| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
The P2X7 receptor in the HEK-hP2X7 cell line is blocked by the antagonist AZD9056 with an IC50 of 11.2 nM, demonstrating the antagonist's strong receptor selectivity. AZD9056, an antagonist of the P2X7 receptor, significantly inhibits murine microglial BV2 cells (IC50=1-3 μM) [1]. The BCRP inhibitor AZD9056 has an IC50 of 92 μM, which indicates a poor inhibition of BCRP-mediated methotrexate transport[2].
P2X7 receptor – selective antagonist; inhibits BCRP-mediated methotrexate transport with IC50 = 92 μM; inhibits BCRP-mediated estrone 3-sulphate transport with IC50 = 32 μM; does not inhibit OAT1 or OAT3 transporters [2] P2X7 receptor antagonist that suppresses NF-κB pathway activation and reduces inflammatory cytokine expression in osteoarthritis [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
HEK-hP2X7 细胞系中的 P2X7 受体被拮抗剂 AZD9056 阻断，IC50 为 11.2 nM，表明该拮抗剂具有很强的受体选择性。 AZD9056 是 P2X7 受体拮抗剂，显着抑制小鼠小胶质细胞 BV2 细胞 (IC50=1-3 μM) [1]。 BCRP 抑制剂 AZD9056 的 IC50 为 92 μM，这表明对 BCRP 介导的甲氨蝶呤转运的抑制作用较差[2]。
AZD9056 在膜片钳实验中能抑制BzATP在表达P2X7受体的小鼠小胶质BV2细胞中诱导的内向电流。抑制作用呈浓度依赖性，IC₅₀为1-3 μmol/L。 [1] AZD9056 (10 μmol/L) 不能显著抑制过表达P2X1、P2X2或P2X3受体的人星形细胞瘤1321N1细胞在ATP刺激下的钙内流。它在表达P2X4的细胞中使活性降低27%，在表达P2X7的细胞中将剩余活性降低至9%，证明其对P2X7受体相对于其他P2X受体亚型具有选择性。 [1] AZD9056 以浓度依赖的方式抑制ATP诱导的新鲜分离的人单核血细胞释放过氧化氢，当用1 mmol/L ATP刺激细胞时，IC₅₀为3.0 μmol/L。 [1] AZD9056 (10 μmol/L) 可逆转BzATP (50 μmol/L)在过表达人P2X7受体的HEK293细胞中诱导的细胞呼吸、胞外酸化（代谢活性）和细胞阻抗（形态）的增加。该抑制作用在洗脱拮抗剂后可逆。在缺乏P2X7的亲本HEK293细胞中未观察到此类效应。 [1] AZD9056 以浓度依赖的方式保护HEK-hP2X7细胞免受ATP或BzATP诱导的细胞毒性。它拮抗ATP (2.5 mmol/L)诱导的细胞毒性，IC₅₀为11.4 nmol/L；拮抗BzATP (0.25 mmol/L)诱导的细胞毒性，IC₅₀为5.62 nmol/L。在亲本HEK293细胞中未观察到保护作用。 [1] AZD9056 (10 μmol/L) 抑制ATP (250 μmol/L)在HEK-hP2X7细胞中诱导的荧光染料YoPro1的摄取（P2X7受体孔道扩张的标志），IC₅₀为11.2 nmol/L。 [1] AZD9056（0.3-100 μM）在卵母细胞实验中不抑制OAT1或OAT3介导的甲氨蝶呤摄取。它抑制BCRP介导的甲氨蝶呤转运，IC50为92 μM，抑制BCRP介导的雌酮-3-硫酸盐转运，IC50为32 μM。[2] AZD9056是一种弱碱性仲胺（pKa 9.77），带有疏水性金刚烷部分，血浆蛋白结合率高（97%）。[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
AZD9056 治疗具有抗炎和镇痛特性。导致白细胞介素 (IL)-1β、IL-6、基质金属蛋白酶-13 (MMP-13)、P 物质 (SP)、前列腺素 E2 (PGE2) 和肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 的表达上调。 AZD9056 可以抵消 MIA 对软骨组织的影响 [3]。
在大鼠碘乙酸单钠诱导的骨关节炎模型中，AZD9056（12.5 mg/kg，MIA注射后2周开始每2天注射一次，持续7天）与单纯MIA组相比，显著减轻了体重承载不对称性，增加了缩爪阈值，并减少了膝关节水肿大小（p < 0.05）。[3] AZD9056逆转了MIA诱导的骨关节炎大鼠血清和膝关节软骨组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的上调表达。[3] AZD9056显著降低了MIA诱导的膝关节软骨组织中P2X7受体、MMP-13、P物质和前列腺素E2表达的增加。[3] AZD9056逆转了MIA诱导的OA大鼠膝关节软骨组织中IKKα、IKKβ、IκBα、NF-κB p65及其磷酸化形式的上调。[3] 在类风湿关节炎临床研究中，AZD9056在接受甲氨蝶呤或柳氮磺吡啶治疗后仍有活动性疾病的患者中进行了疗效评估。[2] |
