| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 5g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Natural product; hydroxyanthraquinone
mTOR complex 2 (mTORC2) [1] - Galectin-3 (target for antiviral activity via up-regulation; ) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
芦荟大黄素(0-15 μM;24-96 小时)以剂量依赖性方式抑制 PC3 细胞增殖 [1]。芦荟大黄素(0–15 μM;24 小时)可防止 mTORC2 的两种下游底物 Akt 和 PKCα 激活。芦荟大黄素能够将自身附着在细胞内 mTORC2 上并阻止激酶激活 [1]。
芦荟大黄素上调半乳糖凝集素-3 [2];半乳糖凝集素-3对甲型流感病毒体外复制的抑制作用[2]; 芦荟大黄素在甲型流感ns1表达细胞中的信号诱导作用。[2] 浓度依赖性抑制人前列腺癌细胞(DU145、PC-3)增殖:芦荟大黄素(Rhabarberone)处理72小时后,DU145细胞IC50 = 20 μM,PC-3细胞IC50 = 25 μM[1] - 抑制前列腺癌细胞中mTORC2活性:30 μM浓度下,使AKT Ser473位点磷酸化(mTORC2下游靶点)降低约75%,mTORC2组分Rictor表达下调约60%[1] - 诱导DU145细胞凋亡:30 μM 芦荟大黄素(Rhabarberone)处理48小时后,caspase-3激活增加约3.2倍,Bax/Bcl-2比值上调约4.0倍[1] - 对流感A病毒(H1N1、H3N2)具有抗病毒活性:抑制病毒复制的IC50为15 μM(H1N1)、18 μM(H3N2),选择指数(SI)>10(MDCK细胞中CC50 > 150 μM)[2] - 上调MDCK细胞中galectin-3表达:20 μM浓度下,galectin-3的mRNA和蛋白水平分别增加约2.5倍和2.0倍,介导抗病毒效应[2] - 20 μM浓度下使MDCK细胞中流感A病毒滴度降低约1000倍,且无显著细胞毒性(细胞存活率>85%)[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
通过抑制 mTOR 复合物 2 活性,芦荟大黄素 (10-50 mg/kg) 可以抑制肿瘤的生长 [1]。
基于我们的体外和离体(ex in vivo)结果,我们接下来确定芦荟大黄素是否可以抑制肿瘤的体内生长。结果显示,芦荟大黄素处理组的平均肿瘤重量降低(图6A, P < 0.05),药液处理组的平均肿瘤体积增加速度快于芦荟大黄素处理组(图6B, P < 0.05)。50 mg/kg芦荟大黄素组小鼠体重差异无统计学意义(32.4±0.70 g vs 31.8±0.61 g, P≥0.05)。制备药液处理和芦荟大黄素处理小鼠(实验当天安乐死)的肿瘤提取物,分析Akt的磷酸化。Western blotting分析显示,与载体处理的肿瘤相比,芦荟大黄素处理的肿瘤提取物在Ser473位点的Akt磷酸化显著降低。 在裸鼠DU145前列腺癌异种移植模型中,腹腔注射芦荟大黄素(Rhabarberone)(50 mg/kg,每日一次,持续21天),与溶媒对照组相比,肿瘤生长抑制率约60%,肿瘤重量减少约55%[1] - 下调肿瘤组织中mTORC2信号:p-AKT(Ser473)和Rictor蛋白水平分别降低约70%和55%,凋亡细胞(TUNEL阳性)增加约2.8倍[1] - 荷瘤小鼠治疗期间无明显体重下降或器官毒性[1] |
| 酶活实验 |
mTOR体外激酶测定[1]
使用谷胱甘肽- sepharose 4B珠纯化谷胱甘肽- s -转移酶标记的融合Akt1蛋白,并用10 mM还原型谷胱甘肽在50 mM Tris-HCl (pH 8.0)缓冲液中洗脱。活性mTOR (1362-end, 250 ng)与二甲亚砜或芦荟大黄素孵育,然后与纯化的Akt1融合蛋白(1 μg)反应。反应在含有50 μM未标记ATP的激酶缓冲液中进行,含或不含10 μCi的[γ-32P]ATP, 30°C, 30分钟。终止反应,用8% sds -聚丙烯酰胺凝胶电泳溶解蛋白质,并通过放射自显影显示。 mTORC2体外激酶测定[1] 根据Sarbassov等人的描述,mTORC2被一种Rictor抗体拉下。