Anti-malarial; STAT-3; exported protein 1 (EXP1).

青蒿琥酯抑制输出蛋白 1 (EXP1)[2] 和 STAT-3[1]。青蒿琥酯治疗 24 小时后，两种细胞系的活性氧 (ROS) 均出现显着的剂量依赖性升高。此外，Western blotting 证明，以更大剂量的青蒿琥酯处理癌细胞 24 小时可显着提高 γ-H2AX 水平。此外，在 A2780 和 HO8910 细胞中，青蒿琥酯对 RAD51 水平表现出时间依赖性影响。两种类型的非恶性细胞（正常人成纤维细胞和永生化上皮细胞 FTE-187）在响应青蒿琥酯时未显示 RAD51 水平发生变化。事实上，青蒿琥酯以剂量依赖性方式降低 A2780 细胞中的 RAD51 mRNA 水平。相应地，青蒿琥酯显着降低了RAD51的启动子活性。相反，青蒿琥酯对H8910细胞中RAD51 mRNA的量没有影响[3]。 对STL候选物的虚拟分析表明，青蒿琥酯（ATS）是STAT-3的最佳潜在抑制剂，其效力与特异性抑制剂S3I-201相当。我们还观察到，在无细胞系统中，ATS抑制IL-6驱动的STAT-3-DNA结合活性，其效力与S3I-201相当。此外，观察到ATS在体外干扰STAT-3二聚化和抑制组成型和IL-6诱导型STAT-3。然而，我们还观察到，ATS调节STAT-3依赖性靶点（前天冬氨酸蛋白酶-3、Bcl-xl和存活素）有利于体外凋亡的发生。总体而言，ATS对STAT-3的推定抑制表明其通过与STAT-3单体的SH2结构域结合来干扰STAT-3二聚化的能力。它导致STAT-3的抑制，也有利于促进体外细胞凋亡。因此，ATS在体外也表现出癌症细胞对正常细胞的选择性细胞毒性。[1]

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EXP1能有效降解细胞毒性血红素，被青蒿琥酯有效抑制，并与青蒿琥乙酯代谢和药物压力疟疾寄生虫的易感性有关。这些数据表明EXP1参与了一线抗疟疾药物的作用模式。[2]

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青蒿酸盐诱导卵巢癌症细胞ROS和DNA双链断裂。 青蒿酸下调卵巢癌症细胞中的RAD51。 青蒿琥酯抑制RAD51病灶和HRR的形成。 青蒿酸盐使卵巢癌症细胞对顺铂敏感。 RAD51的异位表达减弱了青蒿琥酯增加的化疗敏感性。 [3]

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青蒿琥酯在体外具有强大的抗淋巴瘤活性[4]
为了表征青蒿琥酯的疗效，在药物敏感性筛查中，将目前临床试验中用于治疗B细胞淋巴瘤的抑制剂与青蒿琥乙酯进行了比较。青蒿琥酯被确定为一种有前景的候选药物，因为它在所有测试的B淋巴瘤细胞系中都能有效减少细胞生长，这与其他药物的疗效存在较大差异（图1）。为了扩大青蒿琥酯的测试范围，在代表各种组织学类型的18种不同B细胞淋巴瘤细胞系中进行了剂量反应实验。这表明青蒿琥酯在淋巴瘤细胞系中表现出广泛的活性，并强烈影响细胞生长，而在单独用CD40L或与IL21联合激活的正常B细胞中，其作用有限（图2a）。青蒿琥酯降低了细胞生长，IC50值从0.189μM降至3.72μM，在测试的18个细胞系中，有11个对青蒿琥乙酯高度敏感（IC50<1μM）（图2a，附加文件2：图S1）。72小时后，PI染色检测到明显的细胞死亡，对正常B细胞只有轻微影响（附加文件2：图S1B）。TUNEL法检测DNA断裂表明，青蒿琥酯诱导的凋亡很强，暴露于青蒿琥乙酯72小时后，凋亡细胞百分比为55至96，而正常B细胞不受影响（图2b）。凋亡的诱导是一个早期事件，青蒿琥酯处理24小时后，活性胱天蛋白酶3+细胞显著增加（附加文件2：图S1C）。青蒿琥酯对活性胱天蛋白酶3+细胞的增加被泛胱天蛋白酶抑制剂Z-VAD-FMK的存在所抵消（图2c），表明青蒿琥乙酯通过胱天蛋白酶依赖途径诱导肿瘤细胞凋亡。细胞周期分析没有显示青蒿琥酯引起的任何总体变化（附加文件3：图S2）。总之，这些结果表明，诱导细胞凋亡是青蒿琥酯抗淋巴瘤活性的主要机制。

