| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
human LPA1 ( pIC50 = 0.98 μM ); mouse LPA1 ( pIC50 = 0.73 μM )
LPA1 (human) (IC50 = 0.025 μM in calcium flux assay)[1] LPA1 (mouse) (IC50 = 0.023 μM in calcium flux assay)[1] AM095 sodium targets the lysophosphatidic acid receptor 1 (LPA1), a G protein-coupled receptor involved in numerous physiological and pathological cellular processes. The compound is a potent LPA1 receptor antagonist that inhibits GTPγS binding to CHO cell membranes overexpressing recombinant human or mouse LPA1 with IC50 values of 0.98 and 0.73 μM, respectively. It exhibits no LPA1 agonism. The compound antagonizes LPA-induced calcium flux in CHO cells stably transfected with human or mouse LPA1 with IC50 values of 0.025 and 0.023 μM, respectively. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
AM095 是一种强效的 LPA1 受体拮抗剂，它能抑制 GTPγS 与过表达重组人或小鼠 LPA1 的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞膜的结合，IC50 值分别为 0.98 μM 和 0.73 μM。AM095 能抑制过表达小鼠 LPA1 的 CHO 细胞 (IC50=778 nM) 和人 A2058 黑色素瘤细胞 (IC50=233 nM) 的 LPA 驱动的趋化作用。在人 LPA1 GTPγS 结合实验中，AM095 的 IC50 值与我们之前发表的化合物 AM966 (IC50=0.98±0.17 μM) 和 Debio-0719 (IC50=0.60±0.04 μM) [1] 相当。AM095 能抑制稳定转染人或小鼠 LPA1 的 CHO 细胞中 LPA 诱导的钙离子内流。 AM095 拮抗人或小鼠 LPA1 转染的 CHO 细胞中 LPA 诱导的钙流的 IC50 分别为 0.025 和 0.023 μM [2]。
AM095 抑制稳定表达人 LPA1 的 CHO 细胞中 LPA 诱导的钙流，IC50 为 0.025 μM；抑制表达小鼠 LPA1 的 CHO 细胞中 LPA 诱导的钙流，IC50 为 0.023 μM。对于转染了LPA2、LPA3、LPA4或LPA5受体（人或小鼠）的CHO、HEK或B103细胞，AM095拮抗LPA诱导的钙离子内流的IC50值均大于5 μM，表明其对LPA1具有选择性。[1] 体外实验表明，AM095可抑制过表达小鼠LPA1的CHO细胞（IC50=778 nM）和人A2058黑色素瘤细胞（IC50=233 nM）的LPA驱动的趋化作用。它可拮抗稳定转染人或小鼠LPA1的CHO细胞中LPA诱导的钙离子内流，IC50值分别为0.025 μM和0.023 μM。该化合物在人LPA1 GTPγS结合试验中的IC50值与其他LPA1拮抗剂相当。其强效且选择性的 LPA1 拮抗作用已在各种基于细胞的检测中得到证实。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AM095具有较高的口服生物利用度和中等的半衰期，在大鼠和犬的口服和静脉给药后，所测试剂量下均具有良好的耐受性。大鼠口服（10 mg/kg）AM095后，血浆浓度在2小时达到峰值，Cmax为41 μM，随后在24小时内降至10 nM。静脉注射（2 mg/kg）后，15分钟内观察到Cmax为12 μM，24小时后也降至约10 nM，t1/2为1.79小时。犬单次口服5 mg/kg后，15分钟内血浆浓度达到峰值21 μM，随后在24小时内降至10 nM。相比之下，静脉注射 2 mg/kg 的剂量在 15 分钟内达到 Cmax 11 μM，并在 8 小时内降至 15 nM，半衰期为 1.5 小时 [1]。
