼠的消除半衰期在给药后4至6小时之间，表明药物清除迅速，且长时间给药后组织中的残留水平极低。在所有处死时间点，雄性和雌性大鼠的胃肠道、肝脏和肾脏中放射性水平最高。骨骼和白色脂肪组织中的放射性浓度最低。与IV组大鼠相比，连续15天接受[(14)C]啶虫脒治疗的大鼠（III组）所有组织中的残留放射性水平均较高。IV组大鼠在连续14天给予未标记的啶虫脒后，接受了单次末次剂量的[(14)C]啶虫脒。在末次给药后96小时处死的大鼠组织中观察到的残留放射性水平非常低（0.01–0.1 ppm），因为大部分给药剂量（>90%）已通过尿液和粪便排出体外。 I、II、III 和 IV 组的总放射性回收率在 91.7% 至 106% 之间，而 V 组（药代动力学组）雄性和雌性大鼠的回收率分别为 71.7% 和 85.6%。V 组回收率低可能是由于一系列采血过程中尿液样本的损失所致。为了确定单次低剂量和高剂量对乙酰氨基酚给药的影响，我们研究了对乙酰氨基酚在大鼠体内的吸收、分布、代谢和排泄。[吡啶-2,6-(14)C]啶虫脒分别以 1.0、1.0 和 50 mg/kg 体重的剂量静脉注射或口服给予 A、B 和 D 组的 5 只雄性和 5 只雌性大鼠。在 CN-B 组中，我们研究了 [氰基-(14)C]啶虫脒在 1.0 mg/kg 体重剂量下的代谢情况。 A组的吸收率通过排泄率和代谢物分析计算得出。B组、D组和CN-B组测定了血药浓度、组织分布、代谢物分析和排泄率。……总之，大鼠口服啶虫脒后，药物迅速被吸收并通过血液广泛分布于组织中。大部分放射性物质经肾脏以尿液形式排出，部分经胆汁以粪便形式排出。放射性物质迅速从大鼠体内消失，未发现疑似化合物蓄积的组织。未观察到性别差异。
本研究采用10-12周龄的Sprague-Dawley插管大鼠研究胆汁排泄。四只雄性和四只雌性插管大鼠经胃内插管给予单剂量溶于0.9%生理盐水的[(14)C]啶虫脒。雄性和雌性大鼠的平均给药剂量分别为1.02和1.07 mg/kg体重。采用高效液相色谱法（HPLC）测定给药溶液中[(14)C]啶虫脒的放射化学纯度为97.1%。分别给予一只雄性和一只雌性大鼠安慰剂（0.9%生理盐水，不含试验物质）。给药后3至12小时，胆汁中[(14)C]啶虫脒的残留水平持续升高，并在给药后12小时达到最高值（占给药剂量的百分比）。48小时内，雄性大鼠胆汁中给药剂量的平均回收率为19.9% ± 1.47%，雌性大鼠为18.6% ± 0.62%。胆汁中残留的[(14)C]啶虫脒量不足给药总量的20%，表明胆汁并非雄性或雌性大鼠的主要排泄途径。雌雄大鼠对受试物质的吸收和首过代谢/系统前消除无显著差异。给药后48小时内，雄性大鼠粪便中药物回收率平均为6.72% ± 3.36%，雌性大鼠为5.84% ± 0.86%。给药后48小时内，雄性大鼠尿液中药物回收率平均为24.3% ± 5.22%，雌性大鼠为36.9% ± 3.80%。雄性和雌性大鼠尿液和笼内冲洗液中的药物残留总量分别为 60.2% ± 5.20% 和 64.4% ± 2.86%，表明大部分给药剂量经尿液排出。给药后 48 小时，雄性大鼠肝脏中药物的平均回收率为 0.22% ± 0.13%，雌性大鼠为 0.18% ± 0.18%。给药后 48 小时，雄性大鼠胃肠道中药物的平均回收率为 0.46% ± 0.34%，雌性大鼠为 0.33% ± 0.23%。这些结果表明，雄性和雌性大鼠肝脏吸收或胃肠道中残留的啶虫脒量均极少（<1%）。三只雄性大鼠的总回收率分别为 93.2%、92.8% 和 89.6%。三只雌性大鼠给药剂量的总回收率分别为 94.9%、93.5% 和 91.2%。