青蒿琥酯和顺铂联合治疗组肿瘤的发展明显受到抑制（P<0.01）。另一方面，单独使用青蒿琥酯时，两种细胞系的肿瘤异种移植物均未显着生长[3]。

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Artesunate联合顺铂抑制卵巢癌症异种移植物肿瘤生长[3]
接下来，我们在体内测试青琥酯和顺铂单独或联合用药对卵巢癌症细胞生长的影响。A2780和HO8910细胞，5×106个细胞/0.2 ml PBS，皮下注射到雌性裸鼠的左腹股沟区。将携带肿瘤的小鼠随机分为4组，每天通过腹腔注射青蒿琥酯（50mg/kg）、顺铂（2mg/kg）或两者的组合给药16天。如图6所示，接受青蒿琥酯和顺铂联合治疗的组肿瘤生长明显减少（P<0.01）。相比之下，单独使用青蒿琥酯对两种细胞系的肿瘤异种移植物的生长没有显著影响。单独使用顺铂似乎仅对HO8910细胞有一定的抑制作用，但对A2780细胞没有。这些结果表明青琥酯可使卵巢癌症细胞在体内对顺铂敏感。

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青蒿琥酯在淋巴瘤异种移植物模型中具有强效的抗淋巴瘤活性[4]
为了测试青蒿琥酯作为体内强效抗淋巴瘤药物的疗效，NSG小鼠皮下接种2×106 BL-41-luc淋巴瘤细胞，随后用青蒿琥酸酯（200mg/kg/天，n=10）治疗或不治疗（对照组，n=10 = 10). 具有不同肿瘤负荷的小鼠在各组中均匀分布（附加文件4：图S3A和B），并在接种后第4天开始治疗。青蒿琥酯治疗的小鼠肿瘤生长明显减少，治疗开始后第12天和第16天达到统计学上的显著差异（P = .0045, 第12天，P<0.0050，第16天；图3a）。第16天小鼠的IVIS图像显示，与对照组相比，青蒿琥酯治疗的小鼠肿瘤生长明显减少（图3b）。在一只接受青蒿琥酯治疗的小鼠中，肿瘤无法检测到（图3b）。在第16天，由于最大肿瘤大小限制（2 cm3），一半的对照小鼠被安乐死。相比之下，第一只青蒿琥酯治疗的小鼠在6天后因肿瘤大小而被安乐死。在治疗结束后（第19天）监测所有剩余的小鼠，在青蒿琥酯治疗的小鼠中观察到肿瘤生长延迟。生存分析显示，对照组和青蒿琥酯治疗的小鼠达到最大肿瘤大小标准的中位时间分别为17.5天和30.5天（p < .0001; 图3c）。青蒿琥酯剂量（200mg/kg/天）耐受良好，治疗期间体重没有减轻（附加文件4：图S3C）。总之，青蒿琥酯在侵袭性B细胞淋巴瘤异种移植物模型中显示出强烈的抗肿瘤反应。

EXP1青蒿琥酯抑制试验[2]
将Artesunate/青蒿琥酯（ART）和阿托伐醌溶解在100%乙醇中，加入100 nM WT EXP1血红素反应中，以测定血红素降解抑制作用。将WT EXP1在pH 6.5的GST测定缓冲液中与0.1%Triton X-100和ART在冰上预孵育30分钟，然后加入2mM GSH和血红素。在395nm下每秒监测反应3分钟。

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EXP1 GST酶测定[2]
纯化的EXP1在pH 6.5下与0.1%Triton X-100和1mM还原GSH在冰上预孵育90分钟，然后加入CDNB。在340nm下每15秒监测一次反应的吸光度，持续10分钟。通过将100 nM WT蛋白与0.1%Triton X-100、2 mM GSH在pH 6.5的测定缓冲液中在冰上预孵育30分钟，然后加入血红素以启动血红素降解，来测定GST对血红素的活性。在395nm下每秒监测吸光度3分钟。

DHA/ART耐受寄生虫的产生[2]
通过在青蒿素衍生物双氢青蒿素（DHA）存在下以亚IC50浓度（2.8 nM，而亲本IC50值为6.4 nM）培养无性血液期寄生虫（平均约108）55天，然后在接下来的200天内逐渐增加药物浓度（高达28 nM），从Dd2菌株中选择3b1寄生虫。在寄生虫暴露于高浓度DHA/ART四天后（高达112 nM；Eastman等人，手稿正在准备中），对DHA和青蒿琥酯（ART）的获得性耐受被证明在30天内复发频率增加。

