Azadirachtin 中文名称: 印木柬素

别名: azadirachtin; Azadirachtin A; 11141-17-6; Nimbicidine; NeemAzal; Nimurin; Ornazin; Azatin; 印楝素; 半齿泽兰素-5-甲醚; 印楝素 A(P); 印楝素标准品;印楝素[印楝];印楝素A标准品;卵楝素;印苦楝子素;印木柬素

目录号: V12022 纯度: ≥98%

COA 产品数据产品说明书 SDS

印楝素是一种很有前景的植物源杀虫剂，广泛用于害虫防治。

Azadirachtin CAS号: 11141-17-6
产品类别: New1

产品仅用于科学研究，不针对患者销售

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Nature 2025, 643(8070):192-200.

Nature 2024 Dec 18.

Nature 2021, 597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022: 8, eabm9427.

Nat Neurosci 2024, 27:1468-1474.

Science Adv 2025, 11(33):eadr5199.

Nat Metab 2024, 6: 1108-1127.

Cell Stem Cell 2024, 31:106-126.e13.

Nature 597, 119–125 (2021)

Cell Stem Cell 2020,26(6):845-861.e12.

Science Trans Med 2023,15(701):eadd7872.

STTT 2023,8(1):91.

Cell Reports 2023,42(4):112313

Science Trans Med 2023, 15: eadd7872.

Cancer Cell 2021,39(4):529-547.e7.

Cancer Discov 2022,12(4):1106-1127.

Immunity 2023,56(3):620-634.e11.

Immunity 2024,57:2651-2668.e12.

J Am Chem Soc 2022,144:21831-21836.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

Science Adv 2022:8,eabm9427.

Nature 2021,597(7874):119-125.

Cell 2020,183:1202-1218.e25.

PNAS Nexus 2022,1(3):pgac063.

ACS Nano 2023,17(10):9110-9125.

Biomaterial 2023 Sep16:302:122333.

产品描述
生物活性&实验参考方法
化学信息
溶解度数据
计算器
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产品描述