本研究将含有 [(14)C]啶虫脒（纯度 97.5%）的 70% 可湿性粉剂涂抹于雄性 CR1:CD(SD)BR 大鼠皮肤上，以研究啶虫脒的吸收情况。实验动物到达时年龄约为 8 周，体重分别为 176–216 g（预实验阶段）和 143–203 g（最终实验阶段）。目标剂量水平为 1、10 和 100 μg/cm²。实际给药剂量分别为0.0136 mg/只大鼠（1.09 μg/cm²）、0.119 mg/只大鼠（9.53 μg/cm²）和1.13 mg/只大鼠（90.2 μg/cm²）。初步阶段包括两组各四只动物，用于评估和建立实验材料的给药方法和皮肤清洁技术。在初始阶段，雄性大鼠经皮给药两种剂量水平（0.0128 mg/只和1.26 mg/只）。在正式阶段，三组各24只大鼠经皮给药三种剂量水平的[(14)C]-啶虫脒。对照组两只大鼠仅接受赋形剂（1%羧甲基纤维素水溶液）。收集每只大鼠的尿液和粪便。处死前清洁给药部位的皮肤。每个剂量组分别在0.5、1、2、4、10和24小时处死4只大鼠；对照组大鼠在24小时处死。处死时通过心脏穿刺采集血液。各处理组放射性物质的平均总回收率为96.6%至102%，其中大部分放射性物质（63.9%至87.5%）存在于皮肤清洁液中。给药部位皮肤中的放射性物质占总给药量的10.2%至32.2%。血液、粪便和尸体中的放射性物质占总给药剂量的6.50%以下。血液中发现的放射性物质、粪便中排出的放射性物质以及尸体中残留的放射性物质均归因于[(14)C]啶虫脒的直接皮肤吸收。在每个组内，经皮肤吸收的放射性物质量均随暴露时间的延长而增加。给药后24小时（最长暴露时间）检测到最高吸收率，剂量组分别为1.09、9.53和90.2 μg/cm²，吸收量分别为4.27%（0.581 μg）、6.34%（7.54 μg）和2.82%（31.9 μg）。直接吸收量与给药部位皮肤中残留放射性物质的量之和被视为间接吸收量。剂量组分别为1.09、9.53和90.2 μg/cm²，间接吸收量分别为3-5 μg、25-37 μg和118-197 μg。给药后24小时，1.09 μg/cm²剂量组的血液放射性浓度最高（0.001 ppm）。给药后10小时和24小时，9.53 μg/cm²剂量组的血放射性浓度分别为0.019 ppm和0.010 ppm；给药后24小时，90.2 μg/cm²剂量组的血放射性浓度为0.041 ppm。在较低剂量水平下，大鼠对啶虫脒的直接吸收呈剂量依赖性，而在最高剂量水平下似乎达到饱和。有关啶虫脒的吸收、分布和排泄的更完整数据（共9项），请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
本研究调查了啶虫脒在蜜蜂（Apis mellifera L.）体内的代谢。在72小时内，我们监测了啶虫脒及其代谢物在蜜蜂六个生物隔室（头部、胸部、腹部、血淋巴、中肠和直肠）中的分布。蜜蜂经口灌胃给予100 μg [(14)C]-啶虫脒/kg蜜蜂，该剂量约为半数致死剂量 (LD50) 的1500倍。72小时后，仅有40%的总放射性被消除，表明啶虫脒及其代谢物倾向于在蜜蜂体内持续存在。啶虫脒迅速分布于蜜蜂的各个体腔并被代谢。给药后，放射性主要集中在腹部，其次是直肠。72小时后，腹部再次检测到最高的放射性水平（约占摄入剂量的20%），而血淋巴中检测到的总放射性水平最低。头部放射性不超过摄入总量的7.6%。超过50%的啶虫脒在30分钟内被代谢，表明该化合物的半衰期非常短。在最初几个小时内，啶虫脒主要存在于富含烟碱型乙酰胆碱受体的组织中，例如腹部、胸部和头部。在检测到的七种代谢物中，主要代谢物是6-氯烟酸和一种名为U1的未知代谢物，后者主要存在于直肠、胸部和头部。我们的结果表明，啶虫脒的低毒性可能与其快速代谢有关。