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ROS的流式细胞术分析[3]
通过膜渗透性CM-H2DCFDA测定青蒿琥酯处理后ROS的产生。简而言之，细胞装载了5μM的CM-H2DCFDA，并在用青蒿琥酯处理后在37°C下孵育20分钟。使用保存液重新悬浮细胞，并用FACSCanto II（Becton Dickinson）进行分析。氧化CM-H2DCFDA的峰值激发波长为490nm，发射波长为530nm。

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γ-H2AX和RAD51[3]的免疫荧光染色 在6孔板的盖玻片上生长的细胞用青蒿琥酯处理24小时，然后进行γ-H2AX水平的测定。对于RAD51的免疫荧光染色，细胞用10μg/ml青蒿琥酯预处理24小时，然后用30μM顺铂预处理4小时以诱导RAD51病灶。用4%甲醛固定细胞，然后用0.2%Triton X-100的PBS溶液处理5分钟，然后用5%牛血清白蛋白的PBS溶液封闭30分钟。小鼠抗γ-H2AX抗体在PBS中的5%牛血清白蛋白中以1:600的稀释度使用。兔抗Rad51抗体以1:600稀释。将标本在4°C下孵育过夜。然后在PBS中洗涤细胞三次，然后在黑暗中用罗丹明标记的二抗孵育60分钟。用含有0.3%Triton X-100的PBS洗涤3次后，用4,6-二脒基-2-苯基吲哚复染细胞5分钟。盖玻片用防磨溶液安装在载玻片上。然后在荧光显微镜下检查载玻片。在3次实验重复中，每次至少对500个核进行核灶评分。

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蛋白质印迹分析[3]
用青蒿琥酯处理24小时后，收获细胞并在1×细胞裂解缓冲液中裂解。通过SDS-PAGE分离15-25μg的总蛋白质，并将其转移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。在室温下用5%脱脂乳封闭膜1-2小时，然后用一抗探测，并在4°C下孵育过夜。用TBS-T广泛洗涤后，将膜与适当的HRP偶联的二抗在室温下孵育1小时，然后用Western ECL增强的鲁米诺反应剂检测。针对以下蛋白质的抗体为RAD51、β-肌动蛋白和His标签。

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萤光素酶报告物测定[3]
使用Lipofectamine 2000（Invitrogen）用携带一系列截短RAD51启动子的pGL3碱性报告质粒转染细胞。将细胞与/不与青蒿琥酯（10μg/ml）一起孵育24小时，然后使用带有多标记计数器的双荧光素酶报告检测系统（Victor 1420；PerkinElmer）进行荧光素酶检测。萤火虫荧光素酶活性被标准化为pRL-TK报告物（共转染的内部对照）的肾小管萤光素酶活性。在3个独立实验中进行了转染，并进行了4次检测

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克隆存活试验[3]
卵巢细胞分为4组，即Artesunate/青蒿琥酯组（5μg/ml，24小时）、顺铂组（0.3μM，24 h）、联合组（青蒿琥酯和顺铂序贯治疗24小时）和对照组（DMSO）。将细胞接种到6cm培养皿中。10-12天后，用甲醇固定菌落，用1.25%Giemsa染色进行计数。仅对那些大小至少为50个细胞的菌落进行计数。

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HR报告分析[3]
含有HR报告盒的质粒由Gorbunova博士提供。13报告盒由2个GFP突变拷贝组成。第一个拷贝包含一个人工内含子和一个22nt的缺失，以及在第一个外显子中反向插入2个I-SceI识别位点。第二个拷贝包含第一个外显子，但缺少启动子和起始密码子。在I-SceI诱导DSB后，基因转换事件重建了一个功能性的GFP基因。质粒通过I-SceI限制性内切酶线性化，并使用天根通用DNA纯化试剂盒纯化。将2μg HR报告构建体和0.1μg pDsRed-N1作为内对照转染指数增长的A2780和HO8910细胞。然后，用青蒿琥酯处理细胞24小时，用新鲜培养基替换，并依次培养48小时。收集细胞，将其重新悬浮在0.4ml pH 7.4的PBS中，并通过FACS进行分析。DNA修复效率以GFP+/DsRed+比值表示，与转染条件无关。