在 C57Bl/6 小鼠中，连续 28 天皮下注射博来霉素以诱导皮肤纤维化，采用“预防性”方案（从第 1 天开始）以 30 mg/kg 的剂量灌胃给予 AM095，与载体对照组相比，可使博来霉素诱导的皮肤厚度增加减少 70%，羟脯氨酸含量减少 52% [1]。 在“治疗性”方案中，AM095 的给药时间从博来霉素刺激开始后的第 7 天或第 14 天开始，皮肤厚度增加也被减轻。 85%（第 7 天开始）和 61%（第 14 天开始），而羟脯氨酸的增加分别减弱了 32%（第 7 天开始）和 26%（第 14 天开始）。[1] 体内实验表明，AM095 具有较高的口服生物利用度和中等的半衰期，并且在大鼠和犬口服和静脉给药后，在所测试的剂量下耐受性良好。大鼠口服（10 mg/kg）AM095 后，血浆浓度在 2 小时达到峰值，Cmax 为 41 μM，然后在 24 小时内降至 10 nM。静脉注射（2 mg/kg）后，在 15 分钟内观察到 Cmax 为 12 μM，t1/2 为 1.79 小时。在犬中，单次口服 5 mg/kg 剂量后，在 15 分钟内产生 21 μM 的血浆峰浓度。 |
| 酶活实验 |
在实验中，hLPA1/CHO 和 mLPA1/CHO 细胞均被使用。将蛋白酶抑制剂、10 mM HEPES（pH 7.4）、1 mM 二硫苏糖醇和约 20 mL 冰冷的膜缓冲液加入到 hLPA1/CHO 或 mLPA1/CHO 细胞沉淀中。细胞经超声破碎后，细胞裂解液在 4°C 下以 2000 rpm 离心 10 分钟。取上清液，在 4°C 下以 25,000 rpm 离心 70 分钟。使用 Potter-Elvehjem 组织研磨器将膜沉淀重悬于 5 mL 冰冷的膜缓冲液中并匀浆。使用 Bradford 蛋白测定试剂盒计算最终蛋白浓度。将 25 至 40 μg hLPA1/CHO 或 mLPA1/CHO 膜和 0.1 nM [35S]-GTPηS 溶于含有 0.2% 无脂肪酸人血清白蛋白和 5 μM GDP 的缓冲液（50 mM HEPES、0.1 mM NaCl、10 mM MgCl2、50 μg/mL 皂苷，pH 7.5）中，加入已知量的 AM095（用二甲基亚砜稀释）或溶剂（二甲基亚砜）。测定 AM095 抑制 900 nM LPA (18:1) 刺激的 GTPγS 结合的能力，以评估 LPA1 拮抗剂活性。作为替代方法，测定 AM095 在没有 LPA 的情况下促进 GTPηS 结合的能力，以评估其激动剂效应。将膜收集到玻璃滤膜结合板上，并在30°C孵育30分钟后，使用Brandel 96孔细胞收集器，用含50 mM HEPES（pH 7.4）、100 mM NaCl和10 mM MgCl2的冷缓冲液洗涤三次。干燥后，使用Packard TopCount NXT微孔板闪烁计数器测量cpm值。
LPA受体拮抗作用的钙流测定：将稳定或瞬时转染LPA受体的细胞以20,000-40,000个细胞/孔的密度接种于96孔聚赖氨酸包被的黑色壁透明底板中，并培养过夜。然后将细胞在无血清培养基中饥饿过夜（稳定表达细胞）或4小时（瞬时转染细胞）。在检测当天，将细胞用FLIPR Calcium 4染料在添加了20 mM HEPES、2 mM丙磺舒和0.3%无脂肪酸HSA的HBSS缓冲液中于37°C孵育1小时。加入测试化合物（25 μl DMSO），并在室温下孵育30分钟。在15秒基线测量后，加入LPA（50 μl 5倍浓缩的LPA储备液，溶于含20 mM HEPES和0.3%无脂肪酸HSA的HBSS缓冲液中）。LPA的最终浓度分别为：LPA1和LPA3为10 nM，LPA2和LPA5为30 nM，LPA4为300 nM。使用FLEXstation III测定细胞内钙动员。通过绘制抑制率与化合物浓度的log10值曲线生成抑制曲线，并使用S型剂量反应方程进行非线性回归计算IC50值。[1] 在无细胞生化分析中，评估了AM095钠抑制GTPγS与LPA1受体结合的能力。使用过表达重组人或小鼠LPA1的CHO细胞膜制备物进行GTPγS结合分析，测定了该化合物的IC50值分别为0.98 μM和0.73 μM。采用分析技术表征了该化合物的纯度（>98%）和分子量。这些分析证实了该化合物作为强效LPA1受体拮抗剂的作用机制。 |
| 细胞实验 |
体外实验表明，AM095 是一种强效的 LPA₁ 受体拮抗剂，因为它能抑制 GTPγS 与过表达重组人或小鼠 LPA₁ 的中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞膜的结合，IC₅₀ 值分别为 0.98 和 0.73 μM，且不表现出 LPA₁ 激动作用。功能性实验表明，AM095 能抑制过表达小鼠 LPA₁ 的 CHO 细胞 (IC₅₀ = 778 nM) 和人 A2058 黑色素瘤细胞 (IC₅₀ = 233 nM) 的 LPA 驱动的趋化作用[3]。
