| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Akt2 (IC50 = 17 nM); p70S6K (IC50 = 85 nM); Akt1 (IC50 = 32 nM); Akt3 (IC50 = 47 nM); PKA (IC50 = 20 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
AT7867 对 AKT2 的抑制具有 ATP 竞争性，Ki 为 18nM。尽管 AT7867 对其他激酶亚家族的激酶表现出明显的选择性窗口，但它也对结构相关的 AGC 激酶 p70S6K 和 PKA 表现出有效的活性。体外生长抑制研究表明，AT7867 可抑制多种人类癌细胞系的增殖。 AT7867 似乎在所测试的两种前列腺系中效果最差（IC50 值范围为 10-12 M），而在抑制 MES-SA 子宫、MDA-MB-468 和 MCF-7 乳房、HCT116 和 HT29 结肠中的增殖方面最有效线（IC50 值范围为 0.9–3 M）[1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
以 20 mg/kg 口服给药后，AT7867 从血浆中的消除似乎与静脉注射后观察到的情况相似。口服 20 mg/kg AT7867 后，血浆水平保持在 0.5 M 以上至少 6 小时。假设静脉给药后出现线性药代动力学，经口服途径的生物利用度计算为 44%。因此，该模型用于体内药效学（PD）生物标志物研究。经过药代动力学和耐受性研究后，对患有 MES-SA 肿瘤的无胸腺小鼠给予 AT7867 剂量（90 mg/kg po 或 20 mg/kg ip），并随时间跟踪肿瘤中 GSK3 和 S6RP 的磷酸化状态。 AT7867 处理后 2 小时和 6 小时，观察到两种途径活性标志物磷酸化的明确抑制。 GSK3 和 S6RP 的总水平在 24 小时内显着下降[1]。
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| 酶活实验 |
AKT2、PKA、p70S6K 和 CDK2/cyclinA 激酶测定均使用放射滤光片结合形式进行。测定反应是在化合物存在的情况下进行的。对于 AKT2，将 AKT2 酶与 25 mM AKTide-2T 肽 (HARKRERTYSFGHHA)、20 mM MOPS、pH 7.2、5 mM EDTA、15 mM MgCl2、1 mM 原钒酸钠、1 mM DTT、10 g/mL 一起孵育 4 小时BSA 和 30 mM ATP (1.16 Ci/mmol)。对于 PKA，将 50 mM 肽 (GRTGRRNSI) 和 PKA 酶在含有 2 mM MOPS（pH 7.2）、25 mM 甘油磷酸盐、5 mM EDTA、15 mM MgCl2、1 mM 原钒酸盐、1 mM 的溶液中孵育 20 分钟DTT 和 40 mM ATP (0.88 Ci/mmol)。对于 p70S6K，酶和 25 M 肽底物 (AKRRRLSSLRA) 在 10 mM MOPS、pH 7、0.2 mM EDTA、1 mM MgCl2、0.01% β-巯基乙醇、0.1 mg/mL BSA、0.001% Brij- 中孵育 60 分钟35、0.5% 甘油和 15μM ATP (2.3 Ci/mmol)。对于 CDK2，将 CDK2/cyclinA 酶和 0.12 g/ml 组蛋白 H1 在 20 mM MOPS、pH 7.2、25 mM β-甘油磷酸、5 mM EDTA、15 mM MgCl2、1 mM 原钒酸钠、1 mM DTT 中孵育 4 小时、0.1 mg/ml BSA 和 45 μM ATP (0.78 Ci/mmol) 4 小时。正磷酸用于终止测定反应，然后将终止的反应混合物转移至 Millipore MAPH 过滤板并进行过滤。然后洗涤板，添加闪烁剂并通过 Packard TopCount 上的闪烁计数测量放射性。 IC50 值是使用 GraphPad Prism 软件根据重复曲线计算得出的。进行 AKT1 和 3 酶测定，同时进行所有其他酶测定[1]。
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| 细胞实验 |
在 AT7867 处理之前，细胞在 96 孔微孔板中的补充有 10% FBS 的培养基中以每孔 16,000 个细胞的密度生长 24 小时。细胞用 AT7867 或载体对照补充一小时。然后将磷酸化 GSK3（丝氨酸 9）抗体与细胞孵育过夜，然后用 3% 多聚甲醛、0.25% 戊二醛和 0.25% Triton-X100 固定，洗涤并用含 0.1% Tris 缓冲盐水的 5% 牛奶封闭。 Tween-20（TBST）。添加二抗并清洗板后，使用 DELFIA 试剂增强信号。使用非线性回归分析和 S 型剂量反应（可变斜率）方程，将铕计数标准化为蛋白质浓度，并确定每种抑制剂的 IC50 值[1]。
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| 动物实验 |
Mice: Male athymic BALB/c mice (nu/nu) are used. BALB/c mice receive a single dose of AT7867 at 5 mg/kg intravenously (i.v.) and 20 mg/kg orally (p.o.). At each of the following time points—0.083, 0.167, 0.33, 0.67, 1, 2, 4, 6, 16 and 24 hours after an intravenous dose—as well as at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 6 and 24 hours after an oral dose—plasma samples are taken from duplicate animals. Mice are bled via cardiac puncture, and after all blood samples are centrifuged to obtain plasma, the plasma is frozen at -20°C until analysis. All plasma samples are prepared for bioanalysis using acetonitrile-containing internal standard protein precipitation. A standard calibration line made with AT7867 is used to quantify sample extracts, and an inhibitor-specific liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) technique is used for this. The parameters of pharmacokinetics are established.
