| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
AGI-5198 specifically targets mutant isocitrate dehydrogenase 1 (IDH1), with the highest selectivity for the IDH1-R132H mutation (the most common mutant form in gliomas). The IC50 value for inhibiting recombinant IDH1-R132H enzyme activity is approximately 100 nM [1]
; AGI-5198 also targets other IDH1 mutant variants (e.g., IDH1-R132C) found in cancer cells. It does not inhibit wild-type IDH1 at concentrations up to 10 μM [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
测量了 TS603 胶质瘤细胞沉淀中 R-2HG 的量，结果表明 AGI-5198 以剂量依赖性方式抑制突变 IDH1 酶。在两种仅表达野生型 IDH1 等位基因的患者来源的胶质瘤细胞系（TS676 和 TS516）中，AGI-5198 对集落形成没有影响 [1]。当暴露于电离辐射 (IR) 时，与 IDH1 野生型细胞相比，IDH1 (R132H) 突变杂合的癌细胞表现出 IDH 介导的 NADPH 生成减少，从而导致活性氧或 DNA 量增加。还观察到双链断裂和细胞死亡。这些效应可被 IDH1 (R132H) 抑制剂 AGI-5198 逆转 [2]。
1. 用AGI-5198处理携带IDH1-R132H突变的胶质瘤细胞系（如U87-IDH1-R132H、HT1080-IDH1-R132H），可浓度依赖性抑制2-羟基戊二酸（2-HG，突变型IDH1生成的致癌性肿瘤代谢物）的产生。在U87-IDH1-R132H细胞中，抑制2-HG的IC50约为100 nM，与酶抑制活性一致。MTT实验显示，用3-10 μM AGI-5198处理72小时后，细胞增殖显著受抑（较溶媒对照组降低约50%-70%）。此外，免疫印迹实验显示胶质纤维酸性蛋白（GFAP，星形胶质细胞分化标志物）和βIII-微管蛋白（βIII-tubulin，神经元分化标志物）表达增加，表明其可促进胶质瘤细胞分化 [1] ； 2. 在携带IDH1-R132H突变的胶质瘤细胞（U87-IDH1-R132H）和携带IDH1-R132C突变的胆管癌细胞（HCCC-9810-IDH1-R132C）中，用1 μM AGI-5198预处理24小时可减少电离辐射（IR）诱导的DNA损伤。γH2AX（DNA双链断裂标志物）免疫荧光染色显示，辐射（2-4 Gy）后24小时，AGI-5198处理组的γH2AX焦点数量较溶媒处理辐射组减少约40%-50%。克隆形成实验表明，AGI-5198处理可提高突变型IDH1细胞的辐射存活分数：在4 Gy辐射下，1 μM AGI-5198处理的U87-IDH1-R132H细胞存活分数约为0.35，而溶媒对照组约为0.15。这种放射保护作用在野生型IDH1细胞（如亲本U87细胞）中未观察到 [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在人神经胶质瘤异种移植物中，AGI-5198（450 mg/kg，口服）可抑制肿瘤生长 50% 至 60%。用 AGI-5198 治疗的小鼠的肿瘤用抗 Ki-67 抗体染色较弱。 IDH1 野生型的神经胶质瘤异种移植物的生长不受 AGI-5198 的影响 [1]。
1. 裸鼠（雌性，6-8周龄）皮下接种U87-IDH1-R132H胶质瘤细胞（5×10⁶细胞/只）。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为两组（每组6只）：溶媒对照组（口服灌胃0.5%甲基纤维素+0.1%吐温80）和AGI-5198处理组（50 mg/kg，口服灌胃，每日两次[bid]，连续21天）。每3天测量一次肿瘤体积：第21天时，AGI-5198组的平均肿瘤体积约为350 mm³，而对照组约为800 mm³（减少约56%）。肿瘤匀浆的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）分析显示，AGI-5198处理组肿瘤中2-HG水平降低约90%。病理检查显示处理组肿瘤中GFAP表达增加，证实其在体内可促进分化 [1] ； 2. 裸鼠（雄性，6-8周龄）原位接种U87-IDH1-R132H胶质瘤细胞（2×10⁵细胞/只，注射至右侧纹状体）。接种后7天，将小鼠分为四组（每组5只）：溶媒对照组（腹腔注射DMSO+生理盐水）、AGI-5198单独组（25 mg/kg，腹腔注射，每日一次[qd]，连续5天）、辐射单独组（处理第3天单次脑部辐射4 Gy）、AGI-5198+辐射联合组。接种后28天，磁共振成像（MRI）显示，AGI-5198+辐射组的平均肿瘤体积约为220 mm³，显著大于辐射单独组（约120 mm³），但小于溶媒对照组（约450 mm³），证实AGI-5198可减弱辐射对突变型IDH1胶质瘤的抗肿瘤效果（放射保护作用） [2] |
| 酶活实验 |