背景：新烟碱类杀虫剂是一类新型杀虫剂，由于其对节肢动物具有选择性毒性，而对脊椎动物的毒性相对较低，因此在全球范围内被广泛使用。研究表明，某些新烟碱类杀虫剂可导致哺乳动物神经发育毒性。本研究旨在建立人体口服新烟碱类杀虫剂与尿液排泄之间的关系，以促进生物监测并评估日本成年人新烟碱类杀虫剂的膳食摄入量。方法/主要结果：9名健康成年人口服微剂量氘标记的新烟碱类杀虫剂（啶虫脒、噻虫嗪、呋虫胺和吡虫啉），并在给药后连续4天收集24小时尿液样本。采用单室模型和双室模型对排泄动力学进行建模，并在12名健康成年人中对非氘标记的新烟碱类杀虫剂进行微剂量研究，以验证模型的有效性。结果显示，给药后尿液中标记的新烟碱类杀虫剂浓度升高。噻虫嗪在3天内以原形排出体外，呋虫胺大部分在1天内以原形排出体外。吡虫啉约有10%以原形排出体外。大部分啶虫脒代谢为去甲基啶虫脒。研究人员分析了373名日本成年人随机尿液样本中的新烟碱类杀虫剂，并估算了每日摄入量。这些新烟碱类杀虫剂的平均每日摄入量估计为0.53–3.66 μg/天。研究人群中摄入量最高的新烟碱类杀虫剂是氟虫腈，为64.5 μg/天，不到每日允许摄入量的1%。五只雄性大鼠和五只雌性大鼠连续14天每日一次口服未标记的啶虫脒，随后在第15天单次口服放射性标记的啶虫脒。在第14天收集一次尿液和粪便，之后每24小时收集一次[(14)C]啶虫脒剂量溶液，直至处死。采用薄层色谱法，以未标记的参考物质为标准，对代谢物进行定性分析。通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）鉴定未知代谢物为IC-O-甘氨酸结合物（IC-O-Gly）。大鼠粪便中的主要放射性化合物为啶虫脒本身（雄性：5.21%；雌性：7.41%）、去甲基化化合物IM-2-1（雄性：15.48%；雌性：20.39%）、烟酸衍生物IC-O（雄性：11.12%；雌性：8.01%）以及IC-O甘氨酸结合物IC-O-Gly（雄性：10.10%；雌性：10.32%）。此外，还检测到了MeS-IC-O、IM-1-4、IM-2-4、IM-O、IM-1-3和IM-2-3，但它们的含量均低于剂量的2%。尿液中存在几种未知化合物，其中一种在“其他”成分中的最大丰度为1.0%。据推测，啶虫脒在大鼠体内的主要代谢途径为：N-去甲基化生成IM-2-1；IM-2-1的氰基乙酰胺侧链脱除生成IC-O；以及乙酰胺和IM-2-1的氰基乙酰胺侧链分别脱除生成IS-1-1和IS-2-1。……对大鼠粪便中的放射性化合物进行了鉴定和定量分析。B组中鉴定出的主要化合物为啶虫脒本身（雄性：6.10%；雌性：5.63%）、去甲基化化合物IM-2-1（雄性：19.51%；雌性：19.00%）以及烟酸衍生物IC-O（雄性：28.19%；雌性：25.52%）。 D组中鉴定出的主要化合物为啶虫脒（雄性：7.75%；雌性：7.34%）、IM-2-1（雄性：24.48%；雌性：21.37%）和IC-O（雄性：27.11%；雌性：27.63%）。A组中检测到的主要化合物为啶虫脒（雄性：4.16%；雌性：6.12%）、IM-2-1（雄性：13.39%；雌性：18.98%）和IC-O（雄性：28.13%；雌性：24.73%）。 CN-B组中检测到的主要化合物为啶虫脒（雄性：3.98%；雌性：4.51%）、IM-2-1（雄性：16.95%；雌性：16.56%）、IS-1-1（雄性：13.15%；雌性：16.45%）和IS-2-1（雄性：35.61%；雌性：30.23%）。IS-1-1和IS-2-1被认为是啶虫脒侧链裂解的产物，而IM-2-1则被认为是IM-2-1侧链裂解的产物。此外，A、B和D组中还检测到了IC-O-Gly、MeS-IC-O、IM-1-4、IM-2-4、IM-O、IM-1-3和IM-2-3，但其含量均低于剂量的4%。对乙酰氨基酚在大鼠体内的主要代谢途径如下：首先，它通过去甲基化转化为IM-2-1，然后分别从对乙酰氨基酚和IM-2-1中裂解出IS-1-1和IS-2-1，并进一步转化为IC-O。
有关对乙酰氨基酚（共8种代谢物）更完整的代谢物数据，请访问HSDB记录页面。