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存活率和凋亡测定[4]
细胞在96孔板（10000个细胞/孔）中生长72小时，有或没有青蒿琥酯（0.125-8μM）和小分子抑制剂（附加文件1：表S1）。CellTiterGlo测定用于使用Modulus微孔板读数器测量相对细胞生长（ATP水平）。测量结果与对照组相关，并报告为相对发光单位（RLU）。在用青蒿琥酯（5-10μM）处理72小时后，通过碘化丙啶（PI）测定法（1μg/ml）测量存活率。在用有和没有Z-VAD-FMK（1μl/ml）的青蒿琥酸酯（1和5μM）治疗24小时后，用活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3测定法（Alexa-647-rabbit抗活性半胱氨酸天冬酶-3克隆C92-605）检测细胞凋亡。用青蒿琥酯（10μM）处理72小时后，用原位细胞死亡检测试剂盒测定末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）。对于这两种凋亡测定，细胞在PFA中固定5分钟，并用冰冷的甲醇渗透。所有测定均使用FACS Canto II或LSR II流式细胞仪 进行分析。使用在线Cytobank流式细胞术软件（www.Cytobank.org）分析流式细胞仪数据。DL-丁硫醚磺酰亚胺（BSO）在50μM下使用18-24小时，通过抑制γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶来降低细胞谷胱甘肽水平。谷胱甘肽水平通过GSH-Glo谷胱甘肽测定法（Promega）测量。

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基因表达谱[4]
在用青蒿琥酯（5μM）处理4小时和12小时后，使用MiRNeasy分离总RNA。微阵列分析在Illumina的HumanHT-12 v4 Expression BeadChip平台上进行。使用R中的limma包（版本3.3.1）进行差异基因表达分析。每个细胞系和时间点进行两次技术复制，并将结果取平均值。基于大于绝对值0.5的对数倍变化和小于0.01的调整后p值（FDR）来选择差异表达的基因。使用Illumina的HumanHT-12 v4 Expression BeadChip平台的注释文件，根据基因符号折叠探针。当多个探针定位到同一基因时，选择对数倍数变化最小的探针。通过默认设置的Ingenuity Pathway Analysis（IPA）软件确定了差异表达基因最丰富的途径和网络。

4～6周龄的雌性无胸腺裸鼠（BALB/c，nu/nu）购自北京实验动物中心（中国北京）。收集A2780和HO8910细胞，重悬于0.1 ml PBS中，取5 × 10⁶个细胞/0.2 ml皮下注射至小鼠左侧腹股沟。两周后，将荷瘤小鼠（A2780和HO8910肿瘤体积约为70 mm³）随机分为4组。分别每日腹腔注射青蒿琥酯（50 mg/kg），单独使用或联合顺铂（2 mg/kg），连续16天。每隔一天监测肿瘤生长情况。肿瘤体积按公式1/2a × b²计算，其中a为长径（mm），b为短径（mm）。

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本研究使用4至6周龄的雌性无胸腺裸鼠（BALB/c，nu/nu）。收集A2780和HO8910细胞，重悬于0.1 ml PBS中，取5 × 10⁶个细胞/0.2 ml，皮下注射至小鼠左侧腹股沟。两周后，将荷瘤小鼠（A2780和HO8910肿瘤体积约为70 mm³）随机分为4组。每日腹腔注射青蒿琥酯，剂量为50 mg/kg，单独使用或与顺铂（2 mg/kg）联合使用，持续16天。每隔一天监测肿瘤生长情况。肿瘤体积采用公式 1/2a × b² 计算，其中 a 为长径（mm），b 为短径（mm）。[3]

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NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 小鼠为本实验室自行繁殖。预实验每组使用三只小鼠。根据结果，最终选择治疗组和对照组各 n = 10 只小鼠。将 2 × 10⁶ 个表达萤火虫荧光素酶的 BL-41 细胞 (BL-41-luc) 皮下注射到 6-10 周龄的小鼠体内。在将小鼠分为治疗组和对照组之前，于第 4 天使用 IVIS 系统测量肿瘤生长情况。为了确保各组之间无偏倚且具有可比性，根据每笼小鼠的肿瘤大小进行分组。将青蒿琥酯溶于乙醇/二甲基亚砜（1:1）混合溶液中，配制成 370 mg/ml 的溶液，注射前用 5% 碳酸钠溶液稀释 10 倍。从第 4 天起，每天给小鼠腹腔注射 200 mg/kg 青蒿琥酯或对照溶液（5% 乙醇和 5% 二甲基亚砜的碳酸钠溶液）。治疗持续 12 天，停药 2 天，然后每天继续治疗，直至第 19 天（共注射 17 次）。定期通过生物发光成像监测肿瘤生长情况。小鼠腹腔注射 150 mg/kg d-荧光素，10 分钟后进行成像。成像过程中使用吸入麻醉剂七氟烷，并辅以氧气和一氧化二氮。使用卡尺测量来确定肿瘤大小是否在一个方向上达到最大 2 厘米或 2 立方厘米，这是安乐死的限度。[4]