印楝素是一种很有前景的植物源杀虫剂，广泛用于害虫防治。 Azadirachtin 可引起昆虫 Sf9、SL-1 和 BTI-Tn-5B1-4 细胞凋亡。

生物活性&实验参考方法

靶点	Bcl-2/Bax ratio; activating Apaf-1; caspase-3
体外研究 (In Vitro)	印楝。印度楝树（Neem）是一种印度树，以其杀虫剂的活性以及几种药理特性而闻名。在已从印楝树中分离和研究的多种化合物中，印楝素（azadirachtin， AZA）被确定为主要的生物活性化合物。印楝素可以在印楝植物的不同部位找到，但在种子水平上其浓度最高。这种化合物具有相当复杂的化学结构，这证明了20多年来确定合成途径的困难，随后允许进行人工合成。印楝素被广泛用作生产生物农药的基础；然而，这种物质的其他特性也得到了认可，其中抗癌和抗疟疾的活性尤为突出。印楝素的提取方法多种多样，包括固液萃取法和高温或低温溶剂萃取法。醇基溶剂具有较高的提取率，因此优选用于从植物部位分离印楝素。为了进一步提纯，通常需要对提取物进行清理。印楝种子的印楝素含量最高，但不同批次的印楝素浓度差异很大。因此，除提取方法外，建立常规的印楝素鉴定和定量方法十分必要。以色谱为基础的技术优选用于植物基质中印楝素的检测和定量。总的来说，这一过程将保证未来商业应用配方中提取物的可重复性、安全性和有效性。[1]
酶活实验	印度楝树已经引起了相当大的研究关注，因为它含有丰富的柠檬素，具有有效的抗氧化和抗癌特性。本研究旨在通过体外抗氧化试验和体内抑制7,12-二甲基苯[a]蒽（DMBA）诱导的仓鼠颊袋癌（HBP）的作用来评估印楝柠檬素印楝素和nimbolide的化学预防潜力。印楝素和印楝内酯均表现出浓度依赖性的抗自由基清除活性和还原电位，其顺序为：印楝内酯>印楝素>抗坏血酸。印楝素和nimbolide均可通过抑制前致癌物活化和DNA氧化损伤、上调抗氧化和致癌物解毒酶以及抑制肿瘤侵袭和血管生成等多种机制抑制dba诱导的HBP癌的发展。在比较的基础上，nimbolide被发现是一种更有效的抗氧化剂和化学预防剂，并有望作为多目标预防和治疗癌症的候选剂。[3] 考虑到类维生素a在超过500个参与细胞周期和生长停滞的基因调控中的作用，详细了解其机制及其调控对治疗是有用的。药用植物印度楝树（印楝）的提取物用于治疗几种疾病，特别是具有抗炎、止痒、杀精、抗癌和杀虫活性。本文详细论证了印楝提取物活性成分印楝素调控视黄酸介导的细胞信号转导的机制。印楝素抑制所有反式维甲酸（ATRA）介导的核转录因子κB （NF-κB）的激活，但不是DNA结合，而是NF-κB依赖性基因的表达。它不抑制i -κ b α降解、i -κ b α激酶活性或p65磷酸化及其核易位，但抑制NF-κ b依赖性报告基因的表达。印楝素抑制traf6介导的NF-κB活化，但不抑制traf2介导的NF-κB活化。它抑制atra诱导的Sp1和CREB （camp反应元件结合蛋白）DNA结合。印楝素抑制ATRA与类视黄醛受体的结合，有生物化学和硅证据支持。印楝素与类视色素受体表现出较强的相互作用。它通过抑制ATRA与其受体的结合，抑制ATRA介导的与DNA结合的类视黄醛受体的去除。综上所述，我们的数据表明，印印素与视黄酸受体相互作用，抑制ATRA结合，抑制脱落受体，激活转录因子如CREB， Sp1， NF-κB等。因此，印楝素通过一种新的途径发挥抗炎和抗转移反应，这将有利于进一步的抗炎和抗癌治疗。[2]
细胞实验	印楝树（Azadirachta indica）中的柠檬素因其有效的抗氧化和抗增殖作用近年来引起了广泛的研究关注。本研究旨在探讨印楝素和nimbolide在人宫颈癌（HeLa）细胞系中发挥细胞毒性作用的细胞和分子机制。印楝素和nimbolide均通过诱导细胞周期阻滞在G0/G1期，并伴有p53依赖性p21的积累和细胞周期调节蛋白cyclin B、cyclin D1和PCNA的下调，以剂量依赖性的方式显著抑制HeLa细胞的活力。核形态的特征性变化、亚二倍体峰的存在和膜联蛋白- v染色表明细胞凋亡是细胞死亡的方式。活性氧生成增加，线粒体跨膜电位下降，细胞色素c释放增加，证实了印楝类柠檬素通过线粒体途径转导凋亡信号。Bcl-2家族蛋白表达的改变、NF-kappaB激活的抑制以及caspases和survivin的过度表达提供了令人信服的证据，证明印楝素和nimbolide诱导细胞向促凋亡表型的平衡转变。抗氧化剂，如印楝素和nimbolide，可以同时阻止细胞周期和靶向涉及线粒体凋亡的多个分子，为抗癌治疗药物提供了巨大的潜力。[4]
药代性质 (ADME/PK)	代谢/代谢物向蝗虫体内注射氚标记的印楝素衍生物(22,23-(3)H)二氢印楝素后，放射性标记物质能迅速从血液中清除。90%的放射性物质在注射后的前7小时内随粪便排出，而剩余的(22,23-(3)H)二氢印楝素则积聚在马氏管中，甚至在注射后24天仍能检测到。注射后24小时，粪便中至少含有三种极性的、未鉴定的代谢物，但未检测到(22,23-(3)H)二氢印楝素。
参考文献	[1]. Fernandes SR, et al. Chemistry, bioactivities, extraction and analysis of azadirachtin: State-of-the-art. Fitoterapia. 2019 Apr;134:141-150. [2]. Thoh M, et al. Azadirachtin interacts with retinoic acid receptors and inhibits retinoic acid-mediated biological responses. J Biol Chem. 2011 Feb 11;286(6):4690-702. doi: 10.1074/jbc.M110.169334. Epub 2010 Dec 2. Retraction in: J Biol Chem. 2013 Mar 22;288(12):8563. [3]. Priyadarsini RV, et al. The neem limonoids azadirachtin and nimbolide inhibit hamster cheek pouch carcinogenesis by modulating xenobiotic-metabolizing enzymes, DNA damage, antioxidants, invasion and angiogenesis. Free Radic Res. 2009 May;43(5):492-504. [4]. Priyadarsini RV, et al. The neem limonoids azadirachtin and nimbolide induce cell cycle arrest and mitochondria-mediated apoptosis in human cervical cancer (HeLa) cells.
其他信息	印楝素A是印楝素家族的成员，是从印度楝树（Azadirachta indica）中分离得到的。它具有保肝作用。印楝素是一种有机杂四环化合物，其结构包含乙酸酯、环氧化物、烯酸酯、环状半缩酮、叔醇、仲醇和甲酯。已有报道称，印楝素存在于印度楝（Azadirachta indica）和楝属植物中，并有相关数据可供参考。