| 酶活实验 |
膜片钳电生理学：在表达功能性P2X7受体的小鼠小胶质BV2细胞上进行全细胞膜片钳记录。电极内液含有KF、KCl、EGTA和Hepes缓冲液。细胞外灌流液含有NaCl、KCl、CaCl₂、Hepes和葡萄糖。细胞钳制在-70 mV恒定电位。通过计算机控制的灌流系统施加BzATP (100 μmol/L)，记录在存在或不存在不同浓度AZD9056时产生的激动剂诱导电流。测量稳态电流，校正漏电流，并用于生成拮抗剂的浓度-反应曲线。 [1]
钙流测定：将过表达特定人P2X受体亚型（P2X1, P2X2, P2X3, P2X4, 或 P2X7）的人星形细胞瘤1321N1细胞用钙敏感荧光染料Fluo-4 AM负载。洗涤后，在用ATP (0.2-2 mmol/L)刺激前，用10 μmol/L AZD9056预处理细胞2分钟。使用荧光酶标仪记录15分钟后的荧光信号（指示细胞内Ca²⁺增加），以评估受体活性和拮抗剂选择性。 [1] YoPro1摄取实验：该实验用于测量P2X7受体的孔道扩张。将HEK-hP2X7细胞接种于孔板中。移除培养基后，加入含有膜不通透染料YoPro1的检测缓冲液，同时加入ATP (250 μmol/L)和不同浓度的AZD9056。孵育45分钟，使染料通过扩张的P2X7孔道进入细胞。使用酶标仪（激发光485 nm，发射光530 nm）测量荧光以量化染料摄取和拮抗剂抑制。 [1] 卵母细胞摄取实验：将10个表达OAT1或OAT3的卵母细胞或注射水的卵母细胞用钠摄取缓冲液（pH 7.4）洗涤。摄取溶液含有放射性标记化合物和适当浓度的非放射性标记化合物。室温孵育1小时后，卵母细胞用冰冷缓冲液洗涤5次，用10% SDS裂解，通过液闪计数分析。[2] 囊泡摄取实验：将表达MRP2和BCRP的膜囊泡（0.67 mg/mL）与放射性标记底物在摄取缓冲液（250 mM蔗糖，10 mM MgCl₂，10 mM Tris/HCl，pH 7.4）中，在有或无5 mM ATP存在下孵育。37°C孵育4分钟后，通过GF/B滤板过滤终止反应。通过液闪计数测量放射性。[2] |
| 细胞实验 |
过氧化氢释放实验：将新鲜分离的人单核血细胞与Amplex Red试剂和辣根过氧化物酶在缓冲液中孵育。加入ATP (1 mmol/L)或BzATP后，使用酶标仪（激发光550 nm，发射/吸收光600 nm）定量由H₂O₂依赖的Amplex Red转化为试卤灵所产生的荧光。通过在用激动剂前预处理细胞来测试AZD9056的效果。 [1]
细胞传感器实时监测：将HEK-hP2X7或亲本HEK293细胞培养在传感器芯片上。细胞传感器系统在恒定流速的检测培养基下，连续记录胞外酸化（代谢）、耗氧量（呼吸）和细胞阻抗（形态/粘附）。在停流循环期间，用浓度递增的BzATP (0-100 μmol/L)刺激细胞。对于抑制实验，在用50 μmol/L BzATP刺激前，先用10 μmol/L AZD9056预处理细胞。包含洗脱阶段以评估可逆性。 [1] 细胞活力/毒性实验：将HEK-hP2X7或亲本HEK293细胞接种于孔板并使其贴壁。对于激动剂毒性，加入不同浓度的ATP或BzATP。对于拮抗剂保护实验，在加入固定浓度的ATP (2.5 mmol/L)或BzATP (0.25 mmol/L)前，先用递增浓度的AZD9056预处理细胞5分钟。孵育30分钟后，加入细胞活力检测试剂，1小时后测量荧光（激发光560 nm，发射光590 nm）以确定细胞存活率。 [1] 线粒体膜电位测定：将HEK-hP2X7和亲本HEK293细胞接种于包被的载玻片上，并用JC-1染料负载，该染料在线粒体中聚集，在膜电位完整的健康细胞中发出红色荧光。然后用BzATP (31.3 或 250 μmol/L)处理细胞1小时。线粒体去极化导致JC-1荧光从红色变为绿色，使用共聚焦显微镜进行监测。缬氨霉素作为去极化的阳性对照。该实验用于证明激动剂诱导的线粒体毒性，但未描述AZD9056对膜电位的直接影响。 [1] |
| 动物实验 |
骨关节炎大鼠模型：雄性Wistar大鼠通过髌下韧带使用26G针向左后膝关节单次关节内注射碘乙酸单钠（5 mg/kg，溶于无菌0.9%生理盐水）。AZD9056（12.5 mg/kg）在MIA注射后2周开始每2天注射一次，持续7天。在MIA注射后第3、7、10、14、15、17、19和21天评估行为测试（使用Von Frey单丝测试缩爪阈值，使用失能测试仪测试后肢体重承载不对称性，使用数字卡尺测试膝关节水肿大小）。在第7、14和21天处死大鼠收集组织。[3]
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| 药代性质 (ADME/PK) |
AZD9056的治疗剂量预计为400 mg，预测总最大血浆浓度为2 μM。理论肠道浓度为3.5 mM。未结合的AZD9056血浆浓度为0.06 μM。该化合物的血浆蛋白结合率高（97%）。[2]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
这些文献中未描述AZD9056的具体毒性数据（LD50、肝肾毒性、药物相互作用）。该化合物作为通过转运体抑制与甲氨蝶呤发生药物相互作用的潜在原因进行了评估。AZD9056抑制BCRP介导的雌酮-3-硫酸盐转运的[I₁]/IC₅₀比值为0.06（总浓度）或0.002（未结合浓度），抑制BCRP介导的甲氨蝶呤转运的比值为0.02（总）或0.0007（未结合），表明全身性DDI风险较低。肠道[I₂]/IC₅₀比值为109，提示与BCRP底物药物发生肠道DDI的潜在风险。[2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AZD9056被描述为嘌呤能P2X7受体的选择性拮抗剂。[1]