吸收、分布和排泄
青蒿琥酯的血药峰浓度（Cmax）为3.3µg/mL，其活性代谢物DHA的血药峰浓度（Cmax）为3.1µg/mL。青蒿琥酯的AUC为0.7µgh/mL，DHA的AUC为3.5µgh/mL。静脉注射青蒿琥酯后，成人患者的DHA达峰时间（Tmax）为0.5-15分钟，儿童患者的Tmax为21-64分钟。肌注青蒿琥酯的Tmax为8-12分钟。6个月以下婴儿由于UGT代谢途径尚未发育成熟，其AUC值较高。
青蒿琥酯在人体内的主要消除途径尚不明确。
在大鼠中，青蒿琥酯的剂量有56.1%经尿液排出，38.5%经粪便排出。
青蒿琥酯的分布容积为68.5升，而双氢青蒿素的分布容积为59.7升。
青蒿琥酯的清除率为180升/小时，而双氢青蒿素的清除率为32.3升/小时。
青蒿琥酯在人体给药后迅速水解为其主要活性代谢物双氢青蒿素。青蒿琥酯的药代动力学特征是显著的个体间差异，健康志愿者和感染患者之间以及不同疾病严重程度的患者之间存在显著差异。
青蒿琥酯和双氢青蒿素的药代动力学特征是显著的个体间差异。青蒿琥酯和双氢青蒿素的药代动力学参数在健康志愿者和感染患者之间，以及不同疾病严重程度的患者之间均存在显著差异。由于药物会选择性地在受寄生虫感染的红细胞中蓄积，因此应谨慎解读来自游离血浆中青蒿琥酯或双氢青蒿素浓度的药代动力学数据。体外实验表明，双氢青蒿素在受感染红细胞中的蓄积浓度比血浆中的浓度高约300倍。
本研究在20名健康泰国志愿者（10名男性，10名女性）中，考察了口服双氢青蒿素（DHA）2 mg/kg和4 mg/kg体重以及口服青蒿琥酯（AS）4 mg/kg体重后的药代动力学。所有制剂的耐受性总体良好。口服DHA可从胃肠道迅速吸收，但个体间差异显著。两种剂量水平下DHA的药代动力学特征相似，且呈线性关系。基于模型无关的药代动力学分析，分别给予2 mg/kg和4 mg/kg体重剂量后1.5小时，DHA的Cmax中位数（95% CI）分别为181 (120-306) ng/ml和360 (181-658) ng/ml。相应的 AUC_0-∞、t_1/2z、CL/f 和 V_z/f 值分别为 377 (199-1,128) vs 907 (324-2,289) ng·hr/mL、0.96 (0.70-1.81) vs 1.2 (0.75-1.44) 小时、7.7 (4.3-12.3) vs 6.6 (3.1-10.1) L/kg 和 90.5 (28.6-178.2) vs 6.6 (3.1-10.1) mL/min/kg（剂量分别为 2 mg/kg 和 4 mg/kg）。口服 AS 可迅速生物转化为 DHA，在给药后 15 分钟即可在血浆中检测到 DHA。服用 4 mg/kg 剂量后，Cmax 的中位值（95% CI）为 519 (236-284) ng/mL，达到时间为 0.7 (0.25-1.5) 小时。AUC0-∞ 和 t1/2z 分别为 657 (362-2,079) ng·hr/mL 和 0.74 (0.34-1.42) 小时。口服青蒿琥酯后 DHA 的 Cmax 显著高于直肠给药，但在相同剂量水平（4 mg/kg 体重）下，口服 DHA 的总系统暴露量更高。DHA 的药代动力学无显著性别差异。本研究旨在确定健康志愿者单次口服和直肠给药 200 mg 青蒿琥酯的药代动力学参数，并提出合理的直肠给药方案。本研究采用随机、开放、交叉设计，纳入12名健康志愿者……由于青蒿琥酯从血浆中迅速清除，药代动力学参数来源于主要代谢物α-二氢青蒿素的数据。口服青蒿琥酯后，二氢青蒿素的AUC(0-∞)（P<0.05；95%置信区间(CI) -1168.73, -667.61 ng·hr/mL⁻¹）和Cmax（P<0.05；95% CI -419.73, -171.44 ng/mL⁻¹）显著高于直肠给药青蒿琥酯，且tmax（P<0.05；95% CI -0.97, -0.10 hr）显著缩短。两种给药途径的消除半衰期无统计学显著差异（P>0.05；95% CI -0.14, 0.53 小时）。直肠给药的青蒿琥酯相对生物利用度为[平均值（变异系数）54.9 (24.8%) %]。
有关青蒿琥酯（共 8 项）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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代谢/代谢物
青蒿琥酯经血浆酯酶迅速代谢为双氢青蒿素 (DHA)。DHA 经 UGT1A9 和 UGT2B7 葡萄糖醛酸化生成 DHA-葡萄糖醛酸苷。DHA-葡萄糖醛酸苷可通过次要代谢途径生成 DHA-葡萄糖醛酸苷的呋喃乙酸衍生物。 CYP2A6 可能对青蒿琥酯的代谢有轻微贡献。
青蒿琥酯在人体内给药后，迅速水解为其主要活性代谢物双氢青蒿素。体外人肝微粒体研究和临床研究的数据表明，DHA-葡萄糖醛酸苷（10位）是DHA的主要II期代谢物，尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶同工酶1A1、1A8-9或2B7可能是主要的结合酶。
大鼠口服青蒿素后，药物被完全且迅速吸收。然而，即使剂量达到300 mg/kg，血浆药物浓度也极低。肝脏是主要的失活部位。肌注青蒿素后，检测到显著且更持久的血浆药物浓度。静脉注射青蒿素后，药物能够穿过血脑屏障和血胎屏障。无论给药途径如何，48 小时内尿液或粪便中均未检测到多少未代谢的青蒿素。在人体给药后鉴定出的代谢物包括脱氧青蒿素、脱氧二氢青蒿素和 9,10-二羟基脱氧青蒿素。
青蒿琥酯已知的人体代谢物包括 (1S,4S,5R,8S,9R,10R,12R,13R)-1,5,9-三甲基-11,14,15,16-四氧杂四环[10.3.1.04,13.08,13]十六烷-10-醇。