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| 参考文献 |
| 分子式 |
C20H20N3CL
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|---|---|
| 分子量 |
337.8459
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| 精确质量 |
337.13458
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| 元素分析 |
C, 71.10; H, 5.97; Cl, 10.49; N, 12.44
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| CAS号 |
857531-00-1
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| 相关CAS号 |
AT7867 dihydrochloride;1431697-86-7
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| 外观&性状 |
Solid powder
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| SMILES |
ClC1=CC=C(C2(C3=CC=C(C4=CNN=C4)C=C3)CCNCC2)C=C1
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| InChi Key |
LZMOSYUFVYJEPY-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H20ClN3/c21-19-7-5-18(6-8-19)20(9-11-22-12-10-20)17-3-1-15(2-4-17)16-13-23-24-14-16/h1-8,13-14,22H,9-12H2,(H,23,24)
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| 化学名 |
4-(4-(1H-pyrazol-4-yl)phenyl)-4-(4-chlorophenyl)piperidine
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| 别名 |
AT7867 dihydrochloride; AT7867 hydrochloride; AT7867 HCl; AT7867; AT 7867; AT-7867
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
DMSO: ~68 mg/mL (201.3 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: 5 mg/mL (14.8 mM) |
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| 溶解度 (体内) |
Solubility in Formulation 1: ≥ 1 mg/mL (2.96 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 10.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 400 μL of PEG300 and mix evenly; then add 50 μL of Tween-80 to the above solution and mix evenly; then add 450 μL of normal saline to adjust the volume to 1 mL. Preparation of saline: Dissolve 0.9 g of sodium chloride in 100 mL ddH₂ O to obtain a clear solution. Solubility in Formulation 2: ≥ 1 mg/mL (2.96 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 10.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of 20% SBE-β-CD physiological saline solution and mix evenly. Preparation of 20% SBE-β-CD in Saline (4°C，1 week): Dissolve 2 g SBE-β-CD in 10 mL saline to obtain a clear solution. View More
Solubility in Formulation 3: ≥ 1 mg/mL (2.96 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution. Solubility in Formulation 4: 15% Captisol, pH 9: 10mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9599 mL | 14.7995 mL | 29.5989 mL | |
| 5 mM | 0.5920 mL | 2.9599 mL | 5.9198 mL | |
| 10 mM | 0.2960 mL | 1.4799 mL | 2.9599 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Trichloroacetic acid
N1,N8-Diacetylspermidine hydrochloride
Akt/ROCK-IN-1
CTX-0294885 hydrochloride
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