1. 重组IDH1-R132H酶活性测定实验：反应体系（总体积100 μL）包含50 mM Tris-HCl缓冲液（pH 7.5）、2 mM NADP⁺、10 mM α-酮戊二酸（α-KG，底物）、5 mM MgCl₂、1 μg重组IDH1-R132H蛋白及系列浓度的AGI-5198（0.01-10 μM）。加入α-KG启动反应，37℃孵育30分钟，每5分钟在340 nm波长下分光光度法测定NADPH（突变型IDH1催化2-HG合成的副产物）的生成量。以NADPH生成速率计算酶活性，通过非线性回归拟合抑制曲线确定IC50值 [1]
； 2. 突变型IDH1酶抑制验证实验：针对IDH1-R132C的测定流程与IDH1-R132H类似，仅轻微调整：反应缓冲液改用20 mM HEPES（pH 7.2）替代Tris-HCl，孵育时间延长至45分钟。AGI-5198测试浓度为0.1-5 μM，通过测定NADPH荧光（激发光340 nm，发射光460 nm）量化酶活性以提高灵敏度；即使在最高AGI-5198浓度（10 μM）下，也未观察到对野生型IDH1的抑制 [2] |
| 细胞实验 |
1. 胶质瘤细胞增殖与分化测定实验：U87-IDH1-R132H细胞以5×10³细胞/孔接种于96孔板，贴壁过夜后，用AGI-5198（0.1-10 μM）或溶媒（0.1% DMSO）处理72小时。增殖评估时，每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL），37℃孵育4小时后移除上清，加入100 μL DMSO溶解甲臜结晶，在570 nm波长下测定吸光度。分化分析时，细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，用5 μM AGI-5198处理5天，RIPA缓冲液裂解细胞；取40 μg等量蛋白进行12% SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜，用抗GFAP和抗βIII-tubulin一抗（1:1000稀释）孵育，HRP标记二抗（1:5000稀释）和ECL试剂显影条带 [1]
； 2. γH2AX免疫荧光与克隆形成测定实验：γH2AX染色时，U87-IDH1-R132H细胞以1×10⁴细胞/孔接种于24孔板盖玻片上，用1 μM AGI-5198处理24小时后，接受2 Gy辐射；辐射后24小时，细胞用4%多聚甲醛固定，0.2% Triton X-100透化，5% BSA封闭，抗γH2AX一抗（1:500稀释）4℃孵育过夜；加入Alexa Fluor 488标记二抗（1:1000稀释）和DAPI（细胞核染色），荧光显微镜成像，每组随机计数50个细胞的γH2AX焦点数。克隆形成实验时，细胞以200细胞/孔接种于6孔板，1 μM AGI-5198处理24小时后接受0-6 Gy辐射，培养14天；结晶紫染色计数大于50个细胞的克隆，计算存活分数 [2] |
| 动物实验 |
溶于 0.5% MC 和 0.2% Tween 80；每日 150 mg/kg 或 450 mg/kg；灌胃给药。
IDH1 突变型胶质瘤异种移植模型 1. 皮下异种移植模型用于抗肿瘤疗效评估：雌性裸鼠（6-8 周龄）在实验前适应环境 1 周。将 U87-IDH1-R132H 细胞（5×10⁶ 个细胞，溶于 100 μL PBS + 50% Matrigel）皮下注射到每只小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到约 100 mm³（第 0 天）时，将小鼠分为两组（n=6）：载体组（灌胃 0.5% 甲基纤维素 + 0.1% Tween 80，100 μL/只，每日两次）和 AGI-5198 组（50 mg/kg，溶于相同载体，灌胃 100 μL/只，每日两次）。每 3 天使用以下公式计算肿瘤体积：体积 = (长度 × 宽度²)/2。治疗 21 天后，处死小鼠，切除肿瘤，称重，并匀浆后通过 LC-MS/MS 测定 2-HG 含量 [1]； 2. 用于放射防护的原位异种移植模型：雄性裸鼠（6-8 周龄）用异氟烷麻醉。将 U87-IDH1-R132H 细胞（2×10⁵ 个细胞，溶于 2 μL PBS）使用立体定位仪注射到小鼠右侧纹状体（坐标：前 0.5 mm，侧 2 mm，距前囟 3 mm）。注射后 7 天，将小鼠随机分为四组（n=5）：（1）载体组：腹腔注射 100 μL DMSO + 生理盐水（1:10 v/v），每日一次，连续 5 天；（2）AGI-5198 组：腹腔注射 25 mg/kg AGI-5198（溶于 DMSO + 生理盐水，1:10 v/v），每日一次，连续 5 天；（3）IR 组：第 3 天进行单次 4 Gy 脑部 IR 照射（使用直线加速器，照射野大小为 5×5 mm）。 （4）AGI-5198 + IR：AGI-5198 治疗联合 IR。植入后第 28 天，对小鼠进行 MRI 检查以测量肿瘤体积，然后处死小鼠进行组织病理学分析 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 在皮下异种移植研究（裸鼠，50 mg/kg AGI-5198，每日两次口服，持续21天）中，未观察到体重显著变化（平均体重较基线下降<5%）或毒性临床症状（例如嗜睡、腹泻、脱毛）。安乐死时测得的血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT) 和天冬氨酸氨基转移酶 (AST) 水平在正常范围内，表明无明显的肝毒性[1]；2. 在原位异种移植研究（裸鼠，25 mg/kg AGI-5198，每日一次腹腔注射，持续5天）中，未报告死亡或严重毒性。在整个实验过程中，AGI-5198 治疗组小鼠的平均体重与载体对照组相当[2]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AGI-5198 (IDH-C35) 是一种强效且选择性的 IDH1 R132H 突变体抑制剂。