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生物半衰期
青蒿琥酯的消除半衰期为 0.3 小时，范围为 0.1-1.8 小时。二氢青蒿素的消除半衰期为 1.3 小时，范围为 0.9-2.9 小时。肌注给药后，儿童的半衰期为 48 分钟，成人的半衰期为 41 分钟。
在志愿者研究中，青蒿琥酯通过生物转化为双氢青蒿素而迅速清除（几分钟内），双氢青蒿素的半衰期约为 45 分钟。

肝毒性
在美国一项针对104名重症疟疾患者的开放标签研究中，27%的受试者出现ALT升高，49%出现AST升高，17%出现胆红素升高。然而，这些异常均归因于急性重症疟疾患者常见的溶血和肝脏受累。所有升高均与药物引起的肝损伤无关。自青蒿琥酯注射剂获准在美国上市并广泛用于临床以来，尚未有因使用青蒿琥酯而导致急性肝损伤的报告。
可能性评分：E（不太可能是临床上明显的肝损伤的原因）。

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妊娠和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
有限的信息表明，母亲口服200毫克青蒿琥酯后，乳汁中的药物浓度较低，预计不会对母乳喂养的婴儿造成任何不良影响，尤其是对于2个月以上的婴儿。给药后6小时内停止哺乳可显著降低婴儿的药物摄入量。
通常情况下，哺乳期妇女乳汁中分泌的抗疟疾药物量非常少。由于母乳中抗疟药物的含量不足以提供足够的疟疾保护，因此需要化学预防的婴儿必须接受推荐剂量的抗疟药物。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
接受双氢青蒿素和哌喹治疗疟疾的母乳喂养婴儿比接受这些药物的非母乳喂养婴儿呕吐的频率更高。这一发现是否适用于通过母乳摄入双氢青蒿素的婴儿尚未进行研究。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白质结合
青蒿琥酯及其代谢物DHA在血浆中的蛋白质结合率约为93%。青蒿琥酯可与血清白蛋白结合。