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性

化学信息 & 存储运输条件

分子式	C35H44O16
分子量	720.7143
精确质量	720.262
元素分析	C, 58.33; H, 6.15; O, 35.52
CAS号	11141-17-6
PubChem CID	5281303
外观&性状	Microcrystalline powder Yellow green powder
密度	1.5±0.1 g/cm3
沸点	792.4±60.0 °C at 760 mmHg
熔点	159ºC
闪点	244.8±26.4 °C
蒸汽压	0.0±6.3 mmHg at 25°C
折射率	1.623
LogP	1.75
tPSA	212.04
氢键供体(HBD)数目	3
氢键受体(HBA)数目	16
可旋转键数目(RBC)	10
重原子数目	51
分子复杂度/Complexity	1660
定义原子立体中心数目	16
SMILES	O1[C@@]2(C([H])([H])[H])[C@]3([H])[C@]4(C([H])=C([H])O[C@@]4([H])OC([H])(C3([H])[H])[C@@]12[C@]1(C([H])([H])[H])[C@@]([H])(C2([H])[C@@]3([H])[C@](C(=O)OC([H])([H])[H])(C([H])([H])O2)[C@@]([H])(C([H])([H])[C@@]([H])([C@]23C([H])([H])O[C@](C(=O)OC([H])([H])[H])([C@@]12[H])O[H])OC(/C(=C(\[H])/C([H])([H])[H])/C([H])([H])[H])=O)OC(C([H])([H])[H])=O)O[H])O[H]
InChi Key	FTNJWQUOZFUQQJ-NDAWSKJSSA-N
InChi Code	InChI=1S/C35H44O16/c1-8-15(2)24(38)49-18-12-19(48-16(3)36)32(26(39)43-6)13-46-21-22(32)31(18)14-47-34(42,27(40)44-7)25(31)29(4,23(21)37)35-20-11-17(30(35,5)51-35)33(41)9-10-45-28(33)50-20/h8-10,17-23,25,28,37,41-42H,11-14H2,1-7H3/b15-8+/t17-,18+,19-,20+,21-,22-,23-,25+,28+,29-,30+,31+,32+,33+,34+,35+/m1/s1
化学名	dimethyl (1S,4S,5R,6S,7S,8R,11S,12R,14S,15R)-12-acetyloxy-4,7-dihydroxy-6-[(1S,2S,6S,8S,9R,11S)-2-hydroxy-11-methyl-5,7,10-trioxatetracyclo[6.3.1.02,6.09,11]dodec-3-en-9-yl]-6-methyl-14-[(E)-2-methylbut-2-enoyl]oxy-3,9-dioxatetracyclo[6.6.1.01,5.011,15]pentadecane-4,11-dicarboxylate
别名	azadirachtin; Azadirachtin A; 11141-17-6; Nimbicidine; NeemAzal; Nimurin; Ornazin; Azatin;
HS Tariff Code	2934.99.9001
存储方式	Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意：本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件	Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

溶解度数据

溶解度 (体外实验)	DMSO : ≥ 100 mg/mL (~138.75 mM)
溶解度 (体内实验)	配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。配方 2 中的溶解度:* ≥ 2.5 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

溶解度 (体外实验)

DMSO : ≥ 100 mg/mL (~138.75 mM)

溶解度 (体内实验)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (3.47 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。

制备储备液		1 mg	5 mg	10 mg
	1 mM	1.3875 mL	6.9376 mL	13.8752 mL
	5 mM	0.2775 mL	1.3875 mL	2.7750 mL
	10 mM	0.1388 mL	0.6938 mL	1.3875 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器

质量

浓度

体积

分子量*

计算重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度

参见示例

使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？

在分子量（MW）框中输入350.26
在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。

浓度 (起始)

体积 (起始)

浓度 (终)

体积 (终)

计算重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：

在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
单击“计算”按钮
答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中

分子式

分子量

g/mol

计算重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4 c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：