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生物半衰期
……从V组每只大鼠分别于约0.25、0.5、1、2、3、4、5、7、9、12、24和48小时采集全血，以测定血液中[(14)C]对乙酰氨基酚的浓度。雄性大鼠的平均峰浓度（Cmax）、达峰时间（Tmax）、吸收半衰期和浓度-时间曲线下面积（AUC）分别为0.798 ± 0.111 μg/mL、2.80 ± 0.637 h、1.35 ± 0.825 h和8.35 ± 1.12 μg eqhr/mL。雌性大鼠相应参数的平均值分别为0.861 ± 0.132 μg/mL、2.81 ± 0.894 h、1.18 ± 0.868 h和10.3 ± 2.90 μg eqhr/mL。雄性和雌性大鼠的消除半衰期分别为4.42 ± 1.10 h和5.56 ± 1.93 h。 …
口服1 mg/kg剂量后，雄性和雌性大鼠的血浆峰浓度均在2小时内达到。在此条件下，消除半衰期估计为6至11小时。口服50 mg/kg剂量后，血浆峰浓度略有延迟（3-7小时），消除半衰期延长（雄性8小时，雌性15小时）。

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残留检测：采用UPLC-QQQ-MS/MS法在暴露大鼠的血液和睾丸中检测到啶虫脒残留。残留水平呈剂量依赖性，高剂量组的残留水平高于低剂量组。对照组动物未检测到啶虫脒[2]。
- 组织分布：研究证实，口服啶虫脒可被吸收并分布至生殖组织，包括睾丸，并在这些组织中蓄积并发挥毒性作用[2]。
- 代谢：维生素E联合治疗不影响啶虫脒残留水平，表明维生素E不改变啶虫脒的吸收、分布或代谢[2]。

