BAPTA

别名: 85233-19-8; 1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid; Bapeta; Ca(II)-bapta; 1,2-Bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid; UNII-K22DDW77C0; MFCD00036255; 1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N'',N''-四乙酸;1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸;1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic Acid 1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸
目录号: V5285 纯度: ≥98%
BAPTA 是一种选择性钙螯合剂。
BAPTA CAS号: 85233-19-8
产品类别: Phospholipase
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
500mg
1g
2g
5g
10g
Other Sizes

Other Forms of BAPTA:

  • BAPTA Tetrasodium
  • BAPTA tetrapotassium
  • Calcium Green BAPTA-2 AM
  • Oregon-BAPTA Green 1AM (Oregon Green 488 BAPTA 1AM)
  • FG-488 BAPTA-2 AM
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InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: =98.46%

产品描述
BAPTA 是一种选择性钙螯合剂。 BAPTA作为钙离子指示剂,对镁离子和钙离子具有较高的选择性。 BAPTA 广泛用作细胞内缓冲液,用于研究细胞内储存的 Ca2+ 释放或通过质膜 Ca2+ 可渗透/穿透通道流入的影响。 BAPTA 还抑制磷脂酶 C 的活性,与其钙离子螯合特性无关。
生物活性&实验参考方法
靶点
Calcium chelator
体外研究 (In Vitro)
BAPTA(0.3-30 μM;1 小时)可抑制单分化 NH15-CA2 神经母细胞瘤和神经胶质瘤杂交细胞中的钙信号传导,尽管它可用于阻止 [Ca2+] 诱导的细胞损伤 [3]。 BAPTA (0–10 mM) 以剂量依赖性且不依赖 Ca2+ 的方式抑制磷脂酶 C (PLC) 活性 [2]。
合理设计并合成了一个新的高亲和力Ca2+缓冲液和光学指示剂家族。母体化合物是1,2-双(邻氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸(BAPTA),是众所周知的螯合剂EGTA[乙二醇双(β-氨基乙基醚)-N,N、N',N'-四醋酸]的近亲,其中氧和氮之间的亚甲基键被苯环取代。BAPTA及其衍生物对Ca2+的选择性高于EGTA对Mg2+的选择性(大于10(5)),但受pH变化的影响要小得多,吸收和释放Ca2+的速度更快。母体化合物对Ca2+的亲和力(在0.1 M KCl中的离解常数为1.1 x 10(-7)M)可能会因芳香环上的电子释放或撤回取代基而增强或减弱。通过用杂环氮原子取代醚氧,可以进一步改变Ca2+和Mg2+的亲和力。所述化合物是吸收紫外线区域的荧光Ca2+指示剂;在结合Ca2+时观察到的非常大的光谱偏移符合络合作用应阻碍氮孤对电子与芳香环共轭的预测。具有喹啉核的衍生物以其对Ca2+结合的荧光量子产率的高灵敏度而闻名,但对Mg2+的结合不敏感。到目前为止,初步的生物学测试表明,细胞内微量注射后很少或根本没有与膜结合或毒性作用。[1]