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相互作用
体外和体内分别测定了青蒿素与其他抗疟药物联合使用对恶性疟原虫和伯氏疟原虫的活性。体外和体内实验均表明，青蒿素与甲氟喹联用具有协同作用，而与乙胺嘧啶联用则具有拮抗作用。体内实验还表明，青蒿素与其他抗疟药物（磺胺嘧啶、磺胺多辛、磺胺多辛-乙胺嘧啶、环胍和氨苯砜）联用也具有拮抗作用。
有人担心，由于使用解热药会延缓寄生虫清除，因此可能会削弱宿主对疟疾的防御能力。然而，这似乎是由于细胞黏附延迟所致，而细胞黏附延迟可能是有益的。因此，没有理由在疟疾治疗中停用解热药。对乙酰氨基酚（扑热息痛）和布洛芬是退烧的首选药物。

[1]. Artesunate as an Anti-Cancer Agent Targets Stat-3 and Favorably Suppresses Hepatocellular Carcinoma. Curr Top Med Chem. 2016;16(22):2453-63.
[2]. Supergenomic network compression and the discovery of EXP1 as a glutathione transferase inhibited by artesunate. Cell. 2014 Aug 14;158(4):916-928.
[3]. Artesunate sensitizes ovarian cancer cells to cisplatin by downregulating RAD51. Cancer Biol Ther. 2015;16(10):1548-56.
[4]. Artesunate shows potent anti-tumor activity in B-cell lymphoma. J Hematol Oncol. 2018 Feb 20;11:23.

治疗用途
治疗类别：抗疟药
青蒿琥酯直肠胶囊适用于无法口服药物且无法进行肠外治疗的急性疟疾患者的初始治疗。
为了应对恶性疟原虫对单一疗法的耐药性威胁，并改善治疗效果，世界卫生组织目前推荐使用联合抗疟药治疗恶性疟疾。目前推荐的青蒿素类复方药物（ACT）如下（按字母顺序排列）：AS+AQ（青蒿琥酯+阿莫地喹）、AS+MQ（青蒿琥酯+甲氟喹）、AS+SP（青蒿琥酯+磺胺多辛-乙胺嘧啶）。
青蒿素及其衍生物（青蒿琥酯、蒿甲醚、蒿甲醚、双氢青蒿素）可快速清除寄生虫血症并迅速缓解症状。在每个无性繁殖周期中，它们可将寄生虫数量减少约 10,000 倍，这比其他现有的抗疟药（每个周期可减少寄生虫数量 100 至 1000 倍）更有效。青蒿素及其衍生物代谢迅速。当与代谢迅速的化合物（四环素类、克林霉素）联合使用时，需要 7 天的青蒿素类化合物疗程；但当与代谢缓慢的抗疟药联合使用时，较短的疗程（3 天）即可有效。它们优于单一疗法的证据已得到充分证实。
有关青蒿素酸（共 14 种）的更多治疗用途（完整）数据，请访问 HSDB 记录页面。

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药物警告
对于既往服用青蒿素类化合物后出现过敏反应的患者，或在治疗期间出现荨麻疹的患者，不应使用青蒿素类化合物。有青蒿素类药物过敏史的患者应被告知不要再服用任何青蒿素衍生物。
尚未评估青蒿琥酯直肠胶囊作为疟疾单一疗法的疗效；因此，所有最初接受青蒿琥酯直肠胶囊治疗的患者均应立即转诊至最近的医疗机构进行评估，该机构能够提供完整的疟疾治愈疗程。
青蒿琥酯的不良反应包括苦味、注射部位轻微疼痛、心动过缓、阵发性室性早搏、不完全性右束支传导阻滞、一度房室传导阻滞和荨麻疹。
……最常见的报告不良反应（发生率<1%）是轻度胃肠道反应（恶心、呕吐、腹泻、腹痛）。
有关青蒿琥酯（共25条）的更多药物警告（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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药效学
青蒿琥酯是青蒿素衍生物，代谢为DHA，DHA会产生自由基以抑制正常功能。疟原虫的治疗药物。由于其半衰期短，作用持续时间也短，治疗指数中等。应告知患者治疗后发生溶血性贫血和超敏反应的风险。