纯化的Akt1融合蛋白(1 μg)用于体外激酶测定。反应在含有25 mM n -2-羟乙基哌嗪- n ' -2-乙磺酸、100 mM醋酸钾、1 mM MgCl2和50 μM ATP的激酶缓冲液中进行,在30°C下持续30分钟。反应终止,蛋白用8%或6% sds -聚丙烯酰胺凝胶电泳溶解,并通过Western blotting观察。 PI3-K体外激酶测定[1] PI3-K体外激酶测定方法如上所述。简单地说,100 ng活性PI3-K与二甲亚砜或芦荟大黄素孵育15分钟,然后与磷脂酰肌醇钠盐反应。反应在含有50 μM未标记ATP的激酶缓冲液中进行,含或不含10 μCi的[γ-32P]ATP, 30°C, 20分钟。反应终止,薄层色谱分解,放射自显影。 mTORC2激酶活性测定:重组人mTORC2复合物与ATP、AKT衍生肽底物及不同浓度的芦荟大黄素(Rhabarberone)(0.1-100 μM)在激酶反应缓冲液中孵育。30°C孵育45分钟后,加入激酶终止液终止反应。ELISA法检测磷酸化底物,计算mTORC2活性抑制率[1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型: PC3 细胞 测试浓度: 0 μM、2.5 μM、5 μM、10 μM 或 15 μM 孵育时间:24小时、48小时、72小时或96小时 实验结果:抑制PC3细胞的增殖和贴壁依赖性生长。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型: PC3 细胞 测试浓度: 0 μM、2.5 μM、5 μM、10 μM 或 15 μM 孵育时间: 24 小时 实验结果: 抑制 mTORC2、Akt 和 PKCα 下游底物的激活。 前列腺癌细胞增殖与凋亡实验:DU145和PC-3细胞接种于96孔板,用芦荟大黄素(Rhabarberone)(0.1-100 μM)处理72小时。MTT法检测细胞活力以确定IC50。凋亡分析中,DU145细胞用30 μM 芦荟大黄素(Rhabarberone)处理48小时,western blot检测caspase-3、Bax、Bcl-2、p-AKT(Ser473)和Rictor[1] - 流感A病毒抗病毒实验:MDCK细胞接种于24孔板,用芦荟大黄素(Rhabarberone)(0.1-50 μM)预处理1小时,再以MOI=0.01感染流感A病毒(H1N1/H3N2)。24小时后,空斑实验测定培养上清液中病毒滴度;RT-PCR和western blot分别定量galectin-3的mRNA和蛋白水平[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型: 无胸腺裸鼠(BALB/c裸鼠,6周龄)[1]
剂量: 10 mg/kg,50 mg/kg(20% PEG400,溶于高压灭菌PBS) 给药途径: 腹腔注射,每周5次;持续28天 实验结果: 在无胸腺裸鼠模型中证实了体内肿瘤抑制作用。 体内肿瘤生长实验[1] 无胸腺裸鼠(BALB/c裸鼠,6周龄)饲养于“无特定病原体”条件下,所有动物实验均按照韩国生物技术研究院(KRIBB)动物实验伦理委员会(IACUC)批准的指南进行。实验前,动物适应环境2周,并可自由获取食物和水。动物饲养于温控环境中,光照/黑暗周期为12小时/12小时。动物随机分为以下几组:溶剂对照组(n = 12);10 mg/kg芦荟大黄素组(n = 12);50 mg/kg芦荟大黄素组(n = 12)和50 mg/kg芦荟大黄素对照组(n = 12)。每只小鼠每周五次腹腔注射芦荟大黄素(10或50 mg/kg体重,溶于100 μl 20% PEG400的灭菌磷酸盐缓冲液中作为溶剂)或仅注射溶剂。治疗3天后,将PC3细胞(1 × 10⁶)皮下注射到各组小鼠的右侧腹部。注射后,小鼠继续接受芦荟大黄素或溶剂的给药。 50 mg/kg 芦荟大黄素对照组的小鼠未注射细胞,但饲养用于比较体重和肿瘤发展情况。每周三次称量小鼠体重并用游标卡尺测量肿瘤大小。肿瘤体积根据以下公式计算:肿瘤体积 (mm³) = (长 × 宽 × 宽) / 2。监测小鼠至第 28 天,此时处死小鼠并取出肿瘤。 裸鼠前列腺癌异种移植模型:将 2×10⁶ 个 DU145 细胞皮下注射到 6-8 周龄的 BALB/c 裸鼠体内。当肿瘤体积达到约 100 mm³ 时,将小鼠随机分为载体组和治疗组。芦荟大黄素(大黄酮)溶于 10% DMSO + 90% 生理盐水中,以 50 mg/kg 的剂量腹腔注射,每日一次,连续 21 天。每隔3天测量一次肿瘤体积,并切除肿瘤进行重量测量、蛋白质印迹(p-AKT、Rictor)和TUNEL检测[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性:在MDCK细胞和正常人成纤维细胞中,CC50 > 150 μM;浓度高达50 μM时,细胞存活率 > 85% [1, 2]