要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。

分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：

分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。

配液体积

质量

配液浓度

计算重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
单击“计算”按钮
答案显示在体积框中

动物体内实验配方计算器（澄清溶液）

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量 mg/kg

动物平均体重 g

每只动物给药体积 μL

动物数量

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。

% DMSO

% Tween 80

% ddH₂O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH₂O，混匀澄清。

注意： (1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片

Effect of azadirachtin on ATRA-induced NF-κB activation. The chemical structure of azadirachtin (A) is shown. Human lung carcinoma (A549) cells (1 × 106/ml) were plated in 60-mm Petri dishes. After 1 day of culture, cells were transfected with Qiagen Superfect transfection reagent for 6 h with plasmids for NF-κB promoter DNA that had been linked to secretory alkaline phosphatase (NF-κB-SEAP) and GFP. After washing, cells were cultured for 12 h. The GFP-positive cells were counted, and transfection efficiency was calculated. Cells treated with different concentrations of azadirachtin for 6 h were stimulated with 1 μm ATRA for 24 h. Cultured supernatant was collected and assayed for secreted alkaline phosphatase activity as described under “Experimental Procedures.” -Fold of SEAP activity was indicated relative to that from vector-transfected cells, taken as 1-fold (B). A549 cells, treated with 10 μm azadirachtin for 6 h, were stimulated with 1 μm ATRA for different times. Cells were washed, pellets were extracted, and 100 μg of proteins were analyzed in 10% SDS-PAGE. The gels were probed with ICAM1 (intercellular adhesion molecule 1) and cox2, and bands were detected by enhanced chemiluminescence (C). All these gels were re-probed with anti-tubulin monoclonal antibody. A549 cells were co-transfected with the Cox2-luciferase plasmid and β-galactosidase gene. After 6 h of transfection, cells were cultured for 12 h and stimulated with different concentrations of azadirachtin for 6 h. Cells were then induced with 1 μm ATRA for 24 h. The luciferase and β-galactosidase enzyme activity was measured from the extracts of cells. Luciferase activity was indicated in -fold of activation after normalization with β-galactosidase activity .[2]. Thoh M, et al. Azadirachtin interacts with retinoic acid receptors and inhibits retinoic acid-mediated biological responses. J Biol Chem. 2011 Feb 11;286(6):4690-702. doi: 10.1074/jbc.M110.169334. Epub 2010 Dec 2. Retraction in: J Biol Chem. 2013 Mar 22;288(12):8563.

Effect of azadirachtin on degradation of IκBα and nuclear translocation of p65. A549 cells were treated with 10 μm azadirachtin for 6 h and then stimulated with ATRA (1 μm) for different times. NE and cytoplasmic extracts were prepared. The amounts of IκBα and p65 were measured from 50 μg of cytoplasmic extracts as detected by Western blot (A, upper panel). The amount of p65 was measured from 30 μg of NE by Western blot (A, lower panel). The blot for NE was reprobed for CRM1, and blots for CE were reprobed for tubulin. A549 cells treated without or with azadirachtin (10 μm) were stimulated with ATRA (1 μm) for 24 h. Cells were subjected immunocytochemistry to detect IκBα or p65 as described under “Experimental Procedures” (B and C).[2]. Thoh M, et al. Azadirachtin interacts with retinoic acid receptors and inhibits retinoic acid-mediated biological responses. J Biol Chem. 2011 Feb 11;286(6):4690-702. doi: 10.1074/jbc.M110.169334. Epub 2010 Dec 2. Retraction in: J Biol Chem. 2013 Mar 22;288(12):8563.

Effect of azadirachtin on ATRA-induced activation of IKK. A549 cells were treated with azadirachtin (10 μm) or BAY 1087 (5 μm) for 6 h at 37 °C and then stimulated with ATRA (1 μm) for 12 h. Whole cell extracts were prepared, 300 μg of proteins were immunoprecipitated with anti-IKKα and -IKKβ antibodies, and IKK activity was measured using GST-IκBα substrate protein (3 μg) (A, upper panel). 300-μg extracts of proteins from untreated and ATRA-stimulated cells were immunoprecipitated with anti-IKKα and -IKKβ antibodies. Thereafter, the immune complexed were treated with azadirachtin or BAY 1087 for 4 h, and IKK assay was performed (A, lower panel). ATRA-stimulated cells were treated with different concentrations of azadirachtin or BAY 1087. Whole cell extracts (300 μg proteins) were used to assay IKK using GST-IκBα as substrate proteins (B). Nuclear extract from ATRA-stimulated cells was incubated with different concentrations of azadirachtin for 2 h at 37 °C and then assayed for NF-κB DNA binding by gel shift assay.[2]. Thoh M, et al. Azadirachtin interacts with retinoic acid receptors and inhibits retinoic acid-mediated biological responses. J Biol Chem. 2011 Feb 11;286(6):4690-702. doi: 10.1074/jbc.M110.169334. Epub 2010 Dec 2. Retraction in: J Biol Chem. 2013 Mar 22;288(12):8563.