转染细胞的钙离子流测定：稳定表达人或小鼠 LPA1、人 LPA3 和小鼠 LPA3 的 CHO 细胞；稳定表达小鼠 LPA3 的 HEK 细胞；使用Lipofectamine 2000将人或小鼠LPA2、LPA4或LPA5瞬时转染至B103大鼠神经母细胞瘤细胞中。细胞培养于合适的培养基中（CHO和HEK细胞使用含10% FBS和潮霉素B的F12培养基；HEK-mLPA3细胞使用含10% FBS和潮霉素B的DMEM培养基），并按上述方法进行铺板。经血清饥饿和染料加载后，用递增浓度的AM095或溶剂处理细胞，然后用LPA刺激。记录荧光信号并计算IC50值。[1] AM095钠的细胞活性测定包括评估其在各种细胞系中对LPA1的拮抗活性。该化合物抑制LPA诱导的钙离子内流的能力在稳定转染人或小鼠LPA1的CHO细胞中进行评估，IC50值分别为0.025和0.023 μM。其抑制LPA驱动的趋化作用的能力在过表达小鼠LPA1的CHO细胞（IC50=778 nM）和人A2058黑色素瘤细胞（IC50=233 nM）中进行评估。 |
| 动物实验 |
小鼠的左肾分别接受单侧输尿管梗阻（UUO）或假手术。简而言之，手术方法是在左上腹做纵向切口，暴露左肾。找到肾动脉后，将一根6/0丝线插入肾动脉和输尿管之间。为确保输尿管完全结扎，将丝线缠绕在输尿管周围并打结三次。缝合皮肤，将肾脏放回腹腔，并用缝合钉闭合切口。健康对照组的肾脏为对侧（右）肾。在UUO手术前1至4小时，以及手术后根据需要，分别灌胃给予AM095（30 mg/kg）或溶剂（水）。小鼠经二氧化碳吸入麻醉8天后，取出肾脏并切成两半，进行组织病理学和生化检查，以评估纤维化情况。将肾脏样本固定于 10% 中性缓冲福尔马林溶液中，并用 Masson 三色染色法染色，以测量纤维化程度。为了进行胶原蛋白含量的生化分析，将肾脏的另一半冷冻于 -80°C。
野生型 (WT)、LPA₁ 基因敲除 (KO) 和 LPA₂ 基因敲除 (LPA₂-KO) 小鼠每天皮下注射一次博来霉素或磷酸盐缓冲液 (PBS)，持续 28 天。测定博来霉素注射组和 PBS 注射组皮肤的真皮厚度、胶原蛋白含量以及 α-平滑肌肌动蛋白 (α-SMA) 或磷酸化 Smad2 阳性细胞的数量。在另一组实验中，将一种新型选择性 LPA₁ 拮抗剂AM095或载体单独灌胃给予接受 28 天博来霉素或 PBS 注射的 C57BL/6 小鼠。在注射博来霉素和PBS的同时或之后7天或14天，分别开始给予AM095或载体处理，并持续至实验结束。测定注射部位皮肤的真皮厚度和胶原蛋白含量。[1] 动物模型：雌性和雄性C57Bl/6小鼠（6-8周龄）皮下注射博来霉素（100 μl，10 μg/ml，溶于PBS）或PBS，每日一次，连续28天。AM095溶于无菌水中，以30 mg/kg/只的剂量灌胃给药，工作日每日两次，周末每日一次。载体对照组仅给予无菌水。本研究测试了三种治疗方案：预防性方案（从第1天开始，与博来霉素同时给药）和两种治疗性方案（分别在博来霉素给药后第7天或第14天开始）。所有治疗均持续至实验结束。第28天，处死小鼠，并采集注射部位皮肤的6 mm穿刺活检组织进行组织学和羟脯氨酸测定。[1] 其他动物实验：LPA1基因敲除小鼠（C57Bl/6/129Sv/J杂交背景）和LPA2基因敲除小鼠（BALB/c背景）也接受了类似的博来霉素或PBS处理，持续28天，以评估基因缺失的影响。[1] AM095钠的动物模型包括用于药代动力学研究的大鼠和犬。该化合物可通过口服或静脉注射给药。研究已考察了其血浆浓度-时间曲线、生物利用度和半衰期。已评估了该化合物在不同剂量下的耐受性。已在与LPA1信号通路相关的疾病模型中研究了该化合物对LPA1介导过程的影响。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在体内实验中，我们证实AM095：1）具有较高的口服生物利用度和中等的半衰期，在测试剂量范围内，大鼠和犬口服和静脉给药后均耐受良好；2）以剂量依赖的方式降低LPA刺激的组胺释放；3）减弱博来霉素诱导的支气管肺泡灌洗液中胶原蛋白、蛋白质和炎症细胞浸润的增加；4）在单侧输尿管梗阻小鼠模型中减轻肾纤维化。尽管AM095具有抗纤维化活性，但它对大鼠切开和切除后的正常伤口愈合没有影响。这些数据表明，AM095是一种LPA₁受体拮抗剂，在啮齿动物模型中具有良好的口服暴露量和抗纤维化活性。 [3]
AM095在小鼠体内的药代动力学：C57Bl/6小鼠分别于0小时和8小时经口灌胃给予30 mg/kg的AM095。分别于0、4、8、9、12和24小时采集血液样本。采用LC-MS/MS分析血浆浓度。AUC为118.7 μg*hr/ml。最大血浆浓度(Cmax)为6200 nM (28 μg/ml)，最小血浆浓度(Cmin)为170 nM (0.08 μg/ml)。每日两次30 mg/kg的给药方案在整个治疗期间均能使血浆浓度高于LPA1的IC50值。[1] AM095钠的药代动力学数据显示，其在大鼠和犬体内具有较高的口服生物利用度和中等的半衰期。在大鼠中，口服给药（10 mg/kg）2 小时后血药浓度峰值 (Cmax) 为 41 μM，24 小时后降至 10 nM。静脉注射给药（2 mg/kg）15 分钟内血药浓度峰值 (Cmax) 为 12 μM，半衰期 (t1/2) 为 1.79 小时。在犬中，口服给药（5 mg/kg）15 分钟内血药浓度峰值 (Cmax) 为 21 μM。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