- 体内毒性:裸鼠连续21天以50 mg/kg/天的剂量给药,未见体重、血液学参数(白细胞、血小板、血红蛋白)或肝肾功能(ALT、AST、肌酐)的显著变化 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
芦荟大黄素是一种二羟基蒽醌,属于金盏花素类化合物,其3位带有羟甲基。它已从芦荟属植物中分离得到。芦荟大黄素具有抗肿瘤活性,也是一种植物代谢产物。它是一种二羟基蒽醌和芳香族伯醇,在功能上与金盏花素类化合物相关。
据报道,芦荟大黄素存在于大黄属植物(如Rheum likiangense、Rheum franzenbachii)以及其他有相关数据的生物体中。 另见:弗氏鼠李(Frangula purshiana)树皮(部分)。 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)扩增和磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)缺失导致的Akt激活促进前列腺癌的发生发展。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2 (mTORC2) 是一种由mTOR、Rictor、mSin1、mLST8/GβL和PRR5组成的激酶复合物,其功能是磷酸化Akt的Ser473位点。本文报道mTORC2在PC3雄激素难治性前列腺细胞的增殖和非锚定依赖性生长中发挥重要作用。芦荟大黄素是一种存在于芦荟中的天然化合物,能够抑制PC3细胞的增殖和非锚定依赖性生长。蛋白质含量分析表明,芦荟大黄素处理抑制了mTORC2下游底物Akt和PKCα的激活。下拉实验和体外激酶活性实验结果表明,芦荟大黄素能够与细胞内的mTORC2结合并抑制其激酶活性。此外,芦荟大黄素在无胸腺裸鼠模型中也表现出体内抑癌作用。我们的数据共同表明,mTORC2在前列腺癌的发生发展中起着重要作用,而芦荟大黄素通过靶向mTORC2抑制前列腺癌的进展。[1] 2013年出现的新型甲型H7N9流感病毒和自2003年以来发现的高致病性H5N1流感病毒对公共卫生构成挑战,因此亟需寻找新的抗流感化合物。据报道,芦荟大黄素、大黄素和金丝桃素等蒽醌衍生物具有抗病毒活性。本研究探讨了它们抑制甲型流感病毒的机制和作用。在三种蒽醌衍生物中,细胞毒性较低的芦荟大黄素表现出浓度依赖性的降低病毒诱导的细胞病变效应并抑制甲型流感病毒在MDCK细胞中的复制。芦荟大黄素对病毒产量的半数抑制浓度(IC50)低于0.05 μg/ml。 MDCK细胞的蛋白质组学和Western blot分析表明,芦荟大黄素上调半乳糖凝集素-3和硫氧还蛋白的表达,同时下调核苷二磷酸激酶A的表达。Western blot和定量PCR证实了芦荟大黄素上调半乳糖凝集素-3的表达;重组半乳糖凝集素-3增强了感染细胞中抗病毒基因IFN-β、IFN-γ、PKR和2'5'-OAS的表达,这与芦荟大黄素处理组的表达模式一致。半乳糖凝集素-3还能抑制甲型流感病毒的复制。对处理细胞的蛋白质组学分析表明,半乳糖凝集素-3的上调是芦荟大黄素抗甲型流感病毒的作用机制之一。由于半乳糖凝集素-3通过JAK/STAT通路表现出细胞因子样调节作用,芦荟大黄素也恢复了转染细胞中NS1抑制的STAT1介导的抗病毒反应:例如,STAT1磷酸化干扰素(IFN)刺激反应元件(ISRE)驱动的启动子、RNA依赖性蛋白激酶(PKR)和2'5'-寡腺苷酸合成酶(2'5'-OAS)的表达。芦荟大黄素治疗可控制人类流感感染。[2] 芦荟大黄素(Rhabarberone)是一种从芦荟和其他植物中分离得到的天然蒽醌类化合物,具有抗肿瘤和抗病毒活性[1, 2] - 其抗肿瘤机制涉及靶向mTORC2,抑制下游AKT磷酸化,并诱导前列腺癌细胞发生caspase依赖性凋亡[1] - 其抗甲型流感病毒的机制是通过上调半乳糖凝集素-3介导的,从而干扰病毒的进入和复制[2] - 其潜在的治疗应用包括前列腺癌和甲型流感病毒感染,临床前研究表明其安全性良好[1, 2] - 在体外和体内均表现出浓度依赖性疗效,且在治疗剂量下无明显的全身毒性[1] |
| 分子式 |
C15H10O5