毒性概述
识别和用途：啶虫脒是一种固体杀虫剂。啶虫脒是一种新烟碱类杀虫剂，用于防治叶类蔬菜、果类蔬菜、十字花科蔬菜、柑橘类水果、仁类水果、葡萄、棉花以及观赏植物和花卉上的刺吸式害虫。人体研究：曾有两例因自杀未遂而摄入含啶虫脒杀虫剂导致的急性中毒病例。两名患者均出现严重恶心呕吐、肌肉无力、体温过低、抽搐以及心动过速、低血压、心电图改变、缺氧和口渴等临床表现。血清啶虫脒浓度较高的患者也出现了这些症状。这些症状与某些急性有机磷中毒症状相似。一名79岁男性摄入啶虫脒后两小时就医。患者入院时血药浓度为21.1 μg/mL。他出现意识改变、低血压、恶心、呕吐和高血糖，但无瞳孔缩小或黏液分泌过多等典型的有机磷中毒症状。体外实验表明，在所有浓度和处理时间下，啶虫脒均能显著诱导人外周血淋巴细胞发生姐妹染色单体交换和染色体畸变，并在浓度为30、35和40 μg/mL时显著诱导微核形成。动物实验：啶虫脒在兔眼和皮肤刺激性试验中未显示刺激性；在豚鼠的Magnusson和Kligman致敏试验中也未显示皮肤致敏性。将啶虫脒以0、400、800、1600或3200 ppm的剂量添加到小鼠饲料中，并饲喂13周。在3200 ppm剂量组中，两只雄性小鼠和两只雌性小鼠在研究期间死亡。该剂量组中有五只雌性小鼠出现震颤。在800、1600和3200 ppm剂量组中，雄性和雌性小鼠的平均相对肝脏重量均出现与治疗相关的增加。显微镜检查显示，在3200 ppm剂量组中，雄性和雌性小鼠均出现小叶中心肥大和肾上腺皮质脂肪减少。在大鼠（基于骨骼变异的无观察效应剂量 (NOEL) 为 16 mg/kg/天）和兔（基于两只胎儿胸椎弓和肋骨融合的发育 NOEL 为 15 mg/kg/天）中观察到发育毒性。在大鼠中，啶虫脒通过降低胆固醇转化为睾酮的速率并阻止胆固醇进入睾丸间质细胞的线粒体，从而干扰睾酮的生物合成。这些作用导致大鼠生殖系统受损。啶虫脒对大鼠具有神经毒性，并可诱导小鼠的神经发育毒性。啶虫脒暴露会干扰雄性小鼠社交和焦虑相关行为所需的神经回路的发育。在有无代谢活化的条件下，使用鼠伤寒沙门氏菌TA100、TA1535、TA98和TA1537菌株以及大肠杆菌WP2 uvrA菌株进行了回复突变试验。结果表明，啶虫脒对回复突变呈阴性反应。生态毒性研究：啶虫脒可引起蛙坐骨神经病变。口服啶虫脒可增加蜜蜂对蔗糖溶液触角刺激的敏感性（1 μg/只），并损害其嗅觉学习的长期记忆（0.1 μg/只）。胸腔注射啶虫脒对这些行为学测试无影响，但可增加蜜蜂的运动活性（0.1和0.5 μg/只）以及水诱导的喙伸展反射（0.1、0.5和1 μg/只）。啶虫脒对黄瓜钝绥螨（Amblyseius cucumeri）不同发育阶段均有显著不良影响。啶虫脒暴露导致蚯蚓出现氧化应激和DNA损伤，并改变了抗氧化酶的活性。