在通过贴片移液管装载的细胞中,用4 mM游离BAPTA缓冲不同浓度的Ca2+,光诱导的PLC活性对游离Ca2+表现出明显的钟形依赖性(最大值为“100 nM”,在<10nM或约1微M时抑制约10倍)。然而,当游离[Ca2+]保持恒定时,总BAPTA浓度变化的实验表明,在更高(>100 nM)的标称Ca2+浓度下对PLC的抑制与Ca2+无关,并且是由于BAPTA本身的抑制(IC50约为8 mM)。二溴BAPTA(DBB)在抑制PLC活性方面更有效(IC50约为1mM)。BAPTA和DBB似乎也能诱导对基础PLC活性的适度但不太严重的抑制。相比之下,EGTA在预加载Ca2+时未能抑制PLC活性,但与BAPTA一样,在没有Ca2+的情况下引入EGTA会抑制基础PLC活性和光诱导PLC活性。结果表明,BAPTA和DBB均抑制PLC活性,与它们作为Ca2+螯合剂的作用无关,而非生理低水平(<100 nM)的Ca2+抑制基础和光诱导的PLC活性。[2]
在单分化的NH15-CA2神经母细胞瘤x胶质瘤杂交细胞中研究了膜渗透性钙螯合剂1,2-双(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四(乙酰氧基甲基)酯(BAPTA/AM)对离子霉素诱导的细胞钙超载的影响。为了监测[Ca2+]i,我们使用了荧光指示剂Fura-2。在离子霉素诱导的钙内流过程中,用3微摩尔的BAPTA/AM预孵育细胞可以减少[Ca2+]i失调的细胞数量。应用KCl引发的钙瞬变也受到螯合剂的严重影响。这些瞬态虽然在形状、振幅和持续时间上因细胞而异,但在单个细胞中具有良好的可重复性。用0.3-30microM BAPTA/AM孵育细胞1小时后,这些细胞瞬变的时间过程明显减慢。在1微M BAPTA/AM时,[Ca2+]i下降的时间常数增加了4.1+/-2.4倍(n=14),振幅降低到约50%。使用30μM BAPTA/AM,K(+)诱导的钙瞬变几乎完全被抑制。我们得出结论,细胞内负载的钙螯合剂可用于预防[Ca2+]i诱导的细胞损伤,但以钙信号传导紊乱为代价[3]。
细胞实验
全细胞记录。从最近羽化(<2小时)的成年果蝇中制备解离的小眼,并将其转移到倒置尼康Diaphot显微镜上的记录室底部。如前所述,为了避免串联电阻误差,Kir2.1电流被4 mM Cs+部分阻断,这会导致电压依赖性阻断,从而在-84 mV的电压下产生最大内向电流。通过调整保持电位以找到最大电流,将细胞精确地箝位在该电压下,并在整个记录过程中定期检查。对照浴由(以mM计):110 NaCl、10 KCl、4 CsCl、10 N-三-(羟甲基)-甲基-2-氨基-乙磺酸(TES)、4 MgCl2、1.5 CaCl2、25脯氨酸和5丙氨酸组成。对照细胞内溶液为(以mM计):140 K葡萄糖酸盐、10 TES、4 Mg ATP、2 MgCl2、1 NAD和0.4 Na GTP。各种缓冲液(K4BAPTA、K4DBB和K4EGTA)被制成20或40 mM的储备液,使用相同的碱性细胞内溶液,但葡萄糖酸钾被降低以保持渗透压。制备每种缓冲液的两种储备,一种还含有等摩尔(20或40 mM)CaCl2,另一种不含Ca2+。将这些与适当体积的对照细胞内溶液混合在一起,以产生本研究中使用的各种溶液。使用WinMaxC程序计算游离二价离子浓度,并将所有溶液的pH值调节至7.15。为了激活反向Na+/Ca2+交换,如前所述,使用宽尖(约10μm)吸管用LiCl等摩尔替代,迅速降低细胞外NaCl浓度,而细胞内溶液含有20 mM葡萄糖酸钠和120 mM葡萄糖酸钾(与上述对照相同)。使用电阻约为10-15MΩ的电极进行全电池电压钳记录,串联电阻值通常低于30MΩ,通常补偿至>80%。在进行测量之前,让细胞与贴片移液管溶液平衡至少3分钟。使用Axopatch 1-D或200放大器和pCLAMP 8或9软件在20±1°C下收集和分析数据。细胞被绿色发光二极管(LED)刺激,每个感光器的最大有效强度约为4×105光子s-1。使用线性光电二极管校准相对强度,并通过在WT苍蝇的低强度下计数量子凸块,将其转换为有效吸收光子的绝对强度。
参考文献

[1]. New calcium indicators and buffers with high selectivity against magnesium and protons: design, synthesis, and properties of prototype structures. Biochemistry. 1980 May 27;19(11):2396-404.

