| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PAR2 ( IC50 = 23 nM )
AZ3451 targets protease-activated receptor 2 (PAR2) (binds to a remote allosteric site outside the helical bundle) [1] AZ3451 targets protease-activated receptor 2 (PAR2) (functions as a PAR2 antagonist) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
多层抗氧化剂 AZ3451 与 AZ3451 与 2 螺旋束外的远程变构位点结合。 AZ3451 具有高度亲脂性，这与膜内结合袋的新颖性相一致。 多层抗氧化剂结合可阻止受体激活信号和转导所需的结构重排[1]。
- AZ3451 是PAR2拮抗剂，结合于PAR2螺旋束外的远程变构位点，阻止受体激活和信号传导所需的结构重排[1] - AZ3451 具有慢结合动力学特征，这一特性使其适合与PAR2的拴系配体竞争结合[1] - 在IL-1β刺激的软骨细胞中，AZ3451 可降低炎症介质（iNOS、COX2）和软骨降解酶（MMP1、MMP13、ADAMTS5）的表达，同时升高软骨基质蛋白（聚集蛋白聚糖、II型胶原蛋白）和软骨形成转录因子Sox9的表达[2] - AZ3451 可抑制IL-1β诱导的软骨细胞早衰，表现为p16INK4a蛋白表达降低，SA-β半乳糖苷酶阳性细胞数量减少[2] - AZ3451 可激活IL-1β刺激的软骨细胞自噬，升高自噬相关蛋白（Atg5、Atg7、Atg12、Beclin1、LC3）的表达，增加mRFP-GFP-LC3荧光斑点数量[2] - AZ3451 可减轻IL-1β诱导的软骨细胞凋亡，表现为膜联蛋白V-FITC/PI双染色阳性细胞率降低、TUNEL阳性细胞减少，Bcl-2蛋白表达升高，BAX、细胞色素C、剪切型半胱天冬酶3蛋白表达降低，线粒体膜电位恢复[2] - AZ3451 可抑制IL-1β诱导的P38/MAPK、NF-κB、PI3K/AKT/mTOR通路激活，表现为通路关键蛋白磷酸化水平降低，P65核转位受抑[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在大鼠骨关节炎（OA）模型中，关节内注射AZ3451可以减少手术引起的软骨退化。[/2]
- 在手术诱导的大鼠骨关节炎（OA）模型中，关节内注射AZ3451 可改善软骨降解，H&E、甲苯胺蓝、番红O-固绿染色结果显示软骨形态改善，OARIS评分降低[2] - AZ3451 可降低OA大鼠软骨组织中MMP13和剪切型半胱天冬酶3的表达，升高Beclin1的表达，减少软骨组织中TUNEL阳性凋亡细胞数量[2] |
| 酶活实验 |
- X射线晶体学实验：将PAR2与AZ3451 形成复合物并进行结晶，通过分析晶体结构确定结合位点。结果显示，AZ3451 结合于PAR2螺旋束外的远程变构位点，与拴系配体的正构位点不同[1]
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| 细胞实验 |
1周龄Sprague-Dawley大鼠膝关节软骨组织是原代大鼠软骨细胞的来源。使用溶解在 Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) 培养基中的 0.2% 胰蛋白酶和 0.25% 胶原酶 II 对软骨片进行连续消化。收集游离的软骨细胞并在用 10% FBS、100 单位/ml 青霉素和 100 μg/ml 链霉素增强的 DMEM 中孵育。在存在或不存在 10 ng/mL IL-1β 的情况下用 10 μM AZ3451 处理细胞直至约 80% 汇合。在我们的实验中，我们利用第 1-3 代的软骨细胞来防止表型损失。
- 软骨细胞培养与处理：分离原代软骨细胞，用IL-1β（10 ng/mL）刺激诱导OA样改变，随后用不同浓度的AZ3451 处理特定时长[2] - Western blot实验：制备细胞裂解液，检测炎症介质（iNOS、COX2）、软骨基质相关蛋白（聚集蛋白聚糖、II型胶原蛋白、Sox9）、软骨降解酶（MMP1、MMP13、ADAMTS5）、衰老相关蛋白（p16INK4a）、自噬相关蛋白（Atg5、Atg7、Atg12、Beclin1、LC3）、凋亡相关蛋白（Bcl-2、BAX、细胞色素C、剪切型半胱天冬酶3）及通路相关蛋白（P38、磷酸化P38、PI3K、磷酸化PI3K、AKT、磷酸化AKT、mTOR、磷酸化mTOR、NF-κB P65、磷酸化NF-κB P65）的表达水平[2] - SA-β半乳糖苷酶染色实验：用SA-β半乳糖苷酶染色液对软骨细胞进行染色，识别衰老细胞并计数阳性细胞数量[2] - 凋亡检测实验：采用膜联蛋白V-FITC/PI双染色流式细胞术检测凋亡细胞；通过TUNEL染色荧光显微镜下观察凋亡细胞[2] - 自噬检测实验：将mRFP-GFP-LC3腺病毒转染至软骨细胞，荧光显微镜下观察并定量自噬体（黄色斑点）和自噬溶酶体（红色斑点）数量[2] - 免疫荧光实验：固定软骨细胞后，用抗P65抗体染色，荧光显微镜下观察P65的核转位情况[2] |
| 动物实验 |
male 8-week-old Sprague–Dawley rats
100 μl (50 μg/ml) intra-articular injection - Rat OA model establishment: Male Sprague-Dawley rats were subjected to surgery to induce OA (anterior cruciate ligament transection and medial meniscectomy). Sham-operated rats served as controls [2] - Drug administration: OA rats were randomly divided into model group and AZ3451 treatment group. AZ3451 was administered via intra-articular injection once a week for 8 weeks; the model group received vehicle injection [2] - Tissue collection and detection: After 8 weeks of treatment, rats were euthanized, and knee joint tissues were collected. Histological staining (H&E, Toluidine blue, Safranin O/Fast Green) was performed to evaluate cartilage morphology; immunohistochemical staining was used to detect the expression of MMP13, Cleaved-caspase 3, and Beclin1 in cartilage; TUNEL staining was performed to detect apoptotic cells in cartilage [2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AZ3451 is a member of the class of benzimidazoles that is 1H-benzimidazole substituted by (1S)-1-cyclohexylethyl, 6-bromo-1,3-benzodioxol-5-yl, and 4-(cyanoanilino)acyl groups at positions 1, 2 and 5, respectively. It is an allosteric modulator of protease-activated receptor 2 (IC50 = 23 nM) and exhibits anti-osteoarthritis properties. It has a role as an anti-inflammatory agent, a PAR2 negative allosteric modulator and an autophagy inducer. It is a secondary carboxamide, a nitrile, a member of benzimidazoles, a member of benzodioxoles and an organobromine compound.
- AZ3451 is a novel allosteric antagonist of PAR2, which is a G-protein-coupled receptor involved in inflammation and various diseases [1][2] - The slow binding kinetics of AZ3451 makes it an attractive candidate for competing against the tethered ligand of PAR2 [1] - AZ3451 exerts protective effects on chondrocytes in vitro by inhibiting inflammation, senescence, and apoptosis, and activating autophagy, which is mediated by the P38/MAPK, NF-κB, and PI3K/AKT/mTOR pathways [2] - AZ3451 shows therapeutic potential for osteoarthritis, as demonstrated by its ability to ameliorate cartilage destruction in a rat OA model [2] |
| 分子式 |
C30H27BRN4O3
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|---|---|
| 分子量 |
571.464386224747
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| 精确质量 |
570.13
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| 元素分析 |
C, 63.05; H, 4.76; Br, 13.98; N, 9.80; O, 8.40
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| CAS号 |
2100284-59-9
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| PubChem CID |
126961335
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| 外观&性状 |
White to light brown solid powder
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| LogP |
6.9
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| tPSA |
89.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
38
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| 分子复杂度/Complexity |
882
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
C[C@@H](C1CCCCC1)N2C3=C(C=C(C=C3)C(=O)NC4=CC=C(C=C4)C#N)N=C2C5=CC6=C(C=C5Br)OCO6
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| InChi Key |
FJAOGFGHTPYADT-SFHVURJKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H27BrN4O3/c1-18(20-5-3-2-4-6-20)35-26-12-9-21(30(36)33-22-10-7-19(16-32)8-11-22)13-25(26)34-29(35)23-14-27-28(15-24(23)31)38-17-37-27/h7-15,18,20H,2-6,17H2,1H3,(H,33,36)/t18-/m0/s1
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| 化学名 |
2-(6-bromo-1,3-benzodioxol-5-yl)-N-(4-cyanophenyl)-1-[(1S)-1-cyclohexylethyl]benzimidazole-5-carboxamide
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| 别名 |
AZ-3451; AZ3451; AZ 3451
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~175.0 mM)
Ethanol: ~100 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (3.64 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7499 mL | 8.7495 mL | 17.4990 mL | |
| 5 mM | 0.3500 mL | 1.7499 mL | 3.4998 mL | |
| 10 mM | 0.1750 mL | 0.8750 mL | 1.7499 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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PAR4 antagonist 7
P4pal10 TFA
PAR-2 antagonist 1
PAR4 antagonist 6
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