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毒性数据
LC50（大鼠）= 290 mg/m3

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相互作用
尽管水生生态系统中的农药监管传统上是单独进行的，但地表水中的农药通常以混合物的形式存在。本研究旨在调查斑马鱼（Danio rerio）中单一和混合农药（异菌脲、吡唑醚菌酯、吡唑醚菌酯和啶虫脒）的致死性和转录反应。半静态毒性试验表明，吡唑醚菌酯对斑马鱼（D. rerio）所有四个生命阶段（胚胎期、幼鱼期、幼虫期和成鱼期）的毒性最强，其次是异菌脲和吡唑醚菌酯。相比之下，啶虫脒的毒性最低。大多数选定的农药对斑马鱼胚胎的毒性高于其他生命阶段。异菌脲与吡唑醚菌酯或啶虫脒的二元混合物，以及异菌脲+吡唑醚菌酯与吡唑醚菌酯或啶虫脒的三元混合物，均表现出协同效应。mRNA水平上与细胞凋亡通路、氧化应激、先天免疫和内分泌干扰相关的16个基因的表达表明，斑马鱼胚胎受到单一或混合农药的影响。与单一农药使用相比，多种农药联合使用后，P53、Tnf、TRβ、Tsh 和 Cyp19a 的表达变化更为显著。综上所述，水生环境中多种农药同时存在可能增强毒性，并对非靶标生物造成严重损害。本研究旨在探讨水溶性富勒烯（富勒醇）纳米颗粒对杀虫剂啶虫脒诱导的体外遗传毒性的影响。将健康人肺细胞（IMR-90）分别用富勒醇 C60(OH)n（n：18-22）单独处理以及与啶虫脒联合处理 24 小时。采用微核试验、彗星试验和 γ-H2AX 灶形成试验作为遗传毒性终点指标。采用克隆形成试验评估细胞毒性。富勒醇最高测试浓度（1600 μg/mL）可诱导77%的细胞存活率，而最低浓度（25 μg/mL）则无细胞毒性，尽管啶虫脒具有细胞毒性。在测试浓度范围（50–1600 μg/L）内，富勒醇未诱导遗传毒性。另一方面，啶虫脒（>50 μM）显著诱导IMR-90细胞形成微核以及双链和单链DNA断裂。在一项联合暴露研究中，我们选择了两种无细胞毒性的富勒醇浓度（50和200 μg/mL）和三种具有细胞毒性的啶虫脒浓度（100、200和400 μM）。结果表明，与富勒醇联合暴露可显著降低啶虫脒对IMR-90细胞的细胞毒性和遗传毒性。我们的研究结果表明，水溶性富勒烯颗粒对除草剂诱导的基因毒性具有保护作用。姜黄素是一种存在于姜黄根中的分子，具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤特性，已被广泛用作草药和食品添加剂，用于治疗或预防神经退行性疾病。本研究旨在探讨姜黄素对啶虫脒诱导的雄性大鼠神经行为和神经病理学改变的影响。本研究使用了三组雄性Wistar大鼠（每组n=10）：第1组为对照组（CTR），不给予啶虫脒（ACE）；第2组为实验组（ACE），每日给予40 mg/kg体重的啶虫脒；第3组（CUR）同时给予姜黄素（100 mg/kg）和啶虫脒（40 mg/kg）。神经行为学评估包括斜坡测试和前爪抓握时间测试。姜黄素（CUR）治疗显著预防了乙酰甲胺磷（ACE）处理大鼠在神经行为学测试中的表现受损，表明其感觉运动和神经肌肉反应存在缺陷。此外，姜黄素给药保护大鼠免受乙酰甲胺磷诱导的小脑毒性，例如乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE）活性升高、细胞活力下降、氧化应激以及细胞内钙离子浓度升高。总之，这些结果表明，乙酰甲胺磷处理通过诱导坏死并伴有氧化应激，显著损害原代神经元的存活。此外，姜黄素减轻了乙酰甲胺磷引起的组织病理学改变。检测化学物质的发育神经毒性（DNT）对于保护人类健康至关重要。然而，许多农药的DNT尚不清楚。此外，目前尚未建立有效的体外DNT评估系统。本研究采用大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC-12，评估了18种常用农药的神经毒性（DNT），这些农药分属不同类别，包括新烟碱类、拟除虫菊酯类、有机磷类、有机氯类、季铵化合物、农药增效醚类以及杀虫剂避蚊胺（DEET）。我们检测了PC-12细胞在与神经生长因子和不同浓度农药共同处理5天后神经突的生长情况。此外，我们还检测了可能与DNT相关的特定基因的转录变化，例如camek2α和camek2β、gap-43、神经丝蛋白h、微管蛋白α和微管蛋白β。印楝素、毒死蜱、狄氏剂和七氯均能以剂量依赖的方式强烈抑制神经突生长，这与gap-43的上调有关。新烟碱类杀虫剂，如啶虫脒、噻虫嗪、吡虫啉和噻虫嗪；拟除虫菊酯类杀虫剂，如高效氯氟氰菊酯、溴氰菊酯和氯菊酯；杀菌剂，如C12-C14-烷基（乙基苄基）二甲基铵（BAC）、苯扎氯铵和杆菌肽（二甲基苄基氯化铵）；以及增效醚和避蚊胺（DEET）对神经突生长和转录变化的影响甚微或无影响。本研究证实了某些杀虫剂潜在的发育神经毒性，并首次证明了硫唑嘌呤作为一种发育神经毒性化合物的潜力。我们还证实，神经突生长抑制与gap-43表达的转录改变相关，表明gap-43表达可作为检测和初步评估化学物质潜在致病性神经递质（DNTs）的生物标志物。目的：啶虫脒（ACE）是一种新烟碱类杀虫剂，也是世界上使用最广泛的杀虫剂之一。本研究评估了ACE对啮齿动物体液和细胞免疫反应的影响。我们还评估了姜黄素在ACE处理后恢复异常免疫反应中的作用。方法：将瑞士白化小鼠分为5组（每组n=5），腹腔注射重组结核分枝杆菌毒力因子CFP32进行免疫。一组小鼠接受ACE（5 mg/kg）治疗61天，另一组小鼠接受ACE联合姜黄素（100 mg/kg）治疗。另设3个对照组：一组小鼠未接受任何处理，第二组小鼠接受玉米油处理，第三组小鼠仅接受姜黄素处理。采用ELISA法检测血清中抗rCFP32抗体的浓度来评估体液免疫反应。通过分析体外有丝分裂原或rCFP32刺激的脾细胞增殖情况来评估细胞免疫反应。结果：ACE处理的小鼠表现出特异性体液免疫反应显著抑制，而ACE与姜黄素联合使用可恢复这种抑制作用。同样，ACE显著降低了非特异性或特异性激活后脾细胞的增殖水平。姜黄素部分恢复了抗原特异性细胞免疫反应。此外，姜黄素单独使用即可显著抑制有丝分裂原诱导的增殖反应，证实了其抗有丝分裂作用。组织学分析显示，ACE处理小鼠的脾脏发生了改变。重要性：总之，我们的数据表明ACE可能对免疫系统有害。

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非人类毒性值
大鼠皮肤LD50 >2000 mg/kg 体重
大鼠吸入LC50 >1.15 mg/L/4 小时（仅限鼻腔）
雄性大鼠口服LD50 417 mg/kg
雌性大鼠口服LD50 314 mg/kg
有关啶虫脒更完整的非人类毒性数据（共8项），请访问HSDB记录页面。