据报道，N-环己基-2-(N-(3-氟苯基)-2-(2-甲基-1H-咪唑-1-基)乙酰胺基)-2-(邻甲苯基)乙酰胺存在于黄曲霉中，并有相关数据报道。 1. AGI-5198 是首个对 IDH1 突变体具有高选择性的小分子抑制剂。其在胶质瘤中的抗肿瘤机制主要通过抑制 IDH1 突变体来减少 2-HG 的产生——2-HG 在 IDH1 突变细胞中积累，破坏组蛋白和 DNA 甲基化，导致细胞分化受损和增殖失控。通过降低 2-HG 水平，AGI-5198 可恢复正常的表观遗传调控，并促进胶质瘤细胞分化为成熟的胶质细胞或神经元谱系[1]； 2. AGI-5198 对 IDH1 突变型癌细胞的放射防护作用是其临床应用的关键考量因素。文献表明，这种作用可能与 AGI-5198 诱导的 2-HG 水平降低有关，从而间接增强 DNA 损伤修复能力（表现为 IR 后 γH2AX 灶减少）。这一发现意味着，AGI-5198 与放射疗法联合使用可能会降低 IDH1 突变型癌症患者的治疗效果，因此需要进一步研究以优化治疗策略[2]； 3. AGI-5198 对野生型 IDH1 没有活性，这最大限度地减少了对正常细胞的脱靶效应（因为野生型 IDH1 对细胞代谢至关重要，例如三羧酸循环）。这种选择性使其成为针对突变型 IDH1 驱动的癌症（例如胶质瘤、胆管癌）进行靶向治疗的理想候选药物 [1, 2] |
| 分子式 |
C27H31FN4O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
462.56
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| 精确质量 |
462.243
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| CAS号 |
1355326-35-0
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
56645356
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
707.6±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
381.7±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.613
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| LogP |
4.05
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| tPSA |
67.23
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
686
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
FNYGWXSATBUBER-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H31FN4O2/c1-19-9-6-7-14-24(19)26(27(34)30-22-11-4-3-5-12-22)32(23-13-8-10-21(28)17-23)25(33)18-31-16-15-29-20(31)2/h6-10,13-17,22,26H,3-5,11-12,18H2,1-2H3,(H,30,34)
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| 化学名 |
N-cyclohexyl-2-(N-(3-fluorophenyl)-2-(2-methyl-1H-imidazol-1-yl)acetamido)-2-(o-tolyl)acetamide
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| 别名 |
IDH C35; AGI5198; IDH-C35; IDHC35; AGI-5198; AGI 5198;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.50 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.50 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 0.5% methylcellulose+0.2% Tween 80: 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1619 mL | 10.8094 mL | 21.6188 mL | |
| 5 mM | 0.4324 mL | 2.1619 mL | 4.3238 mL | |
| 10 mM | 0.2162 mL | 1.0809 mL | 2.1619 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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Succinate dehydrogenase-IN-4
Succinate dehydrogenase-IN-5
Succinate dehydrogenase-IN-2
甘草次酸
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COA
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