[2]. Inhibition of phospholipase C activity in Drosophila photoreceptors by 1,2-bis(2-aminophenoxy)ethane N,N,N',N'-tetraacetic acid (BAPTA) and di-bromo BAPTA. Cell Calcium. 2005 Dec;38(6):547-56.

[3]. Intracellular calcium chelator BAPTA protects cells against toxic calcium overload but also alters physiological calcium responses. Cell Calcium. 1997 Jun;21(6):453-9.

其他信息
BAPTA 是一种多氨基羧酸,其中双(羧甲基)亚硝基与 1,1'-[乙烷-1,2-二基双(氧)]二苯的 C-2 和 C-2' 位相连。它是一种螯合剂。它既是多氨基羧酸,也是四羧酸。
螯合剂:能与溶液中的离子结合并将其移除的化学物质。许多螯合剂通过与金属形成配位络合物发挥作用。
总之,这些结果提供了令人信服的证据,表明 BAPTA 和 DBB 能抑制果蝇感光细胞中的 PLC 活性。虽然 BAPTA 的这种非特异性作用很少被考虑,但并非没有先例。例如,据报道,BAPTA 能抑制 InsP3 受体,IC50 值为 340 μM。据报道,BAPTA 还能与多种不同的钙结合蛋白相互作用,包括β-胰蛋白酶、小白蛋白和钙调蛋白,从而使蛋白激酶C失活,并作为电压门控和钙激活钾通道的阻断剂。在已测试的案例中,只有游离的 BAPTA(而非 BAPTA:Ca)在这些情况下似乎有效;本研究的特殊之处在于,PLC 活性的抑制与总 BAPTA 浓度明显相关。尽管 BAPTA 的 IC50 值(约为 8 mM)相当高,但使用浓度为 10 mM 或更高的 BAPTA 并不罕见,而 DBB 在 1 mM 时就已经具有显著的效力。显然,在解释此类实验结果时需要谨慎,尤其是在涉及 PLC 活性时。[2]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C22H24N2O10
分子量
476.4334
精确质量
476.143
元素分析
C, 55.46; H, 5.08; N, 5.88; O, 33.58
CAS号
85233-19-8
相关CAS号
BAPTA tetrasodium;126824-24-6;BAPTA tetrapotassium;73630-08-7; BAPTA;85233-19-8;BAPTA tetrasodium;126824-24-6; 480436-84-8 (cesium)
PubChem CID
104751
外观&性状
Off-white to light brown solid powder
密度
1.5±0.1 g/cm3
沸点
766.6±60.0 °C at 760 mmHg
熔点
177-179 °C
闪点
417.4±32.9 °C
蒸汽压
0.0±2.7 mmHg at 25°C
折射率
1.657
LogP
0.13
tPSA
174.14
氢键供体(HBD)数目
4
氢键受体(HBA)数目
12
可旋转键数目(RBC)
15
重原子数目
34
分子复杂度/Complexity
613
定义原子立体中心数目
0
InChi Key
FTEDXVNDVHYDQW-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C22H24N2O10/c25-19(26)11-23(12-20(27)28)15-5-1-3-7-17(15)33-9-10-34-18-8-4-2-6-16(18)24(13-21(29)30)14-22(31)32/h1-8H,9-14H2,(H,25,26)(H,27,28)(H,29,30)(H,31,32)
化学名
1,2-Bis(2-Aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid
别名
85233-19-8; 1,2-Bis(2-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid; Bapeta; Ca(II)-bapta; 1,2-Bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid; UNII-K22DDW77C0; MFCD00036255;
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
1M NaOH : 33.33 mg/mL (~69.96 mM)
DMSO : ~15.62 mg/mL (~32.79 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (3.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 15.6 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80,混匀;加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。

配方 2 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (3.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 15.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中,混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备(4°C,1 周):将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中,得到澄清溶液。

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配方 3 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (3.27 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将 100 μL 15.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。


请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0989 mL 10.4947 mL 20.9894 mL
5 mM 0.4198 mL 2.0989 mL 4.1979 mL
10 mM 0.2099 mL 1.0495 mL 2.0989 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

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