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生殖毒性：啶虫脒暴露导致雄性大鼠出现显著的生殖毒性，包括睾丸重量减轻、精子数量和活力下降以及血浆睾酮水平降低。这些效应呈剂量依赖性[2]
。
- 氧化应激：啶虫脒显著增加睾丸间质细胞中的氧化应激标志物（MDA 和 NO），表明诱导脂质过氧化和氧化损伤[2]
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- 线粒体毒性：电镜显示睾丸间质细胞中线粒体损伤呈剂量依赖性，包括嵴断裂、间距增大、内膜破坏和嵴消失。线粒体损伤率随啶虫脒剂量的增加而显著升高[2]
。
- 细胞毒性：啶虫脒暴露可减少睾丸中 Leydig 细胞的数量，HSD3B 免疫荧光染色证实了这一点[2]
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- 维生素 E 的保护作用：与维生素 E (20 mg/kg) 联合给药可显著改善多种毒性作用，包括氧化应激、线粒体损伤、Leydig 细胞数量减少和睾酮水平降低，且不影响啶虫脒的残留水平[2]
。
- LD₅₀ 信息：雄性 SD 大鼠口服啶虫脒的 LD₅₀ 为 217 mg/kg[2]
。

[1]. Effect of acetamiprid on the immature murine testes. Int J Environ Health Res. 2018 Dec;28(6):683-696.

[2]. Acetamiprid inhibits testosterone synthesis by affecting the mitochondrial function and cytoplasmic adenosine triphosphate production in rat Leydig cells. Biol Reprod. 2017 Jan 1;96(1):254-265.

啶虫脒是一种具有乙酰胺结构的羧基脒胺类化合物，其氨基氢原子被(6-氯吡啶-3-基)甲基和甲基取代，与亚氨基氮原子相连的氢原子被氰基取代。它是一种新烟碱类杀虫剂，也是一种环境污染物和外源物质。它属于一氯吡啶类、腈类和羧基脒胺类化合物。其作用机制与2-氯吡啶类似。据报道，在犬链霉菌(Streptomyces canus)中检测到了啶虫脒，相关数据已有报道。

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背景及用途：啶虫脒是一种相对较新的新烟碱类杀虫剂，用于防治水果、蔬菜和茶叶等作物上的鳞翅目和半翅目害虫。由于其对昆虫具有很高的活性，因此被广泛使用[2]。
- 环境问题：由于其持久性、水溶性和高使用量，啶虫脒容易在环境中残留，并可能进入水体，对人类健康和环境构成潜在威胁。据报道，在某些地区，西瓜和土壤中啶虫脒的最大残留量分别为0.01 mg/kg和0.3 mg/kg[2]。
- 生殖毒性机制：研究表明，啶虫脒通过以下机制抑制睾丸间质细胞中睾酮的合成：（1）在睾丸中的积累诱导氧化应激；（2）氧化应激导致线粒体内膜损伤；（3）线粒体功能障碍减少ATP的产生；（4）ATP减少导致cAMP合成减少； (5) cAMP 水平降低会下调类固醇生成基因（STAR、CYP11A1、HSD3B）的表达；(6) STAR、CYP11A1 和 HSD3B 蛋白水平降低会损害胆固醇的转运和转化为睾酮；(7) 睾酮水平降低会导致生殖功能障碍[2]。
- 维生素 E 的作用：维生素 E 作为一种链终止抗氧化剂，可以保护线粒体膜免受脂质过氧化损伤，从而维持线粒体功能和睾酮合成。这表明抗氧化剂可能有助于减轻农药暴露引起的生殖毒性，尤其是在职业暴露人群中[2]。
- 睾丸间质细胞的鉴定：HSD3B（3β-羟基类固醇脱氢酶）被用作组织切片和分离细胞制备物中睾丸间质细胞鉴定的特异性标记物[2]。

C10H11CLN4

222.68

222.067

135410-20-7

Acetamiprid-d3;1353869-35-8

213021

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

352.4±52.0 °C at 760 mmHg

101-103ºC

166.9±30.7 °C

0.0±0.8 mmHg at 25°C

1.571

0.62

52.28

0

3

3

15

280

0

CC(=NC#N)N(C)CC1=CN=C(C=C1)Cl

WCXDHFDTOYPNIE-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C10H11ClN4/c1-8(14-7-12)15(2)6-9-3-4-10(11)13-5-9/h3-5H,6H2,1-2H3

N-[(6-chloropyridin-3-yl)methyl]-N'-cyano-N-methylethanimidamide

Intruder Mospilan Mospilan

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~100 mg/mL (~449.10 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (11.23 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。