如引言所述，其在类风湿性关节炎中的疗效已在II期临床试验中得到评估。[1] 在该研究中，AZD9056主要用作药理学工具，以证实ATP或其类似物BzATP诱导的各种细胞效应（离子流、染料摄取、代谢变化、氧化应激、细胞毒性）是通过激活P2X7受体特异性介导的。[1] 在细胞传感器实验中，该拮抗剂表现出可逆性抑制作用。[1] AZD9056是一种嘌呤能P2X7受体拮抗剂，曾用于口服治疗类风湿关节炎的临床开发。它是一种弱碱性仲胺（pKa 9.77），带有疏水性金刚烷部分。体外研究表明，AZD9056既不是OAT1也不是OAT3的抑制剂，不太可能与甲氨蝶呤发生全身性转运体介导的DDI。然而，作为BCRP抑制剂，它有潜力与共给药的BCRP底物药物发生肠道DDI。在骨关节炎大鼠模型中，AZD9056通过抑制P2X7R和NF-κB信号通路发挥抗炎和镇痛作用，降低IL-1β、IL-6、TNF-α、MMP-13、SP和PGE2的表达。该化合物在类风湿关节炎临床试验中进行了评估，但未达到疗效终点。[2][3] |
| 分子式 |
C24H36CL2N2O2
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|---|---|
| 分子量 |
455.460844993591
|
| 精确质量 |
454.215
|
| 元素分析 |
C, 63.29; H, 7.97; Cl, 15.57; N, 6.15; O, 7.03
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| CAS号 |
345303-91-5
|
| 相关CAS号 |
345304-65-6
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| PubChem CID |
10161380
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
5.774
|
| tPSA |
61.36
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
4
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
3
|
| 可旋转键数目(RBC) |
10
|
| 重原子数目 |
30
|
| 分子复杂度/Complexity |
514
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
C1C2CC3CC1CC(C2)(C3)CNC(=O)C4=C(C=CC(=C4)CCCNCCCO)Cl.Cl
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| InChi Key |
LZBBHFRRZLDHLE-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C24H35ClN2O2.ClH/c25-22-5-4-17(3-1-6-26-7-2-8-28)12-21(22)23(29)27-16-24-13-18-9-19(14-24)11-20(10-18)15-24;/h4-5,12,18-20,26,28H,1-3,6-11,13-16H2,(H,27,29);1H
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| 化学名 |
Benzamide, 2-chloro-5-(3-((3-hydroxypropyl)amino)propyl)-N-(tricyclo(3.3.1.13,7)dec-1-ylmethyl)- HCl
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| 别名 |
AZD-9056 HCl; AZD9056 hydrochloride; 345303-91-5; AZD-9056 hydrochloride; UNII-0CZ6S167ZM; 0CZ6S167ZM; AZD 9056 HCl; AZD9056.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~109.78 mM)
H2O : ~1.67 mg/mL (~3.67 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.49 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1956 mL | 10.9779 mL | 21.9558 mL | |
| 5 mM | 0.4391 mL | 2.1956 mL | 4.3912 mL | |
| 10 mM | 0.2196 mL | 1.0978 mL | 2.1956 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
HW091077
UB-MBX-46
P2X3 antagonist 39
HEI3090
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