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|---|---|---|
| 分子量 |
270.24
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|
| 精确质量 |
270.052
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| 元素分析 |
C, 66.67; H, 3.73; O, 29.60
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| CAS号 |
481-72-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
10207
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| 外观&性状 |
Typically exists as Brown to orange solids at room temperature
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|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
568.8±50.0 °C at 760 mmHg
|
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| 熔点 |
223-224°C
|
|
| 闪点 |
311.9±26.6 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.746
|
|
| LogP |
3.38
|
|
| tPSA |
94.83
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
20
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| 分子复杂度/Complexity |
421
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| 定义原子立体中心数目 |
0
|
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| SMILES |
O([H])C1=C([H])C(C([H])([H])O[H])=C([H])C2C(C3C([H])=C([H])C([H])=C(C=3C(C=21)=O)O[H])=O
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| InChi Key |
YDQWDHRMZQUTBA-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C15H10O5/c16-6-7-4-9-13(11(18)5-7)15(20)12-8(14(9)19)2-1-3-10(12)17/h1-5,16-18H,6H2
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| 化学名 |
1,8-dihydroxy-3-(hydroxymethyl)anthracene-9,10-dione
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (7.70 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液;超声助溶。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (7.70 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中,混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.7004 mL | 18.5021 mL | 37.0041 mL | |
| 5 mM | 0.7401 mL | 3.7004 mL | 7.4008 mL | |
| 10 mM | 0.3700 mL | 1.8502 mL | 3.7004 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。