AM095钠的毒性特征表明，在大鼠和犬的测试剂量下，其耐受性良好。处理药物研究化合物时，应遵循标准安全预防措施。该化合物仅供研究使用，不得用于人体。除药代动力学研究中的耐受性数据外，现有文献中未报道其他具体的毒性研究。应遵循适当的操作规程，以最大程度地减少暴露。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
目的：硬皮病（系统性硬化症[SSc]）的特征是进行性多器官纤维化。我们近期发现溶血磷脂酸（LPA）参与肺纤维化的发病机制。本研究旨在探讨LPA及其两种受体LPA₁和LPA₂在SSc小鼠模型皮肤纤维化中的作用。方法：将野生型（WT）、LPA₁基因敲除（KO）和LPA₂基因敲除小鼠皮下注射博来霉素或磷酸盐缓冲液（PBS），每日一次，连续28天。分别检测博来霉素组和PBS组小鼠的真皮厚度、胶原含量以及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）或磷酸化Smad2阳性细胞的数量。在另一项实验中，我们连续28天给C57BL/6小鼠注射博来霉素或PBS后，通过灌胃给予小鼠一种新型选择性LPA₁拮抗剂AM095或其载体。AM095或载体治疗与博来霉素和PBS注射同时开始，或在注射后7天或14天开始，并持续至实验结束。我们测量了注射部位的真皮厚度和胶原蛋白含量。结果表明，LPA₁敲除小鼠对博来霉素诱导的真皮厚度和胶原蛋白含量增加具有显著的抵抗力，而LPA₂敲除小鼠与野生型小鼠一样易感。在LPA₁敲除小鼠中，博来霉素诱导的真皮α-SMA+和磷酸化Smad2+细胞的增加被消除。无论采用预防性治疗还是联合治疗方案，使用AM095进行LPA₁的药理学拮抗均能显著减轻博来霉素诱导的皮肤纤维化。结论：这些结果表明，LPA/LPA₁通路抑制可能是一种治疗系统性硬化症（SSc）的可行新疗法，并且LPA₁是治疗皮肤纤维化的一个有吸引力的药理学靶点。[1] 溶血磷脂酸（LPA）已被证实参与多种心血管功能，但其在血管张力调节中的潜在作用仍不清楚。本研究表明，LPA (18:1) 和 VPC31143（LPA1-3 受体的合成激动剂）均能扩张完整的小鼠胸主动脉，且二者的最大扩张效应 (Emax) 值相似（分别为苯肾上腺素诱导预收缩的 53.9% 和 51.9%），但 LPA 和 VPC31143 诱导血管舒张的半数有效浓度 (EC50) 不同（分别为 400 nM 和 15 nM）。机械去除内皮或敲除内皮型一氧化氮合酶 (eNOS) 基因不仅减弱了 LPA 或 VPC31143 的血管舒张作用，而且使其转变为血管收缩作用。新鲜分离的小鼠主动脉内皮细胞表达 LPA1、LPA2、LPA4 和 LPA5 转录本。 LPA1,3拮抗剂Ki16425、LPA1拮抗剂AM095以及LPA1基因敲除（而非LPA2基因敲除）均能消除LPA诱导的血管舒张作用。Watmanin或MK-2206对磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B/Akt通路的抑制作用并不影响LPA的作用。然而，U73122或依地福辛对磷脂酶C (PLC)的药理学抑制（而非PLCε基因敲除）消除了LPA诱导的血管舒张作用，表明除PLCε外，其他PLC酶也参与了该反应。总之，本研究鉴定出LPA是一种内皮依赖性血管舒张剂，其作用机制涉及LPA1、PLC和eNOS。 [2]
AM095钠（4'-[3-甲基-4-((R)-1-苯基-乙氧羰基氨基)-异恶唑-5-基]-联苯-4-基]-乙酸钠）是一种选择性LPA1拮抗剂。它由Amira Pharmaceuticals公司开发。在博来霉素诱导的皮肤纤维化模型中，预防性给药AM095可减少肌成纤维细胞的积累和TGF-β/Smad信号通路（如α-SMA+和磷酸化Smad2+细胞减少所示）。 AM095在损伤后开始使用时能够减轻已形成的纤维化，这表明其具有作为硬皮病和其他纤维化疾病抗纤维化疗法的潜力。[1] AM095钠是一种新型、高效且选择性的LPA1受体拮抗剂，对人LPA1和鼠LPA1的IC50值分别为0.98 μM和0.73 μM。它具有良好的口服生物利用度和耐受性。该化合物可抑制LPA诱导的钙离子内流（IC50：0.025-0.023 μM）和趋化作用（IC50：233-778 nM）。CAS号为1345614-59-6。目前尚未发现该研究化合物的上市许可信息。 |
| 分子式 |
C27H23N2NAO5
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|---|---|
| 分子量 |
478.471698045731
|
| 精确质量 |
478.15
