| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
STING/stimulator of interferon genes
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| 体外研究 (In Vitro) |
与内源性和病原体衍生的环状二核苷酸 (CDN) 相比，ADU-S100 铵盐具有多种特性，可提高稳定性和亲脂性，从而显着增强 STING 信号 [1]。在 THP-1 人单核细胞中，ADU-S100 产生的 I 型 IFN 多于 CDA。另一方面，二硫键混合连接的环状二核苷酸 (CDN) 衍生物可有效激活所有五个 hSTING 等位基因，包括难治性 hSTINGREF 和 hSTINGQ 等位基因（ML RR-CDA、ML RR-S2 CDG 和 ML RR-S2 cGAMP）。与内源性 ML cGAMP 和 TLR3 激动剂 Poly I:C 相比，ADU-S100 在摩尔当量基础上诱导 IFN-β 和促炎细胞因子 TNF-α、IL-6 和 MCP-1 的最高表达。在小鼠骨髓巨噬细胞 (BMM) 中，ADU-S100 还被发现可诱导 STING 聚集并诱导 TBK1 和 IRF3 磷酸化。与 ML cGAMP 相比，ADU-S100 诱导明显更高水平的 IFN-α [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
ADU-S100 的抗肿瘤控制能力优于内源性 ML cGAMP。在 B16 荷瘤小鼠中，进行了 ADU-S100 化合物的剂量反应研究，以确定最佳抗肿瘤剂量水平，最大限度地提高肿瘤抗原特异性 CD8+ T 细胞反应并将长期存活率提高至 50%[1 ]。
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| 酶活实验 |
萤光素酶测定[1]
将104个HEK293T细胞接种在96孔板中，并用人IFN-β萤火虫报告质粒（Fitzgerald等人，2003）和TK-Renilla荧光素酶报告质粒瞬时转染以使其正常化。第二天，使用洋地黄皂苷透化（50 mM HEPES、100 mM KCL、3 mM MgCl2、0.1 mM DTT、85 mM蔗糖、0.2%BSA、1 mM ATP、0.1 mM GTP、10 ug/ml洋地黄皂苷）用10μM的ADU-S100或100μg/ml DMXAA刺激细胞，以确保均匀摄取。20分钟后，移除刺激混合物并加入正常培养基。总共6小时后，制备细胞裂解物，并在Spectramax M3光度计上使用双荧光素酶测定系统测量报告基因活性。 差示扫描荧光法[1] 热位移测定如（Cavlar等人，2013）所示。在20mM Tris-HCL、150mM NaCl、pH 7.5和1:500稀释的SYPRO橙色染料中，用1mg/ml的STING配体结合结构域进行检测，有或没有1mM的各种ADU-S100。荧光作为温度的函数记录在CFX 96实时PCR机器上，读取HEX通道EX 450–490 EM 560–580 nm的读数。温度梯度为15-80°C，每15秒上升0.5°C。将曲线拟合到玻尔兹曼S形曲线上，以确定热展开的中点（Tm）。 |
| 细胞实验 |
用25μg/ml DMXAA或100ng/ml LPS刺激WT或STING−/-小鼠的BM DC 4小时。使用RNeasy®试剂盒分离总RNA，并与扩增级脱氧核糖核酸酶I一起孵育。使用高容量cDNA逆转录试剂盒合成cDNA，使用小鼠INF-β、TNF-α、IL-6和IL12p40的特异性引物/探针通过实时qRT-PCR测量细胞因子的表达，泛特异性引物用于定量IFN-α家族的表达。引物序列列于补充材料表1中。在7300实时PCR系统中进行PCR反应。使用18s作为内源性对照，结果表示为2-ΔCt。
在HBSS中用5μM的ADU-S100刺激WT BMM，并添加Effectene转染试剂（按照试剂盒方案）。如所示刺激人PBMC。使用PrimePCR RNA纯化和cDNA分析系统，通过实时qRT-PCR评估IFN-β1、MCP-1、TNF-α和IL-6的基因表达，并在CFX96基因循环仪上运行。通过使用参考基因Gapdh和Ywhaz（小鼠）以及GusB和Pgk1（人类）将诱导的靶基因表达与未刺激的对照进行比较来确定相对归一化表达，这些基因被证实具有低于0.5的系数变量（CV）和低于1的M值，因此不随不同的处理条件而变化。 |
| 动物实验 |
将10~6个B16-SIY肿瘤细胞、5×10~4个B16.F10肿瘤细胞、10~5个4T-1和CT26肿瘤细胞，或106个其他肿瘤细胞，以100 μl DPBS或HBSS溶液皮下注射到小鼠右侧腹部。肿瘤植入后，将小鼠随机分组。当肿瘤体积达到100–200 mm³（宽度5–7 mm）时，分别给予小鼠单次或三次DMXAA（溶于7.5% NaHCO₃溶液）、溶于HBSS溶液的CDNs或溶剂对照。每周使用游标卡尺测量肿瘤大小两次，并使用公式V=（长×宽²）/2计算肿瘤体积。在一些实验中，在原发肿瘤注射数周后，将无肿瘤存活的小鼠在另一侧腹部再次接种肿瘤细胞。未接种肿瘤的小鼠作为对照组。在对侧实验中，小鼠两侧腹部均植入肿瘤细胞，但仅对一侧肿瘤进行治疗。在B16黑色素瘤肺转移实验中，于第0天在小鼠腹部植入5 × 10⁴个B16.F10细胞，然后在第7天静脉注射1 × 10⁵个细胞。于第28天采集肺组织。化合物的给药、肿瘤的测量和肺肿瘤的计数均采用盲法进行。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
ADU-S100 (MIW815) 是一种合成的环状二核苷酸 (CDN) 激动剂（激活剂），可激活干扰素基因刺激因子 (STING) 受体。STING 受体是激活先天性（内源性）免疫系统的关键受体。ADU-S100 (MIW815) 可激活所有已知的人类和小鼠 STING 受体，并有效诱导细胞因子和趋化因子的表达，从而产生针对癌细胞的强效且持久的抗原特异性 T 细胞介导的免疫应答。DrugBank 数据库中收录的 STING 激活环状二核苷酸激动剂 MIW815 是一种合成的环状二核苷酸 (CDN)，也是干扰素基因刺激因子蛋白 (STING；跨膜蛋白 173；TMEM173) 的激动剂，具有潜在的免疫调节和抗肿瘤活性。瘤内注射后，STING 激动剂 MIW815 与 STING 结合，并激活 STING 介导的信号通路。这通过激活某些免疫细胞（包括树突状细胞 (DC)）来激活免疫反应，进而诱导细胞因子和趋化因子的表达，最终导致针对癌细胞的抗原特异性T细胞介导的免疫反应。STING是一种跨膜蛋白，能够激活肿瘤微环境中的免疫细胞，在先天免疫系统的激活中发挥着关键作用。