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生物学的核心问题之一是识别基因功能。一种方法是通过大型超基因组网络推断基因间相互作用和祖先关系的功能；然而，此类分析的计算量可能非常巨大。我们在此证明，这些生物网络是可压缩的。通过消除冗余的进化关系，可以显著缩小这些网络，而且由于这些网络中可压缩元素的数量呈线性增长，而不是像其他复杂网络那样呈指数增长，因此该过程非常高效。压缩使得全局网络分析能够利用数百个相互连接的基因组进行计算，并生成功能预测。作为示例，我们证明了恶性疟原虫必需但功能尚未明确的抗原EXP1是一种膜谷胱甘肽S-转移酶。 EXP1能有效降解细胞毒性血红素，可被青蒿琥酯强效抑制，并且与药物胁迫下疟原虫的青蒿琥酯代谢和敏感性相关。这些数据表明EXP1参与了一线抗疟药物的作用机制。[2]青蒿琥酯是一种半合成的青蒿素衍生物，最初用于治疗疟疾，但最近的研究表明其具有抗肿瘤特性。青蒿琥酯对癌细胞的细胞毒性作用之一是通过诱导氧化应激和DNA双链断裂（DSB）介导的。我们在此报告，除了诱导氧化应激和DSB外，青蒿琥酯还可以下调RAD51并损害卵巢癌细胞中的DSB修复。我们观察到，在青蒿琥酯处理的细胞中，RAD51聚集体的形成和同源重组修复（HRR）显著减少。因此，青蒿琥酯和顺铂协同诱导DNA双链断裂（DSB），并抑制卵巢癌细胞的克隆形成。异位表达RAD51能够挽救青蒿琥酯增强的化疗敏感性，证实青蒿琥酯的化疗增敏作用至少部分是通过下调RAD51介导的。我们的结果表明，青蒿琥酯可以损害卵巢癌细胞中DSB的修复，因此可作为化疗增敏剂。[3]

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尽管化疗联合免疫疗法已显著改善了大多数B细胞淋巴瘤患者的总体生存率，但复发和难治性疾病仍然是一个挑战。抗疟疾药物青蒿琥酯此前已被证实可抑制某些癌症类型的生长，并被测试作为B细胞淋巴瘤的一种新的治疗选择。方法：我们将青蒿琥酯纳入B淋巴瘤细胞系的癌症敏感性药物筛选中。本研究在体外（使用18种代表不同组织学类型的B细胞淋巴瘤细胞系）和体内（使用NSG小鼠构建的侵袭性B细胞淋巴瘤异种移植模型）测试了青蒿琥酯作为单药的临床前特性。通过功能分析、基因表达谱分析和蛋白质表达分析，对青蒿琥酯处理的B细胞淋巴瘤细胞系进行了分析，以阐明其作用机制。结果：药物筛选发现青蒿琥酯是一种高效的抗淋巴瘤药物。青蒿琥酯对大多数B细胞淋巴瘤细胞具有显著的生长抑制作用，其IC50值与青蒿琥酯治疗的疟疾患者血清中的浓度相当，且对正常B细胞无影响。在异种移植模型中，青蒿琥酯显著抑制了高度侵袭性肿瘤的生长。基因表达分析发现内质网（ER）应激和未折叠蛋白反应是受影响最显著的通路，青蒿琥酯诱导的ER应激标志物ATF-4和DDIT3的表达在恶性B细胞中特异性上调，但在正常B细胞中未见上调。此外，青蒿琥酯显著抑制了细胞的整体代谢，影响了呼吸作用和糖酵解。结论：青蒿琥酯在体外对多种B细胞淋巴瘤细胞系表现出强效的凋亡诱导作用，并在体内表现出显著的抗淋巴瘤活性，提示其可能是一种治疗B细胞淋巴瘤的有效药物。[4]

C19H28O8

384.42

384.178

C, 59.36; H, 7.34; O, 33.29

88495-63-0

Artesunate-d3;1316303-44-2;Artesunate-d4;1316753-15-7; 82864-68-4 (Sodium salt)

6917864

Fine white crystalline powder

1.3±0.1 g/cm3

507.1±50.0 °C at 760 mmHg

132-135ºC

175.6±23.6 °C

0.0±2.8 mmHg at 25°C

1.544

2.94

100.52

1

8

5

27

623

8

C[C@H]1[C@H](OC(=O)CCC(=O)O)O[C@@H]2O[C@]3(CC[C@@H]4[C@@]2(OO3)[C@H]1CC[C@H]4C)C

FIHJKUPKCHIPAT-AHIGJZGOSA-N

InChI=1S/C19H28O8/c1-10-4-5-13-11(2)16(23-15(22)7-6-14(20)21)24-17-19(13)12(10)8-9-18(3,25-17)26-27-19/h10-13,16-17H,4-9H2,1-3H3,(H,20,21)/t10-,11-,12+,13+,16-,17-,18-,19-/m1/s1

4-oxo-4-(((3R,5aS,6R,8aS,9R,10S,12R,12aR)-3,6,9-trimethyldecahydro-12H-3,12-epoxy[1,2]dioxepino[4,3-i]isochromen-10-yl)oxy)butanoic acid

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。