规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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5mg |
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10mg |
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25mg |
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50mg |
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100mg |
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250mg |
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500mg |
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Other Sizes |
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体外研究 (In Vitro) |
体外活性:AT9283 通过抑制 HCT116 细胞中 Aurora B 激酶的活性,产生明显的多倍体表型,IC50 为 30 nM。此外,AT9283 还对 HCT116 集落形成产生有效抑制。激酶测定:Aurora A 和 B 的测定以 DELFIA 格式进行。将 Aurora A 酶与 AT9283 和 3 μM 跨潮底物 (生物素-CGPKGPGRRGRRRTSSFAEG) 在 10 mM MOPS、pH 7、0.1 mg/mL BSA、0.001% Brij-35、0.5% 甘油、0.2 mM EDTA、10 mM MgCl2 中孵育、0.01% β-巯基乙醇、15 μM ATP 和 2.5% DMSO。 Aurora B 酶与 AT9283、3 μM 上述底物在 25 mM Tris(pH 8.5)、5 mM MgCl2、0.1 mg/mL BSA、0.025% Tween-20、1 mM DTT、15 μM ATP 和 2.5% DMSO 中一起孵育。 Aurora A 和 Aurora B 的反应分别进行 60 分钟和 45-90 分钟,然后用 EDTA 猝灭。然后将反应混合物转移至中性抗生物素蛋白包被的板中,并使用时间分辨荧光(激发,337 nm;发射,620 nm)通过磷酸特异性抗体和铕标记二抗对磷酸化肽进行定量。对照化合物的 IC50 值为 92 nM(Aurora A 测定)和 17 nM(Aurora B)。细胞测定:HCT 116 细胞在 DMEM + 10% FBS + GLUTAMAX I 中培养。将黑色 96 孔平底(透明)组织培养处理板接种到 200 μL 培养基中,并在 37°C 下孵育约 16 小时。空气中含有 5% CO2 的潮湿气氛。用九种不同浓度的测试化合物(1 nM 至 10 μM,加上 DMSO 载体对照)处理细胞,然后孵育 72 小时。然后记录细胞的多倍体形态学观察结果。报告了产生独特的多倍体表型所需的 AT9283 浓度。将细胞以 75−100 个细胞/mL 相关培养基的浓度接种到 6 或 24 孔组织培养板上,并允许恢复 16 小时。将测试化合物(0.1 nM 至 10 μM 的 11 种浓度)或载体对照 (DMSO) 添加到重复孔中,得到 0.1% 的最终 DMSO 浓度。添加化合物后,菌落可生长 10 至 14 天,以实现最佳的离散菌落计数。将集落固定在 2 mL Carnoys 固定剂(25% 乙酸、75% MeOH)中,并在 2 mL 0.4% w/v 结晶紫中染色。计算每个孔中的菌落数。使用 Prism Graphpad 软件通过 S 形剂量反应(可变斜率)IC50 曲线计算 IC50 值。
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体内研究 (In Vivo) |
在 HCT116 人类结肠癌异种移植小鼠中,AT9283 治疗(15 mg/kg 和 20 mg/kg)16 天可分别显着抑制 67% 和 76% 的肿瘤生长。此外,与血浆(0.5 小时)相比,AT9283 在肿瘤中的半衰期(2.5 小时)也显着延长,并且在小鼠中的口服生物利用度适中(Fp.o. = 24%)。
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动物实验 |
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参考文献 |
J Med Chem.2009 Jan 22;52(2):379-88.
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分子式 |
C22H29N7O5
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分子量 |
471.52
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CAS号 |
896466-76-5
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相关CAS号 |
AT9283;896466-04-9
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SMILES |
O=C(NC1CC1)NC2=CNN=C2C=3NC4=C(N3)C=C(C=C4)CN5CCOCC5.C[C@H](O)C(O)=O
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别名 |
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存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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溶解度 (体外) |
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溶解度 (体内) |
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 2.1208 mL | 10.6040 mL | 21.2080 mL | |
5 mM | 0.4242 mL | 2.1208 mL | 4.2416 mL | |
10 mM | 0.2121 mL | 1.0604 mL | 2.1208 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。