肿瘤自发启动的T细胞启动依赖于肿瘤驻留树突状细胞产生的IFN-β。基于近期观察结果表明IFN-β的表达依赖于宿主STING通路的激活，我们假设通过瘤内(IT)注射特异性激动剂直接激活STING通路将产生有效的抗肿瘤治疗效果。在利用小鼠STING激动剂DMXAA进行的概念验证研究显示出显著的治疗效果后，我们合成了环状二核苷酸（CDN）衍生物，这些衍生物能够激活所有人类STING等位基因以及小鼠STING。鞘内注射STING激动剂可显著抑制小鼠体内已形成的肿瘤，并产生强大的全身免疫反应，能够清除远处转移灶并提供持久的免疫记忆。合成CDN作为癌症治疗药物具有很高的转化应用潜力。[1] |
| 分子式 |
C₂₀H₃₀N₁₂O₁₀P₂S₂
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|---|---|
| 分子量 |
724.60
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| 精确质量 |
724.112
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| CAS号 |
1638750-96-5
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| 相关CAS号 |
ADU-S100 disodium salt;1638750-95-4;ADU-S100 enantiomer ammonium salt;ADU-S100;1638241-89-0
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| PubChem CID |
123131801
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| tPSA |
310
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| 氢键供体(HBD)数目 |
6
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| 氢键受体(HBA)数目 |
20
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
46
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| 分子复杂度/Complexity |
1180
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| 定义原子立体中心数目 |
7
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| SMILES |
C1[C@@H]2[C@H]([C@H]([C@@H](O2)N3C=NC4=C(N=CN=C43)N)O)OP(=S)(OC[C@@H]5C([C@H]([C@@H](O5)N6C=NC7=C(N=CN=C76)N)OP(=O)(O1)[S-])O)[O-].[NH4+].[NH4+]
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| InChi Key |
VZYXAGGQHVUTHM-LJFXOJISSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H24N10O10P2S2.2H3N/c21-15-9-17(25-3-23-15)29(5-27-9)19-12(32)13-8(38-19)2-36-42(34,44)40-14-11(31)7(1-35-41(33,43)39-13)37-20(14)30-6-28-10-16(22)24-4-26-18(10)30;;/h3-8,11-14,19-20,31-32H,1-2H2,(H,33,43)(H,34,44)(H2,21,23,25)(H2,22,24,26);2*1H3/t7-,8-,11?,12-,13-,14-,19-,20-,41?,42?;;/m1../s1
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| 化学名 |
diazanium;(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R)-8,17-bis(6-aminopurin-9-yl)-12-oxido-3-oxo-12-sulfanylidene-3-sulfido-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3λ5,12λ5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecane-9,18-diol
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| 别名 |
ADU-S100; ML RR-S2 CDA; MIW-815; ML RR-S2 CDA ammonium salt; ADU-S100 ammonium salt; 1638750-96-5; diazanium;(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R)-8,17-bis(6-aminopurin-9-yl)-3,12-dioxido-3,12-bis(sulfanylidene)-2,4,7,11,13,16-hexaoxa-3lambda5,12lambda5-diphosphatricyclo[13.2.1.06,10]octadecane-9,18-diol; MIW815 ammonium salt; MIW815 (ammonium salt); ML RR-S2 CDA (ammonium salt; MIW815 ammonium salt
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~100 mg/mL (~138.01 mM)
DMSO : ~15 mg/mL (~20.70 mM) MEthanol : ~5 mg/mL (~6.90 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 50 mg/mL (69.00 mM) (饱和度未知) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.3801 mL | 6.9004 mL | 13.8007 mL | |
| 5 mM | 0.2760 mL | 1.3801 mL | 2.7601 mL | |
| 10 mM | 0.1380 mL | 0.6900 mL | 1.3801 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CDN prodrug-1
STING agonist-45
STING agonist-46
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