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| 元素分析 |
C, 67.78; H, 4.85; N, 5.85; Na, 4.80; O, 16.72
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| CAS号 |
1345614-59-6
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| 相关CAS号 |
AM095 free acid; 1228690-36-5; 1345614-59-6 (sodium)
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| PubChem CID |
53303875
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| 外观&性状 |
Light yellow to khaki solid powder
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| LogP |
4.932
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| tPSA |
107.98
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
35
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| 分子复杂度/Complexity |
673
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=C([O-])CC1=CC=C(C2=CC=C(C3=C(NC(O[C@@H](C4=CC=CC=C4)C)=O)C(C)=NO3)C=C2)C=C1.[Na+]
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| InChi Key |
BDKDADFSIDCQGB-GMUIIQOCSA-M
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| InChi Code |
InChI=1S/C27H24N2O5.Na/c1-17-25(28-27(32)33-18(2)20-6-4-3-5-7-20)26(34-29-17)23-14-12-22(13-15-23)21-10-8-19(9-11-21)16-24(30)31;/h3-15,18H,16H2,1-2H3,(H,28,32)(H,30,31);/q;+1/p-1/t18-;/m1./s1
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| 化学名 |
sodium;2-[4-[4-[3-methyl-4-[[(1R)-1-phenylethoxy]carbonylamino]-1,2-oxazol-5-yl]phenyl]phenyl]acetate
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| 别名 |
AM095 sodium; AM095; AM-095; 1345614-59-6; AM095; AM-095 Sodium; AM095 sodium; AM-095; sodium;2-[4-[4-[3-methyl-4-[[(1R)-1-phenylethoxy]carbonylamino]-1,2-oxazol-5-yl]phenyl]phenyl]acetate; AM 095
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~83.33 mg/mL (~174.16 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.35 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 5 mg/mL (10.45 mM) in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0900 mL | 10.4500 mL | 20.9000 mL | |
| 5 mM | 0.4180 mL | 2.0900 mL | 4.1800 mL | |
| 10 mM | 0.2090 mL | 1.0450 mL | 2.0900 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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